一株副干酪乳桿菌堅韌亞種菌株、篩選方法及用途
【專利摘要】本發(fā)明涉及具有抗微生物特性的Kefir源副干酪乳桿菌堅韌亞種菌株及其抑菌組合物。本發(fā)明菌株FX-6-1于2014年02月23日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號為CCTCCM2014043。本發(fā)明菌株發(fā)酵產(chǎn)生的抑菌組合物可以抑制大腸桿菌(Escherlchiacoli)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)等細菌病原微生物及黃曲霉（Aspergillusflavus）、黑根霉（Rhizopusnigricans）等霉菌的生長，抗菌譜寬；本發(fā)明菌株發(fā)酵產(chǎn)生的抑菌組合物對熱處理和酶解處理性質(zhì)穩(wěn)定，將可作為防腐劑應用于飼料及食品，并具有開發(fā)成為醫(yī)療組合物的潛力。
【專利說明】一株副干酪乳桿菌堅韌亞種菌株、篩選方法及用途 【技術(shù)領域】
[0002] 本發(fā)明涉及一種副干酪乳桿菌堅韌亞種FX-6-1 (Zac ioAaciBiAs paracasei subsp. io/era/75· FX-6-1)菌株，特別是涉及一種可以抑制大腸桿菌co/i)、 金黃色葡萄球菌atfrews)等細菌病原微生物及黃曲霉d/?6?rgiJ7w5· /7ara5·)、黑根霉(TSizo/WAs fligricafls)等霉菌的等病原菌的副干酪乳桿菌堅韌亞種菌株， 以及含有該副干酪乳桿菌堅韌亞種菌株發(fā)酵產(chǎn)生的抑菌組合物及該組合物的活性穩(wěn)定性， 屬于微生物【技術(shù)領域】。 技術(shù)背景
[0003] 在加工、貯藏、運輸及消費過程中，導致食品腐敗變質(zhì)的原因較多，有物理因素、化 學因素和生物性因素，其中由微生物污染所引起的食品腐敗變質(zhì)是最為重要和普遍的。微 生物廣泛分布于自然界，食品及原料中不可避免的會受到一定類型和數(shù)量微生物的污染， 當環(huán)境條件適宜時，它們就會迅速生長繁殖，造成食品的腐敗與變質(zhì)。據(jù)估計，在世界范圍 內(nèi)每年有超過20%的食品由于腐敗變質(zhì)而白白浪費（曹妍等，2011)，尤其是微生物污染導 致的腐敗最為嚴重。
[0004] 微生物滋生導致食品腐敗變質(zhì)的同時，也給食品安全帶來嚴重危害。全球每年發(fā) 生40-60億例食源性疾病，發(fā)展中國家每年約有180萬人死于食源性疾病，在發(fā)達國家， 每年亦有10%以上的人群感染食源性疾病（吳燕燕等，2009)。美國和歐洲曾分別因火雞污 染沙門氏菌和豆芽菜污染大腸桿菌〇l〇4(Frank et al，2011)而爆發(fā)嚴重的食品安全事 件。在中國，僅2012年就爆發(fā)了 6685起食物中毒事件，而56. 1%的事故原因是由微生物污 染引起（Lam et al, 2013)。
[0005] 雖然傳統(tǒng)的加熱殺菌可以有效抑制微生物的污染，但在殺菌的同時也不同程度的 破壞了食品的營養(yǎng)、質(zhì)地以及色香味型，同時產(chǎn)生大量能耗。在現(xiàn)代食品工業(yè)中，食品防腐 劑被廣泛應用于延長食品的保藏期，已成為現(xiàn)代食品生產(chǎn)中一種不可缺少的食品添加劑。
[0006] 而在現(xiàn)代食品工業(yè)以及種植、養(yǎng)殖業(yè)中，化學防腐劑、殺蟲劑及抗生素的不規(guī)范使 用及殘留隱患已越來越引起消費者關注，人們更傾向于消費天然來源的食品資源。因此，開 發(fā)不易產(chǎn)生耐藥性且無殘留、無安全隱患的新型天然抗菌物質(zhì)具有重要的現(xiàn)實意義，而作 為天然來源的蛋白質(zhì)類抗菌物質(zhì)成為急需的替代品，成為近年來研究的熱點。
[0007] 西藏開菲爾主要生長在我國西部高海拔地區(qū)，是極具地方特色的發(fā)酵乳產(chǎn)品，具 有增強人體免疫力、抗腫瘤、降血壓、降血脂等多種功效。西藏開菲爾中主要包含乳酸菌和 酵母菌。從西藏開菲爾中分離篩選產(chǎn)抗菌物質(zhì)菌株，對開發(fā)我國傳統(tǒng)微生物資源具有重要 意義。
[0008] 針對食品工業(yè)中化學防腐劑存在的問題以及對廣譜高效天然防腐保鮮劑的需求 狀況，本發(fā)明從西藏開菲爾乳中篩選能產(chǎn)生抗菌活性高、抗菌譜廣的抗菌菌株，旨在獲得廣 譜高效的新型抗菌物質(zhì)及推動其開發(fā)和應用。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 本發(fā)明的目的在于提供一種副干酪乳桿菌堅韌亞種FX-6-1 (Zac paracasei subsp. io/era/75· FX-6-1)菌株及其發(fā)酵抑菌組合物。該發(fā)酵抑菌組合物具有 良好的抗菌活性。
[〇〇1〇] 本發(fā)明所提供的菌株篩選自西藏開菲爾（Tibetan kefir)發(fā)酵乳。該副干酪乳桿菌 堅韌亞種？乂-6-1(1<3<^0知<^7/"51/7<3/' <3<^3>5(9/81^8。.（〇/6?/'<3/7 >5?乂-6-1)菌株已經(jīng)保藏于 于2014年02月23日保藏于位于武漢市武漢大學的中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號為 CCTCC Μ 2014043。其篩選方法是：采用選擇性培養(yǎng)基MC固態(tài)培養(yǎng)基及MRS固態(tài)培養(yǎng)基初 篩得到乳酸菌，隨后將篩選到的乳酸菌接種至純牛奶中發(fā)酵培養(yǎng)以獲取發(fā)酵組合物。以大 腸桿菌為指示菌，采用牛津杯瓊脂擴散法對發(fā)酵組合物進行抑菌活性試驗檢測，篩選到良 好抗菌活性的副干酪乳桿菌堅韌亞種？乂-6-1(/ /<3<^0知<^7^/15/7<3/'<3<^35 1(9/81^8。.（〇/(9/'<3/75· FX-6-1)菌株。
[0011] 本發(fā)明所提供的副干酪乳桿菌堅韌亞種FX-6-1 (L3cioAaciJ7w5· paracasei subsp. FX-6-1)菌株發(fā)酵抑菌組合物，來自副干酪乳桿菌堅韌亞種 FX-e-lfZacioAaciBiAsparacasei subsp. io/erafls FX-6-1)發(fā)酵乳。其制備方法是：將 副干酪乳桿菌堅韌亞種 FX-6-1 paracasei subsp. io/era/75· FX-6-1)發(fā) 酵凝乳混勻后離心（4,000 r/min，20min)去除沉淀，發(fā)酵上清經(jīng)抽濾過膜（0.45 μπι濾 膜）進一步去除大顆粒物質(zhì)，隨后發(fā)酵上清經(jīng)冷凍干燥獲得凍干樣抑菌組合物。
[0012] 將本發(fā)明提供的副干酪乳桿菌堅韌亞種FX-6-1 (L3cioAaciJ7w5· paracasei subsp. io/era/75· FX-6-1)菌株發(fā)酵抑菌組合物進行牛津杯瓊脂擴散法分析，結(jié)果顯示，可 以抑制大腸桿菌co/i)、金黃色葡萄球菌（5?<3/成r/ococci/s atfrews)等細菌 病原微生物及黃曲霉/7ara5〇、黑根霉(TSizo/WAs fligricafls)等霉菌的生 長，甚至有殺菌效果。
[0013] 本發(fā)明提供的副干酪乳桿菌堅韌亞種FX-6-1 (ZacioAaciBiAs paracasei subsp. FX-6-1)菌株發(fā)酵抑菌組合物為乳發(fā)酵物，它們可以是食品，特別是乳制品，或是 防腐劑或醫(yī)用原料。
[0014] 本發(fā)明所提供的副干酪乳桿菌堅韌亞種FX-6-1 (L3cioAaciJ7w5· paracasei subsp. io/era/75· FX-6-1)菌株及發(fā)酵產(chǎn)生的抑菌組合物，與其他現(xiàn)有技術(shù)相比主要具有 下述優(yōu)點： 1.本發(fā)明副干酪乳桿菌堅韌亞種FX-6-1 subsp. io/6?r<ms FX-6-1)菌株經(jīng)過革蘭氏染色及鏡檢分析、 16S rDNA序列鑒定分析后，確認為一的副干酪乳桿菌堅韌亞種。且根據(jù)查閱文獻發(fā)現(xiàn)， 本抑菌菌株首次從西藏開菲爾中分離到，且目前尚未報道所產(chǎn)抑菌組合物既對革蘭氏陰性 菌和陽性菌，又對霉菌具有抑制細菌作用的副干酪乳桿菌堅韌亞種。
[0015] 2.副干酪乳桿菌堅韌亞種 FX-6-1 (ZacioAaciBiAs paracasei subsp. tolerans FX-6-1)菌株發(fā)酵產(chǎn)生的抑菌組合物抗菌普寬，既可以抑制細菌中的革蘭氏陽性菌和陰性 菌，同時對部分霉菌也有抑制作用。 3.副干酪乳桿菌堅韌亞種 FX-6-1 paracasei subsp. io/era/75· FX-6-1)菌株發(fā)酵產(chǎn)生的抑菌組合物性質(zhì)穩(wěn)定，121°C下20min或10(TC下60min抑菌活性 保持穩(wěn)定，經(jīng)胃蛋白酶或胰蛋白酶酶解處理后抑菌活性并未出現(xiàn)顯著下降。
[0016] 圖 1 是副干酪乳桿菌堅韌亞種 FX-6-1 (ZacioAaciBiAs paracasei subsp. io/era/?^· FX-6-1)菌株菌落特征。
[0017] 圖 2 是副干酪乳桿菌堅韌亞種 FX-6-1 (ZacioAaciBiAs paracasei subsp. io7era/75· FX-6-1)菌株的革蘭氏染色后菌體形態(tài)。
[0018] 圖 3 是副干酪乳桿菌堅韌亞種 FX-6-1 (ZacioAaciBiAs paracasei subsp. io7er<ms FX-6-1)菌株 16S rDNA PCR 產(chǎn)物電泳結(jié)果。
[0019] 圖 4 是副干酪乳桿菌堅韌亞種 FX-6-1 (ZacioAaciBiAs paracasei subsp. FX-6-1)菌株發(fā)酵產(chǎn)生的抑菌組合物的抗菌譜。 【具體實施方式】
[0020] 實施例1 (一）本發(fā)明副干釀乳桿菌堅初亞種FX-6-1 (ZacioAaciBiAs paracasei subsp. io/era/?^· FX-6-1)菌株的篩選與分離： 將西藏開菲爾粒接種到純牛奶中，30 °C靜態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)24 h，混勻發(fā)酵后的凝乳，取液 態(tài)發(fā)酵乳用0.9%無菌生理鹽水稀釋至1(Γ6~1(Γ8,渦旋混勻后吸取0. 1 mL稀釋樣至MC固態(tài) 培養(yǎng)基及MRS固態(tài)培養(yǎng)平板表面并涂布均勻。30 °C下密封培養(yǎng)24-48h至單一菌落長出。 挑取產(chǎn)生清晰鈣圈的單菌落，并再次通過MRS瓊脂板純化以獲取單菌落菌株，共收集到49 株乳酸菌。
[0021] 將分離到的產(chǎn)酸單菌落菌株接種到MRS液態(tài)培養(yǎng)基中，30°C下靜態(tài)密封過夜培 養(yǎng)。隨后將活化乳酸菌菌液按接種量5% (v/v)加入純牛奶中，混勻后30 °C下靜態(tài)密封培 養(yǎng)24 h，發(fā)酵液離心（4,000 r/min，20min)過膜（0. 45 μπι濾膜）后，經(jīng)冷凍干燥獲得凍 干樣。
[0022] 以大腸桿菌為指示菌，采用牛津杯瓊脂擴散法篩選到抗菌活性最佳的副干酪乳桿 菌堅韌亞種？乂-6-1(1<3<^0知<^7/" 15/7<3/'<3<^351(9/81^8口.（〇/6?/' <3/7>5?乂-6-1)菌株。該菌株 培養(yǎng)特征如下：菌落呈圓形白色突起，菌落濕潤、明亮，邊緣整齊，具有典型的乳酸菌菌落特 征(圖1)。
[0023] 所述的副干酪乳桿菌堅韌亞種 FX-6-1 (ZacioAaciBiAs paracasei subsp. FX-6-1)菌株已經(jīng)保藏于于2014年02月23日保藏于位于武漢市武漢大學的中 國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號為CCTCC Μ 2014043。
[0024] (二)副干酪乳桿菌堅韌亞種FX-6-1 (ZacioAaciBiAs paracasei subsp. tolerans FX-6-1)菌株的革蘭氏染色： 用接種環(huán)挑取一環(huán)MRS平板培養(yǎng)基上培養(yǎng)的副干酪乳桿菌堅韌亞種 subsp. io/eraflsFX-e-l)菌落，涂片后革蘭氏染色，油 鏡觀察乳酸菌菌株形態(tài)特征。經(jīng)顯微鏡油鏡觀察發(fā)現(xiàn)，菌株經(jīng)革蘭氏染色呈陽性，短桿狀， 菌株粘連成短鏈狀排列，無鞭毛，無孢子形成，為乳酸桿菌的典型特征（圖2)。
[0025] (三)副干酪乳桿菌堅韌亞種FX_6_1 (ZacioAaciBiAs paracasei subsp. io/era/75· FX-6-1)菌株的16S rDNA序列分析 1.模板DNA制備：將一 80 °C保藏的副干酪乳桿菌堅韌亞種FX-6-1 paracasei subsp. 菌株接種到MRS液態(tài)培養(yǎng)基中，30 °C下靜態(tài)密封過 夜培養(yǎng)。取1 mL活化后菌液至1.5 mL離心管，4 °C離心3 min(12000 r/min)，棄上清液， 收集菌體。加入1 mL 1XTE輕輕混勻，4 °C離心3 min(12000 r/min)，棄上清液，收集菌 體(注意：棄上清過程中勿將離心管底部菌體倒掉)。向離心管中加入10 KL 1% SDS，渦旋 裂解10 min后加入390 μ? IX ΤΕ，輕輕混勻后備用。
[0026] 2. 16S rDNA PCR 擴增 引物：上游引物 27F(5 ' -AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3 ')，下游引物 1492R (5，-TACGGYTACCTTGTTACGACTT-3')。
[0027] PCR反應體系：采用25μ?反應體系。
[0028] Mix ：12. 5 μ? 上游引物：1 μ? 下游引物：1 μ? 模板 DNA : 1 μ?，dd 水 9. 5 μ?。
[0029] PCR擴增反應程序：循環(huán)35次。
[0030] 預變性 94 °C 5 min 變性 94 °C 1 min 退火 55 °C 1 min 延伸 72 °C 3 min 延伸 72 °C 10 min 保存 4 V 3. 16S rDNA PCR片段定序、比對：電泳結(jié)果見圖3。由圖3可知擴增片段約為1500 bp (標準品片段長度由上到下依次為 2000 bp，1100 bp，750 bp，500 bp，250 bp，100 bp)，PCR 產(chǎn)物測序結(jié)果表明，16S rDNA堿基序列為1468bp， 具體如下：GAAGTGGGGGGTGCTATAATGCAGTCGAACGAGTTCTCGTTGATGATCGGTGCTTGCACCGAG ATTCAACATGGAACGAGTGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCCTTAAGTGGGGGATAACATTTGGAA ACAGATGCTAATACCGCATAGATCCAAGAACCGCATGGTTCTTGGCTGAAAGATGGCGTAAGCTATCGCTTTTGGAT GGACCCGCGGCGTATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGATGATACGTAGCCGAACTGAGAGGTTGA TCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGACGCAA GTCTGATGGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGCTTTCGGGTCGTAAAACTCTGTTGTTGGAGAAGAATGGTCGGC AGAGTAACTGTTGTCGGCGTGACGGTATCCAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACG TAGGTGGCAAGCGTTATCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTTTTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCT CGGCTTAACCGAGGAAGCGCATCGGAAACTGGGAAACTTGAGTGCAGAAGAGGACAGTGGAACTCCATGTGTAGCGG TGAAATGCGTAGATATATGGAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTGTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTCGAAA GCATGGGTAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCATGCCGTAAACGATGAATGCTAGGTGTTGGAGGGTTTCC GCCCTTCAGTGCCGCAGCTAACGCATTAAGCATTCCGCCTGGGGAGTACGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAGGAATT GACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATC TTTTGATCACCTGAGAGATCAGGTTTCCCCTTCGGGGGCAAAATGACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGT CGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTATGACTAGTTGCCAGCATTTAGTTGGGCACTCTAGT AAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACAC GTGCTACAATGGATGGTACAACGAGTTGCGAGACCGCGAGGTCAAGCTAATCTCTTAAAGCCATTCTCAGTTCGGAC TGTAGGCTGCAACTCGCCTACACGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCACGCCGCGGTGAATACGTTCCC GGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGAGAGTTTGTAACACCCGAAGCCGGTGGCGTAACCCTTTAGGGAGCG AGCCGTCTAAGGTGAACAA 經(jīng)過BLAST序列同源性比對分析，副干酪乳桿菌堅韌亞種FX-6-1 (Zac ioAaci paracasei subsp. io/erafls FX-6-1)菌株序列與副干釀乳桿菌堅初亞種 ^Lactobacillus, paracasei subsp. Tb/erafls)才目"(以度高于 99%〇
[0031] 實施例2 副干酪乳桿菌堅韌亞種subsp. 菌株發(fā)酵抑菌組合物： (一）、副干酪乳桿菌堅韌亞種 FX-6-1 (ZacioAaciBiAs paracasei subsp. io/era/75· FX-6-1)菌株發(fā)酵產(chǎn)生的抑菌組合物制備 將副干酪乳桿菌堅韌亞種 FX-6-1 paracasei subsp. io/era/75· FX-6-1)菌株的活化菌液按接種量5% (v/v)加入純牛奶中，混勻后35 °C下靜態(tài)密封培養(yǎng) 24 h，發(fā)酵液離心（4,000 r/min，20min)過膜（0.45 μπι濾膜）后，經(jīng)冷凍干燥獲得凍干 樣，以備抗菌活性測定。
[0032] (二)副干酪乳桿菌堅韌亞種FX-6-1 (ZacioAaciBiAs paracasei subsp. tolerans FX-6-1)菌株發(fā)酵抑菌組合物抗菌譜分析 牛津杯瓊脂擴散法： 副干酪乳桿菌堅韌亞種subsp. 菌株發(fā)酵產(chǎn)生的抑菌組合物的抗菌譜采用牛津杯瓊脂擴散法測定分析。
[0033] 1、指示菌活化：在超凈工作臺中挑取4 °C保存的試管斜面指示細菌 {Escherichia coli ATCC 25922; Staphylococcus aureus ATCC 63589; Salmonella enterica CMCC 9812; Shigella dysenteriae CMCC(B)50071; Bacillus thuringiensis CMCC 9812)單菌落于5 mL LB肉湯培養(yǎng)基，放置于恒溫搖床，37 °C下150 r/min過夜培養(yǎng)。 將過夜培養(yǎng)指示菌液稀釋至菌濃度為1X108 CFU/mL)，備用。指示菌霉菌 niger ACCC 30005; Aspergillus flavus CGMCC 3. 2890; Rhizopus nigricans AS3. 4997; PeniciIlium glaucum STL 3501)采用 PDA 固體培養(yǎng)基，30 °C 下培養(yǎng)。
[0034] 2、檢測平板制備：將滅菌處理的LB瓊脂冷卻至5(T60 °C，無菌條件下用移液器向 水平放置的培養(yǎng)皿（9 cm)中轉(zhuǎn)移20 mL培養(yǎng)基。瓊脂平板凝固后，吸取0.2 mL指示菌液 至平板，用無菌涂布器涂布均勻，隨后放置牛津杯于平板上，為了使牛津杯放置穩(wěn)固，可適 當輕輕按壓。
[0035] 3、抑菌活性測定：吸取0. 2 mL副干酪乳桿菌堅韌亞種FX-6-1 paracasei subsp. io/erafls FX-6-1)菌株發(fā)酵產(chǎn)生的抑菌組合物溶液至牛津杯，細菌在 37 °C下恒溫靜置培養(yǎng)18 h (霉菌采用PDA固體培養(yǎng)基，30 °C下培養(yǎng)24 h)，游標卡尺測抑 菌圈直徑。
[0036] 實驗結(jié)果見表1和圖4,可以看出，副干酪乳桿菌堅韌亞種FX-6-1 paracasei subsp. io/era/75· FX-6-1)菌株發(fā)酵產(chǎn)生的抑菌組合物（1 g/mL)具有較寬的抗 菌譜，對細菌種的部分革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌均具有顯著抑制作用，同時對霉菌中 的黃曲霉、黑曲霉、黑根酶和青霉也具有不同程度的抑制作用。但總體上對細菌的抑制效果 優(yōu)于對霉菌的抑制效果。
[0037] 表 1 副干酪乳桿菌堅韌亞種FX-6-1 (ZacioAaciBiAs paracasei subsp. io/eraas FX-6-1)菌株發(fā)酵產(chǎn)生的抑菌組合物的抗菌譜
【權(quán)利要求】
1. 一株副干酪乳桿菌堅韌亞種菌株，該菌株為副干酪乳桿菌堅韌亞種FX-6-1，于 2014年02月23日保藏于位于武漢市武漢大學的中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號為 CCTCC Μ 2014043。
2. -種如權(quán)利要求所述的副干酪乳桿菌堅韌亞種菌株的篩選方法，其特征在于，采用 選擇性培養(yǎng)基MC固態(tài)培養(yǎng)基及MRS固態(tài)培養(yǎng)基初篩得到乳酸菌，隨后將篩選到的乳酸菌 接種至純牛奶中發(fā)酵培養(yǎng)以獲取發(fā)酵組合物，以大腸桿菌為指示菌，采用牛津杯瓊脂擴散 法對發(fā)酵組合物進行抑菌活性試驗檢測，篩選到良好抗菌活性的副干酪乳桿菌堅韌亞種 FX_6_1 菌株。
3. -種如權(quán)利要求所述的副干酪乳桿菌堅韌亞種菌株發(fā)酵產(chǎn)生的抑菌組合物，其特征 在于，由以下方法制得：將副干酪乳桿菌堅韌亞種FX-6-1發(fā)酵凝乳混勻后離心去除沉淀， 發(fā)酵上清經(jīng)抽濾過膜進一步去除大顆粒物質(zhì)，隨后發(fā)酵上清經(jīng)冷凍干燥獲得凍干樣抑菌組 合物。
4. 如權(quán)利要求3所述的副干酪乳桿菌堅韌亞種FX-6-1菌株發(fā)酵產(chǎn)生的抑菌組合物在 乳制品防腐劑方面的用途。
5. 如權(quán)利要求3所述的副干酪乳桿菌堅韌亞種FX-6-1菌株發(fā)酵產(chǎn)生的抑菌組合物在 制備抗菌藥物方面的用途。
【文檔編號】C12R1/225GK104087524SQ201410128543
【公開日】2014年10月8日 申請日期:2014年4月2日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月2日
【發(fā)明者】曹庸, 苗建銀 申請人:曹庸