專利名稱：抗腫瘤藥物羥地嗎啉和其衍生物及制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，尤其涉及抑制腫瘤細(xì)胞生長、發(fā)揮抗腫瘤效果的羥地嗎啉
和其衍生物及制備方法及用途。
背景技術(shù)：
在馮威健等進(jìn)行的中藥抗癌篩選中，瑞香狼毒(Stellera chamaejasme L.)的甲 醇提取物顯示了較強(qiáng)的抗癌活性(中華腫瘤雜志1995年1月第17巻第1期)。瑞香狼毒 可用于治療腫瘤性疾病，臨床報(bào)道其粗提物對治療肺癌和肝癌等有效。馮威健等以小鼠白 血病為活性指標(biāo)，對瑞香狼毒進(jìn)行了分離提取，得到了一種二萜活性成份，其中尼地嗎琳具
有較強(qiáng)的抗癌作用，其結(jié)構(gòu)為
o 尼地嗎琳對常規(guī)使用的L-1210腹水型及實(shí)體瘤Lewis肺癌、B-16和結(jié)腸癌26顯 示較強(qiáng)的抗癌活性，尼地嗎琳對體外培養(yǎng)的人白血病和胃癌具有明顯的細(xì)胞生長抑制作用 和克隆形成抑制作用，對小鼠體內(nèi)體外抗癌活性均較強(qiáng)，表明其抗癌機(jī)制是通過對癌細(xì)胞 的直接作用而發(fā)揮的。 但尼地嗎琳的腹腔給藥劑量超過0. 05mg/kg時即出現(xiàn)毒性反應(yīng)，說明其活性劑量 與毒性劑量比較接近，治療窗非常窄，臨床應(yīng)用安全性較差，對其它腫瘤細(xì)胞的抑制作用不 明顯。 發(fā)明概述 為解決以上問題，本發(fā)明的目的是提供比尼地嗎啉具有更優(yōu)良的抗腫瘤活性和安 全性，及治療窗寬的抗腫瘤藥物羥地嗎啉和其衍生物。 本發(fā)明的另一 目的是提供抗腫瘤藥物羥地嗎啉和其衍生物的制備方法及其應(yīng)用。 本發(fā)明中，為改變尼地嗎啉的上述弱點(diǎn)，我們對其進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，合成多種羥地嗎
啉等衍生物，對其抗腫瘤活性進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)用下述通式[I]和[II]表示的化合物是
具有極其優(yōu)良的抗腫瘤活性、穩(wěn)定性和安全性的新化合物。 本發(fā)明涉及用通式[I]表示的化合物及其藥學(xué)上可允許的鹽。
4
式中， &表示羥基、羰基、酰胺、低級烷基、芐氧甲基、芳烷基或C2—5的不飽和烴基。 R2表示四氮唑、鹵原子、鹵代烴、氰基、氰甲基、低級烷基、芐氧甲基、芳烷基或(V5 的不飽和烴基。 R3表示羥基、羰基或酰胺。 所述的低級烷基是指Q C6的烷基。 優(yōu)選的為羥基，R2為C2的不飽和烴基，R3為羥基的化合物1及其藥學(xué)上可允
許的鹽。其結(jié)構(gòu)式如(1)所示
(1) 優(yōu)選的為羥基，1 2為四氮唑，1 3為羥基的化合物6(即，羥地嗎啉)及其藥學(xué)上
可允許的鹽。其結(jié)構(gòu)式如(6)所示 本發(fā)明涉及用通式[II]表示的化合物及其藥學(xué)上可允許的鹽。
式中， &表示羥基、羰基、酰胺、低級烷基、芐氧甲基、芳烷基或C2—5的不飽和烴基。
R2表示四氮唑、鹵原子、鹵代烴、氰基、氰甲基、低級烷基、芐氧甲基、芳烷基或(V5 的不飽和烴基。 R3表示羥基、羰基或酰胺。 所述的低級烷基是指Q C6的烷基。 優(yōu)選的為羥基，1 2為四氮唑，1 3為羥基的化合物7及其藥學(xué)上可允許的鹽。其
結(jié)構(gòu)式如(7)所示 對于本發(fā)明通式[I]和[II]表示的化合物及中間體，制備方法如下
圖1和圖2中， &表示羥基、羰基、酰胺、低級烷基、芐氧甲基、芳烷基和C2—5的不飽和烴基。
R2表示四氮唑、鹵原子、鹵代烴、氰基、氰甲基、低級烷基、芐氧甲基、芳烷基和(V5 的不飽和烴基。 R3表示羥基、羰基或酰胺。( — )通式[I]表示的化合物的制備方法如圖1所示， 尼地嗎啉在甲醇和三乙胺的作用下，直接水解獲得多羥基化合物；乙酸酐對羥基 進(jìn)行保護(hù)，15位的雙鍵經(jīng)加成，獲得16位為卣代烴的卣代化合物；經(jīng)取代可獲得16位為低 級烷基、芐氧甲基、芳烷基和C2—5的不飽和烴基，或16位鹵代化合物經(jīng)與氰化鈉反應(yīng)獲得氰 甲基，再與疊氮化鈉反應(yīng)獲得16位為四氮唑基團(tuán)；得到具有通式[III]表示的中間體。
6OAc
III 通式[III]表示的中間體，經(jīng)脫保護(hù)獲得&表示羥基，&表示羥基的本發(fā)明通式表示的化合物。其脫保護(hù)以二丁基氧化錫為催化劑，因而保持6、7位環(huán)氧結(jié)構(gòu)不該變。 通式[III]表示的中間體，優(yōu)選的， R2為C2的不飽和烴基，其結(jié)構(gòu)式如(2)所示； 或R2為鹵代烴，優(yōu)選為溴甲基，其結(jié)構(gòu)式如(3)所示； 或R2為氰甲基，其結(jié)構(gòu)式如(4)所示； 或R2為四氮唑，其結(jié)構(gòu)式如(5)所示。
OAc
(4) (5) 制備方法還可以是 尼地嗎啉通過乙酸酐對4、5、20和28位的羥基進(jìn)行保護(hù)后，再進(jìn)行水解，獲得3、
18位為羥基，對3、 18位的羥基再進(jìn)行修飾，3位可獲得羰基、酰胺、低級烷基、芐氧甲基、芳
烷基和C2—5的不飽和烴基，18位可獲得羰基或酰胺，得通式[IV]表示的化合物。 通式[IV]表示的化合物，15位的雙鍵經(jīng)加成，獲得16位為鹵代烴的鹵代化合物，
經(jīng)取代可獲得16位為低級烷基、芐氧甲基、芳烷基和C2—5的不飽和烴基；或16位鹵代化合
物經(jīng)與氰化鈉反應(yīng)獲得氰甲基，再與疊氮化鈉反應(yīng)獲得16位為四氮唑基團(tuán)，得通式[V]表
示的化合物。式[V]表示的化合物經(jīng)脫保護(hù)獲得本發(fā)明通式[I]表示的化合物。其脫保護(hù)以 二丁基氧化錫為催化劑，因而保持6、7位環(huán)氧結(jié)構(gòu)不該變。
( 二 )通式[II]表示的化合物的制備方法如圖2所示 通式[V]表示的化合物經(jīng)脫保護(hù)獲得本發(fā)明通式[II]表示的化合物。其脫保護(hù) 以醋酸鋅為催化劑，因而獲得6、7位雙鍵。 本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明得到的抗腫瘤藥物羥地嗎啉和其衍生物，具有更優(yōu) 良的抗腫瘤活性和安全性，可在治療肝癌、肺癌、乳腺癌、白血病、結(jié)腸癌、卵巢癌胃癌及神 經(jīng)癌等腫瘤中的應(yīng)用，抗癌譜廣，治療窗寬，所以在醫(yī)藥領(lǐng)域中作為抗腫瘤劑是非常有應(yīng)用 價值的。


圖1是本發(fā)明通式[I]表示的化合物及其藥學(xué)上可允許的鹽的合成機(jī)理圖；
圖2是本發(fā)明通式[II]表示的化合物及其藥學(xué)上可允許的鹽的合成機(jī)理圖；
圖3是本發(fā)明化合物1和化合物6的合成工藝路線圖；
圖4是本發(fā)明化合物7的合成工藝路線具體實(shí)施例方式以下舉出實(shí)施例，進(jìn)一步具體地說明本發(fā)明，但本發(fā)明不受這些實(shí)施例的限制。
用圖3表示化合物1和化合物6的制備工藝。 實(shí)施例l化合物l及其制備方法，化合物1的結(jié)構(gòu)式如(1)所示
取一個干燥的50ml的茄型瓶，加入磁力攪拌棒、尼地嗎啉1. 548g(2mmol)、加甲
醇三乙胺水(v : v : v) = 5 : i : i共2imi溶液溶解，將反應(yīng)體系置于集熱式恒溫
加熱磁力攪拌器上劇烈攪拌，密閉反應(yīng)體系，在干燥的氮?dú)獗Ｗo(hù)下，7(TC下回流20小時后
停止反應(yīng)，將反應(yīng)體系于5(TC下減壓濃縮蒸干得到棕黃色初產(chǎn)物，采用硅膠柱層析分離得
到化合物1，共0.46g，收率40.6X，mp 150 152°C。 元素分析實(shí)測值C，63. 54 ;H，8. 19。 分子式(C30H46010)計(jì)算值C，63. 58 ;H :8. 18。 質(zhì)譜MS(EI，70ev)m/z(X ) :567(M+1)。 紅外IR(KBr)cm—1 :3432， 3298， 2986， 1652， 1383， 739。 核磁共振氫譜丄H-NMR(CDCl3) S :5. 23 (s， 1H) ，4. 88 (s， 1H) ，4. 44(d， J = 3. OHz， 1H) ， 3. 99-3. 80 (m， 1H) ， 3. 92 (d， J = 10. OHz， 1H) ， 3. 87-3. 68 (d， J = 7. 4Hz， 1H) ， 3. 85 (t， J =
810. 0Hz， 1H) ， 3. 78 (d， 1H) ， 3. 72 (d， J = 10. OHz， 1H) ， 3. 67 (t， J = 10. OHz， 1H) ， 3. 40 (s， 1H)， 3. 12(d， J = 2. 9Hz， 1H) ，2. 99 (d， J = 12. 5Hz， 1H) ， 2. 74 (m， 1H) ， 2. 56(dd， J = 12. 5Hz， 1H)， 2. 32(d， J = 14. 7Hz， 1H) ， 2. 26 (m， 1H) ， 2. 11-1. 65 (m， 18H) ，2. OO(d， J = 7. 5Hz， 1H) ， 1. 89 (s， 3H) ， 1. 74 (m， 1H) ， 1. 24 (d， J = 7. 6Hz，3H) ， 1. 06 (d， J = 7. 6Hz，3H). 核磁共振氫譜檢測氫數(shù)為46，核磁共振碳譜檢測碳數(shù)為30，結(jié)構(gòu)分析與目標(biāo)產(chǎn)物一致。 實(shí)施例2化合物6 (即，羥地嗎啉)及其制備方法 [OOSS]( — )中間體1的制備，中間體1的結(jié)構(gòu)式如下
取一個干燥的50ml的茄型瓶，加入磁力攪拌棒、0. 452g(0. 8mmo1)化合物1后，加
入四氫呋喃溶劑lOrnl，乙酸酐lml，吡啶lml，將反應(yīng)體系置于集熱式恒溫加熱磁力攪拌器
上室溫下密閉劇烈攪拌8小時后停止反應(yīng)。45t:下減壓旋出反應(yīng)瓶中四氫呋喃，加入無水
乙醚20ml，室溫下劇烈攪拌有大量白色固體析出，過濾干燥后得到中間體l，共O. 62g，收率
95. 1%， mp 156 158°C。 元素分析實(shí)測值C，61. 56 ;H，7. 16。 分子式(C42H58016)計(jì)算值:C， 61. 60 ;H， 7. 14。 質(zhì)譜MS(EI，70ev)m/z(X ) :819(M+1)。 紅外IR(KBr)cm—1 :3308， 3029， 1742， 1648， 1350， 649。 核磁共振氫譜檢測氫數(shù)為58，核磁共振碳譜檢測碳數(shù)為42，結(jié)構(gòu)分析與目標(biāo)產(chǎn)物一致。
( 二 )中間體2及其制備方法，中間體2的結(jié)構(gòu)式如下
取一個干燥的50ml的茄型瓶，加入磁力攪拌棒、0. 41克(0. 5mmo1)中間體l，加 30%溴化氫乙酸溶液15ml，30X雙氧水溶液2ml，將反應(yīng)體系密閉，置于集熱式恒溫加熱磁 力攪拌器上5(TC劇烈攪拌2小時后停止反應(yīng)，反應(yīng)液在5(TC下減壓濃縮至油狀棕黃色初產(chǎn) 物，加入乙酸乙酯30ml溶解，并用飽和碳酸氫鈉水溶液50毫升*3洗滌三次，分出有機(jī)相用
OAc OAc無水硫酸鎂干燥后濃縮，柱層析硅膠分離得到中間體2，共0. 30克，收率67. 3%。 元素分析實(shí)測值C，56. 11 ;H，6. 64 ;Br，8. 79。 分子式(C42H59Br016)計(jì)算值:C，56. 06 ;H，6. 61 ;Br，8. 88。 質(zhì)譜MS(EI，70ev)m/z(X ) :899(M+1)。 紅外IR(KBr)cm—1 :3352， 2988， 1745， 1432， 832。 核磁共振氫譜檢測氫數(shù)為59，核磁共振碳譜檢測碳數(shù)為42，結(jié)構(gòu)分析與目標(biāo)產(chǎn)物一致。(三)中間體3及其制備方法，中間體3的結(jié)構(gòu)式如下
取一個干燥的50ml的茄型瓶，加入磁力攪拌棒、0. 27g(0. 3mmo1)中間體2，加入氰
化鈉0. 18g(0. 36mmol)，加匿S0溶劑5ml溶液溶解，密閉反應(yīng)體系，在干燥的氮?dú)獗Ｗo(hù)下，
將反應(yīng)體系置于集熱式恒溫加熱磁力攪拌器上劇烈攪拌，25t:下反應(yīng)12小時后停止反應(yīng)，
將反應(yīng)液加入20ml乙酸乙酯，25ml水，充分震蕩分層后用分液漏斗分出有機(jī)相，并分別用
25ml、25ml、10ml去離子水洗有機(jī)相，分出有機(jī)相并用無水硫酸鎂干燥后，濾液在5(TC下減
壓濃縮，經(jīng)柱層析硅膠分離得到中間體3，共0. 19g，收率72.8X，mp 162 166°C。 元素分析實(shí)測值C，61. 24 ;H，7. 11 ;N， 1. 52。 分子式(C43H59N016)計(jì)算值:C，61. 05 ;H，7. 03 ;N， 1. 66。 質(zhì)譜MS(EI，70ev)m/z(X ) :846(M+1)。 紅外IR(KBr)cm—1 :3024， 2928， 2231， 1754， 1324， 1250， 895。 核磁共振氫譜檢測氫數(shù)為59，核磁共振碳譜檢測碳數(shù)為43，結(jié)構(gòu)分析與目標(biāo)產(chǎn)物一致。(四)中間體4及其制備方法，中間體4的結(jié)構(gòu)式如下
取一個干燥的50ml的茄型瓶，加入磁力攪拌棒、0. 17克(0. 2mmo1)中間體3、疊氮 化鈉0. 14g(0. 21mmol)、氯化鋅0. 27g(0. 2mmo1)，加入甲苯溶劑20ml后，密閉反應(yīng)體系，在 干燥的氮?dú)獗Ｗo(hù)下，滴加30%鹽酸水溶液1毫升，將反應(yīng)體系置于集熱式恒溫加熱磁力攪 拌器上劇烈攪拌，ll(TC下反應(yīng)8小時后停止反應(yīng)，將反應(yīng)液在5(TC下減壓濃縮，經(jīng)柱層析
10硅膠分離得到中間體4，共0. 16g，收率87. 6%，mp 192 194°C。 元素分析實(shí)測值C，58. 11 ;H，6. 88 ;N，6. 23。 分子式(C43H60N4016)計(jì)算值:C，58. 10 ;H，6. 80 ;N，6. 30。 質(zhì)譜MS(EI，70ev)m/z(X ) :889(M+1)。 紅外IR(KBr) :cm—13411， 3024， 2984， 1752， 1668， 1338， 1223， 766。 核磁共振氫譜檢測氫數(shù)為60，核磁共振碳譜檢測碳數(shù)為43，結(jié)構(gòu)分析與目標(biāo)產(chǎn)物一致。(五)化合物6及其制備方法，化合物6的結(jié)構(gòu)式如下
取一個干燥的25ml的茄型瓶，加入磁力攪拌棒、0. 14g(l. 6mmo1)中間體4、二丁基
氧化錫O. 08g，加入無水甲醇10ml，密閉反應(yīng)體系，在干燥的氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將反應(yīng)體系置于
集熱式恒溫加熱磁力攪拌器上劇烈攪拌，7(TC下回流8小時后停止反應(yīng)，將反應(yīng)液在50°C
下減壓濃縮，經(jīng)柱層析硅膠分離得到化合物6，共0. 04g，收率36. 5%， mp 189 191°C。 元素分析實(shí)測值C，58. 52 ;H，7. 66 ;N，8. 66。 分子式(C31H48N4010)計(jì)算值:C，58. 48 ;H，7. 60 ;N，8. 80。 質(zhì)譜MS(EI，70ev)m/z(X ) :637(M+1)。 紅外IR(KBr)cm—1 :3432， 3335， 3266， 2998， 1659， 1374， 1148,856。
核磁共振氫譜'H-NMR(CDCl3) S :15. 1(s，lH)，4.59(d， J = 3.0Hz，lH)， 4. 02-3. 86(m，lH)，3. 90(d， J = 11Hz，lH)，3. 85(d， J = 7. 4Hz， 1H) ， 3. 81 (t， J = 11Hz，lH)， 3. 76 (d， 1H) ， 3. 70 (d， J = 10. 0Hz， 1H) ， 3. 65 (t， J = 10. 0Hz， 1H) ， 3. 35 (s， 1H) ， 3. 22 (d， J = 3. 0Hz， 1H) ，3. 03(d， J = 12. 6Hz， 1H) ， 2. 74-2. 36(m，4H) ，2. 66(dd， J = 12. 6Hz， 1H) ， 2. 42(d， J = 15Hz， 1H) ，2. 33(m， 1H) ，2. 05-1. 56(m， 18H) ，2. 01 (d， J = 7. 4Hz， 1H) ， 1. 68 (s， 3H)， 1. 64(m， 1H) ， 1. 35(d， J = 7. 5Hz，3H) ， 1. 16(d， J = 7. 5Hz，3H)。 核磁共振氫譜檢測氫數(shù)為48，核磁共振碳譜檢測碳數(shù)為31，結(jié)構(gòu)分析與目標(biāo)產(chǎn)物一致。 當(dāng)然，以上(一)至(四)反應(yīng)得到的各中間體，即中間體1、中間體2和中間體 3都可以按第(五)步揭示的中間體4的脫保護(hù)方法，以二丁基氧化錫為催化劑，進(jìn)行脫保 護(hù)，得到具有相應(yīng)結(jié)構(gòu)的通式[I]表示的化合物由中間體1得到，R1為羥基，1 2為C2的不 飽和烴基，R3為羥基的化合物；由中間體2得到，&為羥基，R2為溴甲基，R3為羥基的化合 物；由中間體3得到，&為羥基，R2為氰甲基，R3為羥基的化合物。這對于本領(lǐng)域的技術(shù)人 員來說是顯而易見。 實(shí)施例3化合物7及其制備方法 用圖4表示化合物7的制備工藝，化合物7的結(jié)構(gòu)式如(7)所示，
11
HO取一個干燥的25ml的茄型瓶，加入磁力攪拌棒、0. 14g(0. 16mmol)中間體4、醋酸
鋅O. 12g，加入無水甲醇15ml，密閉反應(yīng)體系，在干燥的氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將反應(yīng)體系置于集熱
式恒溫加熱磁力攪拌器上劇烈攪拌，7(TC下回流8小時后停止反應(yīng)，將反應(yīng)液在5(TC下減
壓濃縮，經(jīng)柱層析硅膠分離得到化合物7共0. 03g，收率25. 8%， ， mp 176 179°C。 元素分析實(shí)測值C，60. 06 ;H，7. 81 ;N，8. 95。 分子式(C31H48N409)計(jì)算值C，59. 98 ;H，7. 79 ;N，9. 03。 質(zhì)譜MS(EI，70ev)m/z(X ) :621(M+1)。 紅外IR(KBr)cm—1 :3458， 3297， 3011， 1668， 1642， 1274,956。 核磁共振氫譜丄H-NMR(CDCl3) S :14. 9(s， 1H) ， 5. 76 (m， 1H) ，4. 49(d， J = 3. OHz， 1H) ，3. 98-3. 77(m， 1H) ，3. 89(d， J = 10. 2Hz， 1H) ， 3. 84 (d， J = 7. 5Hz， 1H) ， 3. 80 (t， J = 10. OHz， 1H) ，3. 71(d， J = 10. OHz， 1H) ， 3. 64(t， J = 10. OHz， 1H) ， 3. 50(d， 1H) ， 3. 28(d， J = 3. OHz， 1H) ，3. 08(d， J = 12. 6Hz， 1H) ， 2. 74-2. 36 (m， 4H) ， 2. 66(d， J = 15. OHz， 1H) ， 2. 60(dd， J = 12.5Hz，lH)，2.30-1.66(m，19H)，2. ll(d， J = 7. 5Hz， 1H) ， 1. 76 (m， 1H) ， 1. 60 (s， 3H)， 1. 33 (d， J = 7. 6Hz， 3H) ， 1. 06 (d， J = 7. 6Hz， 3H)。 核磁共振氫譜檢測氫數(shù)為48，核磁共振碳譜檢測碳數(shù)為31，結(jié)構(gòu)分析與目標(biāo)產(chǎn)物一致。 實(shí)施例4化合物6和化合物7的藥效學(xué)試驗(yàn) 以實(shí)施例2和實(shí)施例3提供的化合物6和化合物7為受試樣品，表示了如以下藥 效學(xué)試驗(yàn)所示的優(yōu)良抗腫瘤作用。 (1)對于各種癌細(xì)胞的抑制生長活性(GI5。)測定方法 腫瘤細(xì)胞經(jīng)胰蛋白酶消化后，分散成單個細(xì)胞，并使其懸浮在含青霉素
(25U/ml)和鏈霉素(25 y g/ml)的RPMI1640培養(yǎng)基中。將細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板
(Corninglncorporated)，在37°C ，含5 % C02的空氣，相對濕度100 %條件下培養(yǎng)24小時后，
棄去培養(yǎng)液，加入含一系列濃度受試樣品的培養(yǎng)液，每一濃度設(shè)平行孔，培養(yǎng)24小時后，棄
去含受試樣品的培養(yǎng)液，加入常規(guī)培養(yǎng)液培養(yǎng)48小時后，棄去培養(yǎng)液，再代之以含噻唑藍(lán)
(MTT，美國Sigma公司產(chǎn)品)培養(yǎng)液，MTT終濃度為0. 5g/L，繼續(xù)溫育4小時后加二甲基亞
砜溶解液，1小時后紫色結(jié)晶完全溶解，在SK601型酶標(biāo)儀(日本國Seikagaku公司產(chǎn)品)
檢測570nm/630nm的光密度(0D)。按下式計(jì)算受試樣品對腫瘤細(xì)的半數(shù)生長抑制率 (T-T。) / (C-T。) X 100 % 注C表示對照組細(xì)胞的0D值 T表示加受試樣品組細(xì)胞的0D值 T。表示加受試樣品時對照平板細(xì)胞的0D值
受試樣品對于各種癌細(xì)胞的抑制作用，結(jié)果見表1。
表l化合物6和化合物7對腫瘤細(xì)胞的抑制作用
癌癥種類GI5o (nmol mL_ ')
癌癥名稱化合物6化合物7
肺癌A-5490. 51. 9
H-5220. 033.2
H-46010. 80. 2
PC-13>30>30
肝癌週O772120. 28.5
白血病K-50210. 10. 01
K-5620.60.6
P3888. 63.2
乳腺癌T-47D0. 2>30
MCF73.9〉30
結(jié)腸癌HCC-29985.816. 3
HCT-1166. 60,2
DLD-121.0>30
卵巢癌IGR0V10. 0050. 08
OVCAR-30. 050.4
胃癌M認(rèn)-452.96. 7
神經(jīng)癌SF-268>30>30
U251>30>30 (2)對于肝癌S匪C-7721和肺癌A549的抑制作用 取生長旺盛期的瘤組織剪切成1. 5咖3左右，在無菌條件下，接種于裸小鼠右側(cè)腋 窩皮下。裸小鼠移植瘤用游標(biāo)卡尺測量移植瘤直徑，待腫瘤生長至100 300mm3后將動物 隨機(jī)分組。使用測量瘤徑的方法，動態(tài)觀察被試物抗腫瘤的效應(yīng)。腫瘤直徑的測量次數(shù)為 每周2次，每次測量時同時稱鼠重。實(shí)驗(yàn)組每周靜脈給藥3次，陽性對照組每周靜脈給藥3 次，陰性對照組同時給等量生理鹽水。腫瘤體積(tumor volume, TV)的計(jì)算公式為
TV = 1/2XaXb2 其中a、b分別表示長寬。根據(jù)測量的結(jié)果計(jì)算出相對腫瘤體積(relative t咖orvolume， RTV)，計(jì)算公式為RTV = Vt/V。。其中V。為分籠給藥時(即d。)測量所得腫瘤 體積，Vt為每一次測量時的腫瘤體積?？鼓[瘤活性的評價指標(biāo)為相對腫瘤增殖率T/C(X )， 計(jì)算公式如下
13Trtv
T/C(%)= -X100
CrtvTKTV :實(shí)驗(yàn)組RTV ; CKTV :陰性對照組RTV 。 受試樣品對人肝癌SMMC-7721和人肺癌A549的抑制作用，結(jié)果見表2、3。
表2化合物6和化合物7對異種移植于裸鼠人肝癌S匪C-7721的抑制作用
_化合物6_化合物7_環(huán)磷酰胺
劑量(mg kg—1) 1 1 15
相對腫瘤增殖率T/C(。/。) 36.32 32.5 48.30
表3化合物6和化合物7對異種移植于裸鼠人肺癌A549的抑制作用
化合物6化合物7環(huán)磷酰胺
劑量(mg kg—1)1115
相對腫瘤增殖率T/C(%)21. 236, 858. 25 本發(fā)明提供的化合物6和化合物7，與對照化合物環(huán)磷酰胺相比較，顯示了如上述
藥理試驗(yàn)結(jié)果所示的更優(yōu)良對腫瘤的抑制作用。 實(shí)施例5化合物6和化合物7的安全性試驗(yàn)(急性毒性) 化合物6和化合物7通過小鼠尾靜脈給藥結(jié)果顯示對呼吸系統(tǒng)有一定的毒性，大 劑量動物在給藥后1 2小時出現(xiàn)呼吸困難、俯臥、活動減少等臨床癥狀，死亡發(fā)生在給藥 后5 10小時內(nèi)，對死亡小鼠進(jìn)行解剖，肉眼觀察小鼠胸腔內(nèi)存有一定量的積液，肺臟有 大面積出血點(diǎn)，其余臟器未見異常，肺臟病理組織學(xué)檢查顯示肺臟有出血，大量炎性細(xì)胞浸 潤，肺泡周圍有實(shí)變。對存活小鼠連續(xù)觀察14天，攝食、飲水、一般狀態(tài)及活動情況均未見 異常，觀察期結(jié)束后處死小鼠，肉眼觀察肺臟及主要器官均未見異常。 化合物6對呼吸系統(tǒng)有一定的毒性，給藥后造成小鼠呼吸衰竭死亡，其0)5。為
20. 66mg/kg，95X的可信限為16. 32mg/kg 24. 51mg/kg，毒性耙器官主要為肺臟?；衔?對呼吸系統(tǒng)有一定的毒性，給藥后造成小鼠呼吸衰竭死亡，其LD50為
22. 58mg/kg，95X的可信限為17. 19mg/kg 25. 32mg/kg，毒性耙器官主要為肺臟。 如上述藥理試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明化合物顯示了優(yōu)良的抗腫瘤作用，作為抗腫瘤
劑，對于預(yù)防、治療疾病，特別是處置癌是有用的。將本發(fā)明的化合物用于這樣的用途時，可 制成含有本發(fā)明化合物的有效量和藥學(xué)容許的載體或賦形劑的制劑。 作為抗腫瘤劑使用本發(fā)明化合物的給藥形態(tài)，可選擇各種形態(tài)，例如可舉出片劑、 膠囊劑、粉劑、顆粒劑或液劑等的經(jīng)口制劑、或例如溶液或懸浮液等的殺菌了的液狀非經(jīng)口 制劑、注射劑、栓劑、軟膏劑等。 固體的制劑可直接以片劑、膠囊劑、顆粒劑或粉末的形態(tài)進(jìn)行制造，但也可使用適 當(dāng)?shù)奶砑觿┲圃?。作為這樣的添加劑，例如可舉出乳糖或葡萄糖等的糖類，例如玉米、小麥 或米等的淀粉類，例如硬脂酸等的脂肪酸、例如偏硅酸鋁酸鎂或無水磷酸鈣等的無機(jī)鹽、例 如聚乙烯吡咯烷酮或聚亞烷基二醇等的合成高分子，例如硬酯酸鈣或硬質(zhì)酸鎂等的脂肪酸鹽、例如十八烷醇或芐醇等的醇類，例如甲基纖維素、羧甲基纖維素、乙基纖維素或羥丙基 甲基纖維素等的合成纖維素衍生物，其他，明膠、滑石、植物油、阿拉伯樹膠等通常可使用的 添加物。 這些片劑、膠囊劑、顆粒劑和粉末等的固形制劑，通?？珊?. 1 99% (w/w)，優(yōu) 選的是O. 1 50% (w/w)的有效成分。 液狀制劑，可在水、醇類或例如大豆油、花生油、芝麻油等植物油的液狀制劑中，使
用通常所用的適當(dāng)添加物、以懸浮液、糖漿劑、注射劑、點(diǎn)滴劑等形態(tài)制造。 特別是作為以非經(jīng)口的肌肉注射、靜脈注射或皮下注射的形式給藥時的適當(dāng)溶
劑，例如可舉出注射用蒸餾水、生理食鹽水、葡萄糖水溶液、乙醇、聚乙二醇、靜脈注射用液
體(例如檸檬酸和檸檬酸鈉等的水溶液)或電解質(zhì)溶液(點(diǎn)滴靜脈注射和靜脈注射用)等，
或這些的混合溶液。 除了這些預(yù)先溶解的注射劑之外，也可作成加有粉末或適當(dāng)?shù)奶砑觿┑脑谑褂脮r 溶解的形態(tài)。這些注射液通常可含有0. 1 20% (w/w)、優(yōu)選的是0. 5 5% (w/w)的有效 成分。 另外，經(jīng)口給藥用的懸浮劑、糖漿劑等的劑型，通?？珊?. 5 10% (w/w)的有效 成分。 本發(fā)明化合物優(yōu)選的給藥量，可根據(jù)使用的化合物的種類、配合的組合物種類、適 用頻度和應(yīng)該治療的特定部位、病情的輕重、患者的年齡、醫(yī)生的診斷、腫瘤的種類等而變 化，但作為大致目標(biāo)，例如每天每1個成人的給藥量，在經(jīng)口給藥時，可在0. 01 200mg范 圍內(nèi)，另外，在非經(jīng)口給藥時，在靜脈注射時，優(yōu)選的是每天在O.Ol 50mg范圍內(nèi)。另外， 給藥次數(shù)，根據(jù)給藥方法和癥狀而不同，但1天是1 3次。另外，也可使用隔日給藥、隔二 日給藥等間歇給藥等給藥方法。
1權(quán)利要求
用通式[I]表示的化合物及其藥學(xué)上可允許的鹽式中，R1表示羥基、羰基、酰胺、低級烷基、芐氧甲基、芳烷基或C2-5的不飽和烴基；R2表示四氮唑、鹵原子、鹵代烴、氰基、氰甲基、低級烷基、芐氧甲基、芳烷基或C2-5的不飽和烴基；R3表示羥基、羰基或酰胺。F201010010170XC00011.tif
2.用通式[II]表示的化合物及其藥學(xué)上可允許的鹽<formula>formula see original document page 2</formula>[n]式中， &表示羥基、羰基、酰胺、低級烷基、芐氧甲基、芳烷基或C2—5的不飽和烴基； R2表示四氮唑、鹵原子、鹵代烴、氰基、氰甲基、低級烷基、芐氧甲基、芳烷基或C2—5的不 飽和烴基；R3表示羥基、羰基或酰胺。
3.如權(quán)利要求1所述的化合物及其藥學(xué)上可允許的鹽，其特征在于A為羥基，1 2為C2 的不飽和烴基，R3為羥基，其結(jié)構(gòu)式如(1)所示，
4.如權(quán)利要求1所述的化合物及其藥學(xué)上可允許的鹽，其特征在于為羥基，1 2為四 氮唑，R3為羥基，其結(jié)構(gòu)式如(6)所示，
5. —種合成權(quán)利要求1或2所述的化合物及其藥學(xué)上可允許的鹽的中間體，其特征在于具有通式[III]的結(jié)構(gòu)，式中，R2表示四氮唑、鹵原子、鹵代烴、氰基、氰甲基、低級烷基、芐氧甲基、芳烷基或C2—5的不 飽和烴基。
6. 如權(quán)利要求5所述的中間體，其特征在于R2為C2的不飽和烴基、鹵代烴、氰甲基或 四氮唑。
7. 如權(quán)利要求6所述的中間體，其特征在于所述的鹵代烴為溴甲基。
8. 如權(quán)利要求2所述的化合物及其藥學(xué)上可允許的鹽，其特征在于^為羥基，I^為四 氮唑，R3為羥基，其結(jié)構(gòu)式如(7)所示，<formula>formula see original document page 3</formula>
9. 權(quán)利要求1、2、3、4或8所述的化合物及其藥學(xué)上可允許的鹽作為有效成分在抗腫瘤 藥物上的應(yīng)用。
10. 權(quán)利要求5、6或7所述的中間體在制備抗腫瘤藥物羥地嗎啉和其衍生物上的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種抗腫瘤藥物羥地嗎啉和其衍生物及制備方法和應(yīng)用?？鼓[瘤藥物羥地嗎啉和其衍生物，具有通式[I]所示的結(jié)構(gòu)。式中，R1表示羥基、羰基、酰胺、低級烷基、芐氧甲基、芳烷基或C2-5的不飽和烴基；R2表示四氮唑、鹵原子、鹵代烴、氰基、氰甲基、低級烷基、芐氧甲基、芳烷基或C2-5的不飽和烴基；R3表示羥基、羰基或酰胺。本發(fā)明得到的抗腫瘤藥物羥地嗎啉和其衍生物，具有更優(yōu)良的抗腫瘤活性和安全性，可在治療肝癌、肺癌、乳腺癌、白血病、結(jié)腸癌、卵巢癌胃癌及神經(jīng)癌等腫瘤中的應(yīng)用，因而治療窗寬，所以在醫(yī)藥領(lǐng)域中作為抗腫瘤劑是非常有應(yīng)用價值的。
文檔編號A61K31/41GK101735238SQ201010010170
公開日2010年6月16日 申請日期2010年1月21日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月21日
發(fā)明者盧紅, 徐利鋒, 王洋, 鄒廣輝, 陳燁 申請人:遼寧大學(xué)