一種降低膽固醇的干酪乳桿菌及其生產(chǎn)益生菌酸奶的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種降低膽固醇干酪乳桿菌（Lactobacilluscasei)Jl及其生產(chǎn)益生 菌酸奶的方法，干粉發(fā)酵劑和普通酸奶干粉發(fā)酵劑混合發(fā)酵生成益生菌酸奶，適用于發(fā)酵 乳制品中降膽固醇的益生菌酸奶、益生菌片、微生態(tài)制劑的生產(chǎn)。
【背景技術(shù)】
[0002] 益生菌（Probiotics)是指一類通過腸道定殖作用改善宿主特定部位微生態(tài)平衡 并兼有若干其他有益生理功能的微生物，其通過改善腸道微生物生態(tài)平衡，控制腸道感染， 降低血清膽固醇水平，提高乳糖不耐癥人對乳糖的利用，并能刺激特異性或非特異性免疫 反應(yīng)，具有免疫增強的作用。益生菌制品的活菌應(yīng)該代謝穩(wěn)定，活性較強，通過消化道后大 量存活，進入腸道后發(fā)揮益生菌作用。目前用于生產(chǎn)益生菌劑的優(yōu)良菌種有雙歧桿菌屬、乳 桿菌屬、乳球菌屬中的乳酸乳球菌乳酸亞種等。
[0003] 本發(fā)明所用干酪乳桿菌J1菌株是從藏靈茹中分離純化出來的一種益生乳酸菌， 可在生長代謝過程中產(chǎn)生大量高活力的膽鹽水解酶，經(jīng)過體外牛津杯試驗和動物實驗證明 有降低機體血清膽固醇含量的功效。其降低膽固醇機理是緣于干酪乳桿菌J1菌株代謝產(chǎn) 生的膽鹽水解酶炬ileSaltHy化olase，BSH)，B甜是腸道中的雙歧桿菌屬、乳桿菌屬、乳球 菌屬中的多種乳酸細(xì)菌在生長過程中產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物。大量實驗證明，膽鹽水解酶能在肝 腸循環(huán)中將結(jié)合膽鹽分解，產(chǎn)生氨基酸與溶解度較低的游離膽鹽。后者能與膽固醇結(jié)合形 成沉淀復(fù)合物而排出體外，從而降低血清總膽固醇的含量。早在1963年人們就證實攝取含 有某種乳桿菌或雙歧桿菌發(fā)酵的酸奶具有降低血清膽固醇含量的功效。迄今為止，國內(nèi)外 學(xué)者對乳酸菌降膽固醇作用機理的研究尚存在不同觀點，主要集中于W下S點；（1)乳酸 菌菌體細(xì)胞直接吸收同化膽固醇；(2)乳酸菌的膽鹽水解酶活性使結(jié)合態(tài)膽鹽降解為游離 態(tài)膽鹽，后者溶解度下降與膽固醇發(fā)生共同沉淀作用；（3)其他理論，如吸收同化與共沉淀 聯(lián)合作用。
[0004] 國內(nèi)關(guān)于干酪乳桿菌的研究主要是在降血脂、抗高血壓、治療過敏性疾病等 保健功效上，如上海光明乳業(yè)股份有限公司申請的"干酪乳桿菌Bd-II菌株及其在降 低血脂方面的應(yīng)用"，專利申請?zhí)枮?；CN03128995.9 干酪乳桿菌LC2W菌株及其在抗 高血壓方面的應(yīng)用"，專利申請?zhí)枮?；CN03129450. 2 ;景岳生物科技股份有限公司申請 的"新的微生物株類干酪乳桿菌GM-080及其治療過敏相關(guān)疾病的用途"，專利申請 號為；CN200410038566.X。雖然國外關(guān)于干酪乳桿菌降低血清膽固醇功效的研究也 有--項專利報道：Lactobacilluscaseibd-IIstainandusedtoreduceblood cholesterol(20060127380)，但是，目前國外有關(guān)干酪乳桿菌產(chǎn)膽鹽水解酶的內(nèi)容尚無專 利報道。雖然國內(nèi)有一項"含羅伊氏乳桿菌的功能性酸奶及其制作方法（200310112715. 8)" 的專利報道，但是國內(nèi)有關(guān)利用降膽固醇及高產(chǎn)膽鹽水解酶的干酪乳桿菌應(yīng)用于益生菌酸 奶的生產(chǎn)尚未見相關(guān)文獻報道和專利報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種降低膽固醇干酪乳桿菌J1及其生產(chǎn)益生菌酸奶的方 法。
[0006] 本發(fā)明的技術(shù)方案是：一種降低膽固醇的干酪乳桿菌（LactobacilluscaseUjl， 分離普通家庭的藏靈茹（又稱開菲爾粒）中，具有優(yōu)異的產(chǎn)膽鹽水解酶及耐受胃腸道逆環(huán) 境特性，可W調(diào)節(jié)腸道菌群的平衡，并有降低血清膽固醇等益生保健功效，該菌株已于2006 年9月11日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中屯、，保藏地址為；北京市 朝陽區(qū)大屯路，保藏號；CGMCCNo. 1808。
[0007] 本發(fā)明制備益生菌酸奶是由具有高效降低膽固醇及產(chǎn)膽鹽水解酶的干酪乳桿菌 (Lactobacilluscasei)Jl干粉發(fā)酵劑和普通酸奶干粉發(fā)酵劑制得。
[0008] -種利用降膽固醇的干酪乳桿菌J1生產(chǎn)益生菌酸奶的方法，采用直投法添加干 粉發(fā)酵劑生產(chǎn)益生菌酸奶的工藝為；在發(fā)酵溫度為37~43°C，發(fā)酵時間為6~化，庶糖添 加量為5%~8% (W/V，質(zhì)量體積比濃度）前提下，干酪乳桿菌J1菌株干粉發(fā)酵劑接種量為 1%。（W/V，質(zhì)量體積比濃度），普通酸奶干粉發(fā)酵劑的接種量為1%。（W/V，質(zhì)量體積比濃度）， 干酪乳桿菌J1菌株干粉發(fā)酵劑與普通酸奶干粉發(fā)酵劑的接種比例為1:1 (W/W，質(zhì)量分?jǐn)?shù)）。
[0009] 所述方法中，普通酸奶干粉發(fā)酵劑為市售保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌的混合菌 粉。
[0010] 本發(fā)明的效果是：添加干酪乳桿菌J1的干粉發(fā)酵劑制備的益生菌酸奶具有良好 的降低血清膽固醇功效。在不改變普通酸奶發(fā)酵工藝基礎(chǔ)上，既可利用J1菌株產(chǎn)膽鹽水 解酶特性制備降低血清膽固醇的酸奶，又解決了酸奶乳清析出問題，還降低了酸奶后酸化 程度，提高了酸奶黏度，產(chǎn)品在4°C條件下貶存21天后干酪乳桿菌J1的活菌數(shù)量可達到 106CFU/gW上，仍具有保健功能。
[0011] 本發(fā)明制作益生菌酸奶的原料來源方便，發(fā)酵工藝簡單，發(fā)酵周期短，操作簡單， 對設(shè)備要求低，成本較低，適于工業(yè)化生產(chǎn)。
[0012] 下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明做進一步的說明。
【附圖說明】
[0013] 附圖是應(yīng)用干酪乳桿菌J1(Lactobacilluscasei)Jl和普通酸奶干粉發(fā)酵劑生產(chǎn) 益生菌酸奶工藝流程圖。
【具體實施方式】
[0014] 下述實施例對本發(fā)明作進一步說明而不限制本發(fā)明的保護范圍。
[0015] 下述實施例中的實驗方法，如無特別說明，均為常規(guī)方法。
[0016] 下述實施例中的百分含量，如無特別說明，均為質(zhì)量體積比濃度（W/V)。
[0017] 一種降低膽固醇的干酪乳桿菌（Lactobacilluscasei)Jl，分離普通家庭的藏靈 茹（又稱開菲爾粒）中，具有優(yōu)異的產(chǎn)膽鹽水解酶及耐受胃腸道逆環(huán)境特性，可W調(diào)節(jié)腸道 菌群的平衡，并有降低血清膽固醇等益生保健功效，該菌株已于2006年9月11日保藏于中 國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中屯、，保藏號；CGMCCNo. 1808。
[0018] 本發(fā)明制備益生菌酸奶是由具有高效降低膽固醇及產(chǎn)膽鹽水解酶的干酪乳桿菌 (Lactobacilluscasei)Jl干粉發(fā)酵劑和普通酸奶干粉發(fā)酵劑制得。
[0019] 一種利用降膽固醇的干酪乳桿菌J1生產(chǎn)益生菌酸奶的方法，采用直投法添加干 粉發(fā)酵劑生產(chǎn)益生菌酸奶的工藝為；在發(fā)酵溫度為37~43°C，發(fā)酵時間為6~化，庶糖添 加量為5%~8% (W/V，質(zhì)量體積比濃度）前提下，干酪乳桿菌J1菌株干粉發(fā)酵劑接種量為 1%。（W/V，質(zhì)量體積比濃度），普通酸奶干粉發(fā)酵劑的接種量為1%。（W/V，質(zhì)量體積比濃度）， 干酪乳桿菌J1菌株干粉發(fā)酵劑與普通酸奶干粉發(fā)酵劑的接種比例為1:1 (W/W，質(zhì)量分?jǐn)?shù)）。
[0020] 所述方法中，普通酸奶干粉發(fā)酵劑為市售保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌的混合菌 粉。
[0021] 附圖中，應(yīng)用干酪乳桿菌J1(Lactobacilluscasei)Jl和普通酸奶干粉發(fā)酵劑生 產(chǎn)益生菌酸奶工藝流程，包括下列步驟：
[0022] (1)原料乳：制作酸奶的原料乳要求不含抗生素和消毒藥，菌數(shù)低于1〇4個/mL。
[0023] (2)凈化；W離屯、機除去牛乳中的白細(xì)胞和其他肉眼可見的雜質(zhì)。
[0024] (3)標(biāo)準(zhǔn)化；原料乳的主要成分指標(biāo)應(yīng)符合食品衛(wèi)生國家標(biāo)準(zhǔn)GB5408-85。其總 干物質(zhì)應(yīng)不低于11. 5%，脂肪含量1.0%~3. 2%。
[002引 （4)預(yù)熱、配料和過濾：將原料乳加熱至60°C左右，加入5%~8% (W/V，質(zhì)量體積 比濃度）的庶糖，溶解后過濾除雜。
[002引 妨均質(zhì)；在均質(zhì)機中于8~lOMPa壓力下對預(yù)熱的原料乳進行均質(zhì)處理。
[0027](6)殺菌；將原料乳加熱至90~95°C，保溫5~lOmin。
[0028](7)冷卻；經(jīng)殺菌后的原料乳迅速冷卻至37~43°C，待接種。
[002引 做接種；干酪乳桿菌J1菌株干粉發(fā)酵劑接種量為1.0%。（W/V，質(zhì)量體積比濃 度），普通酸奶干粉發(fā)酵劑的接種量為1. 0%。（W/V，質(zhì)量體積比濃度），干酪乳桿菌J1菌株 干粉發(fā)酵劑與普通酸奶干粉發(fā)酵劑的接種比例為1:1 (W/W，質(zhì)量分?jǐn)?shù)）。
[0030] (9)分裝；分裝于塑料小容器的操作應(yīng)在無菌室中快速進行。
[0031] (10)保溫發(fā)酵；將塑料小容器置于發(fā)酵室中保持發(fā)酵溫度37~43°C，發(fā)酵時間為 6 ~3h。
[003引 山）冷卻；從發(fā)酵室取出，冷卻至1(TC臥下。
[003引冷藏與后熟；經(jīng)冷卻處理的酸奶，貶藏于0~5°C冷藏室中保存，直至飲用。 [0034] 1、利用降膽固醇的干酪乳桿菌J1在益生菌酸奶中應(yīng)用實驗
[00巧](1)、干酪乳桿菌J1干粉發(fā)酵劑添加量對酸奶后酸化的影響
[0036] 在普通酸奶干粉發(fā)酵劑接種量為1. 0%。的前提下，干酪乳桿菌J1干粉發(fā)酵劑添加 量分別為1. 〇%。、1. 5%。、2. 0%。，經(jīng)過37~43°C發(fā)酵6~化后，用0.Imol/LNaOH溶液測定 干酪乳桿菌J1干粉發(fā)酵劑添加量為1. 〇%。、1. 5%。、2. 0%。貶藏至第ld、W、l如、21d的酸奶酸 度，并W未添加干酪乳桿菌J1干粉發(fā)酵劑的普通酸奶為對照組，單位W吉爾涅耳度（°T) 表不，結(jié)果見表1。
[0037] 表1不同干酪乳桿菌J1干粉發(fā)酵劑添加量對酸奶后酸化的影響
[0038]
【主權(quán)項】
1. 一種降低膽固醇的干酪乳桿菌（Lactobacilluscasei)Jl，分離普通家庭的藏靈葫 中，具有優(yōu)異的產(chǎn)膽鹽水解酶及耐受胃腸道逆環(huán)境特性，可以調(diào)節(jié)腸道菌群的平衡，并有降 低血清膽固醇等益生保健功效，該菌株已于2006年9月11日保藏于中國微生物菌種保藏 管理委員會普通微生物中心，保藏號：CGMCCNo. 1808。
2. -種利用如權(quán)利要求1所述的降低膽固醇的干酪乳桿菌（Lactobacilluscasei)Jl 生產(chǎn)益生菌酸奶的方法，其特征在于：發(fā)酵溫度為37~43°C，發(fā)酵時間為6~3h，蔗糖添加 量為5%~8%，益生干酪乳桿菌Jl菌株干粉發(fā)酵劑接種量為1 %。，普通酸奶干粉發(fā)酵劑的 接種量為1%。，干酪乳桿菌Jl菌株干粉發(fā)酵劑與普通酸奶干粉發(fā)酵劑的接種比例為1:1。
3. -種如權(quán)利要求2所述的利用降低膽固醇的干酪乳桿菌（Lactobacilluscasei)Jl 生產(chǎn)益生菌酸奶的方法，其特征在于：干酪乳桿菌Jl益生菌酸奶，經(jīng)動物實驗證實具有良 好的降低血清膽固醇功效，可作為功能食品開發(fā)應(yīng)用。
【專利摘要】一種降低膽固醇干酪乳桿菌(Lactobacillus casei)J1。技術(shù)方案是：干酪乳桿菌(Lactobacillus casei J1)分離篩選自普通家庭的藏靈菇(又稱開菲爾粒)，并已于2006年9月11日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其保藏號為：CGMCC No.1808。本發(fā)明還公開了利用干酪乳桿菌(Lactobacillus casei)J1生產(chǎn)益生菌酸奶的方法。在不改變普通酸奶發(fā)酵工藝基礎(chǔ)上，既可利用J1菌株產(chǎn)膽鹽水解酶特性制備降低血清膽固醇的酸奶，又解決了酸奶乳清析出問題。本發(fā)明制作的益生菌酸奶的發(fā)酵工藝簡單，發(fā)酵周期短，成本較低，適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。CGMCC No. 180820060911
【IPC分類】C12N1-20, A23C9-123, C12R1-245
【公開號】CN104774783
【申請?zhí)枴緾N201510090444
【發(fā)明人】白永強, 劉慧 , 張紅星, 高鵬飛, 熊利霞, 張晶, 謝遠(yuǎn)紅, 高秀芝, 金君華
【申請人】北京和美科盛生物技術(shù)有限公司
【公開日】2015年7月15日
【申請日】2015年2月28日