專利名稱：一種頭孢菌素c的發(fā)酵方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及頭孢菌素C的發(fā)酵方法。
背景技術(shù)：
頭孢菌素C由頂頭孢霉(Cephalosporium acremonium)產(chǎn)生,是繼青霉素之后又一重要的內(nèi)酰胺抗生素，其結(jié)構(gòu)與青霉素的結(jié)構(gòu)相似，有一?；鶄?cè)鏈與一雙環(huán)母核上的氨基相接，與青霉素一樣都具有一個(gè)四元內(nèi)酰胺環(huán)，但頭孢菌素C具有六元二輕噻嗪環(huán)，代替了青霉素特征五元噻唑環(huán)。頭孢菌素C的分子式C16H21O8N3S,分子量為415. 4，結(jié)構(gòu)式
為
權(quán)利要求
1.一種頭孢菌素C的發(fā)酵方法，其特征在于它包括如下步驟 (1)取頂頭抱霉，制備一級(jí)種子、_■級(jí)種子； (2)取步驟(I)制備的二級(jí)種子，接種至頂頭孢霉發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵，在發(fā)酵過程的以下時(shí)間段內(nèi)補(bǔ)入甲硫氨酸和硫酸銨，工藝如下 甲硫氨酸60-80h,流加 3-7g/L h ；80-120h,流加 5_9g/L h ；120-140h,流加 4_8g/L h ;硫酸銨50-90h,流加 l-5g/L h ;90_120h,流加 3_7g/L h ；120-140h,流加 4_6g/L h ； (3)將步驟(2)所得發(fā)酵液過濾，得上清，分離純化，即得頭孢菌素C。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于步驟(I)所述頂頭孢霉是保藏號(hào)為ATCC36225的頂頭孢霉。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于所述步驟(2)中，補(bǔ)入甲硫氨酸的工藝為60-80h，流加 4-6g/L *h ;80-120h，流加 6_8g/L h ; 120_140h，流加 5_7g/L h ;補(bǔ)入硫酸銨的工藝為50-90h，流加 2-4g/L h ;90-120h，流加 4_6g/L h ;120_140h，流加 3_5g/L h。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述補(bǔ)入甲硫氨酸的工藝為60-80h，流加6g/L h，80-120h，流加8g/L h，120_140h，流力口 7g/L h ;所述補(bǔ)入硫酸銨的工藝為50-90h，流加 4g/L h，90-120h，流加 6g/L h，120_140h，流加 5g/L h。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述補(bǔ)入甲硫氨酸的工藝為60-80h，流加5g/L h，80-120h，流加7g/L h，120_140h，流力口 6g/L h ;所述補(bǔ)入硫酸銨的工藝為50-90h，流加 3g/L h，90-120h，流加 5g/L h，120_140h，流加 4g/L h。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于步驟(2)所述發(fā)酵的條件是發(fā)酵溫度0-40h 為 28°C，40-140h 為 24-25°C ;發(fā)酵 pH 為 5. 5-5.8 ;發(fā)酵時(shí)間140h。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于步驟(2)所述發(fā)酵培養(yǎng)基包含如下成分玉米漿40-75重量份、花生粉10-20重量份、葡萄糖5-12重量份、水解淀粉20-30重量份、甲硫氨酸3-8重量份、植物油50-70體積份、消沫劑I. 5-3體積份、MgSO4 2-5重量份、(NH4) 2S048-15 重量份、FeSO4O. 05-0. I 重量份、MnSO4 0. 01-0. 04 重量份、ZnSO4 0. 01-0. 04 重量份、CuSO4O. 01-0. 04 重量份、CaCO3 5-10 重量份。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于所述植物油為大豆油或者玉米油。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種頭孢菌素C的發(fā)酵方法(1)取頂頭孢霉，制備一級(jí)種子、二級(jí)種子；(2)取步驟(1)制備的二級(jí)種子，接種至頂頭孢霉發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵，在發(fā)酵過程的以下時(shí)間段內(nèi)補(bǔ)入甲硫氨酸和硫酸銨，甲硫氨酸60-80h，流加3-7g/L·h；80-120h，流加5-9g/L·h；120-140h，流加4-8g/L·h；硫酸銨50-90h，流加1-5g/L·h；90-120h，流加3-7g/L·h；120-140h，流加4-6g/L·h；(3)將步驟(2)所得發(fā)酵液過濾，得上清，分離純化，即可。本發(fā)明頭孢菌素C的發(fā)酵方法操作方便，制備的頭孢菌素C效價(jià)高，市場(chǎng)應(yīng)用前景良好。
文檔編號(hào)C12P35/06GK102808013SQ201210310800
公開日2012年12月5日 申請(qǐng)日期2012年8月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月28日
發(fā)明者楊勇, 鄧蕓, 黃海玉, 王利春, 劉思川, 梁隆, 程志鵬 申請(qǐng)人:伊犁川寧生物技術(shù)有限公司