專利名稱：用于治療過敏性疾病的苯胺二硫化物衍生物的制作方法
背景技術：
肥大細胞穩(wěn)定劑防止過敏反應中肥大細胞＂脫粒＂或釋放組胺和其它成分或“介質”。作為肥大細胞穩(wěn)定劑銷售的眼科藥物的實例包括olopatadine(參見美國專利US5,641,805)和色甘酸二鈉。
美國專利US 4,705,805中公開了用作抗血栓形成藥的某些二硫化物衍生物。這些二硫化物衍生物抑制血小板聚集?！?05專利中沒有公開二硫化物衍生物在治療過敏性疾病中的應用。
本發(fā)明還涉及用于預防或治療眼、鼻、皮膚、耳、胃腸道、呼吸道或肺的過敏性疾病及預防或治療全身性肥大細胞增多癥的表現(xiàn)癥狀的可局部或全身給藥的組合物，其中該組合物包含式(I)的二硫化物衍生物。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及式(I)的新型二硫化物衍生物，其中X是-NH-C(＝O)-R；R是-C(-R5)-C＝C(-R6)R7或-C(-R5)-C(-OH)R6；R5是H、C1-C3烷基；R6是H、C1-C3烷基或鏈烯基；且R7是H、C1-C4烷基或鏈烯基。
其它的式(I)二硫化物衍生物是已知的或可商購自諸如Milwaukee(Wisconsin)的Aldrich Chemical Company(Sigma Aldrich Library ofRare Chemicals)和英國Maybridge Chemical Company Ltd.。使用諸如Domagala JM等在《生物有機和藥物化學》(Biorganic and MedicinalChemistry)第5卷第3期569-79頁(1997)中和美國專利US 4,705,805(Yamotsu K.等，1987)中所述的那些已知技術可以制備新型和已知的式(I)二硫化物衍生物。將這些文獻的全部內容引入作為參考。
優(yōu)選的式(I)化合物是這樣的化合物其中取代基X位于鄰位上且X＝-NH-C(＝O)-R；和R＝任選地可以被或不被OH、OR2、NR3R4取代或封端的C1-C8烷基或鏈烯基、C4-C7環(huán)烷基、(未)取代的芳基或(未)取代的5-7元雜環(huán)；其中任選存在的取代基選自C1-C6烷基或烷氧基、鹵素、OH、CN、CF3、NO2和CO2R2。
最優(yōu)選的化合物是這樣的化合物其中R＝任選地可以被或不被OH、OR2、NR3R4取代或封端的C1-C5烷基或鏈烯基、C4-C7環(huán)烷基、(未)取代的芳基或(未)取代的5-7元雜環(huán)；其中任選存在的取代基選自C1-C6烷基或烷氧基、鹵素、OH、CN、CF3、NO2和CO2R2。
可以使用常規(guī)的局部或全身用制劑局部(即局部、器官特異性遞送)或全身給予式(I)的化合物，所述的制劑有例如用于眼部和耳部的溶液、混懸液或凝膠；用于鼻部的鼻腔噴劑或霧劑；用于肺部的計量給藥吸入器；用于皮膚的溶液、凝膠、乳膏或洗劑；包括片劑或糖漿在內的用于胃腸道的口服劑型；和包括注射劑在內的非腸道用劑型。式(I)化合物在本發(fā)明制劑中的濃度取決于所選擇的給藥途徑和劑型。式(I)化合物在局部給藥的制劑中的濃度一般在約0.00001至5wt.(重量)％的范圍。就全身給藥的劑型而言，式(I)化合物的濃度一般在約10mg至1000mg的范圍。
用于眼部局部給藥的優(yōu)選制劑是旨在作為滴眼液給藥的溶液。就旨在用于眼部局部給藥的溶液而言，式(I)化合物的濃度優(yōu)選約為0.0001至0.2wt.％且最優(yōu)選約為0.0001至0.01wt.％。按照常規(guī)技術制備本發(fā)明的局部用組合物且它除含有一種或多種式(I)的化合物外還含有常用的賦形劑。滴眼液組合物的一般制備方法如下所述將一種或多種式(I)的化合物和滲漲度調節(jié)劑(tonicity-adjusting agent)加入到無菌純水中且在希望或必要時加入一種或多種賦形劑。滲漲度調節(jié)劑以足以使最終組合物具有眼部可接受的重量摩爾滲透濃度(一般約為150-450mOsm、優(yōu)選250-350mOsm)的量存在。常用賦形劑包括防腐劑、緩沖劑、螯合劑或穩(wěn)定劑、粘度增強劑等。將所選擇的組分混合至均勻為止。在將溶液混合后，將pH調節(jié)(一般用NaOH或HCl)至適于局部眼用的范圍，優(yōu)選4.5至8。
許多可眼用的賦形劑是已知的，它們包括例如作為滲漲度調節(jié)劑的氯化鈉、甘露糖醇、甘油等；作為防腐劑的苯扎氯銨、聚季銨鹽-1(polyquaterium-1)等；作為緩沖劑的磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、硼酸等；作為螯合劑或穩(wěn)定劑的乙二胺四乙酸二鈉等；作為粘度增強劑的聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酸、多糖等；和作為pH控制劑的氫氧化鈉、鹽酸等。
如果希望或必要，可以將其它藥物與式(I)的二硫化物衍生物組合，這些藥物包括但不限于抗組胺藥、消炎藥(甾類和非甾類)和減充血劑。適宜的抗組胺藥包括依美斯汀、mapinastine、依匹斯汀、左卡巴斯汀、氯雷他定、desloratadine、酮替芬、氮斯汀、西替利嗪和fexofenadine。優(yōu)選的眼用抗組胺藥是依美斯汀，它在局部給藥的組合物中的濃度一般為0.001至0.1wt.％、優(yōu)選0.05wt.％。適宜的消炎藥包括莫米松、氟替卡松、地塞米松、潑尼松龍、氫化可的松、利美索龍和氯替潑諾。適宜的減充血劑包括羥甲唑啉、萘甲唑啉、四氫唑啉、賽洛唑啉、丙己君、乙基去甲腎上腺素、偽麻黃堿和苯丙醇胺。
根據(jù)本發(fā)明，式(I)的二硫化物衍生物可用于預防和治療眼部過敏性疾病，包括過敏性結膜炎、春季結膜炎、春季角結膜炎和巨乳頭性結膜炎；鼻部過敏性疾病，包括過敏性鼻炎和過敏性鼻竇炎；耳部過敏性疾病，包括咽鼓管瘙癢；上呼吸道和下呼吸道過敏性疾病，包括內源性哮喘和外源性哮喘；皮膚過敏性疾病，包括皮炎、濕疹和蕁麻疹；胃腸道過敏性疾病，包括因吞食過敏原導致的全身過敏和由診斷成像過程中使用的造影劑導致的醫(yī)原性過敏；和包括低血壓在內的全身性肥大細胞增多癥的表現(xiàn)癥狀。
下列實施例用于舉例說明而不用于限定。
實施例1局部眼用溶液劑組分濃度(wt.％)式(I)的化合物0.0001至0.2磷酸氫二鈉(無水) 0.5氯化鈉 0.65苯扎氯銨 0.01NaOH/HCl 適量至pH6-8純水 適量至100實施例2局部眼用凝膠劑組分濃度(wt.％)式(I)的化合物0.0001至0.2卡波姆974P 0.8乙二胺四乙酸二鈉 0.01聚山梨醇酯80 0.05苯扎氯銨 0.01NaOH/HCl 適量至pH6-8注射用水 適量至100實施例3雙-(2-烯丙基酰氨基苯基)-二硫化物(II)的合成將亞硫酰氯(2.7ml，34.85mmol)中的乙烯基乙酸(1.97ml，23.23mmol)在油浴(～80℃)上溫和地回流2小時。在冷卻后，在旋轉蒸發(fā)器上蒸發(fā)該液體。將殘余物溶于20ml二噁烷。加入2-氨基苯基二硫化物(Aldrich，1.44g，5.8mmol)溶于10ml二噁烷所得到的溶液并將所得混合物冷卻至10℃。在氮氣氛中緩慢加入三乙胺(7ml，50mmol)。在添加完成后，在10℃下將該混合物攪拌1小時并在70℃下攪拌2小時。在冷卻后，過濾出固體并濃縮濾液。將殘余物溶于50ml的CH2Cl2，用1N HCl(20ml)、飽和NaHCO3(20ml)、水(20ml)和飽和NaCl(20ml)洗滌且然后用MgSO4干燥。過濾該混合物并濃縮溶劑。對殘余物進行硅膠層析，用50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，得到0.71g固化為淡黃色固體的產(chǎn)物(II)。1H NMR(CDCl3)δ9.73(s，2H)，7.63-7.18(m，8H)，6.21-5.90(m，2H)，5.27-513(m，4H)，3.16-3.13(d，4H，J＝6.0)。13C NMR(CDCl3)δ169.74(C＝O)，136.43(C)，132.57(CH)，131.94(C)，129.52(CH)，128.59(CH)，126.92(CH)，126.36(CH)，118.38(CH2)，40.95(CH2)。對C20H20O2N2S2的分析計算值C，62.47；H，5.24；N，7.28％；測定值C，62.40；H，5.28；N，7.20％。 實施例4雙-(2-(3-羥基-丁酰氨基)苯基)-二硫化物的合成在0℃下向2-氨基苯基二硫化物(1.5g，6mmol)的溶液中加入3-羥基-丁酸(2.5g，24mmol)溶于THF(8ml)所得到的溶液，同時攪拌。向該混合物中加入二環(huán)己基碳二亞胺(4.95g，24mmol)。在5℃下攪拌1小時后，將該混合物在室溫下攪拌過夜。在旋轉蒸發(fā)器上蒸發(fā)溶劑。向殘余物中加入乙酸乙酯(50mol)并用水(3×20ml)和飽和NaCl(20ml)洗滌且然后用MgSO4干燥。過濾該混合物并濃縮溶劑。對殘余物進行硅膠層析，用50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，得到0.31g為白色固體的產(chǎn)物。1HNMR(CDCl3)δ7.80-7.76(m，2H)，7.48-7.43(m，2H)，7.37-7.29(m，2H)，7.14-7.07(m，2H)，4.22-4.13(m，2H)，2.46-2.42(m，4H)，1.27-1.24(d，6H，J＝6.0).13C NMR(CDCl3)δ172.88(C＝O)，139.42(C)，134.60(CH)，131.08(CH)，130.11(C)，126.96(CH)，125.49(CH)，65.77(CH)，46.68(CH2)，23.56(CH3).ESI LC/MS[M+H]+421.實施例5肥大細胞活性細胞混懸液的制備單分散的HCTMC的具體制備方法和使用這些細胞進行的介質釋放研究已有描述(美國專利US5,360,720和Miller等，《眼科免疫學和炎癥》(Ocular Immunology and Inflammation)，4(1)39-49(1996))。簡單地說，從不同眼庫在死亡8小時內采集獲得并轉入Dexsol角膜保存介質或等同物中的死亡后組織供體分離人結膜組織肥大細胞。通過在含有0.1％明膠的蒂羅德緩沖液中與膠原酶和透明質酸酶(2次用各200U/克組織、然后2-4次用各2000U/克組織)反復接觸(37℃下30分鐘)對組織進行酶促消化。(蒂羅德緩沖液(按mM計)137NaCl、2.7KCl、0.35NaH2PO4、1.8CaCl2、0.98MgCl2、11.9NaHCO3和5.5葡萄糖)。用Nitex布(100μm網(wǎng)孔，Tetko，Briarcliff Manor，NY)過濾各消化混合物并用等體積的緩沖液洗滌。以825xg離心濾液(7分鐘)。將沉淀重新懸浮于緩沖液中，然后合并用于在1.058g/L Percoll墊上富集。洗滌富集的沉淀、重新懸浮于RPMI 1640補加培養(yǎng)基中并在37℃下保溫至平衡。組胺釋放研究從培養(yǎng)平板上收集細胞并對生存力(錐蟲藍排除法)和肥大細胞數(shù)量(甲苯胺藍O)進行計數(shù)。在用測試藥物或蒂羅德緩沖液處理(15分鐘；37℃)后用山羊抗人IgE(10μg/mL)攻擊肥大細胞(5000個/管；1mL終體積)(37℃)15分鐘。使總釋放對照組和非特異性釋放對照組分別與0.1％TritonX-100和山羊IgG(10μg/mL)接觸。通過離心(500xg，4℃，10分鐘)終止該反應。在通過RIA(Beckman Coulter，Chicago，IL)分析組胺含量前將上清液儲存在-20℃下。測試藥物溶液的制備臨用前將所有的測試藥物制成溶液。將它們各自溶于DMSO，濃度為10mM或10mM以上，然后用含有0.1％明膠的蒂羅德緩沖液進行稀釋至評價的濃度范圍內。數(shù)據(jù)分析使用Dunnett氏t-檢驗通過直接與抗-IgE攻擊的肥大細胞進行比較來確定對組胺釋放的抑制(Dunnett，“用于和對照組比較處理效果的多重比較程序”，《美國統(tǒng)計學協(xié)會雜志》(J.Amer.Stat.Assoc.)(1955)，501096-1121)。通過使用Levenburg-Marquardt算法進行4-參數(shù)邏輯擬合或通過線性回歸來確定IC50值(與陽性對照相比抑制組胺釋放的水平為50％的測試化合物的濃度)。結果報導在表1中。表1
表1中所示數(shù)據(jù)表明式(I)的化合物可在過敏性結膜炎的體外模型中有效地抑制組胺從人結膜肥大細胞中釋放。
實施例6局部眼用溶液劑組分濃度(wt.％)式(I)的化合物0.0001至0.2依美斯汀 0.001至0.1磷酸氫二鈉(無水) 0.5氯化鈉 0.65苯扎氯銨 0.01NaOH/HCl 適量至pH6-8純水 適量至100通過參照某些優(yōu)選的實施方案我們描述了本發(fā)明；然而，應理解的是可以按照其它特定形式或變化形式實施本發(fā)明而不會脫離其精神或本質特征。由此認為上述實施方案在所有方面均用于舉例說明而非限制，本發(fā)明的范圍由所附權利要求而非之前的描述來指明。
權利要求
1.一種用于預防或治療患者的眼、鼻、皮膚、耳、胃腸道、或肺的過敏性疾病和預防或治療患者的全身性肥大細胞增多癥表現(xiàn)癥狀的方法，該方法包括給所述患者施用包含下式的二硫化物衍生物的組合物 其中X是-NH-C(＝O)-R或-NH-C(＝O)-OR；R和R1獨立地為H、(未)取代的苯基、(未)取代的芐基、或任選地可以被或不被OH、OR2、NR3R4取代或封端的C1-C8烷基或鏈烯基、C4-C7環(huán)烷基、(未)取代的芳基或(未)取代的5-7元雜環(huán)；其中任選存在的取代基選自C1-C6烷基或烷氧基、鹵素、OH、CN、CF3、NO2和CO2R2；R2是C1-C3烷基；且R3和R4獨立地為H、芐基、C1-C8烷基或鏈烯基、C4-C7環(huán)烷基、(未)取代的芳基或(未)取代的5-7元雜環(huán)；其中任選存在的取代基選自C1-C6烷基或烷氧基、鹵素、OH、CN、CF3、NO2和CO2R2。
2.權利要求1所述的方法，其中取代基X位于鄰位上且其中X＝-NH-C(＝O)-R；且R＝任選地可以被或不被OH、OR2、NR3R4取代或封端的C1-C8烷基或鏈烯基、C4-C7環(huán)烷基、(未)取代的芳基或(未)取代的5-7元雜環(huán)；其中任選存在的取代基選自C1-C6烷基或烷氧基、鹵素、OH、CN、CF3、NO2和CO2R2。
3.權利要求2所述的方法，其中R＝任選地可以被或不被OH、OR2、NR3R4取代或封端的C1-C5烷基或鏈烯基、C4-C7環(huán)烷基、(未)取代的芳基或(未)取代的5-7元雜環(huán)；其中任選存在的取代基選自C1-C6烷基或烷氧基、鹵素、OH、CN、CF3、NO2和CO2R2。
4.權利要求3所述的方法，其中X選自-NH-C(＝O)-CH2CH＝CH2、-NH-C(＝O)-CH3、-NH-C(＝O)-C(＝CH2)-CH3、-NH-C(＝O)-CH2-CH(-OH)-CH3、-NH-C(＝O)-O-CH2-CH3和-NH-C(＝O)-C(CH3)3。
5.權利要求1所述的方法，其中以局部給藥的組合物形式給患者施用所述二硫化物衍生物，所述局部給藥的組合物含有約0.00001至5wt.％量的所述二硫化物衍生物。
6.權利要求5所述的方法，其中所述二硫化物衍生物的存在量為約0.0001至0.2wt.％。
7.權利要求6所述的方法，其中所述二硫化物衍生物的存在量為約0.0001至0.01wt.％。
8.權利要求1所述的方法，其中以全身給藥的組合物形式給患者施用所述二硫化物衍生物，所述全身給藥的組合物含有約10至1000mg量的所述二硫化物衍生物。
9.用于治療眼、鼻、皮膚、耳或肺的過敏性疾病的局部給藥的藥物組合物，其包含用量足以使該組合物具有150至450mOsm重量摩爾滲透濃度的滲漲度調節(jié)劑、藥物上可接受的防腐劑和下式的二硫化物衍生物 其中X是-NH-C(＝O)-R或-NH-C(＝O)-OR；R和R1獨立地為H、(未)取代的苯基、(未)取代的芐基、或任選地可以被或不被OH、OR2、NR3R4取代或封端的C1-C8烷基或鏈烯基、C4-C7環(huán)烷基、(未)取代的芳基或(未)取代的5-7元雜環(huán)；其中任選存在的取代基選自C1-C6烷基或烷氧基、鹵素、OH、CN、CF3、NO2和CO2R2；R2是C1-C3烷基；且R3和R4獨立地為H、芐基、C1-C8烷基或鏈烯基、C4-C7環(huán)烷基、(未)取代的芳基或(未)取代的5-7元雜環(huán)；其中任選存在的取代基選自C1-C6烷基或烷氧基、鹵素、OH、CN、CF3、NO2和CO2R2。
10.權利要求9所述的藥物組合物，其中取代基X位于鄰位上且其中X＝-NH-C(＝O)-R；且R＝任選地可以被或不被OH、OR2、NR3R4取代或封端的C1-C8烷基或鏈烯基、C4-C7環(huán)烷基、(未)取代的芳基或(未)取代的5-7元雜環(huán)；其中任選存在的取代基選自C1-C6烷基或烷氧基、鹵素、OH、CN、CF3、NO2和CO2R2。
11.權利要求10所述的藥物組合物，其中R＝任選地可以被或不被OH、OR2、NR3R4取代或封端的C1-C5烷基或鏈烯基、C4-C7環(huán)烷基、(未)取代的芳基或(未)取代的5-7元雜環(huán)；其中任選存在的取代基選自C1-C6烷基或烷氧基、鹵素、OH、CN、CF3、NO2和CO2R2。
12.權利要求11所述的藥物組合物，其中X選自-NH-C(＝O)-CH2CH＝CH2、-NH-C(＝O)-CH3、-NH-C(＝O)-C(＝CH2)-CH3、-NH-C(＝O)-CH2-CH(-OH)-CH3、-NH-C(＝O)-O-CH2-CH3和-NH-C(＝O)-C(CH3)3。
13.權利要求9所述的藥物組合物，其中所述的二硫化物衍生物的存在量為約0.00001至5wt.％。
14.權利要求13所述的藥物組合物，其中所述二硫化物衍生物的存在量為約0.0001至0.2wt.％。
15.權利要求14所述的藥物組合物，其中所述二硫化物衍生物的存在量為約0.0001至0.01wt.％。
16.下式的二硫化物衍生物 其中X是-NH-C(＝O)-R；R是-C(-R5)-C＝C(-R6)R7或-C(-R5)-C(-OH)R6；R5是H、C1-C3烷基；R6是H、C1-C3烷基或鏈烯基；且R7是H、C1-C4烷基或鏈烯基。
17.權利要求16所述的二硫化物衍生物，其中R是-C(-R5)-C＝C(-R6)R7且R5、R6和R7是H。
18.權利要求16所述的二硫化物衍生物，其中R是-C(-R5)-C(-OH)R6、R5是H且R6是CH3。
全文摘要
本發(fā)明公開了用于預防或治療眼、鼻、皮膚、耳、胃腸道、呼吸道或肺的過敏性疾病和預防或治療全身性肥大細胞增多癥的表現(xiàn)癥狀的方法和組合物。該組合物含有使肥大細胞保持穩(wěn)定的二硫化物衍生物作為活性組分。
文檔編號A61P17/00GK1429208SQ01809475
公開日2003年7月9日 申請日期2001年4月25日 優(yōu)先權日2000年5月19日
發(fā)明者M·R·赫勒貝格, 馮子俠, S·T·米勒 申請人:愛爾康公司