專利名稱：一種三七三醇組皂苷提取物及其制備工藝的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種中藥提取物及其制備方法，特別涉及中藥三七的提取物三七三醇 皂苷提取物及其制備。
背景技術：
三七又名田七，為五加科人參屬植物，是中醫(yī)治療心、腦血管疾病及各種血癥的
“圣藥”?！侗静菥V目》1578年明代李時珍著“味微甘而苦，頗似人參之味......故能治一
切血病?！薄侗静菥V目拾遺》1765年清代趙學敏著“人參補氣第一，三七補血第一，味同而功 亦等，故稱人參三七，為中藥之最珍貴者?！薄吨兴幋筠o典》(1997年版)“三七功用補血，去瘀損，止血衄，能通能補，功效最良， 是方藥中之最珍貴者。三七生吃，去瘀生新，消腫定痛，并有止血不留瘀血，行血不傷新的優(yōu) 點；熟服可補益健體?！比叩乃幚碜饔弥饕憩F為具有保護心臟，明顯提高心肌供氧能力，增加冠脈流 量，防治腦缺血，降血壓，擴張心臟血管，耐缺氧，改善心肌微循環(huán)，抗心律失常，抑制動脈硬 化和抗休克等作用；具有良好的止血功效，能增加血小板數目，提高造血功能，有明顯的活 血和溶血作用；有明顯的鎮(zhèn)痛作用表現在還能提高腦力活動，增強學習和記憶能力；具有 延緩衰老及抗疲勞作用。此外，三七還有促進蛋白質和DNA、RNA的合成，保護肝臟，雙向調 節(jié)血糖等功能。三七的藥理試驗及臨床應用從本世紀三十年代開始，特別是近20多年來，國內外 學者對三七進行了廣泛的藥理研究和臨床實驗，取得了大量的新成果，使三七的醫(yī)學應用 領域得到了有力的拓展。現代藥理研究表明，三七含有多種類型的化學成分，皂苷為三七的主要有效成分 之一，具有多種藥理活性，皂苷為達瑪烷型。三七中總皂苷含量可達8% 12%，其中所含 單體有人參皂苷Rbl、Rb2、Re、Rd、Re、Rf、Rgl、Rg2、Rh等9種，但以Rbl和Rgl為主。皂苷 元為人參二醇和人參三醇，以人參三醇含量為高。但Rbl的苷元為20 (S)-原人參二醇，Rgl 的苷元為20 (S)-原人參三醇。以三七單體皂苷Rgl為代表的原人參三醇皂苷具有興奮中樞神經、增強記憶、恢 復疲勞，促進DNA，RNA合成，抗血小板凝集等作用，該成分在三七中含量為1.9%。三七中Rgl還具有免疫調節(jié)劑的作用，能使過高或過低的免疫反應恢復到正常， 并活化人體內的淋巴球細胞，但不干擾人體正常的免疫反應。三七皂苷Rgl還可提高大鼠 腸上皮細胞線粒體編碼基因COX I，C0X II的表達，對失血性休克腸上皮細胞線粒體損傷有 明顯的保護作用。Rgl可以抑制腫瘤壞死因子平滑肌血管增生，藉以抑制腫瘤細胞汲取養(yǎng) 分，達到抑制腫瘤生長的目的。Rgl和雌激素即女性荷爾蒙(Estrogen)有類似相同的結構，可以和雌激素受體結合，和雌激素產生競爭抑制，減少雌激素和受體結合所引起的乳癌及其降低發(fā)生率，同時 Rbl也具有相同的作用，也具有抑制血管新生的功能。以Rbl為代表的原人參二醇皂苷，促進神經纖維的形成并維持其功能，防止性功 能減退，抑制中樞神經系統(tǒng)，具有抗緊張、抑制中樞的鎮(zhèn)靜、安神、解熱、促進睡眠作用；促進 血清蛋白合成，促進膽留醇的合成與分解，抑制中性脂肪分解，抗溶血。該成分在三七中含 量達1.8%。三七花中的人參皂苷Rbl，Rb3，Rc和Rg3可以協(xié)同大腸癌治療藥物氟嘧啶二酮 (5-Fluorouracil)誘導大腸癌細胞細胞凋亡，以補氟嘧啶二酮無法誘導細胞凋亡之不足。三七中其它成分的作用如下人參皂苷Rb2抑制中樞神經，促進DNA，RNA合成，抗溶血，抗糖尿病。人參皂苷Rc 抑制中樞神經，促進DNA，RNA合成，促進血清蛋白合成。人參皂苷Rd增強免疫功能，抑制癌 細胞成長。人參皂苷Rh2促進癌細胞轉化為非癌細胞。四環(huán)三萜達瑪烷型原人參三醇組皂 苷人參皂甙Re抑制中樞神經，促進DNA，RNA合成。人參皂苷Rg2抗血小板凝集。人參皂苷 Rhl促進癌細胞轉化為非癌細胞。三七皂苷Rl誘導白血病細胞分化。由于三七具有以上的優(yōu)點，現在對三七的開發(fā)利用也成為醫(yī)藥領域內的熱點。中 國專利200410073881. 6公開了一種三七三醇組皂苷組合物及制備方法。該專利采用大孔 吸附樹脂分離，不能將三七三醇和三七二醇進行有效的分離，提取物中Rbl的含量過高。中國專利200610066204.0公開了一種用于治療心血管疾病的三七總皂苷組合 物。該專利的提取工藝采用D型大孔吸附樹脂分離，在該專利的工藝條件下提取的三七總 皂苷組合物Rgl35% -50%, Rbl20% -35%。三七三醇和三七二醇沒有進行有效的分離， 三七二醇的含量過高。由于以上工藝分離三七三醇和三七二醇效果不佳，因此，需要對現有提取技術進 行改進，使三七三醇和三七二醇能夠進行有效的分離，制備出三七三醇含量高的提取物。

發(fā)明內容
為解決上述問題，本發(fā)明人在對三七三醇皂苷進行研究過程中，試驗出一組新的 三七三醇組皂甙提取物及其制備方法，能夠實現三七三醇組皂苷和三七二醇組皂苷的有效 分離。本發(fā)明的目的是提供一種治療心腦血管疾病的含有三七三醇組皂苷提取物的中 藥組合物。為實現所述上述目的，本發(fā)明采用以下技術方案一種三七三醇組皂苷提取物，其中含Rgl(C42H72O14)含量占總提取物40 70%， 三七皂苷Rl (C47H80O18)含量占總提取物10 30%，人參皂苷Re (C48H82O18)含量占總提取物 5 10%。優(yōu)選地，Rgl不少于50 65%，三七皂苷Rl不少于15 25%，人參皂苷Re不少
于5 8%。上述Rgl (C42H72O14)，三七皂苷Rl (C47H80O18)和人參皂苷Re含量總和小于100%優(yōu)選地，本發(fā)明提取物中將總皂苷含量控制在80%以上；更優(yōu)選地，將總皂苷含 量控制在85%以上。
優(yōu)選地，本發(fā)明提取物中Rbl不多于10% ；更優(yōu)選地，Rbl不多于8%。優(yōu)選地，本發(fā)明提取物中總皂苷含量控制在80%以上，Rbl不多于10%。 優(yōu)選地，本發(fā)明提取物中總皂苷含量控制在85%以上，Rbl不多于8%。上述三七三醇組皂苷提取物性狀為淡黃色或棕褐色粉末，味苦；水分不超過 10. 0%。本發(fā)明的另一個目的是提供一種治療心腦血管疾病的含有上述三七三醇組皂苷 提取物的藥物。所述的藥物由上述三七三醇組皂苷提取物及藥學上可接受的輔料制成。所述藥物可接受的輔料可以選自甘露醇、山梨醇、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代 硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨酸、維生素C、EDTA 二鈉、EDTA鈣鈉，一價堿金屬的碳 酸鹽、醋酸鹽、磷酸鹽或其水溶液、鹽酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化鈉、氯化鉀、乳酸鈉、 木糖醇、麥芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纖 維素及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土溫80、瓊脂、碳酸鈣、碳酸氫鈣、表 面活性劑、聚乙二醇、環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、磷脂類材料、高嶺土、滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂寸。本發(fā)明藥物的活性組分可以加入制備不同劑型時所需的各種常規(guī)輔料，如崩解 齊U、潤滑劑、粘合劑等以常規(guī)的中藥制劑方法制備成任何一種常用劑型，如粉針劑、片劑、丸 齊U、散劑、顆粒劑、膠囊劑、糖漿、滴丸劑、口服液及其它藥學上可以接受的劑型，如口含劑、 沖齊 、膏劑、丹劑、混懸劑、溶液劑、注射劑、栓劑、軟膏劑、硬膏劑、霜劑、噴霧劑、滴劑、貼劑寸。本發(fā)明的另一目的是提供一種三七三醇組皂苷提取物的制備方法。本發(fā)明所述的 三七三醇組皂苷的制備方法包括以下步驟a.取三七，粉碎成粗顆粒，加4-20倍量45% -95%乙醇煎煮兩次，每次1_3小時；b.合并煎液，700C以下減壓濃縮至藥材量的1-2倍體積；c.靜置至室溫，3500-6000rpm，20min離心或100-300目過濾，分離出上清液；d.上清液上大孔弱極性性樹脂，樹脂與原料藥重量比1 1;新樹脂先用95%醇 溶脹，裝柱后用水沖至無醇味，上樣流速為0. 5 lBV/h，4 8倍柱體積水洗，水洗流速為 1 1. 5BV/h，水洗液棄去，以8-20倍柱體積濃度為30% 40%乙醇洗脫，洗脫流速為1 1.5BV/h，收集洗脫液。e.回收洗脫液至無醇味，上脫色樹脂脫色；優(yōu)選的，脫色樹脂為D941樹脂，樹脂與 原料藥重量比0. 5 1 1 ；上樣流速為0. 5 1. 5BV/h，5-10倍柱體積，流速1 1. 5BV/ h，水洗；f.收集上樣流出液和洗脫液，70°C以下真空減壓濃縮至干或采用凍干或噴干，即得。由于三七的地下部分以含人參皂苷Rgl和Rbl為主，三七的地上部分只分離到原 人參二醇的皂苷，未發(fā)現五環(huán)三萜皂苷，因此本發(fā)明所用的材料優(yōu)選的是三七根。上述制備方法中，優(yōu)選步驟a中將原料加乙醇提取時，第一次加6倍量70%乙醇， 煎煮2. 5小時；第二次加5倍量70%乙醇，煎煮2小時。上述制備方法中，優(yōu)選步驟b和f中在55_70°C濃縮；優(yōu)選地，70°C減壓濃縮。上述制備方法中，步驟d中大孔弱極性性樹脂優(yōu)選DlOl大孔吸附樹脂。
本發(fā)明所述的制備方法所提取的活性成分，Rgl和Rl的含量大大提高，能夠實現 三醇組和二醇組的分離；將二醇組皂苷Rbl含量限制在10%以下；總皂苷提取物中成分明 確，結構明確的成分占80%以上；成品脫色后顏色比現有工藝淺，適宜做凍干粉針。這些 三七三醇皂苷提取物具有純度高，療效好，質量穩(wěn)定，同時制備方法分離效果佳，含量高，工 藝簡單，操作方便，成本低廉，適合工業(yè)化生產。
具體實施例方式本實施例是為了便于理解本發(fā)明，而不以任何方式限制本發(fā)明的權利要求和核心 內容。實施例1取三七20. 0g，粉碎成粗顆粒，加6倍量70%乙醇回流提取2次，第一次2. 5小時， 第二次2小時合并提取液，提取液于60°C減壓濃縮至藥材的1. 5倍，4200rpm，20min，離心， 上清液上DlOl大孔吸附樹脂，樹脂與原料藥重量比1 1，上樣流速為0.5BV/h，4倍柱體 積水洗，水洗流速為lBV/h，水洗液棄去，以8倍柱體積30%乙醇洗脫，洗脫流速為1. 5BV/ h，收集洗脫液。回收洗脫液至無醇味，上D941樹脂，樹脂與藥材重量比0.8 1，上樣流速 為lBV/h，10倍柱體積，流速1. 5BV/h，水洗；收集上樣流出液和洗脫液，60°C真空減壓濃縮 至干或常規(guī)方法凍干、噴干，即得。高效液相色譜法測定提取物含量
權利要求
一種三七三醇組皂苷提取物，其特征在于，Rg1(C42H72O14)含量范圍占總提取物40～70％，三七皂苷R1(C47H80O18)含量范圍占總提取物10～30％，人參皂苷Re(C48H82O18)含量范圍占總提取物5～10％。
2.根據權利要求1所述的三七三醇組皂苷提取物，其特征在于，Rgl含量占總提取物 50 65%，三七皂苷Rl含量占總提取物15 25%，人參皂苷Re含量占總提取物5 10%。
3.根據權利要求1所述的三七三醇組皂苷提取物，其特征在于，提取物中水分不超過 10. 0%。
4.根據權利要求1-3所述的任一三七三醇組皂苷提取物，其特征在于，三七總皂苷含 量在80%以上，三七總皂苷中Rbl不多于10%。
5.根據權利要求4所述的任一三七三醇組皂苷提取物，其特征在于，三七總皂苷含量 在85%以上，三七總皂苷中Rbl不多于8%。
6.權利要求1所述的三七三醇組皂苷提取物的制備方法，包括以下步驟將原料以乙 醇提取，提取液濃縮，濃縮液離心，上清液經大孔弱極性性樹脂處理，收集30% 40%乙醇 洗脫液，濃縮后上脫色樹脂處理，得三七皂苷三醇組提取物。
7.根據權利要求6所述的三七三醇組皂苷提取物的制備方法，其特征在于，包括以下 步驟a.取三七，粉碎成粗顆粒，加乙醇煎煮兩次，每次1-3小時；所述的將原料加乙醇提取時，加原料4-20倍量45% -95%乙醇進行煎煮；所述的原料加乙醇提取時，第一次加6倍量70%乙醇，煎煮2. 5小時；第二次加5倍量 70%乙醇，煎煮2小時；b.合并煎液，55-70°C減壓濃縮至藥材量的1 2倍體積；c.靜置至室溫，3500-6000rpm，20min離心或100-300目過濾，分離出上清液；d.上清液上大孔弱極性性樹脂，水洗，乙醇洗脫，收集洗脫液；所述的大孔弱極性性樹脂先用95%醇溶脹，裝柱后用水沖至無醇味，樹脂與原料藥重 量比例為1 1 ；上樣流速為0. 5 lBV/h，4 8倍柱體積水洗，水洗流速為1 1. 5BV/h, 水洗液棄去，以8-20倍柱體積濃度為30% 40%乙醇洗脫，洗脫流速為1 1. 5BV/h ；所述的大孔弱極性性樹脂是DlOl大孔吸附樹脂。e.洗脫液上D941樹脂，水洗；所用的樹脂與原料藥重量比為0.5 1 1，上樣流速為 0. 5 1. 5BV/h, 5-10倍柱體積，流速1 1. 5BV/h水洗；f.收集上樣流出液和洗脫液，55-70°C真空減壓濃縮至干或采用凍干或噴干，即得。
8.根據權利要求6或7所述的三七三醇組皂苷提取物的制備方法，其特征在于，步驟a 中的原料為三七根。
9.根據權利要求7所述的三七三醇組皂苷提取物的制備方法，其特征在于，步驟b和f 中的減壓溫度是70°C。
10.權利要求1所述的三七三醇皂苷提取物所制成的藥物。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種三七三醇組皂苷提取物及其制備工藝，所述的提取物Rg1(C42H72O14)含量范圍占總提取物40～70％，三七皂苷R1(C47H80O18)含量范圍占總提取物10～30％，人參皂苷Re(C48H82O18)含量范圍占總提取物5～10％。上述提取物的制備方法為將原料以乙醇提取，提取液濃縮，濃縮液離心，上清液經大孔弱極性性樹脂處理，收集30％～40％乙醇洗脫液，濃縮后上脫色樹脂處理，得三七皂苷三醇組提取物。本發(fā)明的提取物具有純度高，療效好，質量穩(wěn)定，同時制備方法分離效果佳，含量高，工藝簡單，操作方便，成本低廉，適合工業(yè)化生產。
文檔編號A61K36/258GK101966219SQ20091006990
公開日2011年2月9日 申請日期2009年7月27日 優(yōu)先權日2009年7月27日
發(fā)明者周水平, 張?zhí)m蘭, 李瑞明, 林萬里, 王玉 申請人:天津天士力制藥股份有限公司