專利名稱：一種高效低毒抗腫瘤藥物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，是關(guān)于一種新型抗腫瘤藥物及其制備方法。
傳統(tǒng)的化療藥物即細(xì)胞毒藥物，對腫瘤細(xì)胞的殺滅缺乏選擇性，在殺死腫瘤細(xì)胞的同時(shí)也損傷正常細(xì)胞，有較大的毒副作用，給腫瘤病人帶來巨大的痛苦。如何獲得高效低毒的抗腫瘤藥物一直是人們所關(guān)注的焦點(diǎn)。
本發(fā)明的目的在于提供一種低毒性的能高效殺死腫瘤細(xì)胞的新型抗腫瘤藥物及其制備方法。
磺胺類化合物是一種傳統(tǒng)的抗菌素藥物，本身不能作為抗腫瘤藥物使用。但是，它能夠在腫瘤中有一定程度的富集。本發(fā)明利用磺胺類化合物能夠在腫瘤中富集的特點(diǎn)，將其作為導(dǎo)向基團(tuán)，把它和細(xì)胞毒抗腫瘤藥物通過化學(xué)反應(yīng)接在一定分子量的烷烴兩端，通過烷烴結(jié)構(gòu)的多樣性和豐富的鏈構(gòu)象來屏蔽和減弱導(dǎo)向基團(tuán)與抗腫瘤藥物之間強(qiáng)烈的相互作用，并使之在腫瘤中選擇性富集。
本發(fā)明通過適當(dāng)化學(xué)反應(yīng)合成了一種高效低毒抗腫瘤藥物，其分子結(jié)構(gòu)中含有磺胺類藥物和細(xì)胞毒藥物，化學(xué)通式為A-B-C，其中(1)A通過磺酰胺上的氮與B相連，其通式為 這里R1、R2、R3是各類磺胺藥物上的取代基，例如R1:H,CH3CO,C6H5CH2OCO等，R2:H,CH3CO等，R3嘧啶環(huán)，吡喃環(huán)等；(2)B是分子量為14～140的烷基鏈(CH2)n，這里n為1～10(3)C為細(xì)胞毒抗腫瘤藥物中的任一種。例如氮芥類，5-氟脲嘧啶，嘌呤類，阿霉素，甲氨喋呤，生物堿類以及生物工程類抗腫瘤藥物。
例如，在A后接(CH2)4，然后再接苯丙氨酸氮芥，效果良好；在A后接(CH2)5，然后再接苯丁酸氮芥，效果良好；在A后接(CH2)8，然后再接5-氟脲嘧啶，效果良好。
上述結(jié)構(gòu)的抗腫瘤藥物以磺胺類藥物中磺酰胺基為靶向基團(tuán)，通過適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)鍵，將毒性較大的細(xì)胞毒藥物與靶基團(tuán)結(jié)合，得到的抗腫瘤藥物通過磺胺類藥物導(dǎo)向直接進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，減小了細(xì)胞毒藥物對正常細(xì)胞的損傷，是一種新概念的抗腫瘤藥物。
上述抗腫瘤藥物中的B分子量為50-100將更好，n=4-8，使制備方法更方便，成本也有所下降。
上述抗腫瘤藥物中的C可以是下述細(xì)胞毒抗腫瘤藥物的任何一種。氮芥類，5-氟脲嘧啶，嘌呤類，阿霉素，甲氨喋呤，生物堿類以及生物工程類抗腫瘤藥物。其中氮芥類有苯丙氨酸氮芥、苯丁酸氮芥、甲氮芥等，嘌呤類如6-巰基嘌呤、硫唑嘌呤，生物堿類如喜樹堿、長春新堿、紫杉醇等，生物工程類如白芥素，腫瘤壞死因子等。這些細(xì)胞毒類藥物偶聯(lián)效果十分良好。
上述A-B-C通式的抗腫瘤藥物經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，等毒劑量或等摩爾劑量的效果比單一細(xì)胞毒抗腫瘤藥物效果好，尤其是中、低劑量時(shí)抑制率更好。說明該類藥物具有明顯的導(dǎo)向作用。
本發(fā)明藥物制備時(shí)以含磺酰胺基的磺胺類藥物為起始原料A，在保護(hù)芳香胺基的條件下通過親電反應(yīng)接上烷基鏈B，該步驟一般將芳香胺基用保護(hù)基如芐氧羰基保護(hù)，然后成鹽，便于親電試劑反應(yīng)接B，通過偶聯(lián)反應(yīng)將細(xì)胞毒抗腫瘤藥物接在烷基鏈上。親電反應(yīng)是用常規(guī)現(xiàn)有技術(shù)反應(yīng)。最后將保護(hù)基團(tuán)去除，其反應(yīng)通式為 X為保護(hù)芳香胺基的基團(tuán)其中X可以是乙酰基、芐氧羰基等。反應(yīng)結(jié)束后，產(chǎn)品簡單后處理即可，反應(yīng)過程無特殊要求，易推廣實(shí)施。
本發(fā)明若用芐氧羰基保護(hù)磺酰胺芳香胺基，然后成鹽，例如鉀鹽、鈉鹽，再進(jìn)行親電反應(yīng)接B，偶合細(xì)胞毒藥物之后，用鈀碳和甲酸銨室溫下反應(yīng)2-4小時(shí)即可去保護(hù)。該反應(yīng)效果好，產(chǎn)率高。反應(yīng)過程無特殊要求，易產(chǎn)業(yè)化。當(dāng)R1、R2為H，n=2，C為苯丁酸氮芥時(shí)，ABC-1的合成方法見實(shí)施例一。其制備路線如下
(B)受試動(dòng)物為昆明種小鼠(由上海醫(yī)藥工業(yè)研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物組提供，合格證號(hào)為“滬動(dòng)合證字第107號(hào)”)；體重19±1克。
(B)性別急性毒性試驗(yàn)，雌雄各半；療效試驗(yàn)，雌雄皆可，每批試驗(yàn)使用同一種性別。
(D)動(dòng)物數(shù)急性毒性試驗(yàn)，每組20只昆明種小鼠。每一試驗(yàn)組和陽性對照組均為10只，陰性對照組為20只。急性毒性試驗(yàn)1．劑量設(shè)置ABC-1樣品設(shè)五個(gè)組，分別為200、160、128、102.4、及81.92mg/kg。2．給藥方案采用ip×1。3．試驗(yàn)主要步驟試驗(yàn)設(shè)5個(gè)劑量組，劑量間距為0.8。動(dòng)物隨機(jī)分組，每組20只，雌雄各半。給藥后觀察即時(shí)反應(yīng)，記錄二周內(nèi)小鼠的死亡分布。對死亡小鼠數(shù)及二周后存活小鼠進(jìn)行解剖，肉眼尸檢。當(dāng)尸檢發(fā)現(xiàn)有病變組織時(shí)，對該組織進(jìn)行鏡檢。試驗(yàn)結(jié)果以Bliss方法計(jì)算。4．試驗(yàn)結(jié)果以腹腔途徑一次給藥，對昆明種小鼠急性毒性試驗(yàn)結(jié)果見表1。雌雄動(dòng)物之間無顯著性差異，P值＞0.05。腹腔途徑單次給藥后一般癥狀；即時(shí)動(dòng)物行動(dòng)遲緩，呆滯，腹部略有收縮，與劑量成正相關(guān)，15分鐘左右低劑量組即恢復(fù)至常態(tài)。死亡大多出現(xiàn)在48小時(shí)內(nèi)，以24小時(shí)內(nèi)為死亡高峰。死亡動(dòng)物尸檢未發(fā)現(xiàn)肉眼可見的、明顯的實(shí)質(zhì)性臟器病變。二周后存活動(dòng)物一般狀況良好。因此，ABC-1樣品以腹腔途徑一次給藥對昆明種小鼠急性毒性試驗(yàn)得到的LD50為130.76mg/kg。具體數(shù)據(jù)見表1。
表1．ABC-1腹腔途徑一次給藥對昆明種小鼠急性毒性試驗(yàn)
抗S180實(shí)體瘤療效試驗(yàn)1．劑量設(shè)置CBL(苯丁酸氮芥)設(shè)6.8mg/kg、5mg/kg、2.5mg/kg、1.3mg/kg等劑量；ABC-1設(shè)13mg/kg、9.6mg/kg、6.5mg/kg、4.8mg/kg、3.3mg/kg及2.5mg/kg等劑量2．給藥方案采用ip×73．對S180實(shí)體瘤的療效試驗(yàn)取生長旺盛的荷S180實(shí)體瘤小鼠，無菌條件下取出腫瘤，以勻漿法制備成1～2×107/mL細(xì)胞懸液，以相應(yīng)宿主每鼠右腋皮下接種0.2mL/只，次日按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案給藥，十天左右處死各組動(dòng)物，剖取腫瘤稱重，按下列公式計(jì)算腫瘤抑制率腫瘤抑制率=[(對照組平均瘤重-給藥組平均瘤重)/對照組平均瘤重]×100％4．試驗(yàn)結(jié)果CBL 6.8mg/kg、5mg/kg、2.5mg/kg、1.3mg/kg劑量ip×7qd的治療方案對小鼠S180肉瘤療效分別為77.38％、73.30％、52.94％及37.10％；ABC-1以13mg/kg、9.6mg/kg、6.5mg/kg、4.8mg/kg、3.3mg/kg及2.5mg/kg等劑量，以相同方案試驗(yàn)療效分別為81.45％、76.92％、74.21％、63.35％、50.68％及47.96％，PASE對照劑量13mg/kg，療效為11.31％。結(jié)果詳見表2。
表2．ABC-1及CBL化合物對S180實(shí)體瘤的療效試驗(yàn)
***p值＜0.01與陰性對照組相比，其中CBL為陽性對照樣品苯丁酸氮芥。5．對動(dòng)物腫瘤模型S180肉瘤的療效比較，列表如下表3以等毒劑量比較CBL及ABC-1對小鼠S180的抑制率
表4以等摩爾劑量比較CBL及ABC-1對小鼠S180的抑制率
從表中數(shù)據(jù)可以看出，等毒劑量或等摩爾劑量比較時(shí)ABC-1的效果均比CBL好，尤其是在中、低劑量時(shí)抑制率更有明顯的提高。根據(jù)所得數(shù)據(jù)計(jì)算，CBL的ED50為2.17mg／kg，其療效指數(shù)(TI)為22.84ABC-1的ED50為2.75mg/kg，其療效指數(shù)(TI)為47.55，約為CBL的兩倍。
權(quán)利要求
1．一種高效低毒抗腫瘤藥物，其特征是分子結(jié)構(gòu)中含有磺胺類藥物和細(xì)胞毒藥物，化學(xué)通式為A-B-C，其中(1)A通過磺酰胺上的氮與B相連，其通式為 R1、R2、R3是各類磺胺藥物上的取代基；(2)B是分子量為14～140的烷基鏈(CH2)n，這里n為1～10；(3)C為細(xì)胞毒抗腫瘤藥物中任一種。
2．根據(jù)權(quán)利要求1所述的高效低毒抗腫瘤藥物，其特征是其化學(xué)通式A-B-C中B是分子量為50-100的烷基鏈(CH2)n，這里n=4-8。
3．根據(jù)權(quán)利要求1所述的高效低毒抗腫瘤藥物，其特征是其化學(xué)通式A-B-C中C是下述細(xì)胞毒抗腫瘤藥物中任一種氮芥類，5-氟脲嘧啶，嘌呤類，阿霉素，甲氨喋呤，生物堿類以及生物工程類抗腫瘤藥物。
4．根據(jù)權(quán)利要求1所述的高效低毒抗腫瘤藥物，其特征是結(jié)構(gòu)中含有磺胺類藥物和細(xì)胞毒藥物，且對腫瘤細(xì)胞具有導(dǎo)向作用。
5．根據(jù)權(quán)利要求1所述的高效低毒抗腫瘤藥物的制備方法，其特征是以磺胺類藥物為起始原料A，在保護(hù)芳香胺基的條件下通過親電反應(yīng)接上烷基鏈B，然后通過偶聯(lián)反應(yīng)將細(xì)胞毒抗腫瘤藥物C接在烷基鏈上，最后將保護(hù)基脫除即可，反應(yīng)通式為 X為保護(hù)芳香胺基的基團(tuán)
全文摘要
本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域,是關(guān)于一種新型抗腫瘤藥物及其制備方法,抗腫瘤動(dòng)物試驗(yàn)。傳統(tǒng)的化療藥物對腫瘤細(xì)胞的殺滅缺乏選擇性,在殺死腫瘤細(xì)胞的同時(shí)也損傷正常細(xì)胞,有較大的毒副作用,給腫瘤病人帶來巨大的痛苦。如何獲得高效低毒的抗腫瘤制劑一直是人們所關(guān)注的焦點(diǎn)。本發(fā)明以磺胺類藥物為靶向基團(tuán),通過適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)鍵,將毒性較大的細(xì)胞毒藥物與靶基團(tuán)結(jié)合,得到一類全新的藥物。動(dòng)物試驗(yàn)表明,這類藥物具有高效低毒的特點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61K45/00GK1298743SQ0012758
公開日2001年6月13日 申請日期2000年11月28日 優(yōu)先權(quán)日2000年11月28日
發(fā)明者黃駿廉, 黃兆華 申請人:復(fù)旦大學(xué)