專利名稱：黃芩甙元和黃芩甙在制備抗腫瘤藥物中的用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種黃芩甙元和黃芩甙的制藥用途，具體涉及黃芩甙元和黃芩甙在制備抗腫瘤藥物中的用途。
背景技術：
中藥黃芩(Scutellaria baicalensis Georgi)首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，又名黃文、無芩等。其藥理功效味苦、性寒，功能泄實火、除濕熱，具有抑菌、除熱、解毒、鎮(zhèn)靜、降壓、利膽等作用。
黃芩甙及黃芩甙元是黃芩里所含的主要黃酮類化合物，兩者具有共同的黃酮母體結構 黃芩甙元是黃芩的主要活性成分之一。分子量270.25，可由黃芩甙水解而得。其化學結構為黃酮母體結構上5、6、7三個氫基-H被羥基-OH取代。
黃芩甙的化學結構為黃酮母體結構上5、6二個氫基-H被羥基-OH取代，7位上羥基-OH與葡萄糖醛酸縮合，即黃芩甙元-7-O-葡萄糖醛酸。
近年來有文獻報道，黃芩甙和黃芩甙元對體外培養(yǎng)的乳腺癌細胞的生長具有抑制作用(So F.V.，et al.Cancer Lett.，112127-133，1997)。也有專利文獻報道黃芩甙及黃芩甙元對食道癌和胃癌細胞有很明顯的殺傷效應(中國專利申請?zhí)?3109933.5；中國專利申請?zhí)?3109942.4)。
迄今未見有關黃芩甙和黃芩甙元對其他癌株的抗癌活性的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的旨在尋找并開發(fā)黃芩甙元和黃芩甙的新的醫(yī)藥用途，提供一種黃芩甙元和黃芩甙在制備抗腫瘤藥物中的用途。
本發(fā)明人經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，黃芩甙元和黃芩甙可明顯抑制多種腫瘤細胞的活性，故可用于制備抗腫瘤藥物，其中所述腫瘤包括但不限于白血病、肺癌、肝癌、宮頸癌、腎癌或大腸癌。
上述化合物均可按本領域的常規(guī)方法從黃芩中提取或者通過商業(yè)途徑獲得。
本發(fā)明的化合物的可藥用鹽包括各種無機或有機酸鹽如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、馬來酸鹽、延胡索酸鹽、扁桃酸鹽和草酸鹽；各種無機或有機堿鹽如氫氧化鈉、三羥甲基氨基甲烷(TRIS，tromethane)和N-甲基-葡萄糖胺。
本發(fā)明的化合物的前藥包括含有該化合物的羧酸酯(可按本領域的常規(guī)方法用C1-4的醇濃縮制得)、含有該化合物的羥基酯(可按本領域的常規(guī)方法用C1-4的羧酸，C3-6的二羧酸或其酸酐，如馬來酸酐，富馬酸酐等濃縮制得)、含有該化合物的烯胺(可按本領域的常規(guī)方法用C1-4的醛或酮濃縮制得)或含有該化合物的縮醛或者縮酮(可按本領域的常規(guī)方法用氯甲基甲醚或氯甲基乙醚濃縮制得)等(Albert S.Kearney Advanced Drug Reviews.19(1996)229-234).。
本發(fā)明的黃芩甙元和黃芩甙可以單獨使用或以藥物組合物的形式使用。藥物組合物包括作為活性成份的黃芩甙元和\或黃芩甙及可藥用載體。
所述可藥用載體為各種常用的藥物輔料如填充劑(無水乳糖、淀粉、乳糖珠粒、葡萄糖)、粘合劑(微晶纖維素)、崩解劑(交聯(lián)羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、低取代羥丙基纖維素、交聯(lián)PVP)、潤滑劑(硬酯酸鎂)以及吸收促進劑、吸附載體、香味劑、甜味劑、稀釋劑、賦形劑、潤濕劑等。
所述藥物組合物可按本領域常規(guī)方法制備并可以通過腸道或非腸道或局部途徑給藥?？诜苿┌ㄆ瑒?、顆粒劑、膠囊、懸浮液、溶液等，非腸道給藥制劑包括注射液；局部給藥制劑包括如霜劑、軟膏劑、貼劑、噴霧劑等。
所述藥物的給藥途徑可以為口服、舌下、皮下、肌肉、粘膜、尿道、陰道、靜脈等。
本發(fā)明的黃芩甙元和黃芩甙或其藥物組合物的用量可根據(jù)給藥途徑，患者的年齡和體重，所治療腫瘤的類型及嚴重程度的不同而不同，其日劑量可以是0.001～100mg/kg，可一次或多次給藥。
具體實施例方式
以下結合具體實施例對本發(fā)明作進一步說明。但并不意味著本發(fā)明僅限于此。
實施例1 黃芩甙及黃芩甙元對體外腫瘤細胞生長抑制作用的實驗受試藥物黃芩甙及黃芩甙元(現(xiàn)有商品)溶于二甲基亞砜(DMSO)，實際測試時按1/1000稀釋使用。
陽性對照藥物5-氟脲嘧啶，溶于DMSO，實際測試時按1/1000稀釋使用。
方法與結果通過MTT測定法來測定出黃芩甙及黃芩甙元對人肺癌細胞株A549、人白血病細胞株HL60、人宮頸癌細胞株Hela、人大腸癌細胞株HCT116、人肝癌細胞株HepG2、人腎癌細胞株RXF-631L的增殖抑制來測出各IC50濃度，以及陽性對照藥物5-氟脲嘧啶的IC50濃度。同時將人正常纖維細胞作為對照。
測定方法將上述各細胞株懸浮在含有10％(小)牛胎兒血清的細胞培養(yǎng)液中，以2×104/孔播種于96孔細胞培養(yǎng)盤。在培養(yǎng)24小時后，加入黃芩甙或黃芩甙元于培養(yǎng)液里，最終濃度黃芩甙元0.3-200μg/ml，黃芩甙0.6-350μg/ml，5-氟脲嘧啶0.01-10μg/ml。培養(yǎng)3天后作MTT測定。以未加黃芩甙及黃芩甙元的各細胞作為對照，測試出對各腫瘤細胞50％增長阻止?jié)舛?IC50)。
結果見表1表1

結果顯示黃芩甙及黃芩甙元對受試腫瘤細胞都有很明顯的抑制作用。而與陽性對照藥物5-氟脲嘧啶相比，黃芩甙及黃芩甙元對人正常纖維細胞無任何毒性作用。
實施例2 黃芩甙元抑制移植在活體動物上肺癌的生長實驗材料BALB/c nu/nu鼠，雄性，6周大，體重在20克左右。
受試藥物黃芩甙元(現(xiàn)有商品)溶解于glycofurol使用。
實驗方法和結果先將人肺癌細胞A549接種于的BALB/c nu/nu鼠皮下，并將動物分成對照組及高(20mg/kg)、中(10mg/kg)、低(5mg/kg)劑量組以及陽性藥物組，每組6只。接種兩周后將以溶解于glycofurol黃芩甙元0.1ml注入動物腹腔，每四日注射一次。在于第三次注射后5-7日取出腫塊測出體積。以對照組的平均體積和給藥組相比較。
腫瘤體積的測定方法；{短徑2×長徑}×0.5腫瘤縮小率＝{1-(給藥組的平均體積/對照組的平均體積)}×100％結果見表2表2

表2顯示黃芩甙元對移植肺癌細胞有明顯的抑殺作用，其中以高劑量組最為明顯。
實施例3 黃芩甙元抑制移植在活體動物上大腸癌的生長實驗材料BALB/c nu/nu鼠，雄性，6周大，體重在20克左右。
受試藥物黃芩甙元(現(xiàn)有商品)溶解于glycofurol。
實驗方法和結果先將人大腸癌細胞HCT116接種于的BALB/c nu/nu鼠皮下，并將動物分成對照組及高(20mg/kg)、中(10mg/kg)、低(5mg/kg)劑量組，每組6只。接種兩周后將以溶解于glycofurol黃芩甙元0.1ml注入動物腹腔，每四日注射一次。在于第三次注射后5-7日取出腫塊測出體積。以對照組的平均體積和給藥組相比較。
腫瘤體積的測定方法；{短徑2×長徑}×0.5腫瘤縮小率＝{1-(給藥組的平均體積/對照組的平均體積)}×100％結果見表3表3

表3顯示黃芩甙元對移植大腸癌細胞有明顯的抑殺作用，其中以高劑量組最為明顯。
實施例4 黃芩甙元抑制移植在活體動物上肝癌的生長實驗材料；BALB/c nu/nu鼠，雄性，6周大，體重在20克左右。
受試藥物；黃芩甙元(現(xiàn)有商品)溶解于glycofurol。
實驗方法和結果；先將人肝癌細胞HepG2接種于的BALB/c nu/nu鼠皮下，并將動物分成對照組及高(20mg/kg)、中(10mg/kg)、低(5mg/kg)劑量組，每組6只。接種兩周后將以溶解于glycofurol黃芩甙元0.1ml注入動物腹腔，每四日注射一次。在于第三次注射后5-7日取出腫塊測出體積。以對照組的平均體積和給藥組相比較。
腫瘤體積的測定方法；{短徑2×長徑}×0.5腫瘤縮小率＝{1-(給藥組的平均體積/對照組的平均體積)}×100％結果見表4表4

表4顯示黃芩甙元對移植肝癌細胞有明顯的抑殺作用，其中以高劑量組最為明顯。
實施例5 黃芩甙元抑制移植在活體動物上宮頸癌的生長實驗材料BALB/c nu/nu鼠，雄性，6周大，體重在20克左右。
受試藥物黃芩甙元(現(xiàn)有商品)溶解于glycofurol。
實驗方法和結果先將人宮頸癌細胞株Hela接種于的BALB/c nu/nu鼠皮下，并將動物分成對照組及高(20mg/kg)、中(10mg/kg)、低(5mg/kg)劑量組，每組6只。接種兩周后將以溶解于glycofurol黃芩甙元0.1ml注入動物腹腔，每四日注射一次。在于第三次注射后5-7日取出腫塊測出體積。以對照組的平均體積和給藥組相比較。
腫瘤體積的測定方法{短徑2×長徑}×0.5腫瘤縮小率＝{1-(給藥組的平均體積/對照組的平均體積)}×100％結果見表5表5

表5所顯示黃芩甙元對移植腎癌細胞有明顯的抑殺作用，其中以高劑量組最為明顯。
實施例6 黃芩甙元抑制移植在活體動物上腎癌的生長實驗材料BALB/c nu/nu鼠，雄性，6周大，體重在20克左右。
受試藥物黃芩甙元(現(xiàn)有商品)溶解于glycofurol。
實驗方法和結果先將人腎癌細胞株RXF-631L接種于的BALB/c nu/nu鼠皮下，并將動物分成對照組及高(20mg/kg)中(10mg/kg)低(5mg/kg)劑量組，每組6只。接種兩周后將以溶解于glycofurol黃芩甙元0.1ml注入動物腹腔，每四日注射一次。在于第三次注射后5-7日取出腫塊測出體積。以對照組的平均體積和給藥組相比較。
腫瘤體積的測定方法{短徑2×長徑}×0.5腫瘤縮小率＝{1-(給藥組的平均體積/對照組的平均體積)}×100％結果見表6表6

表6顯示黃芩甙元對移植腎癌細胞有明顯的抑殺作用，其中以高劑量組最為明顯。
實施例7 黃芩甙元抑制移植在活體動物上白血病細胞的生長實驗材料BALB/c nu/nu鼠，雄性，6周大，體重在20克左右。
受試藥物黃芩甙元(現(xiàn)有商品)溶解于glycofurol。
實驗方法和結果先將白血病細胞HL60 1×108接種于BALB/c nu/nu鼠的腹腔內(nèi)，接種48小時后，將動物分成對照組及高(20mg/kg)、中(10mg/kg)、低(5mg/kg)劑量組，每組6只。將溶解于glycofurol黃芩甙元0.1ml注入動物腹腔內(nèi)。每四日注射一次，共注射三次。以對照組的平均生存日數(shù)和給藥組相比較。
延命率(ILS)＝(給藥組的平均生存日數(shù)/對照組的平均生存日數(shù))×100％結果見表7表7

表7顯示黃芩甙元對移植白血病細胞鼠的生存有延長作用，其結果表明黃芩甙元有明顯的抗白血病作用。
權利要求
1.黃芩甙在制備抗宮頸癌藥物中的用途。
2.黃芩甙元在制備抗宮頸癌藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種黃芩甙元和黃芩甙的制藥用途，具體涉及黃芩甙元和黃芩甙在制備抗腫瘤藥物中的用途。本發(fā)明開發(fā)了黃芩甙元和黃芩甙新的醫(yī)藥用途。
文檔編號A61K31/352GK1739546SQ200510109720
公開日2006年3月1日 申請日期2004年5月14日 優(yōu)先權日2004年5月14日
發(fā)明者吳一心 申請人:吳一心