桑枝抗腫瘤提取物及其組合物的醫(yī)藥用途和制備方法
【專利摘要】本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種維吾爾藥桑枝抗腫瘤提取物及其組合物的醫(yī)藥用途和制備方法以及它在制備預(yù)防及治療乳腦膠質(zhì)瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、宮頸癌、肝癌等惡性腫瘤藥物中的應(yīng)用。所述的提取物通過(guò)如下方法得到：桑枝經(jīng)溶劑超聲提取，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱，先用體積比為100：6的石油醚-丙酮溶劑混合溶劑洗脫，繼用體積比為100：100的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫，用100：100的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫的洗脫液經(jīng)回收溶劑，干燥即為該抗腫瘤提取物。
【專利說(shuō)明】
桑枝抗腫瘤提取物及其組合物的醫(yī)藥用途和制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種維吾爾藥桑枝抗腫瘤提取物及其組合物的 制備方法以及它在制備預(yù)防及治療乳腦膠質(zhì)瘤、肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、乳腺癌、宮頸 癌、肝癌等惡性腫瘤藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 本品為?？浦参锷５哪壑?，學(xué)名iforys a辦a Z.。全國(guó)大部分地區(qū)均產(chǎn)；主產(chǎn)江 蘇、浙江、安徽、湖南、河北、四川等地。為落葉灌木或小喬木，高3-15m。樹皮灰白色，有條狀 淺裂；根皮黃棕色或紅黃色，纖維性強(qiáng)。單葉互生；葉柄長(zhǎng)1-2. 5cm ;葉片卵形或?qū)捖研?，長(zhǎng) 5-20cm，寬4-10cm，先端銳尖或漸尖，基部圓形或近心形，邊緣有粗鋸齒或圓齒，有時(shí)有不規(guī) 則的分裂，上面無(wú)毛，有光澤，下面脈上有短毛，腋間有毛，基出脈3條與細(xì)脈交織成網(wǎng)狀， 背面較明顯；托葉披針形，早落。
[0003] 桑枝性平，味苦，具有祛風(fēng)濕，利關(guān)節(jié)，行水氣的功效，主治風(fēng)寒濕痹，四肢拘攣，腳 氣浮腫，肌體風(fēng)癢。用于肩臂、關(guān)節(jié)酸痛麻木。臨床報(bào)道可用于治療治療肩周炎、防治II區(qū) 屈指肌腱術(shù)后黏連、治療淋轉(zhuǎn)率低下等。
[0004] 本發(fā)明在深入地研究桑枝的抗癌活性時(shí)意外地發(fā)現(xiàn)，桑枝具有很好的乳腺癌、宮 頸癌、肝癌、肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、腦膠質(zhì)瘤等惡性腫瘤的預(yù)防及治療作用，該活性提 取物及其組合物有望應(yīng)用到多種癌癥的預(yù)防和治療上。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種桑枝提取物。
[0006] 本發(fā)明還提供了以桑枝提取物為主要活性成分的組合物。
[0007] 本發(fā)明同時(shí)提供了桑枝提取物及其組合物的制備和應(yīng)用。
[0008] 本發(fā)明是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的： 維吾爾藥桑枝經(jīng)甲醇超聲提取，提取液濃縮后，用硅膠（Si02)柱分離，上樣后的硅膠 柱，用石油醚：丙酮混合溶劑梯度洗脫(石油醚：丙酮，比例見(jiàn)表1)，各石油醚：丙酮比例混 合溶劑洗脫液，濃縮，干燥后，利用體外抗腫瘤活性篩選體系測(cè)試其抗腫瘤活性，意外地發(fā) 現(xiàn)先用石油醚：丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:6,體積比）洗脫，繼用石油醚：丙酮混合 溶劑(石油醚：丙酮，100:100,體積比)洗脫，洗脫得到的石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚：丙 酮，100:100,體積比）洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，干燥，即為抗腫瘤活性提取物，而其他比例的 洗脫組分，不具有抗腫瘤活性。最優(yōu)為先用100 :6的石油醚：丙酮混合溶劑洗脫10倍柱體 積，繼用100 ;1〇〇的石油醚：丙酮混合溶劑洗脫15倍柱體積的洗脫液干燥后即得本發(fā)明抗 腫瘤活性的提取物?？鼓[瘤活性的提取物，可以通過(guò)以上方法得到富集，從而與其他雜質(zhì)類 成分分離開。該抗腫瘤活性提取物從未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道，其薄層譜色譜（TLC)分析表征如圖1， TLC分析條件：GF254硅膠板，展開系統(tǒng)：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（3:1:1)顯色方法：香草 醛-硫酸顯色。
[0009] 1、桑枝經(jīng)甲醇超聲提取物的制備 取維吾爾藥桑枝20 g，經(jīng)100 ml甲醇超聲提取15 min，提取液濃縮后，得提取物 SN0114A 0. 7828g，留樣39. 6mg，剩余395 mg，石油醚-丙酮系統(tǒng)洗脫。
[0010] 2、石油醚：丙酮混合溶劑梯度洗脫方法和結(jié)果 取維吾爾藥桑枝20 g，經(jīng)100 ml甲醇超聲提取15 min，提取液濃縮后，得提取物 SN0114A 0.7828g，留樣39.6mg，剩余395 mg。上柱，甲醇溶解，共用甲醇15 ml。上硅膠柱 色譜，拌樣硅膠800 mg，空白硅膠5 g，玻璃柱內(nèi)徑1.5 cm，石油醚：丙酮系統(tǒng)梯度洗脫(條件 見(jiàn)表1)，柱體積12. 5 ml，每個(gè)梯度洗脫100 ml，得到，各個(gè)濃度提取洗脫液的洗脫物，回收 溶劑，即得，石油醚：丙酮梯度洗脫提取物，TLC分析結(jié)果見(jiàn)圖2,圖3, TLC分析條件：GF254 硅膠板，展開系統(tǒng)：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（6:1:1 )，石油醚：乙酸乙酯：丙酮（3:1:1)顯色 方法：香草醛-硫酸顯色。
[0011] 表 1
3、抗腫瘤活性篩選方法和結(jié)果 1)實(shí)驗(yàn)條件 a)細(xì)胞株信息 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞C6購(gòu)于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心細(xì)胞庫(kù)。
[0012] b)藥品及試劑 樣品無(wú)菌條件下，DMS0溶解配置成母液濃度為100mg/mL，使用時(shí)用RPMI-1640培養(yǎng) 液稀釋至所需濃度（DMS0彡1 %〇)。
[0013] RPMI Medium 1640培養(yǎng)基干粉購(gòu)于美國(guó)GIBC0公司。胎牛血清購(gòu)于北京元亨圣馬 生物技術(shù)研究所。Trypsin 1:250、二甲基二苯基四氮唑溴鹽（MTT)。
[0014] c)儀器 C〇2培養(yǎng)箱（SANYO,日本） 垂直層流潔凈工作臺(tái)（上海上凈凈化設(shè)備有限公司） 倒置生物顯微鏡(重慶光電儀器有限公司） 低/高速臺(tái)式離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠） 電子天平(奧豪斯儀器有限公司） 酶標(biāo)儀(伯樂(lè)生命醫(yī)學(xué)產(chǎn)品有限公司） 立式壓力蒸汽滅菌器(上海申安醫(yī)療器械廠） 鼓風(fēng)干燥箱(上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠） PH 計(jì)（SARTORIUS，德國(guó)） 2) 實(shí)驗(yàn)方法和過(guò)程 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞C6以4000/孔的密度鋪于96孔板，每孔100ul，12h后使用。各 組分以DMS0溶解為100mg/mL儲(chǔ)存液，保存于-20°C待用。鋪板后12h，觀察細(xì)胞匯合率 約為40%，加藥，濃度均為100 μ g/mL，每個(gè)組分3個(gè)復(fù)孔。每板細(xì)胞設(shè)立二個(gè)對(duì)照組（培 養(yǎng)基+細(xì)胞；含〇. 1%DMS0培養(yǎng)基+細(xì)胞），3個(gè)空白孔（只有培養(yǎng)基）。加入藥物24小時(shí) 后，加入20 μ 1四甲基偶氮唑鹽化學(xué)名為3-(4, 5-二甲基噻唑）-2, 5-二苯基四氮唑溴鹽 (3- (4, 5-dimethyl_2thiazolyl) -2，5-diphenyl-tetrazolium bromide，MTT)，繼續(xù)培養(yǎng) 4 小時(shí)。完全棄去上清液，加入100 μ 1 DMS0,混勻使MTT完全溶解，去氣泡。490nm測(cè)定0D 值。
3) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 表2

結(jié)果發(fā)現(xiàn)： 本發(fā)明最優(yōu)方案為：維吾爾藥桑枝經(jīng)甲醇超聲提取，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上 樣后的硅膠柱，先用石油醚：丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:6,體積比）洗脫，繼用石油 醚-丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:100,體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，干燥， 得到的高活性提取物，即為該抗腫瘤的提取物。該抗腫瘤活性提取物從未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道，其 TLC分析表征如圖1。
[0016] 4、抗腫瘤有效提取物的提取方法研究 1)提取溶劑的種類研究 分別用甲醇、乙醇、水、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶劑、乙醇水混合溶劑等有機(jī) 溶劑提取，并測(cè)試提取物對(duì)C6細(xì)胞的抗腫瘤活性，結(jié)果如下： 表3
研究結(jié)果表明：提取用有機(jī)溶劑可以為甲醇、乙醇、水、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混 合溶劑、乙醇水混合溶劑。
[0017] 2)提取溶劑的用量研究 分別用1、2、5、10、20、30、40、50倍(重量/體積比）有機(jī)溶劑提取，并測(cè)試提取物對(duì)C6 細(xì)胞的的抗腫瘤活性，結(jié)果如下： 表4
提取物提取用有機(jī)溶劑用量為藥材重量的2-50倍(重量/體積比)。
[0018] 3 )干燥方法的研究 分別用真空干燥法、冷凍干燥法、鼓風(fēng)干燥、離心干燥、旋蒸干燥法等方法，對(duì)得到的抗 腫瘤活性提取物進(jìn)行干燥，以含水量、TLC、活性測(cè)試為指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)真空干燥法、冷凍干燥法、 鼓風(fēng)干燥、離心干燥、旋蒸干燥法適用于對(duì)C6細(xì)胞抗腫瘤活性提取物進(jìn)行干燥，其中，最優(yōu) 為真空干燥法、冷凍干燥法。
[0019] 表 5
優(yōu)選地，桑枝抗腫瘤提取物的制備方法為： 維吾爾藥桑枝經(jīng)溶劑超聲提取，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱，先用 石油醚：丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:6,體積比）洗脫2-50倍柱體積，繼用石油醚：丙 酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:100,體積比）洗脫2-50倍柱體積，用石油醚-丙酮混合溶 劑(石油醚：丙酮，100:100,體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，干燥，得到的高活性提 取物，即為該抗腫瘤的提取物。以上條件最優(yōu)為先用石油醚：丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮， 100:6,體積比)洗脫10倍柱體積，繼用石油醚：丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:100,體積 比）洗脫15倍柱體積。其中， 1)提取物提取用溶劑可以為甲醇、乙醇、丙酮、水、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶劑、乙 醇水混合溶劑，最優(yōu)條件為甲醇和95%乙醇。提取物提取用溶劑用量為藥材重量的2-50倍 (重量/體積比)。
[0020] 2)提取物干燥方法可以為真空干燥法、冷凍干燥法、鼓風(fēng)干燥、離心干燥、旋蒸干 燥法等，最優(yōu)為真空干燥法、冷凍干燥法。
[0021 ] 5.桑枝抗腫瘤有效提取物(洗脫液為100 :100時(shí)干燥所得的提取物）的抗腫瘤活 性研究 利用各種腫瘤細(xì)胞，如乳腺癌、肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、宮頸癌、腦膠質(zhì)瘤、肝癌等 惡性腫瘤細(xì)胞株，分別測(cè)試桑枝抗腫瘤提取物的抗腫瘤活性，IC5。結(jié)果如下： 表6
因此，我們發(fā)現(xiàn)，桑枝抗腫瘤提取物具備抗腫瘤活性，可望用于各種腫瘤如乳腺癌、肺 癌、胃癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、宮頸癌、腦膠質(zhì)瘤、肝癌等惡性腫瘤細(xì)胞株的預(yù)防及治療。
[0022] 6、桑枝抗腫瘤有效提取物的組合物及其制備方法研究 1)固體分散體 處方 桑枝提取物 20g 聚乙烯吡咯烷酮 80g 固體分散l〇〇g 制備方法： 稱取桑枝提取物和載體聚乙烯吡咯烷酮（PVP)按比例、1:2、1:4、1:6的質(zhì)量比分別放 入燒杯中，加入無(wú)水乙醇，磁力攪拌器攪拌至桑枝提取物和載體完全溶解，轉(zhuǎn)入旋蒸儀中除 去溶劑，干燥，粉碎過(guò)80目篩，即得桑枝提取物PVP包合物。
[0023] 2)環(huán)糊精包合物 處方： 桑枝提取物 20g β -環(huán)糊精 80g 包合物100g 制備方法： 將β-環(huán)糊精與1-5倍水研勻，加桑枝提取物（水難溶性的應(yīng)先溶于少量有機(jī)溶劑 中）充分研磨至成糊狀物，低溫干燥即得。
[0024] 3)分散片處方： 桑枝提取物 1〇〇 十^烷基硫酸納 1 預(yù)膠化淀粉 10 可溶性淀粉 100 交聯(lián)聚維酮 10 微晶纖維素 10 微分硅膠 0. 3 滑石粉 1 100片 制備方法： 1. 桑枝提取物淀粉分散體的制備，精密稱取桑枝提取物，加入適量的十二烷基硫酸鈉， 用70%的乙醇溶解加入等比例的可溶性淀粉混合均勻后，在70°C的溫度下蒸干，粉碎，過(guò) 100目篩； 2. 稱取處方量，桑枝提取物淀粉分散體，交聯(lián)聚維酮，預(yù)膠化淀粉，用70%乙醇做濕潤(rùn) 劑，邊加入邊攪拌，制成濕顆粒過(guò)14目篩，室溫下放置15min后，60°C烘箱烘干45min，16 目篩整粒，加入滑石粉和微分硅膠，混合均勻后，壓片。
[0025] 7、桑枝抗腫瘤有效提取物的檢測(cè)方法研究 我們發(fā)現(xiàn)，可以用薄層色譜的方法，很好地檢測(cè)和標(biāo)示桑枝抗腫瘤有效提取物的特征。 見(jiàn)圖1。 具體條件為：色譜條件：GF254硅膠板，展開系統(tǒng)：石油醚：乙酸乙酯：丙酮=3:1:1，顯色 方法：香草醛濃硫酸顯色
【附圖說(shuō)明】： 圖1桑枝C6抑制活性提取物的TLC色譜圖； 圖2桑枝得到的化學(xué)組分的TLC色譜圖； 圖3桑枝得到的化學(xué)組分的TLC色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0026] 以下實(shí)施例表示本發(fā)明的實(shí)用性，本發(fā)明不受此限制。
[0027] 實(shí)施例1 : 取維吾爾藥桑枝20 g，經(jīng)100 ml甲醇超聲提取15 min，提取液濃縮后，用硅膠柱分離， 上樣后的硅膠柱（1. 5 cm內(nèi)徑小柱)，先用石油醚：丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:6,體 積比）洗脫10倍柱體積，繼用石油醚：丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:100,體積比）洗脫 15倍柱體積，用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:100,體積比)洗脫的洗脫液經(jīng)回 收有機(jī)溶劑，真空干燥，得到的高活性提取物，即為該抗腫瘤的提取物。經(jīng)測(cè)試，其抗腫瘤活 性為 IC5Q=79. 0 yg/mL。
[0028] 實(shí)施例2 : 取維吾爾藥桑枝20 g，經(jīng)100 mL乙醇超聲提取15 min，提取液濃縮后，用硅膠柱分離， 上樣后的硅膠柱（1. 5 cm內(nèi)徑小柱)，先用石油醚：丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:6,體 積比）洗脫10倍柱體積，繼用石油醚：丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:100,體積比）洗脫 15倍柱體積，用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:100,體積比)洗脫的洗脫液經(jīng)回 收有機(jī)溶劑，冷凍干燥，即為該活性提取物。經(jīng)測(cè)試，其抗腫瘤活性為IC 5(]=84. 0 μ g/mL。
[0029] 實(shí)施例3 : 取維吾爾藥桑枝20 g，經(jīng)100 mL石油醚超聲提取15 min，提取液濃縮后，用硅膠柱分 離，上樣后的硅膠柱（1. 5 cm內(nèi)徑小柱)，先用石油醚：丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:6， 體積比）洗脫10倍柱體積，繼用石油醚：丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:100,體積比）洗 脫15倍柱體積，用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:100,體積比)洗脫的洗脫液經(jīng) 回收有機(jī)溶劑，旋蒸干燥法，即為該活性提取物。經(jīng)測(cè)試，其抗腫瘤活性為IC 5(]=73. 0 μ g/ mL〇
[0030] 實(shí)施例4: 取維吾爾藥桑枝20 g，經(jīng)100 mL丙酮超聲提取15 min，提取液濃縮后，用硅膠柱分離， 上樣后的硅膠柱（1. 5 cm內(nèi)徑小柱)，先用石油醚：丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:6,體 積比）洗脫10倍柱體積，繼用石油醚：丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:100,體積比）洗脫 15倍柱體積，用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:100,體積比)洗脫的洗脫液經(jīng)回 收有機(jī)溶劑，鼓風(fēng)干燥，即為該活性提取物。經(jīng)測(cè)試，其抗腫瘤活性為IC 5(]=77. 0 μ g/mL。
[0031] 實(shí)施例5: 取維吾爾藥桑枝20 g，經(jīng)100 mL氯仿超聲提取15 min，提取液濃縮后，用硅膠柱分離， 上樣后的硅膠柱（1. 5 cm內(nèi)徑小柱)，先用石油醚：丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:6,體 積比）洗脫10倍柱體積，繼用石油醚：丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:100,體積比）洗脫 15倍柱體積，用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:100,體積比)洗脫的洗脫液經(jīng)回 收有機(jī)溶劑，離心干燥，即為該活性提取物。經(jīng)測(cè)試，其抗腫瘤活性為IC 5(]=72. 0 μ g/mL。
[0032] 實(shí)施例6 : 取維吾爾藥桑枝20 g，經(jīng)100 mL乙酸乙酯超聲提取15 min，提取液濃縮后，用硅膠柱分 離，上樣后的硅膠柱（1. 5 cm內(nèi)徑小柱)，先用石油醚：丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:6， 體積比）洗脫10倍柱體積，繼用石油醚：丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:100,體積比）洗 脫15倍柱體積，用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:100,體積比)洗脫的洗脫液經(jīng) 回收有機(jī)溶劑，冷凍干燥，即為該活性提取物。經(jīng)測(cè)試，其抗腫瘤活性為IC 5(]=62. 0 μ g/mL。
[0033] 實(shí)施例7 : 取維吾爾藥桑枝20 g，經(jīng)100 mL甲醇水混合溶劑（甲醇：水=1:1)超聲提取15 min，提 取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱（1.5 cm內(nèi)徑小柱)，先用石油醚：丙酮混合溶 劑(石油醚：丙酮，100:6,體積比)洗脫10倍柱體積，繼用石油醚：丙酮混合溶劑(石油醚：丙 酮，100:100,體積比）洗脫15倍柱體積，用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:100， 體積比)洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，冷凍干燥，即為該活性提取物。經(jīng)測(cè)試，其抗腫瘤活 性為 IC5Q=83. 0 yg/mL。
[0034] 實(shí)施例8 : 取維吾爾藥桑枝20 g，經(jīng)100 mL乙醇水混合溶劑（乙醇：水=1:1)超聲提取15 min，提 取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱（1.5 cm內(nèi)徑小柱)，先用石油醚：丙酮混合溶 劑(石油醚：丙酮，100:6,體積比)洗脫10倍柱體積，繼用石油醚：丙酮混合溶劑(石油醚：丙 酮，100:100,體積比）洗脫15倍柱體積，用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:100， 體積比)洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，冷凍干燥，即為該活性提取物。經(jīng)測(cè)試，其抗腫瘤活 性為 IC5Q=52.0 yg/mL。
[0035] 實(shí)施例9 : 取維吾爾藥桑枝20 g，經(jīng)100 mL乙醇-水混合溶劑（乙醇：水=90 :10)超聲提取15 min，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱（1.5 cm內(nèi)徑小柱)，先用石油醚：丙酮 混合溶劑(石油醚：丙酮，100:6,體積比）洗脫10倍柱體積，繼用石油醚：丙酮混合溶劑(石 油醚：丙酮，100:100,體積比）洗脫15倍柱體積，用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮， 100:100,體積比)洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，冷凍干燥，即為該活性提取物。經(jīng)測(cè)試，其 抗腫瘤活性為IC5Q=67. Ο μ g/mL。
[0036] 實(shí)施例10:固體分散體 稱取桑枝提取物和載體聚乙烯吡咯烷酮（PVP)按比例、1:2、1:4、1:6的質(zhì)量比分別放 入燒杯中，加入適量的無(wú)水乙醇和Vc，磁力攪拌器攪拌至桑枝提取物和載體完全溶解，充分 混合均勻后轉(zhuǎn)入旋蒸儀中除去有機(jī)溶劑，干燥，粉碎過(guò)80目篩，即得桑枝提取物PVP包合 物。
[0037] 實(shí)施例11 :環(huán)糊精包合物 將β-環(huán)糊精與1-5倍水研勻，加桑枝提取物（水難溶性的應(yīng)先溶于少量有機(jī)溶劑 中）充分研磨至成糊狀物，低溫干燥即得。
[0038] 實(shí)施例12 :分散片 1.稱取干燥的桑枝提取物，加入適量的十二烷基硫酸鈉，使用70%的乙醇充分溶解，加 入水溶性淀粉與桑枝提取物（1:1 )，攪拌混合均勻，在70°C下干燥，粉碎，過(guò)100目篩，得桑 枝提取物分散體。
[0039] 2.精密稱取處方量，桑枝提取物分散體，交聯(lián)聚維酮，可壓性淀粉，用70%乙醇做 濕潤(rùn)劑，邊加入邊攪拌，14目篩制成濕顆粒，室溫下放置15min后，70°C烘箱烘干45min，16 目篩整粒，加入滑石粉和微分硅膠，混合均勻后，壓片。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種維吾爾藥桑枝提取物，其特征為維吾爾藥桑枝經(jīng)溶劑超聲提取，提取液濃縮后， 用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱，先用體積比為100 :6的石油醚-丙酮溶劑混合溶劑洗脫， 繼用體積比為100 :1〇〇的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫，用100 :1〇〇的石油醚-丙酮混合溶 劑洗脫的洗脫液經(jīng)回收溶劑，干燥即為該提取物。2. 如權(quán)利要求1所述維吾爾藥桑枝提取物，其特征為，提取所用溶劑可以為甲醇、乙 醇、水、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶劑或乙醇水混合溶劑，最優(yōu)條件為甲醇和95% 乙醇。3. 如權(quán)利要求1所述維吾爾藥桑枝提取物，其特征為維吾爾藥桑枝經(jīng)溶劑超聲提取， 提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱，先用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚：丙 酮，100:6,體積比）洗脫，繼用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚：丙酮，100:100,體積比）洗 脫，用石油醚-丙酮混合溶劑(石油醚-丙酮，100:100,體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收溶劑， 干燥，即為該提取物。4. 如權(quán)利要求1-3所述維的維吾爾藥桑枝提取物，其特征為，洗脫液的用量為2-50倍 柱體積。5. 如權(quán)利要求1所述提取物的制備方法，其特征為：最優(yōu)為先用100 :6的石油醚：丙酮 混合溶劑洗脫10倍柱體積，繼用100 ;1〇〇的石油醚：丙酮混合溶劑洗脫15倍柱體積。6. -種藥物組合物，其特征在于，包含權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述的維吾爾藥桑枝提 取物和藥學(xué)上可接受的載體。7. -種藥物制劑，其特征在于，包含權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述的桑枝提取物或權(quán)利 要求6所述的藥物組合物。8. 如權(quán)利要求7所述的藥物制劑，其特征在于，所述的制劑為固體分散體、環(huán)糊精包合 物、分散片。9. 權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述提取物或權(quán)利要求6所述的組合物或權(quán)利要求7所述的 藥物制劑在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。10. 如權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的腫瘤為腦膠質(zhì)瘤、乳腺癌、肺癌、胃 癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、宮頸癌或肝癌。11. 如權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述的維吾爾藥桑枝提取物，其特征在于，用TLC法檢測(cè)， 其色譜條件為：GF254硅膠板，展開系統(tǒng)：石油醚：乙酸乙酯：丙酮=3:1:1顯色方法：香草醛 濃硫酸顯色。
【文檔編號(hào)】A61P35/00GK106031747SQ201510111799
【公開日】2016年10月19日
【申請(qǐng)日】2015年3月13日
【發(fā)明人】王金輝, 田麗萍, 李國(guó)玉, 王航宇, 黃健, 李珊, 王桂花, 陳娟
【申請(qǐng)人】石河子大學(xué)