從肉蓯蓉中提取苯乙醇苷的工藝方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及從肉蓯蓉中藥材中提取、分離苯乙醇苷的方法，屬于中藥成份提取技術(shù)領(lǐng)域。
技術(shù)背景
[0002]肉灰蓉(CistanchesalsaGBeck)又名梭梭大蕓、精輿、地精，是我國名貴中藥，藥典收錄，主要生長在我國內(nèi)蒙古西部、甘肅、新疆等沙漠地帶"肉蓯蓉始載于申農(nóng)本草經(jīng)6，列為上品，具有補(bǔ)腎壯陽、填精補(bǔ)髓、養(yǎng)血潤燥、悅色延年等功效，主治男子陽瘓、女子不孕、帶下、血崩、腰膝冷痛、血枯便秘等證。
[0003]肉蓯蓉藥材中含有苯乙醇苷類、D-甘露醇、多糖、甜菜堿等生物功效成分。
[0004]現(xiàn)代研究表明，苯乙醇苷類化合物(phenylethanoidglycosides)是一類含有(輕基、甲氧基)取代苯乙基和(羥基、甲氧基)取代肉桂酞基，通常以B-葡萄糖為母核的含有酯鍵及氧苷鍵的天然糖昔，廣泛存在于雙子葉植物中，生物活性很強(qiáng)，受到植物化學(xué)及藥學(xué)工作者的高度重視。近年來許多研究表明，該類化合物具有抗菌、抗炎、抗病毒、抗腫瘤、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、增強(qiáng)記憶、保肝、強(qiáng)心等作用(參見靖會，佐建鋒等.時珍國醫(yī)國藥.2006，17(3):440 ?441)。
[0005]目前肉蓯蓉生物功效成分的提取方法很多，但大部分的提取方法僅局限于用乙醇溶劑進(jìn)行功效成分的提取，肉蓯蓉苯乙醇苷類化合物極性較大，用乙醇溶劑進(jìn)行提取效果并不好。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的在于提供一種從肉灰蓉藥材提取有效成份苯乙醇苷類物質(zhì)的工藝方法。
[0007]本發(fā)明的目的是通過以下工藝步驟實(shí)現(xiàn)的，其主要步驟如下:
[0008](I)取肉蓯蓉藥材干品；
[0009]所述肉蓯蓉藥材干品最好粉碎成< 40目的顆?；蚍勰?；
[0010](2)回流提取:將上述肉蓯蓉藥材干品置入肉蓯蓉藥材干品重量的5?10倍50?70%體積濃度的丙酮溶液中回流提取20min以上。
[0011]上述的回流提取可再重復(fù)進(jìn)行2?3次，每次提取時間最好在20?60min，回流提取時最好用0.05?IMHz超聲波輔助提取。
[0012]上述的回流提取之前，最好用三氟三氯乙烷和三氯醋酸進(jìn)行處理，以除去肉蓯蓉中蛋白質(zhì)等雜物，具體加入量是三氟三氯乙烷:三氯醋酸:肉蓯蓉藥材原料=0.5:0.5:1，處理20min以上。
[0013]靜置取上清液或過100目以上(< 150 μπι)濾網(wǎng)濾膜得提取液，優(yōu)選200?400目(38?75 μπι)濾網(wǎng)濾膜；
[0014](3)吸附分離:將上述提取液緩慢加入到大孔樹脂柱中進(jìn)行吸附分離。
[0015]加入大孔樹脂柱的流速最好< 0.5BV/h，大孔樹脂柱優(yōu)選AB-8型大孔樹脂柱。
[0016](4)洗脫:用20?70%濃度的乙醇水溶液進(jìn)行洗脫取液相得洗脫液；
[0017]優(yōu)選的，上述的洗脫最好用20?45%濃度的乙醇水溶液進(jìn)行，進(jìn)一步優(yōu)選為25?35%濃度的乙醇水溶液。
[0018]再進(jìn)一步地，洗脫液最好通過聚酰胺色譜進(jìn)行精制:將所述的洗脫液過聚酰胺樹脂柱，取液相。
[0019](5)干燥濃縮:將所得洗脫液干燥濃縮，即得到本發(fā)明的苯乙醇苷類物質(zhì)。
[0020]進(jìn)一步地，上述的洗脫液的干燥濃縮最好采用真空干燥濃縮:在溫度50?70°C下采用負(fù)壓干燥濃縮。
[0021]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的方法對肉蓯蓉中苯乙醇苷類化合物的提取效率更高，同時丙酮更容易在減壓濃縮過程中進(jìn)行回收繼續(xù)使用到提取過程中，達(dá)到循環(huán)利用的效果，從而有效的降低生產(chǎn)成本。
【具體實(shí)施方式】
[0022]為了使本領(lǐng)域的技術(shù)人員更好地理解本發(fā)明的技術(shù)方案，下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。
[0023]實(shí)施例1:
[0024]取肉蓯蓉中藥材干品粉碎，過40目篩，以8倍的液固比加入濃度60%的丙酮溶液，超聲(頻率SOKHz)提取25min，重復(fù)提取3次，抽濾，合并提取液，回收丙酮并濃縮至原提取液的30 %，冷卻至室溫，靜置24h，200目離心甩濾機(jī)甩濾，得澄清濾液。
[0025]將上述濾液以0.5BV/h的流速加入到經(jīng)預(yù)處理過的AB-8型大孔樹脂柱中，用30%濃度的乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，在70°C下抽真空干燥至含水量< 10 %，得到肉蓯蓉總苯乙醇苷類提取物，經(jīng)過紫外(UV)方法測定，其中苯乙醇苷類化合物含量為58%。
[0026]實(shí)施例2:
[0027]取肉蓯蓉中藥材干品粉碎，過40目篩，以5倍的液固比加入50%丙酮溶液，第一次回流2h，第二次和第三次回流lh，抽濾，合并提取液，回收丙酮并濃縮至原提取液的40%，冷卻至室溫，靜置24h，325目離心甩濾機(jī)甩濾，得澄清濾液。
[0028]將上述濾液以0.4BV/h的流速加入到經(jīng)預(yù)處理過的AB-8型大孔樹脂柱中，用35%
[0029]濃度的乙醇，HPLC檢測，收集富含苯乙醇苷類化合物的洗脫液，在60°C下抽真
[0030]空濃縮干燥至含水量彡8%，得到肉蓯蓉總苯乙醇苷類提取物，經(jīng)過紫外(UV)方
[0031]法測定，其中苯乙醇苷類化合物含量為56%。
[0032]實(shí)施例3:
[0033](I)取肉蓯蓉藥材干品，粉碎成80目的顆?；蚍勰?；
[0034](2)回流提取:將上述肉蓯蓉藥材干品顆?；蚍勰┲萌肴馍惾厮幉母善分亓康?倍55%體積濃度的丙酮溶液中回流提取40min，過200目濾網(wǎng)得提取液，回流提取可再重復(fù)進(jìn)行2?3次，每次30min，回流提取時用0.1MHz超聲波輔助提取，合并濾液，回收丙酮并濃縮至原提取液的30%，
[0035](3)吸附分離:將上述提取液以0.5BV/h的流速緩慢加入到AB_8型大孔樹脂柱中進(jìn)行吸附分離。
[0036](4)洗脫:用20?70%濃度的乙醇水溶液進(jìn)行洗脫取液相得洗脫液；
[0037]洗脫液最好通過聚酰胺色譜進(jìn)行精制:將所述的洗脫液過聚酰胺樹脂柱，取液相。
[0038](5)干燥濃縮:將所得洗脫液在60°C下抽真空濃縮干燥至含水量< 8%，即得到本發(fā)明的苯乙醇苷類物質(zhì)。
[0039]實(shí)施例4:
[0040](I)取肉蓯蓉藥材干品，粉碎成60目的顆?；蚍勰?，用重量I倍量的三氟三氯乙烷和三氯醋酸1:1的混合液浸泡40min，之后用100目離心甩濾機(jī)甩濾，取截留物。
[0041](2)回流提取:將上述處理后的肉蓯蓉藥材顆粒或粉末置入肉蓯蓉藥材干品重量的6倍65%體積濃度的丙酮溶液中回流提取60min，過200目濾網(wǎng)得提取液，回流提取可再重復(fù)進(jìn)行2?3次，每次40min，回流提取時用0.2MHz超聲波輔助提取，合并濾液，回收丙酮并濃縮至原提取液的40 %，
[0042](3)吸附分離:將上述提取液以0.3BV/h的流速緩慢加入到AB-8型大孔樹脂柱中進(jìn)行吸附分離。
[0043](4)洗脫:用40%濃度的乙醇水溶液進(jìn)行洗脫取液相得洗脫液，洗脫液再過聚酰胺樹脂柱，取液相。
[0044](5)干燥濃縮:將所得洗脫液在溫度70°C下抽真空濃縮干燥至含水量< 5%，即得到本發(fā)明的苯乙醇苷類物質(zhì)。
[0045]實(shí)施例5:
[0046](I)取肉蓯蓉藥材干品，粉碎成80目的顆?；蚍勰?，用重量2倍的三氟三氯乙烷和三氯醋酸1:2的混合液進(jìn)行浸泡處理60min，之后用150目離心甩濾機(jī)甩濾，取截留物。
[0047](