專利名稱：蛋白酶抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種顯示蛋白酶抑制活性的多肽，以及所述多肽在直接地或間接地抑 制一種或多種蛋白酶的方法中的用途。
背景技術(shù)：
血液凝固級聯(lián)形成了稱為止血(停止從受損血管的失血)的一種重要的宿主防御 機(jī)制的一部分。血管損傷時，血小板與內(nèi)皮下組織中的大分子粘附，然后聚集形成初級止血 栓子。血小板刺激血漿凝血因子的局部活化，導(dǎo)致纖維蛋白凝塊生成，這加固血小板聚集 物。此后，當(dāng)傷口發(fā)生愈合時，血小板聚集物和纖維蛋白凝塊分解。限制上面提及的血小板聚集物和纖維蛋白凝塊在損傷部位形成的機(jī)制對于保持 血液的流動性是必需的，并且，在一些情況下，對于防止不合乎需要的血塊形成諸如血栓形 成是必需的。血栓形成是一種病理過程，其中血小板聚集物和/或纖維蛋白凝塊在完整的血管 腔內(nèi)或心臟的腔室內(nèi)形成。如果血栓形成發(fā)生在動脈中，則動脈所供應(yīng)的組織可能會經(jīng)歷 缺血性壞死(例如由于冠狀動脈的血栓形成引起的心肌梗塞)。如果血栓形成發(fā)生在靜脈 中，則由靜脈引流的組織可能變?yōu)樗[和發(fā)炎。下肢中的深靜脈血栓形成可能并發(fā)于肺栓 塞，其中所有或部分血栓松脫，被血流攜帶通過腔靜脈和右側(cè)心臟，并且停留在肺動脈中。 大塊肺栓塞(Massive pulmonaryembolism)可導(dǎo)致低氧血癥、休克和死亡。血液凝固級聯(lián)血液凝固的經(jīng)典模型包括一系列(或級聯(lián)的)酶原活化反應(yīng)(圖示在本文的

圖1 中)。在各階段中，前體蛋白(酶原)通過前體蛋白中的一個或多個肽鍵的切割而轉(zhuǎn)變?yōu)榛?性蛋白酶?？稍诟鱾€階段中涉及的各類型組分包括下列(a)蛋白酶(來自在前階段(preceding stage))(b)酶原(c)非酶蛋白輔因子(d)鈣離子(e)組構(gòu)表面(例如，在體內(nèi)由血小板提供)血液凝固或止血系統(tǒng)分為三個部分血小板聚集(初期止血)，凝固(二期止血) 和纖維蛋白溶解(三期止血)。參與止血中的凝固蛋白酶原是由肝細(xì)胞分泌至血流中的促 凝因子(凝血酶原/11因子，VII因子，IX因子，X因子，XI因子，XII因子和前激肽釋放 酶)，抗凝因子(蛋白C、蛋白S)，和纖溶因子(纖溶酶原，t-PA和尿激酶原)。非酶蛋白輔因子包括V因子和VIII因子，組織因子和高分子量激肽原(HMWK)。V 因子和VIII因子是大的血漿蛋白，其含有與銅結(jié)合蛋白血漿銅藍(lán)蛋白同源的重復(fù)序列。凝 血酶切割V和VIII，產(chǎn)生活化因子(Va和Villa)，其凝血活性為其前體形式的至少50倍。 Va和VIIIa沒有已知的酶活性。而是，它們作為輔因子，分別增加Xa和IXa的蛋白水解效 率。因子VIII在血漿中循環(huán)，與von Willebrand因子(vWF)結(jié)合，后者是一種介導(dǎo)血流血
4小板與在血管損傷時暴露的內(nèi)皮下結(jié)構(gòu)諸如膠原結(jié)合的糖蛋白。蛋白酶Xa因子(fXa)形成內(nèi)源性途徑和外源性途徑兩者的一部分(圖1)。這些 途徑不是多余的而是高度相互聯(lián)系的。凝固級聯(lián)可在體內(nèi)通過血漿與組織因子的接觸而啟 動。組織因子是在正常不與血漿接觸的細(xì)胞(例如，成纖維細(xì)胞和巨噬細(xì)胞)的表面上組 成型表達(dá)的的非酶脂蛋白。血漿與這些細(xì)胞的接觸啟動了在破裂血管外的凝血。內(nèi)皮細(xì)胞 當(dāng)被內(nèi)毒素、腫瘤壞死因子或白介素-1刺激時也表達(dá)組織因子，并且可參與病理狀況下的 血栓形成。組織因子結(jié)合VIIa因子并加速X因子活化約30，000倍。盡管VII因子被其產(chǎn)物 蛋白酶Xa因子(fXa)活化，但似乎在所有時候血漿中均存在痕量的Vila因子與組織因子 相互作用。在組織因子的存在下VIIa因子還活化IX因子，提供“內(nèi)源性”和“外源性”途 徑之間的聯(lián)系。IXa因子和Xa因子與其非酶蛋白輔因子(分別為VIIIa和Va)在聚集的血 小板表面上組裝。這導(dǎo)致局部生成大量的fXa，活化在該途徑中生成的最終的蛋白酶；凝血 酶(flla)。Xa因子通過切割酶原中的兩個肽鍵將凝血酶原(II因子)轉(zhuǎn)變?yōu)槟?IIa 因子)。Va、血小板(或磷脂)和鈣離子加速Xa活化凝血酶原。整個系統(tǒng)活化凝血酶原的 速率比Xa和鈣單獨(dú)活化快約300，000倍。隨后，凝血酶將可溶性蛋白纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)椴?溶性的纖維蛋白凝膠，纖維蛋白凝膠進(jìn)一步通過由XIIIa因子催化的共價交聯(lián)而加強(qiáng)。纖維蛋白溶解是其中纖溶酶降解已形成的纖維蛋白凝塊的過程。纖溶酶在肝臟中 以無活性形式——纖溶酶原產(chǎn)生。盡管纖溶酶原不能切割纖維蛋白，但它仍與其有親和性， 并且當(dāng)纖維蛋白形成時其摻入至凝塊中。纖溶酶原含有稱為kringles (三環(huán))的二級結(jié)構(gòu) 基序，其特異性地結(jié)合纖維蛋白(纖維蛋白原)上的賴氨酸和精氨酸殘基。當(dāng)從纖溶酶原 轉(zhuǎn)變?yōu)槔w溶酶時，其作為絲氨酸蛋白酶發(fā)揮作用，特異性地切割C-末端上的這些賴氨酸和 精氨酸殘基。纖維蛋白單體，當(dāng)聚合時形成初原纖維。這些初原纖維含有兩條鏈，它們反平 行地非共價締合。在單鏈內(nèi)，纖維蛋白單體通過凝血因子XIII的作用共價連接。因此，纖 溶酶對凝塊的作用初步地在纖維蛋白中建立了切口 ；進(jìn)一步消化導(dǎo)致溶解。組織纖溶酶原激活物(t-PA)和尿激酶是這樣的藥劑，即它們將纖溶酶原轉(zhuǎn)變?yōu)?活性纖溶酶，因此使得發(fā)生纖維蛋白溶解。t-PA由血管的損傷內(nèi)皮非常緩慢地釋放至血液 中，使得幾天后(當(dāng)出血已經(jīng)停止時)凝塊分解。這種情況的出現(xiàn)是因?yàn)楫?dāng)凝塊形成時纖 溶酶原陷入在凝塊中；當(dāng)其緩慢地活化時，其分解纖維蛋白網(wǎng)。t-PA和尿激酶本身受纖溶 酶原激活物抑制劑-1和纖溶酶原激活物抑制劑_2 (PAI-1和PAI-2)抑制。相比，纖溶酶通 過產(chǎn)生更多的tPA和尿激酶兩者的活性形式而進(jìn)一步刺激纖溶酶生成。α 2-抗纖溶酶和 α 2-巨球蛋白使纖溶酶失活。凝血酶活化的纖維蛋白溶解抑制劑(TAFI)也減少纖溶酶活 性，其將纖維蛋白修飾成為tPA介導(dǎo)的纖溶酶原活化的不太有效的輔因子。血液凝固級聯(lián)的抑制劑血液凝固系統(tǒng)被該系統(tǒng)的許多天然存在的抑制劑所遏制。組織因子途徑抑制劑 (TFPI)是一個與血漿脂蛋白并且和血管內(nèi)皮締合的34-kDa蛋白。TFPI是包含三個Kunitz 型結(jié)構(gòu)域、酸性氨基末端和堿性羧基末端結(jié)構(gòu)域的高親和力絲氨酸蛋白酶抑制劑。其結(jié)合 并抑制Xa因子。然后Xa-TFP復(fù)合體與VIIa/組織因子相互作用并抑制X和IX因子的活 化。TFPI可防止凝血，除非初始存在的VIIa/組織因子生成足量的IXa因子以經(jīng)“內(nèi)源性” 途徑維持X因子活化。因此VIIa/組織因子可提供對凝塊的初始刺激(以相對小量的IXa和Xa的形式)，然后迅速地被轉(zhuǎn)變，而IXa和VIIIa可以負(fù)責(zé)生成凝塊形成所需的較大量的 Xa和凝血酶?？鼓甘?8kDa糖蛋白絲氨酸蛋白酶抑制劑(絲氨酸蛋白酶抑制蛋白 (serpin))，其使絲氨酸蛋白酶；凝血酶和fXa，以及fXIIa，和fIXa失活。其持續(xù)地有活性， 但硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(糖胺聚糖)的存在或肝素的施用(不同的類肝素增加與F Xa, 凝血酶或兩者的親和力)增加其與這些因子的附著?？鼓覆皇鼓龎K結(jié)合的凝血酶或 fXa失活?？鼓傅臄?shù)量或質(zhì)量缺乏(先天性或獲得性的，例如，在蛋白尿中)導(dǎo)致血栓 形成傾向。蛋白C是主要生理抗凝劑。其是維生素K依賴性絲氨酸蛋白酶，其被凝血酶活化 成活化的蛋白C(APC)?；罨问?蛋白S和磷脂作為輔因子)降解Va因子和VIIIa因子。 蛋白C途徑的關(guān)鍵酶，即活化的蛋白C，提供生理性的抗血栓形成活性，并且發(fā)揮抗炎和抗 細(xì)胞凋亡兩種活性。其作用與血栓形成和缺血性卒中的發(fā)生有關(guān)。蛋白S是在肝臟中合成的維生素K依賴性血漿糖蛋白。在循環(huán)中，蛋白S以兩種 形式存在游離形式和結(jié)合于補(bǔ)體蛋白C4b的復(fù)合體形式。蛋白S的最佳表征的功能是其 在抗凝途徑中的作用，因?yàn)槠湓赩a和VIIIa因子的失活中作為蛋白C的輔因子起作用。僅 游離形式具有輔因子活性。此外，蛋白S可經(jīng)羧基GLA結(jié)構(gòu)域與帶負(fù)電荷的磷脂結(jié)合。此 特性允許蛋白S在清除正在經(jīng)歷凋亡的細(xì)胞中發(fā)揮作用，所述細(xì)胞在細(xì)胞表面上顯示帶負(fù) 電荷的磷脂。通過與帶負(fù)電荷的磷脂結(jié)合，蛋白S作為凋亡細(xì)胞和吞噬細(xì)胞之間的橋分子 發(fā)揮作用?？鼓齽┰谡顩r下，促進(jìn)血液凝固的因子與抑制它們的因子相平衡。當(dāng)促凝刺激物壓 倒抗凝劑和纖維蛋白溶解系統(tǒng)時發(fā)生靜脈或動脈血栓形成。魏克氏三聯(lián)征(Virchow' s triad)是一組已知影響凝塊形成的三種因素流動速率、血液的濃度(稠度)以及血管壁 的性質(zhì)。目前，治療血栓形成的醫(yī)療干預(yù)是通過施用抗凝劑，其包括胃腸外施用，例如，低 分子量肝素(LMWH)，然后口服施用例如華法林。較新的一類藥物，直接凝血酶抑制劑，正在 開發(fā)中；一些成員已經(jīng)用于臨床(諸如來匹盧定(1印irudin))。還有其他的小分子化合 物正在開發(fā)中，這些小分子化合物直接地干擾特定凝血因子的酶促作用(例如，利伐沙班 (rivaroxaban))?？寡“鍎┌ò⑺酒チ?，氯吡格雷，雙嘧達(dá)莫和噻氯匹定；胃腸外糖蛋 白Ilb/IIIa抑制劑在血管成形術(shù)期間使用。肝素是天然存在的由嗜堿性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞產(chǎn)生的高度硫酸化的糖胺聚糖。肝 素充當(dāng)抗凝劑，防止凝塊形成并防止已存在的凝塊在血液內(nèi)的延伸。盡管肝素不分解已經(jīng) 形成的凝塊(組織纖溶酶原激活物則會分解)，但其使機(jī)體的天然凝塊溶解機(jī)制正常地工 作以分解已經(jīng)形成的凝塊。肝素與酶抑制劑抗凝血酶III (AT-III)結(jié)合，導(dǎo)致構(gòu)象變化，造 成其活性位點(diǎn)暴露。然后活化的AT-III使凝血酶和參與血液凝固的其他蛋白酶(最顯著 地是Xa因子)失活。由于與肝素的結(jié)合，AT-III使這些蛋白酶失活的速率增加1000倍。 AT-III結(jié)合肝素聚合物內(nèi)包含的特異性五糖硫酸化序列。在肝素結(jié)合時AT-III的構(gòu)象 變化介導(dǎo)其對Xa因子的抑制作用。然而，對于凝血酶抑制，凝血酶必須也在靠近五糖的位 點(diǎn)處結(jié)合肝素聚合物。肝素的高負(fù)電荷密度促進(jìn)了其與凝血酶的非常強(qiáng)的靜電相互作用。 AT-III、凝血酶和肝素之間的三元絡(luò)合物的形成導(dǎo)致凝血酶的失活。為此原因，肝素針對凝血酶的活性是尺寸依賴性的，三元絡(luò)合物的有效形成需要至少18個糖單位。相比，抗Xa因 子活性僅需要五糖結(jié)合位點(diǎn)。此尺寸差異性已經(jīng)引領(lǐng)著開發(fā)小分子量肝素(LMWHs)，并且最 近開發(fā)了磺達(dá)肝素作為抗凝劑藥物，其靶向抗Xa因子活性而非抗凝血酶(IIa)活性。如果 需要長期抗凝，僅經(jīng)常使用肝素以開始抗凝治療直至采用口服抗凝劑華法林。II、VII、IX和X因子在其N-末端彼此是同源的。在去除信號肽后，駐留在內(nèi)質(zhì) 網(wǎng)或高爾基體中的羧化酶與這些蛋白的每一種的前肽區(qū)結(jié)合，并在鄰近的“Gla結(jié)構(gòu)域”中 將 10-12個谷氨酸(Glu)殘基轉(zhuǎn)變?yōu)間_羧基谷氨酸(Gla)。在分泌之前前肽從羧化多 肽上被去除。Gla殘基結(jié)合鈣離子并且是這些凝血因子的活性所必需的。Gla的合成需要 維生素K。在g-羧化期間，維生素K變成氧化的，并且必需隨后被還原以使循環(huán)繼續(xù)進(jìn)行。 抗凝藥物華法林(來自香豆素組)抑制維生素K的還原，并且由此防止活性II、VII、IX和 X因子的合成。肝素的嚴(yán)重副作用是肝素誘發(fā)的血小板減少癥(HIT綜合征)。HITS由免疫反應(yīng)引 起，該免疫反應(yīng)使血小板在血管內(nèi)聚集，由此消耗掉凝血因子。血小板凝塊的形成可導(dǎo)致血 栓形成，而凝血因子和血小板的損失可導(dǎo)致出血。HITS可在給予肝素后很快發(fā)生(罕見)， 但也可以在當(dāng)人已經(jīng)使用肝素很長一段時間時發(fā)生。還存在有與早期使用肝素相關(guān)的血小 板減少癥的良性形式，其消退不需要停用肝素。較少見的副作用包括長期使用的脫發(fā)和骨 質(zhì)疏松癥。此外，不確定的反應(yīng)需要密切的患者監(jiān)測，并且已經(jīng)記載有過敏反應(yīng)。與許多藥 物一樣，過量使用肝素可以是致命的。使用LMWH和磺達(dá)肝素，骨質(zhì)疏松癥和HIT的風(fēng)險較 小。抗凝治療，通常采用短期肝素注射和/或長期口服抗凝劑(通常為華法林)，當(dāng)作 為預(yù)防措施，或作為急性動脈或靜脈血栓形成的治療措施給予高?；颊邥r其能明顯地有效 預(yù)防嚴(yán)重的血管事件。因此抗凝治療防止凝塊形成以及已有凝塊的延伸。然而，足量抗凝 也是大多數(shù)內(nèi)出血的常見原因，這些內(nèi)出血包括顱內(nèi)、胃腸或腹膜后出血，它們可以是致命 的。因此選擇最可能從抗凝治療中受益的患者(即，其中大多數(shù)血栓栓塞事件的風(fēng)險超過 大多數(shù)出血的風(fēng)險的患者)是很重要的；并且在抗凝治療期間盡量減小血栓栓子和出血兩 者的發(fā)病率和死亡率是很重要的。因此，存在著能夠較好地控制和選擇性地在預(yù)定的級聯(lián)階段抑制凝血級聯(lián)的需 求。因此，開發(fā)作用于級聯(lián)的特定組分的抗凝劑增加了施用抗凝藥物的效率并減少了副作 用，諸如增加的出血危險。本發(fā)明致力于解決此問題并且提供了控制血液凝固級聯(lián)的改進(jìn)方案。發(fā)明_既述本發(fā)明涉及包含SEQ ID NO :1或由其組成的多肽，或與SEQ ID NO :1具有至少 70%序列同一性的多肽，或SEQ ID NO :1的多肽片段，所述多肽或其片段能夠抑制凝血級聯(lián) 的蛋白酶的活性。SEQ ID NO :1 多肽序列MMKCLFFLCLCLFPILVFSSTFTSQNPINLPSESPLPKPVLDTNGKELNPNLSYRIISTYWGALG⑶VY LGKSPNSDAPCPDGVFRYNSDVGPSGTPVRFIPLSTNIFEDQLLNIQFNIPTPKLCVSYTIWKVGNINAPLRTMLLE TGGTIGQADSSYFKIVKSSNFGYNLLYCPITRHFLCPFCRDDNFCAKVGVVIQNGKRRLALVNENPLDVLFQEV本發(fā)明還涉及SEQ ID NO 1的變體，和SEQ ID NO 1的片段的變體。
本發(fā)明進(jìn)一步包括包含與N-末端側(cè)翼序列可操作地融合的SEQ ID NO=I的融合 多肽。可選地，SEQ ID NO 1的片段與N-末端側(cè)翼序列可操作地融合。最后，SEQ ID NO 1的變體或SEQ ID NO 1的片段的變體與N-末端側(cè)翼序列可操作地融合。本發(fā)明進(jìn)一步包括包含與C-末端側(cè)翼序列可操作地融合的SEQ ID NO=I的融合 多肽?？蛇x地，SEQ ID NO 1的片段與C-末端側(cè)翼序列可操作地融合。最后，SEQ ID NO 1的變體或SEQ ID NO 1的片段的變體與C-末端側(cè)翼序列可操作地融合。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及多肽SEQ ID N0:1、或SEQ ID NO :1的片段、或 SEQ ID NO :1的變體或SEQ ID NO :1的片段的變體的酸加成鹽，所述鹽優(yōu)選地通過將多肽 或其片段或變體用無機(jī)酸或有機(jī)酸處理以提供所述多肽的水溶性鹽而獲得，所述無機(jī)酸諸 如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，所述有機(jī)酸諸如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、蘋 果酸、丙二酸、丁二酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙 磺酸、對甲苯磺酸、或水楊酸。本發(fā)明還涉及產(chǎn)生包含SEQ ID NO :1、或SEQ ID NO 1的片段、或SEQ IDNO 1的 變體、或SEQ ID NO :1的片段的變體的多肽的方法，包括從馬鈴薯采集馬鈴薯塊莖并且提取 和純化所述多肽的步驟。本發(fā)明進(jìn)一步包括產(chǎn)生包含SEQ ID NO :1、或SEQ ID NO 1的片段的多肽的方法， 以及產(chǎn)生SEQ ID NO :1的變體或產(chǎn)生SEQ ID NO 1的片段的變體的方法，其中這些方法 包括下列步驟提供包含如上面所提到的核苷酸序列的任一個的多核苷酸或表達(dá)載體和在 分離的重組或轉(zhuǎn)基因宿主細(xì)胞中表達(dá)所述多核苷酸或所述載體，從而產(chǎn)生根據(jù)本發(fā)明的多 肽。本發(fā)明進(jìn)一步包括產(chǎn)生具有SEQ ID NO :1或SEQ ID NO :1的片段的蛋白質(zhì)的方 法，以及產(chǎn)生SEQ ID NO :1的變體或產(chǎn)生SEQ ID NO 1的片段的變體的方法，其中這些方法 包括下列步驟提供編碼如本文上面所提到的多肽的多核苷酸，以及在體外，或在體內(nèi)在適 當(dāng)?shù)乃拗魃矬w內(nèi)，表達(dá)所述多核苷酸，從而產(chǎn)生根據(jù)本發(fā)明的多肽。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及編碼SEQ ID NO =USEQ ID NO :1的片段、SEQ ID NO 1的變體、或SEQ ID NO 1的片段的變體的多核苷酸。優(yōu)選的多核苷酸是例如下面列舉 的序列SEQ ID NO 2的編碼區(qū)。aatcaatatg atgaagtgtttatttttcttatgtttgtgtttgtttcccattttggtgtt60
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agctactatg ttatgttgta aattaaaata aacacctgct aaggtatatc tatattttag 780catggatttc ttaataaatt gtctttcctt atcgtttaaa(SEQ ID NO 2)在一個實(shí)施方案中，本發(fā)明描述了能夠與編碼SEQ ID NO=USEQ ID NO :1的片段、 SEQ ID NO 1的變體或SEQ ID NO=I的片段的變體的多核苷酸雜交的核苷酸序列。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明包括編碼SEQ ID NO 1的多核苷酸，編碼SEQID NO 1的片段、或編碼SEQ ID NO 1的變體、或編碼SEQ ID NO 1的片段的變體的多核苷酸，其 中所述多核苷酸的編碼所述多肽的部分與對應(yīng)于SEQ IDNO 1的至少10個連續(xù)核苷酸的核 苷酸探針或其變體在嚴(yán)格條件下雜交。本發(fā)明還涉及包含編碼SEQ ID NO =USEQ ID NO 1的片段、SEQ ID NO 1的變體 或SEQ ID NO :1的片段的變體的多核苷酸的表達(dá)載體，所述多核苷酸任選地與控制所述多 核苷酸在適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞中表達(dá)的調(diào)控序列可操作地連接。本發(fā)明進(jìn)一步涉及包含SEQ ID NO :1,SEQ ID NO :1的片段，SEQ ID NO :1的變體， 或SEQ ID NO :1的片段的變體的多肽的分離的重組或轉(zhuǎn)基因宿主細(xì)胞。本發(fā)明還涉及產(chǎn)生重組或轉(zhuǎn)基因宿主細(xì)胞的方法，所述方法包括下列步驟提供 編碼SEQ ID NO 1, SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體或SEQ IDNO 1的片段的變 體的多核苷酸，將所述多核苷酸引入至所述重組或轉(zhuǎn)基因宿主細(xì)胞中，并且任選地還在所 述重組或轉(zhuǎn)基因宿主細(xì)胞中表達(dá)所述多核苷酸，從而生成產(chǎn)生所述多肽的重組或轉(zhuǎn)基因宿 主細(xì)胞。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種包含上述的宿主細(xì)胞的轉(zhuǎn)基因哺乳動物生 物體，其中所述哺乳動物宿主細(xì)胞是選自單系類群兩側(cè)對稱動物的動物細(xì)胞，包括屬于四 種主要譜系后口動物、蛻皮動物、扁形動物(Platyz0a)和冠輪動物的任一種的哺乳動物細(xì) 胞。哺乳動物宿主細(xì)胞可以是選自由下列各項(xiàng)組成的組的動物細(xì)胞卵裂球細(xì)胞，卵 細(xì)胞，胚胎干細(xì)胞，紅細(xì)胞，成纖維細(xì)胞，肝細(xì)胞，成肌細(xì)胞，肌管，神經(jīng)元，卵母細(xì)胞，成骨細(xì) 胞，破骨細(xì)胞，精細(xì)胞、T細(xì)胞和受精卵。還提供了一種產(chǎn)生所述哺乳動物宿主細(xì)胞的方法，所述方法包括下列步驟提供 編碼SEQ ID NO 1, SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體或SEQ IDNO 1的片段的變 體的多核苷酸，將所述多核苷酸引入至所述重組或轉(zhuǎn)基因宿主細(xì)胞中，并且任選地還在所 述轉(zhuǎn)基因哺乳動物宿主細(xì)胞中表達(dá)所述多核苷酸，從而生成產(chǎn)生所述多肽的轉(zhuǎn)基因哺乳動 物宿主細(xì)胞。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及包含重組或轉(zhuǎn)基因宿主細(xì)胞的轉(zhuǎn)基因植物，所 述重組或轉(zhuǎn)基因宿主細(xì)胞包含SEQ ID NO 1, SEQ ID NO 1的片段，SEQID NO 1的變體或 SEQ ID NO 1的片段的變體的多肽。本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種產(chǎn)生上述轉(zhuǎn)基因植物的方法，所述方法包括下列步驟提 供編碼多肽SEQ ID NO :1，SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體或SEQ ID NO 1的片 段的變體的多核苷酸，將所述多核苷酸引入至所述植物中，從而生成產(chǎn)生所述多肽的轉(zhuǎn)基 因植物。本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種轉(zhuǎn)基因植物宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞是分類群有胚植物(Embryophyta)或綠色植物(Viridiplantae)或綠藻生物(Chlorobionta)的植物細(xì)胞， 優(yōu)選地選自由下列各項(xiàng)組成的組糊粉層細(xì)胞，厚角細(xì)胞，內(nèi)皮層細(xì)胞，胚乳細(xì)胞，表皮細(xì) 胞，葉肉細(xì)胞，分生組織細(xì)胞，柵欄細(xì)胞，薄壁細(xì)胞，韌皮部篩管細(xì)胞，花粉生殖細(xì)胞，花粉營 養(yǎng)細(xì)胞，厚壁組織細(xì)胞，管胞細(xì)胞，木質(zhì)部導(dǎo)管細(xì)胞和受精卵細(xì)胞。在一個具體實(shí)施方案中，所述轉(zhuǎn)基因植物是馬鈴薯植物。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種重組細(xì)菌宿主細(xì)胞，其包含多肽SEQID NO 1,SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體或SEQ ID NO 1的片段的變體和/或編碼SEQ ID NO :1,SEQ ID NO :1的片段，SEQ ID NO 1的變體或SEQID NO 1的片段的變體的多核苷 酸和/或包含編碼SEQ ID NO :1，SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體或SEQ ID NO 1的片段的變體的多核苷酸的載體。本發(fā)明還涉及一種細(xì)菌宿主細(xì)胞，其中所述細(xì)菌宿主細(xì)胞選自革蘭氏陽性細(xì)菌宿 主細(xì)胞和革蘭氏陰性細(xì)菌宿主細(xì)胞。本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種產(chǎn)生上述宿主細(xì)胞的方法，所述方法包括下列步驟提供 編碼多肽SEQ ID NO 1, SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體或SEQID NO 1的片段 的變體的多核苷酸，將所述多核苷酸引入至所述細(xì)菌細(xì)胞中，并且任選地還在所述細(xì)菌細(xì) 胞中表達(dá)所述多核苷酸，從而生成產(chǎn)生所述多肽的重組細(xì)菌細(xì)胞。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種重組酵母細(xì)胞，其包含多肽SEQ IDNO=I, SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體或SEQ ID NO 1的片段的變體和/或編碼SEQ ID NO :1,SEQ ID NO :1的片段，SEQ ID NO :1的變體或SEQ IDNO 1的片段的變體的多核苷 酸和/或包含編碼SEQ ID NO :1，SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體或SEQ ID NO 1的片段的變體的多核苷酸的載體。本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種產(chǎn)生上述的重組酵母細(xì)胞的方法，所述方法包括下列步 驟提供編碼多肽SEQ ID NO 1, SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體或SEQ ID NO 1的片段的變體的多核苷酸，將所述多核苷酸引入至所述酵母細(xì)胞中，并且任選地還在所述 酵母細(xì)胞中表達(dá)所述多核苷酸，從而生成產(chǎn)生所述多肽的重組酵母細(xì)胞。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種重組真菌宿主細(xì)胞，其包含多肽SEQID NO 1,SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體或SEQ ID NO 1的片段的變體和/或編碼SEQ ID NO :1,SEQ ID NO :1的片段，SEQ ID NO 1的變體或SEQID NO 1的片段的變體的多核苷 酸和/或包含編碼SEQ ID NO :1，SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體或SEQ ID NO 1的片段的變體的多核苷酸的載體。本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種產(chǎn)生上述的重組真菌宿主細(xì)胞的方法，所述方法包括下列 步驟提供編碼多肽SEQ ID NO :1，SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO :1的變體或SEQ ID NO 1的片段的變體的多核苷酸，將所述多核苷酸引入至所述真菌細(xì)胞中，并且任選地還在所述 真菌細(xì)胞中表達(dá)所述多核苷酸，從而生成產(chǎn)生所述多肽的重組真菌細(xì)胞。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及對多肽SEQ ID NO :1,SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體或SEQ ID NO=I的片段的變體特異的抗體，或其結(jié)合片段。本發(fā)明還涉及一種產(chǎn)生對多肽SEQ ID NO :1,SEQ ID NO :1的片段，SEQ IDNO :1的 變體或SEQ ID NO :1的片段的變體特異的多克隆抗體或其結(jié)合片段的方法，所述方法包括 下列步驟用所述多肽在誘發(fā)抗體應(yīng)答的條件下免疫哺乳動物對象，鑒定與所述多肽特異
10性結(jié)合的抗體，以及任選地從所述哺乳動物對象中分離所述抗體或其結(jié)合片段。本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種產(chǎn)生對多肽SEQ ID NO :1，SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO :1的變體或SEQ ID NO :1的片段的變體特異的單克隆抗體的方法，所述方法包括下列步 驟用所述多肽在誘發(fā)抗體應(yīng)答的條件下免疫哺乳動物對象，制備產(chǎn)生對所述多肽特異的 單克隆抗體的雜交瘤，以及鑒定與所述多肽特異性結(jié)合的抗體。本發(fā)明還涉及能夠被上述抗體識別的多肽。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及包含多肽SEQ ID NO :1，SEQ ID NO 1的片段， SEQ ID NO 1的變體或SEQ ID NO=I的片段的變體以及生理學(xué)可接受的載體的組合物。本發(fā)明還涉及包含多肽SEQ ID NO 1, SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體 或SEQ ID NO :1的片段的變體以及藥學(xué)可接受的載體的藥物組合物。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及包含多肽SEQ ID NO :1，SEQ ID NO 1的片段， SEQ ID NO :1的變體或SEQ ID NO 1的片段的變體以及生理學(xué)可接受的載體和一種或多種 另外的作用于止血中的血小板凝集的醫(yī)用生物活性劑(抗血小板劑)的組合物。本發(fā)明還涉及包含多肽SEQ ID NO 1, SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體 或SEQ ID NO :1的片段的變體以及藥學(xué)可接受的載體和一種或多種另外的作用于止血中的 血小板凝集的醫(yī)用生物活性劑(抗血小板劑)的藥物組合物。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及包含多肽SEQ ID NO :1，SEQ ID NO 1的片段， SEQ ID NO :1的變體或SEQ ID NO 1的片段的變體以及生理學(xué)可接受的載體和一種或多種 另外的作用于止血中的血液凝固級聯(lián)的醫(yī)用生物活性劑(抗凝劑)的組合物。本發(fā)明還涉及包含多肽SEQ ID NO 1, SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體 或SEQ ID NO :1的片段的變體以及藥學(xué)可接受的載體和一種或多種另外的作用于止血中的 血液凝固級聯(lián)的醫(yī)用生物活性劑(抗凝劑)的藥物組合物。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及包含多肽SEQ ID NO :1，SEQ ID NO 1的片段， SEQ ID NO :1的變體或SEQ ID NO 1的片段的變體以及生理學(xué)可接受的載體和一種或多種 另外的作用于止血中的纖維蛋白溶解的醫(yī)用生物活性劑(纖維蛋白溶解劑)的組合物。本發(fā)明還涉及包含多肽SEQ ID NO 1, SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體 或SEQ ID NO :1的片段的變體以及藥學(xué)可接受的載體和一種或多種另外的作用于止血中的 纖維蛋白溶解的醫(yī)用生物活性劑(纖維蛋白溶解劑)的藥物組合物。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及包含多肽SEQ ID NO :1，SEQ ID NO 1的片段， SEQ ID NO :1的變體或SEQ ID NO :1的片段的變體以及生理學(xué)可接受的載體和一種或多 種另外的選自由抗血小板劑、抗凝劑和纖維蛋白溶解劑組成的組的醫(yī)用生物活性劑的組合 物。本發(fā)明還涉及包含多肽SEQ ID NO 1, SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體 或SEQ ID NO :1的片段的變體以及藥學(xué)可接受的載體和一種或多種另外的選自由抗血小板 劑、抗凝劑和纖維蛋白溶解劑組成的組的醫(yī)用生物活性劑的藥物組合物。還在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種多組分試劑盒，其包含多肽SEQ IDNO=I, SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體或SEQ ID NO 1的片段的變體或上述的組合物 之一，以及至少一種另外的組分。本發(fā)明還涉及一種鑒定多肽SEQ ID NO :1，SEQ ID NO 1的片段，SEQ IDNO 1的變體或SEQ ID NO :1的片段的變體的結(jié)合伴侶的方法，所述方法包括提取所述多肽和分離 所述結(jié)合伴侶的步驟。本發(fā)明涉及用作藥物的多肽SEQ ID NO :1,SEQ ID NO :1的片段，SEQ IDNO :1的變 體或SEQ ID NO 1的片段的變體或上述的包含SEQ ID NO 1, SEQ IDNO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體或SEQ ID NO 1的片段的變體的組合物之一。本發(fā)明還涉及一種使用上述的結(jié)合伴侶治療需要該治療的個體的方法，所述結(jié)合 伴侶諸如SEQ ID NO :1，SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體或SEQ ID NO 1的片段 的變體的激動劑或拮抗劑。本發(fā)明還涉及一種使用上述的結(jié)合伴侶結(jié)合所述多肽治療需要該治療的個體的 方法，所述結(jié)合伴侶諸如SEQ ID NO 1, SEQ ID NO 1的片段，SEQ ID NO 1的變體或SEQ ID NO :1的片段的變體的激動劑或拮抗劑。本發(fā)明還涉及一種使用上述的結(jié)合伴侶治療需 要該治療的個體的方法，所述結(jié)合伴侶諸如SEQ IDNO :1,SEQ ID NO :1的片段，SEQ ID NO: 1的變體或SEQ ID NO 1的片段的變體的激動劑或拮抗劑。本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種治療冠狀動脈綜合征的方法，包括將上述的組合物之一施 用于需要其的個體。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用于治療選自由下列各項(xiàng)組成的組的冠狀動脈 綜合征的藥物組合物穩(wěn)定型心絞痛、不穩(wěn)定型心絞痛、心肌缺血、心肌梗塞、擴(kuò)張型心肌 病、肥厚型心肌病、充血性心力衰竭和心力衰竭，所述藥物組合物包含上述的一種或多種組 合物。另外本發(fā)明涉及一種治療心房顫動的方法，包括將上述的一種或多種組合物施用 于需要其的個體。本發(fā)明還涉及用于治療心房顫動和心臟復(fù)律的藥物組合物，其包含上述的一種或 多種組合物。本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種治療外周動脈閉塞的方法，包括將上述的一種或多種組合 物施用于需要其的個體。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用于治療由原發(fā)性或復(fù)發(fā)性血栓形成、栓塞或 動脈粥樣硬化引起的外周動脈閉塞的藥物組合物，其包含上述的一種或多種組合物。本發(fā)明還涉及一種治療深靜脈血栓形成的方法，包括將上述的一種或多種組合物 施用于需要其的個體。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用于治療深靜脈血栓形成和肺栓塞的藥物組合 物，其包含上述的一種或多種組合物。本發(fā)明還涉及一種治療在體外回路和導(dǎo)管中凝血的方法，包括將上述的一種或多 種組合物施用于需要其的個體。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用于治療在心肺轉(zhuǎn)流術(shù)和血液透析期間體外回 路中凝血的藥物組合物，其包含上述的一種或多種組合物。本發(fā)明還涉及一種治療血管成形術(shù)期間凝血的方法，包括將上述的一種或多種組 合物施用于需要其的個體。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用于治療血管成形術(shù)期間凝血的藥物組合物， 其包含上述的一種或多種組合物。
本發(fā)明還涉及一種治療與人工心臟瓣膜置換有關(guān)的凝血的方法，包括將上述的一 種或多種組合物施用于需要其的個體。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用于治療與假體心臟瓣膜置換有關(guān)的凝血的藥 物組合物，其包含上述的一種或多種組合物。本發(fā)明還涉及一種治療由侵襲心臟瓣膜的疾病引起的凝血的方法，包括施用上述 的一種或多種組合物。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用于治療由侵襲心臟瓣膜的疾病引起的凝血的 藥物組合物，其包含上述的一種或多種組合物，所述疾病包括感染的瓣膜(細(xì)菌性心內(nèi)膜 炎)、風(fēng)濕性二尖瓣疾病、二尖瓣狹窄、二尖瓣脫垂、二尖瓣環(huán)鈣化和孤立性主動脈瓣疾病。本發(fā)明還涉及一種治療具有血栓形成傾向綜合征的患者中的凝血的方法，包括施 用上述的一種或多種組合物。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用于治療具有血栓形成傾向綜合征的患者 中的凝血的藥物組合物，其包含上述的一種或多種組合物，所述血栓形成傾向綜合征包括 抗磷脂綜合征、V因子萊頓突變、凝血酶原突變/11因子突變、由MTHFR突變或維生素缺乏 (維生素B6，B12和葉酸)引起的高同型半胱氨酸水平、抗凝血酶的腎損失、纖溶酶原和纖 維蛋白溶解功能障礙、陣發(fā)性夜間血紅蛋白尿、蛋白C缺乏、蛋白S缺乏和抗凝血酶III缺 乏。本發(fā)明還涉及一種治療凝血控制后的凝血的方法，包括施用上述的一種或多種組 合物。還在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用于治療由于增加出血風(fēng)險的病癥的存在而 采取的凝血控制后的凝血的藥物組合物，其包含上述的一種或多種組合物，所述增加出血 風(fēng)險的病癥包括血友病A、血友病B、血友病C、Von Willebrand病、大量失血、血小板無力癥 (Glanzmann' s thrombasthenia)、巨大血小板綜合征(Bernard-Soul ier syndrome)、灰色 血小板綜合征和δ貯藏池缺乏癥(delta storagepool deficiency)。另外，本發(fā)明涉及一種治療導(dǎo)致血小板激活增加的血小板數(shù)目減少的方法，包括 將上述的一種或多種組合物施用于需要其的個體。在另一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用于治療由于產(chǎn)量不足(例如，在骨髓 增生異常綜合征或其他骨髓功能障礙中)、免疫系統(tǒng)造成的破壞(免疫性血小板減少性紫 癜/ITP)和由于各種原因引起的消耗(血栓性血小板減少性紫癜/TTP、溶血性尿毒癥綜合 征/HUS、陣發(fā)性夜間血紅蛋白尿/PNH、彌散性血管內(nèi)凝血/DIC、肝素誘導(dǎo)的血小板減少癥 /HIT)導(dǎo)致的血小板數(shù)目減少所引起的凝血的藥物組合物，其包含上述的一種或多種組合 物。本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種治療不耐受市場上靶向凝血的其他治療藥物的個體中任 何原因的凝血的方法，包括將上述的一種或多種組合物施用于需要其的個體。在另一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用于治療不耐受市場上靶向凝血的其他 治療藥物的個體中的凝血的藥物組合物，其包含上述的一種或多種組合物。本發(fā)明還涉及一種治療因任何原因而不活動的個體、患臨界性肢體缺血或已經(jīng)截 肢的患者中的凝血的方法，包括將上述的一種或多種組合物施用于需要其的個體。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用于治療因任何原因而不活動的個體、患臨界性肢體缺血或已經(jīng)截肢的患者中的凝血的藥物組合物，其包含上述的一種或多種組合物。本發(fā)明還涉及一種治療接受任何形式的化學(xué)治療的患者中的凝血的方法，包括將 上述的一種或多種組合物施用于需要其的個體。在另一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用于治療接受任何形式的化學(xué)治療的患 者中的凝血的藥物組合物，其包含上述的一種或多種組合物。本發(fā)明還涉及一種治療處于發(fā)生血凝塊的高危的患者中的凝血的方法，包括將上 述的一種或多種組合物施用于需要其的個體。還在另一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用于治療處于發(fā)生血凝塊的高危的患 者中的凝血的藥物組合物，其包含上述的一種或多種組合物。定義“血栓形成”是指形成血栓，且“血栓”是血凝塊，S卩，止血的血液凝固級聯(lián)的最終步 驟。在損傷的情況下血栓是生理性的，但在血栓形成從而在未受損傷的血管中發(fā)生的情況 下其是病理性的。血栓形成通常發(fā)生在血管壁或心臟壁損害的部位處(例如，粥樣硬化斑 塊的破裂；患病的或置換心臟瓣膜；心肌梗塞后心內(nèi)膜損傷以后的附壁血栓)和/或血流 擾動(例如，心房顫動，臥床患者中的腿部靜脈)。通過形態(tài)學(xué)研究(病理學(xué)，血管造影和血 管內(nèi)窺鏡)；止血變量的流行病學(xué)研究(與血小板、凝固和纖維蛋白溶解有關(guān))；以及尤其 是通過對抗血小板、抗凝或溶栓治療的大型隨機(jī)化對照試驗(yàn)，已經(jīng)確定了血小板_纖維蛋 白血栓對動脈和靜脈閉塞以及對臨床事件的作用。當(dāng)物體(栓子，多個栓子)從機(jī)體的一個部位移行(通過循環(huán))并且導(dǎo)致機(jī)體另 一部位中的血管阻塞(閉塞)時發(fā)生“栓塞”。“止血”是指使出血停止的生理過程的術(shù)語。其由多個步驟組成，包括1)血管收縮 以盡量減小血管腔直徑并且延緩出血，2)血小板聚集，3)凝固以及4)纖維蛋白溶解，從而 降解血凝塊。術(shù)語“凝血級聯(lián)”或“血液凝固級聯(lián)”是繼發(fā)性止血的一部分，并且是指其中血液 和血管組分通過順序地酶促激活凝血因子，最終導(dǎo)致包含纖維蛋白凝膠和血小板的固體血 凝塊形成而對刺激發(fā)生反應(yīng)的多步驟過程。術(shù)語“心臟復(fù)律”是終止異常快的心率或心律失常的過程。此過程可通過在心動 周期中的特定時刻向心臟遞送治療劑量的電流(表示‘同步心臟電復(fù)律’)，或通過使用藥 物治療代替電擊從而轉(zhuǎn)變心律失常(‘藥物心臟復(fù)律’)而獲得。“生物活性劑”是提供一些可在體內(nèi)或體外證明的經(jīng)常是有益的藥理學(xué)作用的任 何藥劑、藥物、化合物、物質(zhì)的組合物或混合物。如本文所使用，該術(shù)語進(jìn)一步包括在患者中 產(chǎn)生局部或全身作用的任何生理學(xué)或藥理學(xué)活性物質(zhì)。生物活性劑的進(jìn)一步實(shí)例包括，但 不限于，包括寡糖或由其組成的藥劑，包括多糖或由其組成的藥劑，包括任選地糖基化的肽 或由其組成的藥劑，包括任選地糖基化的多肽或由其組成的藥劑，包括寡核苷酸或由其組 成的藥劑，包括多核苷酸或由其組成的藥劑，包括脂質(zhì)或由其組成的藥劑，包括脂肪酸或由 其組成的藥劑，包括脂肪酸酯或由其組成的藥劑和包括次級代謝產(chǎn)物或由其組成的藥劑。如本文所使用的術(shù)語“治療(treating，treatment) ”和“療法(therapy) ”同等 地指治愈性治療、預(yù)防性治療或預(yù)防治療和改善性治療。該術(shù)語包括可在臨床上建立的獲 得有益或所需生理學(xué)結(jié)果的方式。為本發(fā)明的目的，有益的或所需的臨床結(jié)果包括，但不限
14于，癥狀的減輕，病變范圍的減小，穩(wěn)定(即，不惡化)狀態(tài)，延緩或減慢狀況/癥狀的進(jìn)展 或惡化，狀況或癥狀的改善或減輕，以及緩解(部分或全部)，不管可檢測到或檢測不到。如 本文所使用，術(shù)語“減輕”和其變化形式，是指與不施用本發(fā)明的組合物相比，生理狀況或癥 狀的程度和/或不合乎需要的表現(xiàn)被減少和/或進(jìn)展的時程被減慢或延長。術(shù)語“二級預(yù)防”是指病理狀況首次出現(xiàn)后的預(yù)防性治療，所述病理狀況諸如心肌 梗塞，缺血性卒中，心絞痛和外周動脈疾病。如果通過構(gòu)成術(shù)語“治療”的定義的標(biāo)準(zhǔn)測量，被治療狀況有變化，則表現(xiàn)“治療效 應(yīng)”或“治療性效應(yīng)”。如果存在至少5%改善，優(yōu)選地10%改善，更優(yōu)選地至少25%改善， 甚至更優(yōu)選地至少50%改善，諸如至少75%，且最優(yōu)選地至少100%改善，則被治療狀況有 “變化”。所述變化可基于個體中被治療狀況的嚴(yán)重性改善，或基于使用或不使用生物活性 劑或生物活性劑結(jié)合本發(fā)明的藥物組合物治療的個體的群體中狀況改善的頻率的差異?！吧锘钚詣钡摹八幚韺W(xué)有效量”、“藥學(xué)有效量”或“生理學(xué)有效量”是當(dāng)施用如本 文所述的藥物組合物時需要在待治療的個體的血流中或作用部位(例如，肺，胃系統(tǒng)，結(jié)直 腸系統(tǒng)，前列腺等)處提供所需水平的活性劑以得到預(yù)期的生理學(xué)響應(yīng)的所述藥物組合物 中存在的活性劑的量。準(zhǔn)確的用量將取決于許多因素，例如，活性劑，組合物的活性，采用的 遞送裝置，組合物的物理性質(zhì)，預(yù)期的患者應(yīng)用(即，每天施用的劑量次數(shù))，患者考慮等， 并且可容易地由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員基于本文提供的信息來確定。生物活性劑的“有效量” 可在一次給藥中施用，或通過總計(jì)為有效量的量的多次給藥來施用，優(yōu)選地在24小時的時 間內(nèi)。其可使用用于確定給藥的適當(dāng)?shù)牧亢蜁r機(jī)的標(biāo)準(zhǔn)臨床方法來確定。要理解，就衛(wèi)生 保健治療專家和/或個人而言“有效量”可以是經(jīng)驗(yàn)性和/或個體化(個例)確定的結(jié)果。如本文所使用，術(shù)語“增強(qiáng)”和“改善”有益效果，及其變化形式是指生物活性劑相 對于安慰劑的治療效應(yīng)，或現(xiàn)有技術(shù)醫(yī)學(xué)治療的治療效應(yīng)的增加在通常當(dāng)施用藥物組合物 而不施用本發(fā)明的生物活性劑時獲得的治療效應(yīng)之上。當(dāng)由于施用(多種)生物活性劑而 使獲得的治療效應(yīng)的強(qiáng)度和/或程度加速和/或增加時，表現(xiàn)“治療效應(yīng)的增加”。其還包 括治療益處的持續(xù)時間延長。在當(dāng)藥物組合物與本發(fā)明提供的(多種)生物活性劑共同施 用時與缺少該生物活性劑時該藥物組合物的較高給藥量相比，需要較少量的該藥物組合物 以獲得相同的益處和/或效應(yīng)的時候，也可表現(xiàn)“治療效應(yīng)的增加”。增強(qiáng)效應(yīng)優(yōu)選地，但非 必需的，產(chǎn)生對急性癥狀的治療，對于該急性癥狀單獨(dú)的藥物組合物在治療上無效或不太 有效。當(dāng)本發(fā)明的生物活性劑與藥物組合物共同施用時，與單獨(dú)施用該藥物組合物相比，當(dāng) 存在治療效應(yīng)的至少5%增加，諸如治療效應(yīng)的至少10%增加時達(dá)到增強(qiáng)作用。優(yōu)選地，所 述增加為至少25%，更優(yōu)選地至少50%，甚至更優(yōu)選地至少75%，最優(yōu)選地至少100%。如本文所使用，(多種)生物活性劑，或生物活性劑和現(xiàn)有技術(shù)藥物的“共同使用” 或“共同給藥”是指在特定時間周期內(nèi)施用一種或多種本發(fā)明的生物活性劑，或施用本發(fā)明 的一種或多種生物活性劑和現(xiàn)有技術(shù)藥物組合物。所述時間周期優(yōu)選地小于72小時，諸如 48小時，例如小于24小時，諸如小于12小時，例如小于6小時，諸如小于3小時。然而，這 些術(shù)語還指生物活性劑和治療性組合物可在一起施用。術(shù)語“個體”指脊椎動物，特別是哺乳動物物種的成員，并且包括，但不限于家養(yǎng)動 物，諸如牛，馬，豬，羊，水紹，狗，貓，小鼠，豚鼠，兔，大鼠；體育動物，諸如馬，多種矮馬(poly ponies)，狗，駱駝，以及靈長類，包括人。
如在本發(fā)明中所使用，術(shù)語“多組分試劑盒”提供根據(jù)本發(fā)明的多肽和用于聯(lián)合給 藥的第二種生物活性劑。組合的活性物質(zhì)可用于同時的、順序的或單獨(dú)的給藥。在所有情 況下，優(yōu)選本文提到的藥物和生物活性劑的任一種以藥學(xué)有效量施用，即，包括足以顯示有 意義的患者益處的藥物或藥物組合物的各種活性組分的總量或方法的施用。制劑可通過本 領(lǐng)域普通技術(shù)人員知曉的方法方便地以單位劑型提供。優(yōu)選地，試劑盒可例如包含在用于 給藥的多種劑型中的活性化合物。一種劑型含有足量的一種或多種活性化合物，使得當(dāng)施 用于對象時可獲得所需的效應(yīng)。因此，優(yōu)選醫(yī)藥包裝包括與相關(guān)給藥方案對應(yīng)的劑量單位 的量。因此，在一個實(shí)施方案中，醫(yī)藥包裝包括藥物組合物，其包含如上所定義的化合物或 其藥學(xué)可接受的鹽和藥學(xué)可接受的載體、賦形劑和/或輔料。醫(yī)藥包裝可以是任何合適的 形式，例如，用于腸內(nèi)(經(jīng)消化道)或胃腸外(消化道以外的途徑)給藥。在另一個優(yōu)選的 實(shí)施方案中，該包裝是藥筒的形式，諸如注射筆的藥筒，所述注射筆諸如已知用于胰島素治 療的注射筆。優(yōu)選地，多組分試劑盒含有使用說明書，其指示為達(dá)到所需效應(yīng)的所述劑型的 使用以及在規(guī)定的時間周期內(nèi)攝入的劑型的量。因此，在一個實(shí)施方案中，所述醫(yī)學(xué)包裝包 括用于施用所述藥物組合物的使用說明書。考慮到的是，至少一種(諸如2種或3種)另 外的在止血中或在對止血的基本病因或其危險的治療中起作用的藥物，和至少一種(諸如 2種或3種)根據(jù)本發(fā)明的多肽可用于制備本文所述的用于施用于需要其的個體的任一種 “多組分試劑盒”?！吧锛袤w瓣膜”是一種包含生物材料的人工或假體心臟瓣膜。此類生物或生物假 體瓣膜是動物如豬的瓣膜，其經(jīng)歷幾個化學(xué)步驟以便使其適于植入在人心臟中。豬心臟最 類似于人心臟，因此是在解剖學(xué)上最適于置換的代表。豬瓣膜的植入是一種異種移植術(shù)，或 異種移植物，其指從一個物種(在本例中為豬)至另一個物種的移植。存在一些與異種移 植物相關(guān)的危險，諸如人體有排斥異物的傾向。可使用藥物治療來延緩這種效應(yīng)，但不一定 是成功的。另一類型的生物瓣膜利用生物組織來制成縫在金屬框架中的小葉。該組織一般 從牛(奶牛)或馬科動物(馬)的心包囊獲取。心包囊由于其非常耐用的物理性能而特別 適合用作瓣膜小葉。此類生物瓣膜是非常有效的瓣膜置換方式。該組織被滅菌從而去除生 物標(biāo)志物，消除宿主免疫系統(tǒng)的應(yīng)答。在美國和歐洲最常用的心臟瓣膜是那些利用組織小 葉的瓣膜。在亞洲和拉丁美洲較常使用機(jī)械瓣膜。術(shù)語“SEQ ID NO 1的同源物”是指具有與SEQ ID NO=I相似但不同的序列的多 肽，因?yàn)槠涫前琒EQ ID NO :1或其片段或由它們組成的多肽。術(shù)語“SEQ ID NO 1的變體”是指具有與SEQ ID NO 1相似但不同的序列的多肽， 因?yàn)槠涫荢EQ ID NO :1或其片段的多肽變體。變體多肽具有如下的氨基酸序列，其是根據(jù) 本發(fā)明的多肽的修飾形式。所述修飾形式包括一個或多個氨基酸的一個或多個保守置換或 一個或多個等價置換，其改變SEQ ID NO :1的多肽的序列，但不改變其生物學(xué)活性。如本文所使用，“核酸”或“核酸分子”是指多核苷酸，諸如脫氧核糖核酸(DNA)或 核糖核酸(RNA)，寡核苷酸，通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)生成的片段，以及通過連接、切斷、 核酸內(nèi)切酶作用和核酸外切酶作用的任一種生成的片段。核酸分子可由單體組成，所述單 體為天然存在的核苷酸(諸如DNA和RNA)，或天然存在的核苷酸的類似物(例如，天然存在 的核苷酸的α-對映體形式)，或兩者的組合。修飾的核苷酸可具有在糖部分和/或嘧啶或 嘌呤堿基部分中的改變。糖修飾作用包括，例如，一個或多個羥基被鹵素、烷基、胺和疊氮基置換，或糖可被官能化為醚或酯。此外，整個糖部分可用空間上和電子上相似的結(jié)構(gòu)置換， 諸如氮雜_糖和碳環(huán)糖類似物。堿基部分中的修飾作用的實(shí)例包括烷基化嘌呤和嘧啶，酰 化嘌呤或嘧啶，或其他公知的雜環(huán)取代基。核酸單體可通過磷酸二酯鍵或所述鍵的類似物 連接。磷酸二酯鍵的類似物包括硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、硒代磷酸酯、二硒代磷酸酯、硫 代磷酰氨酸酯(phosphoroanilothioate)、磷酰氨酸酯(phosphoranilidate)、氨基磷酸酯 等。術(shù)語“核酸分子”還包括所謂的“肽核酸”，其包含與聚酰胺主鏈連接的天然存在的或修 飾的核酸堿基。核酸可以是單鏈的或雙鏈的。術(shù)語“天然核苷酸”是指四種脫氧核糖核苷酸dA、dG、dT和dC(DNA的成分)的任 意一種，并且四種核糖核苷酸，A、G、U和C(RNA的成分)是天然核苷酸。各種天然核苷酸包 括糖部分(核糖或脫氧核糖)、磷酸部分以及天然/標(biāo)準(zhǔn)堿基部分或主要由它們組成。天 然核苷酸與互補(bǔ)核苷酸根據(jù)公知的堿基配對法則(Watson和Crick)結(jié)合，其中腺嘌呤(A) 與胸腺嘧啶⑴或尿嘧啶⑶配對；以及鳥嘌呤(G)與胞嘧啶(C)配對，其中相應(yīng)的堿基 對是互補(bǔ)的反平行的核苷酸鏈的一部分。堿基配對導(dǎo)致預(yù)定的和互補(bǔ)的核苷酸之間的特異 性雜交。堿基配對是酶能夠催化與模板寡核苷酸互補(bǔ)的寡核苷酸的合成的基礎(chǔ)。在此合成 中，構(gòu)件(通常為A，T，U，C或G的核糖或脫氧核糖衍生物的三磷酸鹽)被模板寡核苷酸引 導(dǎo)以形成具有正確的互補(bǔ)序列的互補(bǔ)寡核苷酸。由此互補(bǔ)序列對寡核苷酸序列的識別通過 形成堿基對的相應(yīng)的和相互作用的堿基來介導(dǎo)。本質(zhì)上，產(chǎn)生堿基配對的特異性相互作用 是由堿基的大小和堿基的氫鍵供體和受體的模式來決定的。大的嘌呤堿基(A或G)與小的 嘧啶堿基(T、U或C)配對。另外，堿基之間的堿基對識別受堿基之間形成的氫鍵影響。在 Watson-Crick堿基對的幾何形狀中，將6元環(huán)(天然寡核苷酸中的嘧啶)并排成由稠合的 6元環(huán)和5元環(huán)(天然寡核苷酸中的嘌呤)構(gòu)成的環(huán)系，中間的氫鍵連接兩個環(huán)原子，并且 任一側(cè)上的氫鍵連接附著于各個環(huán)的官能團(tuán)，供體基團(tuán)與受體基團(tuán)相配對。術(shù)語“核酸分子的互補(bǔ)體”是指與參考核苷酸序列相比具有互補(bǔ)的核苷酸序列和 相反方向的核酸分子。例如，序列5' ATGCACGGG 3'與5' CCCGTGCAT3'互補(bǔ)。術(shù)語“簡并核苷酸序列”指與編碼多肽的參考核酸分子相比，包括一個或多個簡并 密碼子的核苷酸的序列。簡并密碼子含有不同的核苷酸三聯(lián)體，但編碼相同的氨基酸殘基 (即，GAU和GAC三聯(lián)體均編碼Asp)。術(shù)語“結(jié)構(gòu)基因”是指轉(zhuǎn)錄為信使RNA(mRNA)，然后翻譯為特定多肽特有的氨基酸 序列的核酸分子。“分離的核酸分子”是未整合在生物體的基因組DNA中的核酸分子。例如，已經(jīng)與 細(xì)胞的基因組DNA分開的、編碼生長因子的DNA分子是分離的DNA分子。分離的核酸分子 的另一實(shí)例是未整合在生物體的基因組中的化學(xué)合成的核酸分子。已經(jīng)從特定物種中分離 的核酸分子小于來自該物種的染色體的完整DNA分子?！昂怂岱肿訕?gòu)建體”是單鏈或雙鏈的核酸分子，其已經(jīng)通過人為干預(yù)被修飾從而含 有以天然不存在的排列合并和并置的核酸節(jié)段?！熬€性DNA”指具有游離的5'和3'端的非環(huán)狀DNA分子。線性DNA可從閉合的 環(huán)狀DNA分子諸如質(zhì)粒通過酶消化或物理性斷裂而制備?！盎パa(bǔ)DNA(cDNA) ”是單鏈DNA分子，其通過逆轉(zhuǎn)錄酶從mRNA模板形成。典型地， 與mRNA的各部分互補(bǔ)的引物被用來啟動逆轉(zhuǎn)錄。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員還使用術(shù)語“cDNA”來指由此類單鏈DNA分子及其互補(bǔ)DNA鏈組成的雙鏈DNA分子。術(shù)語“cDNA”還指從RNA 模板合成的cDNA分子的克隆?！皢幼印笔且龑?dǎo)結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄的核苷酸序列。典型地，啟動子位于基因的5'非編 碼區(qū)中，靠近結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)。啟動子內(nèi)在轉(zhuǎn)錄的啟動中起作用的序列元件的特 征常常在于共有核苷酸序列。這些啟動子元件包括RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)，TATA序列，CAAT序 列，分化特異性元件(DSEs ；McGehee 等，Mol. Endocrinol. 7 :551 (1993))，環(huán) AMP 應(yīng)答元件 (CREs)，血清應(yīng)答元件(SREs ；Treisman, Seminars in Cancer Biol. 1 :47 (1990))，糖皮質(zhì) 激素應(yīng)答元件(GREs)，和其他轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合位點(diǎn)，諸如CRE/ATF(0' Reilly等，J. Biol. Chem. 267 19938 (1992)), AP2(Ye 等，J. Biol. Chem. 269:25728(1994))，SPl，cAMP 應(yīng)答元 件結(jié)合蛋白(CREB ；Loeken, Gene Expr. 3 253(1993))和八聚體因子(通常，參見，Watson 等，編輯，Molecular Biology of the Gene (基因的分子生物學(xué))，第四版(TheBenjamin/ Cummings Publishing Company, Inc. 1987),以及 Lemaigre 禾口 Rousseau, Biochem. J. 303 1(1994))。如果啟動子是誘導(dǎo)型啟動子，則響應(yīng)于誘導(dǎo)劑轉(zhuǎn)錄速率增加。相反，如果啟動子 是組成型啟動子則轉(zhuǎn)錄速率不受誘導(dǎo)劑調(diào)節(jié)。還已知有阻抑型啟動子?！昂诵膯幼印焙杏糜趩幼庸δ艿谋匦韬塑账嵝蛄?，包括TATA盒和轉(zhuǎn)錄起始 點(diǎn)。通過此定義，在缺少可增強(qiáng)活性或賦予組織特異性活性的特定序列的情況下，核心啟動 子可以具有或不具有可檢測活性?！罢{(diào)控元件”是調(diào)節(jié)核心啟動子的活性的核苷酸序列。例如，調(diào)控元件可含有與使 轉(zhuǎn)錄專門或優(yōu)先地在特定細(xì)胞、組織或細(xì)胞器中進(jìn)行的細(xì)胞因子結(jié)合的核苷酸序列。這些 類型的調(diào)控元件通常與以“細(xì)胞特異性”、“組織特異性”或“細(xì)胞器特異性”的方式表達(dá)的 基因有關(guān)?！霸鰪?qiáng)子”是一類調(diào)控元件，其可增加轉(zhuǎn)錄效率，無論增強(qiáng)子相對于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn) 的距離或方向如何。“異源性DNA”是指天然不存在于指定宿主細(xì)胞內(nèi)的DNA分子或DNA分子的群體。 對特定宿主細(xì)胞異源的DNA分子可含有來源于該宿主細(xì)胞物種的DNA ( S卩，內(nèi)源性DNA)，只 要宿主DNA與非宿主DNA (S卩，外源性DNA)合并在一起。例如，含有與包含轉(zhuǎn)錄啟動子的宿 主DNA節(jié)段可操作地連接的編碼多肽的非宿主DNA節(jié)段的DNA分子被認(rèn)為是異源性DNA分 子。相反地，異源性DNA分子，可包含與外源性啟動子可操作地連接的內(nèi)源性基因。作為另 一種說明，如果DNA分子被引入至缺少野生型基因的突變細(xì)胞中，則包含來源于野生型細(xì) 胞的基因的DNA分子被認(rèn)為是異源性DNA?！岸嚯摹笔莾?yōu)選地專門通過肽鍵連接的氨基酸殘基的聚合物，無論是天然或合成產(chǎn) 生的。通過非宿主DNA分子表達(dá)產(chǎn)生的多肽是“異源的”肽或多肽。如本文所使用，術(shù)語“多 肽”涵蓋蛋白質(zhì)、肽和多肽，其中所述蛋白質(zhì)、肽或多肽可以已經(jīng)或尚未被翻譯后修飾。翻譯 后修飾作用可以是例如，磷酸化、甲基化和糖基化?！鞍被釟埢笨梢允峭ㄟ^肽鍵或不同于肽鍵的鍵連接的天然的或非天然的氨基 酸殘基。氨基酸殘基可以是D-構(gòu)型或L-構(gòu)型。氨基酸殘基包括被包含碳原子或碳原子鏈 的中央部分分開的氨基末端部分(NH2)和羧基末端部分(C00H)，它們中的至少一個包含至 少一個側(cè)鏈或官能團(tuán)。NH2是指存在于氨基酸或肽的氨基末端處的氨基，并且C00H是指存 在于氨基酸或肽的羧基末端處的羧基。上位術(shù)語氨基酸包括天然和非天然氨基酸兩者。列
18舉在 J.Biol. Chem.，243 =3552-59(1969)中和在 37C. F. R.，1.822(b) (2)節(jié)中被采用的標(biāo)準(zhǔn) 命名的天然氨基酸屬于本文下面表1中所列舉的氨基酸組。非天然氨基酸是表1中未列舉 的那些氨基酸。非天然氨基酸的實(shí)例是例如，列舉在37C. F. R. 1.822(b) (4)節(jié)中的那些，所 有這些氨基酸均通過引用合并于此。此外，非天然氨基酸殘疾包括，但不限于，修飾的氨基 酸殘基、L-氨基酸殘基以及D-氨基酸殘基的立體異構(gòu)體。
權(quán)利要求
包含SEQ ID NO1或由SEQ ID NO1組成的多肽，或與SEQ ID NO1具有至少70％的序列同一性的多肽，或SEQ ID NO1的多肽片段，所述多肽或其片段能夠抑制凝血級聯(lián)的蛋白酶的活性。
2.與SEQID NO :1具有至少70%的序列同一性的SEQ ID NO :1的多肽變體，或SEQ ID N0:1的片段的多肽變體。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多肽，其中所述多肽與SEQID NO :1具有至少80%的序列同 一性，諸如至少81%的序列同一性，例如至少82%的序列同一性，諸如至少83%的序列同 一性，例如至少84%的序列同一性，諸如至少85%的序列同一性，例如至少86%的序列同 一性，諸如至少87 %的序列同一性，例如至少88 %的序列同一性，諸如至少89 %的序列同 一性，例如至少90 %的序列同一性，諸如至少91 %的序列同一性，例如至少92 %的序列同 一性，諸如至少93%的序列同一性，例如至少94%的序列同一性，諸如至少95%的序列同 一性，例如至少96%的序列同一性，諸如至少97%的序列同一性，例如至少98%的序列同 一性，諸如至少99%的序列同一性，例如至少99. 5%的序列同一性，或含有SEQ IDN0 1的 片段。
4.一種包含根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的多肽以及生理學(xué)可接受的載體的組合物。
5.一種包含根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的多肽以及藥學(xué)可接受的載體的藥物組 合物。
6.一種用于治療選自由下列各項(xiàng)組成的組的冠狀動脈綜合征的藥物組合物穩(wěn)定型 心絞痛、不穩(wěn)定型心絞痛、心肌缺血、心肌梗塞、擴(kuò)張型心肌病、肥厚型心肌病、充血性心力 衰竭和心力衰竭，所述藥物組合物包括根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的組合物。
7.一種用于治療心房顫動和心臟復(fù)律的藥物組合物，包括根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的 組合物。
8.一種用于治療由原發(fā)性或復(fù)發(fā)性血栓形成、栓塞或動脈粥樣硬化引起的外周動脈閉 塞的藥物組合物，包括根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的組合物。
9.一種用于治療深靜脈血栓形成和肺栓塞的藥物組合物，包括根據(jù)權(quán)利要求4或5所 述的組合物。
10.一種用于治療在心肺轉(zhuǎn)流術(shù)和血液透析期間體外回路中凝血的藥物組合物，包括 根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的組合物。
11.一種用于治療血管成形術(shù)期間凝血的藥物組合物，包括根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的 組合物。
12.一種用于治療與假體心臟瓣膜置換有關(guān)的凝血的藥物組合物，包括根據(jù)權(quán)利要求 4或5所述的組合物。
13.一種用于治療由侵襲心臟瓣膜的疾病引起的凝血的藥物組合物，包括根據(jù)權(quán)利要 求4或5所述的組合物，所述疾病包括感染的瓣膜(細(xì)菌性心內(nèi)膜炎)、風(fēng)濕性二尖瓣疾病、 二尖瓣狹窄、二尖瓣脫垂、二尖瓣環(huán)鈣化和孤立性主動脈瓣疾病。
14.一種用于治療具有血栓形成傾向綜合征的患者中的凝血的藥物組合物，包括根據(jù) 權(quán)利要求4或5所述的組合物，所述血栓形成傾向綜合征包括抗磷脂綜合征、V因子萊頓突 變、凝血酶原突變/II因子突變、由MTHFR突變或維生素缺乏(維生素B6、B12和葉酸)引起的高同型半胱氨酸水平、抗凝血酶的腎損失、纖溶酶原和纖維蛋白溶解功能障礙、陣發(fā)性 夜間血紅蛋白尿、蛋白C缺乏、蛋白S缺乏和抗凝血酶III缺乏。
15.一種用于治療由于增加出血風(fēng)險的病癥的存在而采取的凝血控制后的凝血的藥物 組合物，包括根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的組合物，所述增加出血風(fēng)險的病癥包括血友病A、血 友病B、血友病C、Von ffillebrand病、大量失血、血小板無力癥、巨大血小板綜合征、灰色血 小板綜合征和S貯藏池缺乏癥。
16.一種用于治療由于產(chǎn)量不足(例如，在骨髓增生異常綜合征或其他骨髓功能障礙 中)、免疫系統(tǒng)造成的破壞(免疫性血小板減少性紫癜/ITP)和由于各種原因引起的消耗 (血栓性血小板減少性紫癜/TTP、溶血性尿毒癥綜合征/HUS、陣發(fā)性夜間血紅蛋白尿/PNH、 彌散性血管內(nèi)凝血/DIC、肝素誘導(dǎo)的血小板減少癥/HIT)導(dǎo)致的血小板數(shù)目減少所引起的 凝血的藥物組合物，包括根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的組合物。
17.一種用于治療不耐受市場上靶向凝血的其他治療藥物的個體中的凝血的藥物組合 物，包括根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的組合物。
18.一種用于治療因任何原因而不活動的個體、患臨界性肢體缺血或已經(jīng)截肢的患者 中的凝血的藥物組合物，包括根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的組合物。
19.一種用于治療接受任何形式的化學(xué)治療的患者中的凝血的藥物組合物，包括根據(jù) 權(quán)利要求4或5所述的組合物。
20.一種用于治療處于發(fā)生血凝塊的高危的患者中的凝血的藥物組合物，包括根據(jù)權(quán) 利要求4或5所述的組合物。
21.—種抑制X因子活性的方法，包括向個體施用根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的多 肽和抑制所述個體中的X因子的步驟。
22.一種逆轉(zhuǎn)X因子的抑制的方法，所述方法通過向其中根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所 述的多肽抑制X因子的部位施用一種或多種抗體，所述一種或多種抗體與所述多肽結(jié)合， 至少部分地使所述多肽從X因子解離，由此逆轉(zhuǎn)對X因子活性的抑制。
23.一種收集血液樣品的方法，包括收集血液樣品和將所述血液樣品保存在涂敷以根 據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的多肽的容器中的步驟。
24.一種涂層組合物，包含根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的多肽。
25.一種涂敷以根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的涂層組合物的醫(yī)療技術(shù)裝置。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種顯示蛋白酶抑制活性的多肽以及所述多肽在直接地或間接地抑制凝血級聯(lián)的一種或多種蛋白酶的方法中的用途。本發(fā)明還涉及所述多肽作為例如用于預(yù)防性或改善性治療血凝塊的藥物的用途。另外，本發(fā)明包括產(chǎn)生所述多肽的方法。
文檔編號A61K38/55GK101952309SQ200880127250
公開日2011年1月19日 申請日期2008年12月19日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月21日
發(fā)明者索恩德魯普·梅特·安德森, 萊曼·卡爾·尼爾森 申請人:Ifxa有限公司