專(zhuān)利名稱：一種低分子量麥谷蛋白亞基基因及其表達(dá)載體和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物基因工程技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及到一種低分子量麥谷蛋白亞基基因和其編碼的蛋白。
背景技術(shù)：
小麥?zhǔn)鞘澜缟显耘嗝娣e最大、種植最廣泛的三大主要糧食作物之一。小麥面粉所形成的面團(tuán)因其獨(dú)特的粘彈性和延展性可以被加工成各種面食，包括面包、蛋糕、面條和餅干等。而小麥面團(tuán)這種獨(dú)特的特性正是由于其種子中的儲(chǔ)藏蛋白所引起的。小麥中的儲(chǔ)藏蛋白主要分為麥谷蛋白和醇溶蛋白，而麥谷蛋白可以根據(jù)分子量大小進(jìn)一步分為高分子量麥谷蛋白亞基(high-molecular-weight glutenin subunits, HMW-GS)和低分子量麥谷蛋白亞基(low-molecular-weight glutenin subunits, LMW-GS)。研究表明，LMW-GS 對(duì)面團(tuán)的粘彈性起作用，并進(jìn)而影響到小麥的食品加工品質(zhì)，因此對(duì)這類(lèi)蛋白進(jìn)行基因克隆、多樣性研究、功能研究對(duì)改良小麥品質(zhì)具有重要意義。低分子量麥谷蛋白亞基基因位于小麥第一部分同源染色體短臂上的G1U-A3，Glu-B3，Glu-D3 位點(diǎn)上(D，Ovidio and Masci2004 ；Dong et al.2010)，并且每個(gè)位點(diǎn)上所表達(dá)的基因不止 一個(gè)。于是，盡管對(duì)于普通小麥中確切的LMW-GS基因拷貝數(shù)并不清楚，研究者運(yùn)用多種技術(shù)估計(jì)LMW-GS拷貝數(shù)在10-20個(gè)到30-40個(gè)之間(Cassidy et al.1998 ；Huang and Cloutier2008 ；Zhang et al.2011) LMW-GS 的蛋白質(zhì)根據(jù)其成熟肽的首個(gè)氨基酸分類(lèi)，可以分為L(zhǎng)MW-m、LMff-1和LMW_s三類(lèi)，對(duì)應(yīng)的首個(gè)氨基酸分別是(甲硫氨酸、異亮氨酸和絲氨酸)(Shewry et al.2009)。而根據(jù)目前克隆到的超過(guò)300條LMW-GS的基因序列，其蛋白結(jié)構(gòu)上可以分為以下幾個(gè)結(jié)構(gòu)區(qū):由20個(gè)氨基酸組成的信號(hào)肽、13個(gè)氨基酸組成的N端保守區(qū)(LMW-1類(lèi)型的LMW-GS不含此區(qū)域)、N端重復(fù)區(qū)、C端半胱氨酸富集區(qū)、C端谷氨酰胺富集區(qū)和C端保守區(qū)(D’ Ovidio and Masci2004)。苑科夫斯基小麥(Triticum zhukovskyi)是小麥屬的一個(gè)六倍體種,其染色體數(shù)為2n = 6x = 42，染色體組為AAAAGG。這一類(lèi)小麥的儲(chǔ)藏蛋白的多樣性研究和新基因發(fā)掘都鮮有報(bào)道，因此從茹科夫斯基小麥中克隆儲(chǔ)藏蛋白基因并鑒定這些基因?qū)τ谛←溂庸て焚|(zhì)的作用對(duì)小麥品質(zhì)改良具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的任務(wù)在于提供一種DNA分子及其編碼的蛋白質(zhì)。本發(fā)明的另一個(gè)任務(wù)是提供含有這種DNA分子的重組表達(dá)載體和工程菌，用以獲得本發(fā)明提供的這種DNA分子編碼的蛋白質(zhì)。實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的具體方案是:本發(fā)明提供的這種DNA分子的核苷酸序列為序列表中序列I所示的核苷酸序列或與序列表中序列I所示的核苷酸序列互補(bǔ)的核苷酸序列，本發(fā)明提供的這種DNA分子編碼的蛋白質(zhì)的氨基酸序列為序列表中序列2所示的氨基酸序列，序列表中序列2所示的氨基酸序列經(jīng)增加、缺失或替換一個(gè)或多個(gè)氨基酸且具有同等活性的氨基酸序列也屬于本發(fā)明的范圍。本發(fā)明提供的這種DNA分子，是利用PCR方法從茹科夫斯基小麥品種Zhl (Triticum zhukovskyi)中克隆到一種低分子量麥谷蛋白亞基基因，命名為T(mén)zLMW-12 (其中“Tz”為物種名縮寫(xiě)，“LMW”為基因家族縮寫(xiě)，“i”表示該基因?qū)儆贚MW-GS家族i類(lèi)基因，“2”為本課題組從茹科夫斯基小麥中克隆到的第二條LMW-GS基因，故此命名)。利用TzLMW-12基因的大腸桿菌表達(dá)載體可以大量生產(chǎn)該基因所表達(dá)的蛋白質(zhì)，提純的該蛋白摻入面粉中可以顯著改善面粉的揉混特性，增加面團(tuán)的耐揉性和穩(wěn)定性。本發(fā)明提供的茹科夫斯基小麥低分子量麥谷蛋白亞基基因在序列上與已報(bào)道的其他低分子量麥谷蛋白亞基家族成員存在序列差異，是小麥屬作物中重要的基因資源。本發(fā)明中，TzLMW-12基因所編碼的蛋白含有9個(gè)半胱氨酸殘基(通常LLMW-GS蛋白家族成員都含有8個(gè)半胱氨酸殘基)；通過(guò)構(gòu)建該基因的大腸桿菌表達(dá)載體，在大腸桿菌中表達(dá)并純化出來(lái)的該蛋白摻入面粉可明顯改善其揉混特性，增加面團(tuán)的耐揉性和穩(wěn)定性，具有較大應(yīng)用價(jià)值。本發(fā)明以茹科夫斯基小麥品種Zhl總DNA為模板，根據(jù)NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)(http://www.ncb1.nlm.nih.gov/nucleotide/)中已知的低分子量麥谷蛋白亞基編碼基因5’和3’端的保守片段設(shè)計(jì)引物，利用PCR和分子克隆技術(shù)分離栽培二粒小麥中的低分子量麥谷蛋白亞基基因，得到核苷酸序列如SEQ ID N0.1的基因。將該基因序列與NCBI上已知的LMW-GS編碼基因進(jìn)行序列比對(duì)并分析其序列中存在的差異，分析結(jié)果表明我們克隆到一個(gè)新的低分子量麥谷蛋白亞基基因，命名為T(mén)zLMW-12。該基因全長(zhǎng)837bp，不含內(nèi)含子。編碼一條由277個(gè)氨基酸殘基組成的蛋白質(zhì)，預(yù)測(cè)該蛋白的分子量為29.6kDa，其氨基酸序列如SEQ ID N0.2所示。TzLMW_i2所編碼的蛋白質(zhì)屬于低分子量麥谷蛋白亞基家 族中的i類(lèi)，它具有i類(lèi)LMW-GS的典型序列特征，即蛋白質(zhì)的N端重復(fù)區(qū)的氨基酸序列以“ISQQQQ-”為起始(LMW-GS蛋白家族成員分類(lèi)參見(jiàn)D' Ovidio R 和 Masci S2004) [D' Ovidio R, Masci S.2004.The 1w-moIecuIar-weightglutenin subunits of wheat gluten.J Cereal Sci，39:321-339.]。TzLMW_i2 所編碼的蛋白質(zhì)由以下結(jié)構(gòu)分區(qū)組成:20個(gè)氨基酸組成的信號(hào)肽(signal peptide),無(wú)N端保守區(qū)(N-conservedregion)；83個(gè)氨基酸組成的N端重復(fù)區(qū)(N-repetitive region)；75個(gè)氨基酸組成的C端半胱氨酸富集區(qū)(Cysteine-rich region)；52個(gè)氨基酸組成的C端谷氨酰胺富集區(qū)(Glutamine-rich region)；47個(gè)氨基酸組成的C端保守區(qū)(C-conserved region)。該蛋白含有9個(gè)半胱氨酸，其中C端半胱氨酸富集區(qū)7個(gè)(這與前人文獻(xiàn)中所報(bào)道的6個(gè)半胱氨酸殘基存在明顯差別，這一差別由TzLMW-12基因在該區(qū)域的基因突變?cè)斐?，C端谷氨酰胺富集區(qū)I個(gè)，C端保守區(qū)I個(gè)。前人研究表明在C端半胱氨酸富集區(qū)含有額外的半胱氨酸殘基(導(dǎo)致該區(qū)域含有6-7個(gè)半胱氨酸，全蛋白序列中含有9個(gè)半胱氨酸殘基)可能導(dǎo)致LMW-GS蛋白在小麥儲(chǔ)藏蛋白網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)中形成更多的二硫鍵，因而使這樣的LMW-GS蛋白對(duì)小麥面粉品質(zhì)改良起作用(Xu et al.2006) [Xu H，Wang RJ, et al.2006，F(xiàn)unctional properties of a new 1w-molecular~weight glutenin subunit gene froma bread wheat cultivar.Theor Appl Genet，113:1295-1303.]。應(yīng)該明確的是，本領(lǐng)域技術(shù)人員可根據(jù)本發(fā)明公開(kāi)的氨基酸序列，在不影響其蛋白生物活性的前提下，對(duì)其實(shí)施取代、缺失和/或增加一個(gè)或多個(gè)氨基酸，蛋白質(zhì)序列比對(duì)同源性在98%以上，所得到所述蛋白的突變體序列。因此，本發(fā)明，還包括對(duì)SEQ ID N0.2所示氨基酸序列經(jīng)取代、缺失和/或增加一個(gè)或多個(gè)氨基酸，得到的高同源性且具有生物活性的衍生蛋白。此外，應(yīng)當(dāng)理解，鑒于密碼子兼并性及物種具有密碼子偏好性的特點(diǎn)，本領(lǐng)域技術(shù)人員，可以根據(jù)需要使用適合特定物種表達(dá)的密碼子。本發(fā)明的基因和蛋白質(zhì)既可以從茹科夫斯基小麥品種Zhl中克隆得到，或者通過(guò)序列化學(xué)合成方法得到。本發(fā)明的另一方面涉及重組表達(dá)載體，其特征在于所述表達(dá)載體含有本發(fā)明所述TzLMW-12基因的核苷酸序列，所述重組表達(dá)載體可以通過(guò)本領(lǐng)域公知的分子克隆實(shí)驗(yàn)技術(shù)將上述核苷酸序列插入表達(dá)載體而得到。本發(fā)明中所述的表達(dá)載體是指現(xiàn)有技術(shù)中已知的、能夠在大腸桿菌和酵母菌中進(jìn)行表達(dá)的任何載體，適于構(gòu)建本發(fā)明所述的表達(dá)載體包括但不限于，例如:pET、pCold、pEASY等。本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，所述的表達(dá)載體優(yōu)選pET32-tzLMW表達(dá)載體?？蓪⒈景l(fā)明基因連接至表達(dá)載體啟動(dòng)子下游，構(gòu)建能夠表達(dá)該蛋白的重組表達(dá)載體，進(jìn)而可以通過(guò)遺傳轉(zhuǎn)化的方法，將所述表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌或酵母菌中，得到轉(zhuǎn)TzLMW-12基因的轉(zhuǎn)化體。通過(guò)本領(lǐng)域公知的方法，可在大腸桿菌或酵母菌中大量表達(dá)、純化TzLMW-12基因所編碼的蛋白質(zhì)。該蛋白摻入面粉可以提高面粉的加工品質(zhì)，主要體現(xiàn)在面團(tuán)的耐揉性和穩(wěn)定性的增加。將本發(fā)明所述TzLMW-12基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌，誘導(dǎo)大腸桿菌轉(zhuǎn)化體大量表達(dá)TzLMW-12編碼蛋白，純化的TzLMW-12蛋白摻入面粉后，經(jīng)揉混儀檢測(cè)(小麥面粉加工品質(zhì)檢測(cè)領(lǐng)域?qū)I(yè)儀器，Mixograph)，面團(tuán)的耐揉性和穩(wěn)定性較未摻入該蛋白的面粉顯著增 加。面團(tuán)的耐揉性和穩(wěn)定性對(duì)面食的制作，尤其是面包和糕點(diǎn)的焙烤有重要作用，是評(píng)價(jià)面粉品質(zhì)優(yōu)劣的重要指標(biāo)之一。這說(shuō)明本發(fā)明所述蛋白對(duì)小麥面粉揉混品質(zhì)改良有應(yīng)用價(jià)值。


圖1:本圖說(shuō)明用引物(見(jiàn)實(shí)施例1)可以成功從茹科夫斯基小麥的基因組DNA中PCR擴(kuò)增得到低分子量麥谷蛋白亞基家族成員TzLMW-12基因。泳道M為Marker II (具體條帶大小參見(jiàn)圖1);泳道I為以茹科夫斯基小麥基因組DNA為模板的PCR結(jié)果；泳道2為陰性對(duì)照。圖2:TzLMW-12與其他i類(lèi)低分子量麥谷蛋白亞基家族成員的氨基酸序列的比對(duì)結(jié)果，該圖說(shuō)明本發(fā)明所述的TzLMW-12基因編碼一個(gè)i類(lèi)低分子量麥谷蛋白亞基，其表達(dá)的蛋白與NCBI GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中已知的其他i類(lèi)低分子量麥谷蛋白亞基家族成員高度同源，但最大區(qū)別在于本發(fā)明所述蛋白在半胱氨酸富集區(qū)含有一個(gè)額外的半胱氨酸(見(jiàn)紅色箭頭指示)。用來(lái)與TzLMW-12基因編碼蛋白的進(jìn)行序列比對(duì)的i類(lèi)低分子量麥谷蛋白亞基的 NCBI accession 號(hào)碼為 ACT98422、ACT98426、AAS10192 和 AFH74361 (詳見(jiàn)實(shí)施例 2)。圖3:PET32-tzLMW載體酶切和PCR鑒定結(jié)果，該圖說(shuō)明通過(guò)限制性酶切和PCR鑒定方法(詳見(jiàn)實(shí)施例3)均證明該基因已經(jīng)成功將TzLMW-12基因連入大腸桿菌表達(dá)載體。圖3A為T(mén)zLMW-12原核表達(dá)載體酶切鑒定結(jié)果，泳道Ml為Marker IV (具體條帶大小參見(jiàn)圖3A)，泳道I為未酶切的pET32-tzLMW載體，泳道2為BamH I和HindIII雙酶切的pET32-tzLMW載體，泳道3為BamH I單酶切的pET32_tzLMW載體；泳道M2為MarkerII (具體條帶大小參見(jiàn)圖3B)，泳道4-6均為pET32-tzLMW載體PCR鑒定結(jié)果，泳道7為陰性對(duì)照。圖4:大腸桿菌中表達(dá)的TzLMW_i2基因編碼蛋白以及從大腸桿菌中純化的TzLMW-12基因編碼蛋白(詳見(jiàn)實(shí)施例4)。該圖結(jié)果說(shuō)明采用本領(lǐng)域公知的遺傳轉(zhuǎn)化方法可將pET32-tzLMW載體成功導(dǎo)入大腸桿菌(菌株BL21)，并能夠成功大量表達(dá)TzLMW_i2蛋白，而且通過(guò)常規(guī)的N1-NTA柱純化方法可以將蛋白從大腸桿菌表達(dá)的總蛋白中成功提純出來(lái)。圖4A為從轉(zhuǎn)入pET32-tzLMW載體的大腸桿菌中誘導(dǎo)表達(dá)的TzLMW_i2基因編碼蛋白，泳道M為蛋白質(zhì)Marker (具體條帶大小參見(jiàn)圖4A)，泳道I為未經(jīng)IPTG誘導(dǎo)的大腸桿菌總蛋白；泳道2為經(jīng)IPTG誘導(dǎo)的大腸桿菌總蛋白，其中位于約50kDa處的蛋白條帶為大腸桿菌表達(dá)TzLMW-12蛋白(見(jiàn)箭頭指示)。圖4B為經(jīng)過(guò)N1-NTA柱純化得到的TzLMW_i2蛋白(見(jiàn)箭頭指示)。圖5:該柱狀圖顯 示的是，經(jīng)過(guò)純化的TzLMW_i2蛋白摻入面粉后，揉混儀(Mixograph)所檢測(cè)的揉混曲線右側(cè)斜率(right slope after peak,RPS)較對(duì)照有顯著降低，揉混曲線8分鐘帶寬(time X = 8min wdith,Txff)均有顯著提高，曲線峰值高度(peakvalue, PV)未見(jiàn)顯著增加。這些說(shuō)明TzLMW_i2蛋白通過(guò)摻入面粉的方式可以改善小麥面粉的揉混特性，增強(qiáng)面團(tuán)的耐揉性和穩(wěn)定性(詳見(jiàn)實(shí)施例5)。圖中，對(duì)照(control)用白色柱(標(biāo)注為“I”)表示，為不添加任何蛋白質(zhì)的面粉的揉混儀檢測(cè)參數(shù)；公認(rèn)的對(duì)面粉揉混特性貢獻(xiàn)較小的蛋白——高分子量麥谷蛋白亞基(HMW-GS)家族成員Dx2用作負(fù)對(duì)照(每IOg面粉中添加50mg)，用灰色柱(標(biāo)注為“2”)表示；公認(rèn)的對(duì)面粉揉混特性貢獻(xiàn)較大的蛋白——高分子量麥谷蛋白亞基(HMW-GS)家族成員Bxl4用作正對(duì)照(每IOg面粉中添加50mg)，用黑色柱(標(biāo)注為“3”)表示；TzLMW-12基因編碼蛋白添加面粉后的揉混儀檢測(cè)參數(shù)分別用淺紅色(標(biāo)注為“4”)(每IOg面粉中添加50mg)和深紅色(標(biāo)注為“5”)(每IOg面粉中添加IOOmg)表示。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。在不背離本發(fā)明精神和實(shí)質(zhì)的情況下，對(duì)本發(fā)明方法、步驟或條件所做的修改或替換，均屬于本發(fā)明的范圍。若未特別指明，實(shí)施例中所用的技術(shù)手段為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)手段。實(shí)施例1茹科夫斯基小麥TzLMW_i2基因的分離和鑒定1、提取基因組DNA采用以CTAB法為原理的植物基因組DNA提取試劑盒(購(gòu)自天根生化科技(北京)有限公司)，從小麥葉片(IOOmg新鮮葉片組織)中提取基因組DNA，所有操作均按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。2、PCR引物設(shè)計(jì)及擴(kuò)增:根據(jù)已知的來(lái)自NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)的低分子量麥谷蛋白亞基基因序列，分析其編碼基因的5’和3’的保守區(qū)域設(shè)計(jì)了以下引物:上游引物:ATGAAGACCTTCCTCGTCTTTGCCCT下游引物:TCAGTAGACACCAACTCCGATG以茹科夫斯基小麥的基因組DNA為模板擴(kuò)增其中的低分子量麥谷蛋白亞基基因的PCR反應(yīng)體系如下:
DNA100 ng
dNTPs100 μΜ
引物ISpM
引物25ρΜ
Taq酶(高保真) IU IOxPCR 緩沖液 2.5 μL
ddH20 加至終體積25μΕPCR反應(yīng)程序:(I) 94°C 5分鐘(2) 94 0C I 分鐘(3) 60 0C I 分鐘(4) 720C 1.5 分鐘(5)重復(fù)⑵至⑷步35個(gè)循環(huán)；(6) 72 0C 10 分鐘PCR反應(yīng)程序在Tl型PCR儀(Biometra，德國(guó))中進(jìn)行。擴(kuò)增產(chǎn)物在I %瓊脂糖凝膠上分離，120V電壓恒壓電泳30分鐘，并在凝膠成像系統(tǒng)中觀察結(jié)果并保存圖像。3、PCR產(chǎn)物回收和純化從凝膠中回收PCR產(chǎn)物采用瓊脂糖凝膠回收試劑盒(天根生化科技(北京)有限公司)完成，所有操作均按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。4、連接和轉(zhuǎn)化將回收的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物連接到測(cè)序載體上的過(guò)程采用PCR產(chǎn)物克隆專(zhuān)用載體和配套試劑盒(PMD-18T載體和配套試劑盒，寶生物工程(大連)有限公司)完成，連接反應(yīng)在16°C下進(jìn)行16小時(shí)。反應(yīng)體系如下:pMD-18T 載體 0.5 μ LSolution I 7 μ LPCR 回收產(chǎn)物 7.5yL完成連接反應(yīng)后將整個(gè)連接體系(15 μ L)轉(zhuǎn)化入大腸桿菌Τ0Ρ10菌株的感受態(tài)細(xì)胞(天根生化科技(北京)有限公司)中，轉(zhuǎn)化方法按照感受態(tài)細(xì)胞生產(chǎn)商的標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行。
5、陽(yáng)性克隆的篩選挑取平板上生長(zhǎng)良好的白色菌落，在含有氨芐青霉素(50μ g/mL)的LB液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，37°C培養(yǎng)12小時(shí)，并從混濁的菌液中抽提質(zhì)粒。質(zhì)粒抽提采用質(zhì)粒小量提取試劑盒(天根生化科技(北京)有限公司)，按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。以抽提的質(zhì)粒為PCR模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，反應(yīng)體系如下:
權(quán)利要求
1.一種DNA分子，由序列表中序列I所示的核苷酸序列或與序列表中序列I所示的核苷酸序列互補(bǔ)的核苷酸序列構(gòu)成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的DNA分子，其特征在于，所述DNA分子的上游和下游還分別包括一個(gè)酶切位點(diǎn)，所述DNA分子上游的酶切位點(diǎn)為BamH I酶切位點(diǎn)，所述DNA分子下游的酶切位點(diǎn)為HindIII酶切位點(diǎn)。
3.權(quán)利要求1所述的DNA分子編碼的蛋白質(zhì)。
4.一種蛋白質(zhì)，由序列表中序列2所示的氨基酸序列構(gòu)成，或由序列表中序列2所示的氨基酸序列經(jīng)增加、缺失或替換一個(gè)或多個(gè)氨基酸所形成的且具有同等活性的氨基酸序列構(gòu)成。
5.—種重組表達(dá)載體，由含有權(quán)利要求1或2所述的DNA分子的表達(dá)載體構(gòu)成。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的重組表達(dá)載體，其特征在于，所述的表達(dá)載體為能夠在大腸桿菌或酵母菌中進(jìn)行表達(dá)的表達(dá)載體。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的重組表達(dá)載體，其特征在于，所述的能夠在大腸桿菌或酵母菌中進(jìn)行表達(dá)的表達(dá)載體是PET、pCold或pEASY。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的重組表達(dá)載體，其特征在于，所述的表達(dá)載體pET是pET32。
9.含有權(quán)利要求5至8中任一項(xiàng)所述的重組表達(dá)載體的工程菌。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的工程菌，其特征在于，所述的工程菌為大腸桿菌或酵母菌。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的工程菌，其特征在于，所述的作為工程菌的大腸桿菌為大腸桿菌BL21。
12.權(quán)利要求3或4所述的蛋白質(zhì)在增加面粉耐揉性 和/或穩(wěn)定性中的應(yīng)用。
13.含有權(quán)利要求3或4所述的蛋白質(zhì)的面粉。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種來(lái)自茹科夫斯基小麥的低分子量麥谷蛋白亞基基因(名為T(mén)zLMW-i2)及其編碼的蛋白質(zhì)，構(gòu)建了含TzLMW-i2基因的大腸桿菌表達(dá)載體，將該重組載體導(dǎo)入大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)純化獲得該基因編碼的蛋白質(zhì)，將該蛋白質(zhì)添加到面粉中能改良小麥面粉揉混品質(zhì)，強(qiáng)面團(tuán)的耐揉性和穩(wěn)定性。
文檔編號(hào)C12N15/70GK103233014SQ201310100260
公開(kāi)日2013年8月7日 申請(qǐng)日期2013年3月27日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月27日
發(fā)明者何光源, 楊廣笑, 李引, 王瓊, 肖欣, 李小燕, 孫福生 申請(qǐng)人:華中科技大學(xué)