專利名稱::來自短小芽孢桿菌的枯草桿菌蛋白酶以及含有所述新型枯草桿菌蛋白酶的洗滌劑和清潔劑的制作方法來自短小芽孢桿菌的枯草桿菌蛋白酶以及含有所述新型枯草桿菌蛋白酶的洗滌劑和清潔劑本發(fā)明涉及一種來自短小芽孢桿菌的枯草桿菌蛋白酶型的新型堿性蛋白酶,以及十分相關(guān)的蛋白質(zhì)及其衍生物。本發(fā)明還涉及含有這種枯草桿菌蛋白酶型的新型堿性蛋白酶、十分相關(guān)的蛋白質(zhì)及其衍生物的洗滌劑和清潔劑,它們在洗滌劑和清潔劑中相應(yīng)的洗滌和清潔方法及其應(yīng)用,還有其他可能的技術(shù)應(yīng)用。酶是洗滌劑和清潔劑中已知的活性成分。蛋白酶促使待清潔的物品(例如紡織品或硬質(zhì)表面)上基于蛋白質(zhì)的污物降解。最多在酶和各試劑的其他成分之間有協(xié)同效應(yīng)。洗滌劑蛋白酶的開發(fā)是基于天然形成的酶,優(yōu)選微生物形成的。所述酶通過基本上已知的誘變方法優(yōu)化,例如定點(diǎn)誘變、缺失、插入或與其他蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)部分融合或者通過其他修飾,應(yīng)用于洗滌劑和清潔劑中。在洗滌劑和清潔劑蛋白酶中,枯草桿菌蛋白酶由于其良好的酶學(xué)性質(zhì)(例如穩(wěn)定性或最適pH)而占有較高的地位。根據(jù)催化地活性氨基酸,將枯草桿菌蛋白酶型的蛋白酶(枯草桿菌酶,枯草桿菌蛋白酶,EC3.4.21.62),特別是枯草桿菌蛋白酶,劃歸為絲氨酸蛋白酶。它們由微生物(特別是由芽孢桿菌種)天然形成并分泌。它們起非特異性內(nèi)肽酶的作用,即水解在肽或蛋白質(zhì)內(nèi)部的任何酰胺鍵。其最適pH通常在明確的堿性范圍內(nèi)??梢哉业揭黄摷易宓木C述,例如在"SubtilisinEnzymes,"中,R.Siezen的文章"Subtilases:Subtilisin-likeproteases",第75-95頁,R.BottandC.Betzel編輯,NewYork,1996。枯草桿菌蛋白酶適合于許多可能的工業(yè)應(yīng)用,作為化妝品的成分,以及特別是作為洗滌劑或清潔劑的活性成分。最重要的枯草桿菌蛋白酶以及對于它們的進(jìn)一步工業(yè)開發(fā)最重要的策略列于下文??莶輻U菌蛋白酶BPN',其源于解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)禾口/或枯草芽孢桿菌(B.subtilis,),由Vasantha等(1984)在J.Bacteriol.,vol.159,第811-819頁禾口J.A.Wells等(1983)在NucleicAcidsResearch,vol.11,第7911-7925頁的文章可知??莶輻U菌蛋白酶BPN'充當(dāng)枯草桿菌蛋白酶的參照酶,特別是關(guān)于位置的編號(hào)。由E.L.Smith等(1968)在J.Biol.Chem.,vol.243,第2184-2191頁禾口Jacobs等(1985)在Nucl.Acids.Res"vol.13,第8913-8926頁的公開文獻(xiàn)中提出了蛋白酶枯草桿菌蛋白酶Carlsberg。其由地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)天然形成,并可以從美國紐約羅切斯特的GenencorInternational,Inc.公司(以商品名Maxatase)和從丹麥包威斯的NovozymesA/S公司(以商品名Alcalase)得到??莶輻U菌蛋白酶147和309由Novozymes公司以商品名Esperase和/或Savinas^銷售。它們最初從專利申請GB1243784中公開的芽孢桿菌菌株獲得。枯草桿菌蛋白酶DY最初由Nedkov等,1985在Biol.Chem.Hoppe-Seyler,vol.366,第421-430頁描述。已從芽孢桿菌菌株分離的另外的枯草桿菌蛋白酶型的蛋白酶描述在更近的專利申請WO03/054184和WO03/054185中。一種提高枯草桿菌蛋白酶洗滌性能的策略包括用其他氨基酸以隨機(jī)或定向方式置換已知分子中的個(gè)別氨基酸并檢驗(yàn)產(chǎn)生的變異體對洗滌性能的貢獻(xiàn)。某些氨基酸的交換或缺失也可能改良酶的變應(yīng)原性。12為了提高枯草桿菌蛋白酶的洗滌性能,可以實(shí)行將額外的氨基酸插入活性環(huán)的策略。該策略原則上應(yīng)適用于所有屬于亞類I-S1(真正的枯草桿菌蛋白酶)或亞類I-S2(強(qiáng)堿性枯草桿菌蛋白酶)中之一的枯草桿菌蛋白酶。另一種提高性能的策略包括改變分子的表面電荷和/或等電點(diǎn),從而改變它們與底物的相互作用。此外,還描述了分子電荷pH依賴性變異減少的點(diǎn)突變體。一種據(jù)說適合用在洗滌劑和清潔劑中的鑒別變異體的方法也源自該原理;在這種方法中,所有公開的變異體至少在103位有一個(gè)替換。通常,在103位有一個(gè)替換的變異體經(jīng)常記載在文獻(xiàn)中,可選擇地與許多其他可能的替換結(jié)合。提高在洗漆劑和清潔劑中性能的一種可選的可能性包括增加分子的疏水性,這可能對酶的穩(wěn)定性有影響。另一種調(diào)節(jié)蛋白酶效力的方法包括形成融合蛋白。例如,文獻(xiàn)中已經(jīng)描述了蛋白酶和一種抑制劑(例如鏈霉菌屬枯草桿菌蛋白酶抑制劑)的融合蛋白。另一種可能是例如偶聯(lián)到源自纖維素酶的纖維素結(jié)合區(qū)域(CBD)以增加底物臨近處的活化酶的濃度,或者偶聯(lián)多肽接頭然后是其聚合物以降低變應(yīng)原性和/或免疫原性。產(chǎn)生隨機(jī)氨基酸替換的方法可以基于例如噬菌體展示。酶開發(fā)的一個(gè)現(xiàn)代方向包括用隨機(jī)方法結(jié)合已知相關(guān)蛋白的成分,以形成具有以前未達(dá)到的性質(zhì)的新型酶。還在涵蓋性術(shù)語"重組"下聯(lián)合所述方法。這包括以下方法,例如StEP方法(Zhao等(1998),Nat.Biotechnol.,vol.16,第258-261頁)、隨機(jī)引物重組(Shao等(1998),NucleicAcidsRes.,vol.26,第681-683頁)、DNA改組(W.P.C.Stemmer(1994),Nature,vol.370,第389-391頁)或遞歸序列重組(RSR;WO98/27230,WO97/20078,WO95/22625)或RACHITT方法(Coco,W.M.等(2001),Nat.Biotechnol.,vol.19,第354-359頁)。關(guān)于所述方法的一篇綜述也在Powell等的文章"Directedevolutionandbiocatalysis"(2001),Angew.13Chem.,vol.113,第4068-4080頁中提供。另一種策略,特別是一種補(bǔ)充策略,包括提高各種蛋白酶的穩(wěn)定性,從而提高它們的效力。例如已經(jīng)描述用在化妝品中的蛋白酶通過偶聯(lián)聚合物的穩(wěn)定作用;以這種方式獲得了較好的皮膚耐受性。然而,利用定點(diǎn)誘變的穩(wěn)定作用特別對于洗滌劑和清潔劑更普遍。因此,蛋白酶例如在高溫時(shí)使用也可以被穩(wěn)定化,特別是通過用其他氨基酸殘基替換某些酪氨酸殘基。其他已描述的通過定點(diǎn)誘變用于穩(wěn)定作用的可能性包括如下方面,例如-用脯氨酸替換某些氨基酸殘基;-在分子表面上引入極性更強(qiáng)或電荷更多的基團(tuán);-增加金屬離子的結(jié)合,特別是通過鈣結(jié)合位點(diǎn)的誘變;-通過修飾或誘變阻斷自溶;-通過分析三維結(jié)構(gòu)確定與穩(wěn)定作用有關(guān)的位點(diǎn)。已知蛋白酶可以與a-淀粉酶和其他洗滌劑用酶(特別是脂肪酶)一起應(yīng)用,以提高洗滌性能和/或清潔性能。類似的,本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉蛋白酶在洗滌劑中與其他活性成分(例如漂白劑或去污劑)聯(lián)合的應(yīng)用。此外,已知一些已確定應(yīng)用在洗滌劑中的蛋白酶也適合用于美容目的或用于有機(jī)化學(xué)合成。本說明書介紹的各應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域:
需要具有不同性質(zhì)的蛋白酶,所述不同性質(zhì)例如關(guān)于反應(yīng)條件、穩(wěn)定性或底物特異性。相反,蛋白酶可能的工業(yè)應(yīng)用(例如在洗滌劑配方或清潔劑處方的情況下)依賴于其他因素,例如酶對高溫的穩(wěn)定性、對氧化劑的穩(wěn)定性、表面活性劑使其變性的穩(wěn)定性,折疊效應(yīng)或所需的與其他成分的協(xié)同作用。因此由于應(yīng)用領(lǐng)域的多樣性,對于可工業(yè)應(yīng)用的涉及較廣范圍的性質(zhì)(達(dá)到并包括性能上非常細(xì)微的區(qū)別)的蛋白酶仍有較高需求。這種需求的基礎(chǔ)通過新型蛋白酶而得到擴(kuò)展,反過來可進(jìn)一步以定向于具體應(yīng)用領(lǐng)域的方式開發(fā)所述新型蛋白酶。因此本發(fā)明的目的是發(fā)現(xiàn)另一種迄今未知的蛋白酶。野生型酶的特征應(yīng)優(yōu)選在于,當(dāng)其用在相關(guān)試劑中時(shí),至少接近于已確定用于此目的的酶。本說明書特別感興趣的是對洗滌劑或清潔劑性能的貢獻(xiàn)。本發(fā)明的其他目的可被認(rèn)為是提供蛋白酶,特別是枯草桿菌型的蛋白酶,其與以前技術(shù)比較穩(wěn)定性提高,所述穩(wěn)定性關(guān)于溫度影響、pH值波動(dòng)、變性劑或氧化劑、蛋白降解、高溫、酸性條件或堿性條件或者關(guān)于氧化還原比的改變。可能看到在降低免疫原性和/或降低變應(yīng)原作用方面的額外的目的。本發(fā)明另一個(gè)特殊的目的是發(fā)現(xiàn)在2CTC-6(TC的溫度下具有良好洗滌性能的蛋白酶,優(yōu)選與以前的技術(shù)公開的蛋白酶相比較洗滌性能提高的,特別是枯草桿菌蛋白酶型的蛋白酶。其他部分目的包括產(chǎn)生可用的編碼所述蛋白酶的核苷酸以及產(chǎn)生可用的載體、宿主細(xì)胞和可用來生產(chǎn)所述蛋白酶的生產(chǎn)方法。此外,應(yīng)該使得可以取得用于所述蛋白酶的相應(yīng)試劑(特別是洗滌劑和清潔劑)、相應(yīng)的洗滌和清潔方法以及相應(yīng)的可能應(yīng)用。最后,應(yīng)該限定因此發(fā)現(xiàn)的所述蛋白酶可能的技術(shù)應(yīng)用。通過枯草桿菌蛋白酶型的堿性蛋白酶實(shí)現(xiàn)了該目的,所述蛋白酶與序列表中給出的SEQIDNO.2從109位至383位的氨基酸序列有至少98.5%同一性和/或?qū)τ谒霭被嵝蛄凶疃嘤?個(gè)氨基酸位點(diǎn)的偏差。甚至更優(yōu)選與來自短小芽孢桿菌的新型堿性蛋白酶具有更大程度同一性的蛋白酶,即那些僅有2個(gè)或3個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差的蛋白酶,優(yōu)選僅有1個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差的,尤其最優(yōu)選的是來自短小芽孢桿菌的堿性蛋白酶本身。實(shí)現(xiàn)所述目的和/或?qū)崿F(xiàn)部分目的并藉此分離本發(fā)明主題的另外的方法包括核酸(所述核酸的序列與SEQIDNO.1中定義的核苷酸序列或編碼本發(fā)明蛋白酶的核苷酸序列十分相似)、相應(yīng)的載體、細(xì)胞和/或宿主細(xì)胞以及生產(chǎn)方法。此外,也可得到所述蛋白酶相應(yīng)的試劑(特別是洗滌劑和清潔劑)、相應(yīng)的洗滌和清潔方法和相應(yīng)的可能應(yīng)用。最后,限定了由此發(fā)現(xiàn)的所述蛋白酶可能的技術(shù)應(yīng)用。來自短小芽孢桿菌的堿性蛋白酶在洗滌劑和清潔劑中的應(yīng)用已經(jīng)是本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的。例如,在EP0572992中描述了來自短小芽孢桿菌的堿性蛋白酶在洗滌劑和清潔劑中的應(yīng)用。未給出其中所述的酶的蛋白質(zhì)序列。Pan等(CurrentMicrobiology49(2004),165-169)、Aoyama等(Microbiol.Immunol.44(5)(2000),389-393)、Huang等(CurrentMicrobiology46(2003,169-173)、Aoyama等(Appl.Microbiol.Biotechnol.53(2000),390-395)、Yasuda等(Appl.Microbiol.Biotechnol.51(1999),474-479)禾口Miyaji等(LettersinAppliedMicrobiology42(2006),242-247)的出版物應(yīng)視為最接近于本發(fā)明主題的現(xiàn)有技術(shù)。這些文件描述了具有序列Q6SIX5(Swiss-Prot)、Q9KWR4(Swiss-Prot)、Q5XPN0(Swiss-Prot)和/或Q2HXI3(Swiss-Prot)的短小芽孢桿菌蛋白酶的應(yīng)用,其與本發(fā)明的蛋白酶有非常高的同源性。己描述了作為一些所述蛋白酶可能應(yīng)用的皮革脫毛,因?yàn)檫@些蛋白酶膠原大量失活,因此能夠用于皮革脫毛而不會(huì)在處理中損壞皮革。提及豆乳和豆乳制品的酶處理,作為一種額外的可能應(yīng)用。已提及降解玉米醇溶蛋白(玉米種子中蛋白的主要成分),作為蛋白酶Q2HXI3的一種可能應(yīng)用。但這些文獻(xiàn)中并沒有公開這些酶在洗滌劑和清潔劑中的應(yīng)用。由DSMZ(DeutscheSammlungfUrMikroorganismenundZellkulturen[德國微生物細(xì)胞培養(yǎng)物保藏中心])鑒定了一種新型短小芽孢桿菌菌株,可從所述新型短小芽孢桿菌菌株的培養(yǎng)上清液得到天然形成的枯草桿菌蛋白酶型堿性蛋白酶,本發(fā)明是以其為基礎(chǔ)的,這一點(diǎn)可以根據(jù)實(shí)施例推斷。為了可重復(fù)性的目的,依照布達(dá)佩斯條約(BudapestTreaty),將含有本發(fā)明酶的核酸序列的質(zhì)粒保藏在DSMZ(德國微生物細(xì)胞培養(yǎng)物保藏中心,布倫瑞克),保藏編號(hào)DSM18097。本專利申請實(shí)行這樣的策略,即從天然產(chǎn)地發(fā)現(xiàn)形成蛋白酶的微生物和由此天然形成的盡可能滿足規(guī)定需要的酶。如本專利申請的實(shí)施例所述,己在來自短小芽孢桿菌的堿性蛋白酶中發(fā)現(xiàn)這種酶。如可以由德國微生物細(xì)胞培養(yǎng)物保藏中心(GermanCollectionofMicroorganismsandCellCultures)所完成的生化表征確定的,該菌株分泌蛋白水解活性。根據(jù)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳,其分子量27kD,等電點(diǎn)大于8.5(根據(jù)等電聚焦確定)。來自短小芽孢桿菌的新型本發(fā)明的堿性蛋白酶的核苷酸序列限定在本專利申請的序列表中SEQIDNO.1下。該核苷酸序列包括1152bp。源自其的氨基酸序列在SEQIDN0.2中給出。該氨基酸序列包括383個(gè)氨基酸,接著是終止密碼子。其中,成熟蛋白中可能不包含開始的108個(gè)氨基酸,那么可能會(huì)得到長度為275個(gè)氨基酸的成熟蛋白。將這些序列與從通常可得到的數(shù)據(jù)庫Swiss-Prot(GenevaBioinformatics(GeneBio)S.A.,Geneva,Switzerland;http:〃www.genebio.com/sprot.html)禾口GenBank(NationalCenterforBiotechnologyInformationNCBI,NationalInstitutesofHealth,Bethesda,MD,USA)中可得到的蛋白酶序列相比較,以確定同源性最高的蛋白質(zhì)。同源性的量度是同一性的百分比,可以例如根據(jù)D.J.LipmanandW.R.PearsoninScience227(1985),p.1435-1441提供的方法確定。這個(gè)值可以指完整蛋白質(zhì)或者指待確定的各個(gè)區(qū)域。類似地,另一個(gè)同源性術(shù)語還包括保守變異,即具有相似化學(xué)活性的氨基酸,因?yàn)榭紤]到它們通常在蛋白質(zhì)內(nèi)具有化學(xué)活性。就核酸來說,僅僅知道同一性的百分比。在DNA水平上,下述基因己被鑒定為與全基因最相似(l)來自短小芽孢桿菌(Swiss-Prot)的序列Q5XPN0,同一性94%,(2)來自短小芽孢桿菌(Swiss-Prot)的序列Q6SIX5,同一性91%,(3)來自短小芽孢桿菌(Swiss-Prot)的序列Q9KWR4,同一性91%,(4)來自短小芽孢桿菌(Swiss-Prot)的序列Q2HXI3,同一性91%。在編碼成熟蛋白的DNA水平上(l)來自短小芽孢桿菌(Swiss-Prot)的序列Q5XPN0,同一性95%,(2)來自短小芽孢桿菌(Swiss-Prot)的序列Q2HXI3,同一性91%,(3)來自短小芽孢桿菌(Swiss-Prot)的序列Q6SIX5,同一性90%,(4)來自短小芽孢桿菌(Swiss-Prot)的序列Q9KWR4,同一性90%。在整個(gè)前蛋白原的氨基酸水平上,以下是鑒定為最相似的(1)來自短小芽孢桿菌(Swiss-Prot)的序列Q2HXI3,同一性98%,禾口/或7個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差,(2)來自短小芽孢桿菌(Swiss-Prot)的序列Q9KWR4,同一性98%,和/或9個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差,(3)來自短小芽孢桿菌(Swiss-Prot)的序列Q6SIX5,同一性97%,禾卩/或10個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差,(4)來自短小芽孢桿菌(Swiss-Prot)的序列Q5XPN0,同一性97%,禾口/或11個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差。在成熟蛋白的氨基酸水平上,以下序列已被鑒定為最相似的(1)來自短小芽孢桿菌(Swiss-Prot)的序列Q2HXI3,同一性98%,和/或5個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差,(2)來自短小芽孢桿菌(Swiss-Prot)的序列Q6SIX5,同一性98%,和/或5個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差,(3)來自短小芽孢桿菌(Swiss-Prot)的序列Q9KWR4,同一性98%,和/或6個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差,(4)來自短小芽孢桿菌(Swiss-Prot)的序列Q5XPN0,同一性97%,禾口/或7個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差。根據(jù)與已顯示的其他枯草桿菌蛋白酶的可辨別的對應(yīng)和關(guān)系,將該堿性蛋白酶視為枯草桿菌蛋白酶。因此本發(fā)明的一個(gè)主題是任何多肽,特別是任何水解酶,尤其是任何枯草桿菌蛋白酶型的堿性蛋白酶,所述蛋白酶具有與SEQIDNO.2中提供的氨基酸序列至少98.5%同一性的氨基酸序列和/或與SEQIDNO.2中提供的氨基酸序列有最多6個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差。其中,氨基酸序列與SEQIDNO.2提供的氨基酸序列有至少99%同一性(特別是至少99.5%同一性)的多肽優(yōu)選性增加,禾tl/或與SEQIDNO.2中提供的氨基酸序列有最多5個(gè)或4個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差的多肽,特別是最多3個(gè)或2個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差,更優(yōu)選最多1個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差。具有根據(jù)SEQIDNO.2的氨基酸序列的蛋白質(zhì)是最優(yōu)選的??梢灶A(yù)期,它們的性質(zhì)與來自短小芽孢桿菌的本發(fā)明的堿性蛋白酶的性質(zhì)非常相似。如前所述,根據(jù)N-末端序列的比較,推測氨基酸1-108當(dāng)作前導(dǎo)肽,因此推測氨基酸1-51構(gòu)成信號(hào)肽,推測成熟蛋白根據(jù)SEQIDNO.2從109位延伸到383位。因此384位由終止密碼子移去,那么其確實(shí)不與任何氨基酸對應(yīng)。然而,關(guān)于編碼區(qū)末端的信息也可以視為氨基酸序列的重要組成部分,因此根據(jù)本發(fā)明在與成熟蛋白對應(yīng)的區(qū)域中包括這個(gè)位點(diǎn)。因此本發(fā)明的另一主題是任何多肽,特別是任何水解酶,尤其是任何枯草桿菌蛋白酶型的堿性蛋白酶,所述蛋白酶具有與SEQIDNO.2中提供的從109位至383位的氨基酸序列至少98.5%同一性的氨基酸序列和/或與該氨基酸序列有最多4個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差。其中,更優(yōu)選的多肽是其中氨基酸序列與SEQIDN0.2中提供的從109位至383位氨基酸序列有至少99%同一性(更優(yōu)選至少99.5%同一性)的多肽,和/或其中氨基酸序列與SEQIDN0.2中提供的氨基酸序列有最多3個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差的多肽,特別是最多2個(gè)氨基酸位點(diǎn),更優(yōu)選最多1個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差。最優(yōu)選的是具有根據(jù)SEQIDNO.2從109位至383位氨基酸序列的蛋白質(zhì)。例如,通過對短小芽孢桿菌體內(nèi)釋放的水解蛋白的N-末端序列測定,發(fā)現(xiàn)剪接位點(diǎn)不在根據(jù)SEQIDNO.2的氨基酸108和109之間,而改為在不同的位置,那么這些陳述指的是真正的剪接位點(diǎn)和/或真正的成熟蛋白。本發(fā)明另外一個(gè)主題還包括成熟蛋白的片段,特別是如果它們與現(xiàn)有技術(shù)相比是新型的。本發(fā)明另外一個(gè)主題因此還是多肽,其包括根據(jù)SEQIDNO.2從109位至383位至少100個(gè)連續(xù)氨基酸的氨基酸序列,優(yōu)選至少氨基酸序列的110、120、130或140個(gè)連續(xù)氨基酸,更優(yōu)選至少150、175或200個(gè),最優(yōu)選至少氨基酸序列的225個(gè)或250個(gè)連續(xù)氨基酸。本發(fā)明另外一個(gè)主題因此還是多肽,其具有根據(jù)SEQIDNO.2從109位至383位至少185個(gè)連續(xù)氨基酸的氨基酸序列,優(yōu)選至少190個(gè)、,最優(yōu)選至少220個(gè)、230個(gè)或250個(gè),或者與所述氨基酸序列有最多1個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差。本發(fā)明另外一個(gè)主題因此還是多肽,其具有根據(jù)SEQIDN0.2從109位至383位至少240個(gè)連續(xù)氨基酸的氨基酸序列,優(yōu)選至少245個(gè)、250個(gè)或255個(gè),最優(yōu)選至少260個(gè)、265個(gè)或270個(gè),或者與所述氨基酸序列有最多2個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差,優(yōu)選最多1個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差。本發(fā)明另外一個(gè)主題因此還包括多肽,其包括SEQIDNO.2中提供的序列從109位至383位至少245個(gè)連續(xù)氨基酸的氨基酸序列,優(yōu)選至少250個(gè)或255個(gè),更優(yōu)選至少260個(gè)或270個(gè)連續(xù)氨基酸,或者與所述氨基酸序列有最多3個(gè)位點(diǎn)偏差,優(yōu)選最多2個(gè)位點(diǎn),更優(yōu)選最多l(xiāng)個(gè)位點(diǎn)。本發(fā)明另一個(gè)主題因此還包括多肽,其包括SEQIDNO.2中提供的序列從207位至378位的氨基酸序列,或者與所述氨基酸序列有最多4個(gè)位點(diǎn)不同,優(yōu)選最多3個(gè)位點(diǎn),更優(yōu)選最多2個(gè)位點(diǎn),更優(yōu)選最多1個(gè)位點(diǎn)。因?yàn)樾盘?hào)肽和前肽也同樣具有本發(fā)明關(guān)注的單位,所以本發(fā)明的另一個(gè)主題包括與這些多肽同源的肽,由于它們是新穎的。按照上述,氨基酸1-108可能為前導(dǎo)肽,氨基酸1-51可能為信號(hào)肽,因此,氨基酸52-108為前肽。本發(fā)明另一個(gè)主題因此包括多肽,其具有根據(jù)SEQIDNO.2從1位至51位的氨基酸序列,還具有根據(jù)SEQIDNO.2從1位至108位的氨基酸序列,還包括與這些氨基酸序列有1個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差的多肽。本發(fā)明另一個(gè)主題包括由下文限定的本發(fā)明的多核苷酸編碼的多肽,限定如下。21這種多肽更優(yōu)選包括這樣的多肽,其源自與SEQIDNO.1中提供的核苷酸序列盡可能相似的核苷酸序列,特別是覆蓋與根據(jù)SEQIDNO.2的多肽109-384位對應(yīng)的部分區(qū)域??上攵@些核苷酸將編碼性質(zhì)與來自短小芽孢桿菌的本發(fā)明的堿性蛋白酶的性質(zhì)相似性增加的蛋白質(zhì),特別是成熟蛋白。再有,像所有下述實(shí)施方案的情況一樣,如果會(huì)發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)的剪接位點(diǎn)位于不同于上文指出的位置,這些陳述事實(shí)上指的是真正的成熟蛋白。本發(fā)明的主題最優(yōu)選的實(shí)施方案因此是任何枯草桿菌蛋白酶型的堿性蛋白酶,其中氨基酸序列大體上與SEQIDNO.2中提供的氨基酸序列(優(yōu)選109-383位)有同一性,和/或其中氨基酸序列可以源自SEQIDNO.1中的核苷酸序列,優(yōu)選325-1152位。這是用本專利申請可以從短小芽孢桿菌制得新發(fā)現(xiàn)的堿性蛋白酶的例子。這種堿性蛋白酶是現(xiàn)有技術(shù)尚未知的一種蛋白酶。如實(shí)施例中所表明的,它是可分離、可生產(chǎn)和可用的。也如實(shí)施例中所證明的,其額外的特征在于其用在適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)中時(shí),至少接近和/或甚至超過已確定的用于此目的的酶的性能。本發(fā)明的多肽優(yōu)選酶,更優(yōu)選水解酶,特別是蛋白酶,更優(yōu)選內(nèi)肽酶,特別是枯草桿菌蛋白酶型的蛋白酶或其部分。本發(fā)明的多肽因此優(yōu)選能夠水解蛋白質(zhì)的酰胺鍵,特別是蛋白質(zhì)內(nèi)部的酰胺鍵。多肽的部分可以特別是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域,所述蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域可能適合于例如形成有用的嵌合酶。對于可用在洗滌劑中的工業(yè)蛋白酶的開發(fā),特別如天然(微生物)形成的酶,其可以作為一個(gè)出發(fā)點(diǎn),為了所需的應(yīng)用,采用基本已知22的誘變方法優(yōu)化,例如定點(diǎn)誘變、斷裂、缺失、插入或與其他修飾的蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)部分融合。所述優(yōu)化可以包括例如適應(yīng)溫度影響、pH波動(dòng)、氧化還原比和/或其他影響,這些與應(yīng)用的工業(yè)領(lǐng)域有關(guān)。例如,可能需要提高氧化穩(wěn)定性、對變性劑或蛋白降解的穩(wěn)定性、對高溫酸性或強(qiáng)堿性條件的穩(wěn)定性,改變對鈣離子或其他輔因子的敏感性,降低免疫原性或變應(yīng)原作用。通過例如靶定點(diǎn)誘變,可以為此目的改變表面電荷或者改變催化作用或底物結(jié)合中涉及的環(huán)。對此出發(fā)點(diǎn)是與已知蛋白酶的比對。這使得必要時(shí)可能發(fā)現(xiàn)位點(diǎn),通過所述位點(diǎn)的變化可能實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)性質(zhì)的改良。誘變方法基于SEQIDNO.1中提供的各核苷酸序列和/或與其十分相似的核苷酸序列,并作為本發(fā)明的一個(gè)單獨(dú)主題進(jìn)一步解釋如下。在現(xiàn)有技術(shù)中描述了分子生物學(xué)的相應(yīng)方法,例如在手冊中,如由Fritsch,Sambrook禾口Maniatis"MolecularCloning:ALaboratoryManual,"ColdSpringHarbourLaboratoryPress,NewYork,1989出版的一個(gè)手冊。因此,除了基于上文作為發(fā)明的已提及的點(diǎn)突變和/或置換突變的蛋白質(zhì)變異體之外,本發(fā)明的其他實(shí)施方案因此還包括所有上述本發(fā)明的多肽,特別是有根據(jù)SEQIDNO.2和/或根據(jù)SEQIDNO.2從109位至383位氨基酸序列的多肽,通過插入誘變和/或置換誘變和/或倒位誘變和/或通過與至少一個(gè)其他蛋白或蛋白片段融合而得到的多肽,特別是最多有50個(gè)氨基酸插入和/或缺失和/或倒位的多肽,更優(yōu)選最多40個(gè)、30個(gè)或20個(gè)氨基酸,特別是最多15個(gè)、10個(gè)或5個(gè),尤其是最多4個(gè)、3個(gè)或2個(gè)氨基酸,特別是剛剛l個(gè)氨基酸缺失和/或插入。例如,可能因此在酶的末端或環(huán)中缺失個(gè)別氨基酸,不會(huì)由此喪失蛋白水解活性。例如所述突變在WO99/49057中描述。WO01/07575表明通過所述缺失,可降低各蛋白酶的變應(yīng)原性,總的看來它們的可用性因此提高。斷裂有利于以下方面插入誘變或置換誘變和/或與其他下文將描述的酶融合。關(guān)于這些酶的預(yù)期應(yīng)用,如果它們甚至在斷裂或缺失誘變后仍具有蛋白水解活性則是特別優(yōu)選的。很多現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)也公開了插入和置換在枯草桿菌酶中的有利作用。原則上,除了個(gè)別氨基酸的置換之外,多個(gè)銜接的氨基酸一起置換也適合于本說明書。較大的酶部分(例如上述片段)與其他具有不同功能的蛋白酶或蛋白質(zhì)的新型組合物也適合于本說明書。因此,例如根據(jù)WO99/57254,有可能提供一種本發(fā)明的蛋白質(zhì)或其部分,它們具有來自其他蛋白質(zhì)的結(jié)合區(qū)域,例如纖維素結(jié)合區(qū)域(通過肽接頭或者直接作為融合蛋白),從而可能使得底物的水解更有效。同樣地,例如也可以將本發(fā)明的蛋白質(zhì)與淀粉酶或纖維素酶連接以發(fā)揮雙重作用。在本發(fā)明的多肽中,在源自遲緩芽孢桿菌的堿性蛋白酶的編號(hào)中,在位點(diǎn)3、4、36、42、47、56、61、69、87、%、99、101、102、104、114、118、120、130、139、141、142、154、157、188、193、199、205、211、224、229、236、237、242、243、255禾口268具有一個(gè)或多個(gè)氨基酸替換的蛋白質(zhì)變異體也是優(yōu)選的。本發(fā)明的嵌合蛋白質(zhì)廣義上具有蛋白水解活性。該蛋白水解活性可以由源自本發(fā)明的多肽的部分分子產(chǎn)生或改變。所述超過其全長的嵌合蛋白質(zhì)也可以在上述權(quán)利要求的范圍之外。所述融合的目的例如包括,在本發(fā)明的待融合的蛋白質(zhì)部分幫助下插入或改良特定的功能或子功能。從本發(fā)明的意義上來說,所述嵌合蛋白質(zhì)是否包括單個(gè)多肽鏈或多個(gè)亞單位是無關(guān)的。為了實(shí)現(xiàn)后一個(gè)選擇,例如通過翻譯后或者僅在純化步驟后定向溶蛋白性裂解將單個(gè)嵌合的多肽鏈分解成多個(gè)鏈,這是可能的。24舉例來說,根據(jù)WO99/57254,有可能提供一種本發(fā)明的多肽或其部分,它們有來自其他蛋白質(zhì)的結(jié)合區(qū)域,例如纖維素結(jié)合區(qū)域(通過肽接頭或者直接作為融合蛋白),從而使得底物的水解更有效。所述結(jié)合區(qū)域可能例如源自蛋白酶,以加強(qiáng)本發(fā)明的蛋白質(zhì)與蛋白酶底物的結(jié)合。這增加了局部蛋白酶濃度,可能在個(gè)別應(yīng)用中有利,例如在原材料的處理中。同樣地,還可以將本發(fā)明的蛋白質(zhì)與例如淀粉酶或纖維素酶連接,以發(fā)揮雙重作用。應(yīng)將可通過插入突變獲得的本發(fā)明的多肽劃歸本發(fā)明的嵌合蛋白質(zhì),由于它們基本是類似的。這也包括置換變異體,即其中分子的個(gè)別區(qū)域已被來自其他蛋白質(zhì)的成分所取代的變異體。如在雜種的形成中,插入誘變和置換誘變的目的是為了將本發(fā)明的蛋白質(zhì)的各性質(zhì)、功能或子功能與其他蛋白質(zhì)的結(jié)合。這也包括通過例如來自不同蛋白酶的子序列改組或重組而獲得的變異體。這樣,可以獲得以前未被述及的蛋白質(zhì)。所述技術(shù)允許劇烈的作用或者甚至非常精細(xì)的活性調(diào)節(jié)。所述突變優(yōu)選根據(jù)隨機(jī)方法(該方法將被劃歸為定向進(jìn)化)實(shí)現(xiàn),例如根據(jù)StEP方法(Zhao等(1998),Nat.Biotechnol.,vol.16,第258-261頁)、隨機(jī)引物重組(Shao等(1998),NucleicAcidsRes.,vol.26,第681-683頁)、DNA改組(W.P.C.Stemmer(1994),Nature,vol.370,第389-391頁)或遞歸序列重組(RSR;WO98/27230,WO97/20078,WO95/2262)或RACHITT方法(W.M.Coco等(2001),Nat.Biotechnol"vol.19,第354-359頁)。所述方法可很方便地與誘變和表達(dá)之后的選擇法或篩選法結(jié)合以識(shí)別具有所需性質(zhì)的變異體。由于這些技術(shù)都是在DNA水平上進(jìn)行的,生物技術(shù)生產(chǎn)的出發(fā)點(diǎn)有各種新創(chuàng)造的基因。倒位誘變,即部分序列倒轉(zhuǎn),可以視為缺失的特殊形式,也可視為插入的特殊形式。所述變異體可以隨機(jī)或者以定向方式創(chuàng)造。所有到目前為止已經(jīng)解釋的并表征能夠水解蛋白質(zhì)的本發(fā)明的多肽都是優(yōu)選的。根據(jù)IUBMB的正式酶命名法1992,所述多肽同時(shí)顯示在3.4項(xiàng)(肽酶)下。其中優(yōu)選內(nèi)肽酶,尤其是下類的內(nèi)肽酶3.4.21絲氨酸蛋白酶、3.4.22半胱氨酸蛋白酶、3.4.23天冬氨酸蛋白酶和3.4.24金屬蛋白酶。其中,更優(yōu)選絲氨酸蛋白酶(3.4.21),包括枯草桿菌酶,枯草桿菌酶中最優(yōu)選枯草桿菌蛋白酶(cf."SubtUases:R.Siezen的subtilisin-likeproteases",第75-95頁,在R.BottandC.Betzel編輯的"SubtilisinEnzymes"中,NewYork,1996)。其中,依次優(yōu)選IS-2類的枯草桿菌蛋白酶,強(qiáng)堿性枯草桿菌蛋白酶。優(yōu)選活性分子超過無活性分子,因?yàn)樵谙率鰬?yīng)用領(lǐng)域中,所進(jìn)行的蛋白酶解作用是特別重要的。上述片段廣義上也具有蛋白水解活性,例如用于絡(luò)合底物或形成水解所需要的結(jié)構(gòu)元件。當(dāng)它們可用于水解另一種蛋白質(zhì)時(shí),當(dāng)單獨(dú)考慮它們自己,沒有額外的必需存在的蛋白酶成分時(shí),它們是優(yōu)選的。這涉及可由蛋白酶本身發(fā)揮的活性;這不影響同時(shí)可能需要的緩沖物質(zhì)、輔因子等的存在。用于蛋白質(zhì)水解的分子的不同部分天然具有相互作用,在缺失突變體中高于在片段中,且這種相互作用特別在融合蛋白中存在,最特別的是源自相關(guān)蛋白改組的融合蛋白。如果廣義上的蛋白水解功能因此首次得以維持、改良、指定或?qū)崿F(xiàn),那么缺失變異體以及融合蛋白也是本發(fā)明的蛋白質(zhì)。本發(fā)明的這一主題的優(yōu)選代表包括那些自身能夠水解蛋白質(zhì)底物而不需要存在額外的蛋白酶成分的。一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案構(gòu)成了所有到目前為止討論的所述本發(fā)明的多肽,所述多肽的特征在于它們額外被穩(wěn)定。多肽的穩(wěn)定性因此在貯藏和/或其使用期間增加,例如在洗滌過程中,所以它們的活性持續(xù)更久并因此得以增強(qiáng)。例如發(fā)明的蛋白酶的穩(wěn)定性可通過偶合至聚合物而增加。在聚合物用在相應(yīng)介質(zhì)中之前,需要通過化學(xué)偶合步驟將蛋白質(zhì)與所述聚合物結(jié)合。優(yōu)選可能通過分子本身定點(diǎn)誘變的穩(wěn)定作用,因?yàn)樗鼈冊诘鞍踪|(zhì)提取后不需要任何額外的操作步驟。對此一些合適的定點(diǎn)誘變本身是由現(xiàn)有技術(shù)已知的。例如,可以通過將某些酪氨酸殘基替換為其他殘基而使蛋白酶穩(wěn)定。其他可能性包括例如-用脯氨酸替換某些氨基酸殘基;-在分子表面上引入極性或帶電荷的基團(tuán);-改變金屬離子的結(jié)合,特別是鈣結(jié)合位點(diǎn);-根據(jù)專利US5,453,372,可通過表面上某些突變來保護(hù)蛋白質(zhì)使其不受變性劑(例如表面活性劑)的影響。對于高溫和表面活性劑的作用,穩(wěn)定作用的另一個(gè)可能性將是通過用與分子的殘余部分接觸(通過非共價(jià)相互作用)的氨基酸替換位于N-末端附近的氨基酸,因而對維持球狀結(jié)構(gòu)作出貢獻(xiàn),從而實(shí)現(xiàn)的穩(wěn)定作用。一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案包括所有到目前為止討論的所述本發(fā)明的多肽,所述多肽的特征是它們是額外衍生的。衍生物應(yīng)理解為這樣的蛋白質(zhì),其源自述及的經(jīng)額外修飾的蛋白質(zhì)。所述修飾可以影響例如穩(wěn)定性、底物特異性或與底物的結(jié)合強(qiáng)度或酶活性。例如它們也可用來降低蛋白質(zhì)的變應(yīng)原性和/或免疫原性,從而增加其耐受性。舉例來說,所述衍生作用可以在生物學(xué)上實(shí)現(xiàn),例如通過產(chǎn)生宿主生物體與蛋白質(zhì)生物合成結(jié)合。本說明書將特別強(qiáng)調(diào)低分子化合物(例如脂質(zhì)或低聚糖)的偶合。但衍生作用還可以以化學(xué)方法進(jìn)行,例如通過側(cè)鏈的化學(xué)轉(zhuǎn)化或通過另一種化合物的共價(jià)結(jié)合,例如大分子化合物與蛋白質(zhì)結(jié)合。例如,可以以這種方式發(fā)生胺與酶的羧基偶合(以改變等電點(diǎn))。此外,例如也可使大分子例如蛋白質(zhì)通過雙官能化合物與本發(fā)明的蛋白質(zhì)結(jié)合。所述大分子可以是例如結(jié)合區(qū)域。所述衍生物特別適合用在洗滌劑或清潔劑中。類似地,也可以將蛋白酶抑制劑通過接頭(特別是氨基酸接頭)與本發(fā)明的蛋白質(zhì)結(jié)合。與其他大分子化合物例如聚乙二醇偶合改善了分子的附加性質(zhì),例如穩(wěn)定性或皮膚耐受性。本發(fā)明蛋白質(zhì)的衍生物還可以廣義上理解為這些酶的制劑。蛋白質(zhì)可能與多種例如來自生產(chǎn)微生物的培養(yǎng)物的其他物質(zhì)聯(lián)系在一起,依賴于生產(chǎn)、建立或制備。蛋白質(zhì)還可能已與某些其他物質(zhì)以定向方式混合,例如以增加其穩(wěn)定性和貯藏。因此,所有本發(fā)明的蛋白質(zhì)的制劑也屬于本發(fā)明。這也不依賴于其在特定制劑中是否實(shí)際上顯示這種酶活性,因?yàn)槠湓谫A藏中可能需要有極低或沒有活性,并僅在使用的時(shí)間點(diǎn)顯示其蛋白水解功能。這可以例如通過合適的伴隨物質(zhì)如蛋白酶抑制劑來控制。一種優(yōu)選的實(shí)施方案包括所有蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)片段、融合蛋白或衍生物,它們的特征在于包括具有上述本發(fā)明的多肽之一的至少一個(gè)抗原決定簇。蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)單元和其三維折疊對酶活性有決定意義。在蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)中相互明顯偏離的區(qū)域可能主要形成相應(yīng)的空間結(jié)構(gòu),可能因此激活相同的酶行為。二級(jí)結(jié)構(gòu)中這樣的共性通常被認(rèn)定為抗血清或純化的或單克隆抗體的相應(yīng)抗原決定簇。彼此類似的蛋白質(zhì)或衍生物因此可以根據(jù)免疫化學(xué)交叉反應(yīng)來檢測和確定。本發(fā)明的保護(hù)范圍因此明確包括所述蛋白質(zhì),其可以被確定為本發(fā)明的蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)片段、融合蛋白或上文限定的衍生物,不是通過它們一級(jí)結(jié)構(gòu)中同源性的值而是通過與上文限定的蛋白質(zhì)的免疫化學(xué)關(guān)系。一種優(yōu)選的實(shí)施方案包括所有到目前為止談到的所述本發(fā)明的多肽,其特征為可以從天然源獲得,特別是從微生物。這些微生物可以是例如單細(xì)胞真菌或細(xì)菌,因?yàn)樗鼈兺ǔ1榷嗉?xì)胞生物或者源自多細(xì)胞生物的細(xì)胞培養(yǎng)物更容易產(chǎn)生和處理,但是后者可構(gòu)成具體實(shí)施方案的適當(dāng)選擇,因此基本上不從本發(fā)明的主題中排除。盡管天然存在的生物體生產(chǎn)者可生產(chǎn)本發(fā)明的酶這一點(diǎn)是可能的,但是在最初確定的條件下,其僅在較小程度上表達(dá)和/或分泌所述酶至周圍培養(yǎng)基,這不排除可能經(jīng)實(shí)驗(yàn)確定適當(dāng)?shù)沫h(huán)境條件或其他因素,以便在它們的影響下,生物體可以受刺激經(jīng)濟(jì)地適當(dāng)生產(chǎn)本發(fā)明的蛋白質(zhì)。所述調(diào)節(jié)機(jī)制可以以定向方式用于生物技術(shù)生產(chǎn)。若這也是不可能的,它們?nèi)钥捎糜诜蛛x各自的基因。其中,更優(yōu)選革蘭陽性細(xì)菌的那些。那是因?yàn)楦锾m陽性細(xì)菌沒有任何外膜,因此所分泌的蛋白質(zhì)直接釋放到周圍介質(zhì)中。最優(yōu)選的是芽孢桿菌屬的革蘭陽性細(xì)菌的那些。芽孢桿菌蛋白酶從一開始對于各種可能的技術(shù)應(yīng)用就有良好的性質(zhì)。這些性質(zhì)包括對于高溫、氧化劑或變性劑特定的穩(wěn)定性。此外,關(guān)于微生物蛋白酶的生物技術(shù)生產(chǎn)有最好的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),例如關(guān)于構(gòu)建良好的克隆載體、選擇宿主細(xì)胞和生長條件或估計(jì)危險(xiǎn)(例如變應(yīng)原性)。桿菌還被確定為生物體生產(chǎn)者,在工業(yè)生產(chǎn)過程中產(chǎn)量特別高。在這些蛋白酶的生產(chǎn)和應(yīng)用中獲得的實(shí)踐財(cái)富也有利于根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步開發(fā)這些酶。例如,這與它們與其他化合物(例如洗滌劑或清潔劑的成分)的相容性有關(guān)。在來自芽孢桿菌種的蛋白酶中,來自短小芽孢桿菌種的,特別是來自根據(jù)本發(fā)明應(yīng)用的短小芽孢桿菌菌株的蛋白酶,又是優(yōu)選的。本發(fā)明具體的酶最初從這些種中獲得。其各序列在序列表中給出。上述變異體可以從該菌株或從相關(guān)菌株生產(chǎn),特別是通過利用分子生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)方法例如PCR和/或基本已知的誘變方法。另一種解決該問題及因此成為本發(fā)明的一個(gè)單獨(dú)主題的是核酸,所述核酸用來實(shí)現(xiàn)本發(fā)明。利用當(dāng)今普遍公知的方法例如化學(xué)合成或聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)結(jié)合分子生物學(xué)和/或蛋白質(zhì)化學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)方法,本領(lǐng)域技術(shù)人員可能根據(jù)已知的DNA序列和/或氨基酸序列生產(chǎn)完整的基因。所述方法可從例如"LexikonderBiochemie"[LexiconofBiochemistry],SpektrumAkademischerVerlag,Berlin,1999,vol.1,第267-271頁禾口vol.2,第227-229頁中得知。這是可能的,特別是當(dāng)可以使用菌種保藏機(jī)構(gòu)保藏的菌株時(shí)。例如,使用根據(jù)已知序列和/或通過分離mRNA分子合成的PCR引物,可以從所述菌株合成、克隆以及如果需要,進(jìn)一步處理(例如誘變處理)各基因。核酸形成分子生物學(xué)中幾乎所有研究和進(jìn)一步開發(fā)的出發(fā)點(diǎn)以及生產(chǎn)蛋白質(zhì)。這些特別包括基因序列測定和各氨基酸序列的衍生、任30何類型的誘變(見上文)和蛋白質(zhì)的表達(dá)。用于開發(fā)具有特定性質(zhì)的蛋白質(zhì)的誘變也稱為"蛋白質(zhì)工程"。它們被優(yōu)化的性質(zhì)已經(jīng)在上文作為例子給出。所述誘變也可以以定向方式或通過隨機(jī)方法完成,例如對于克隆基因利用隨后的針對活性的識(shí)別方法和/或選擇方法(篩選和選擇),例如通過與核酸探針雜交,或者對于基因產(chǎn)物、蛋白質(zhì),例如通過它們的活性。本發(fā)明的蛋白酶的進(jìn)一步開發(fā)還可以是定向的,考慮到在Biochim.Bi叩hys.Acta,vol.1543,第203-222頁中所顯示的P.N.Bryan(2000)的公開文獻(xiàn)"Proteinengineering"。本發(fā)明的另一個(gè)主題因此還包括多核苷酸,其編碼本發(fā)明的多肽,特別是水解酶,尤其是枯草桿菌蛋白酶型的堿性蛋白酶。本發(fā)明的主題因此還特別包括選自下列的多核苷酸a)具有根據(jù)SEQIDNO.1的核酸序列的多核苷酸,b)具有根據(jù)SEQIDNO.1從1位至153位核酸序列的多核苷酸,c)具有根據(jù)SEQIDNO.1從1位至324位核酸序列的多核苷酸,d)具有根據(jù)SEQIDNO.1從325位至1152位核酸序列的多核苷酸,e)編碼具有根據(jù)SEQIDN0.2的氨基酸序列的多肽的多核苷酸,f)編碼具有根據(jù)SEQIDNO.2從1位至51位氨基酸序列的多肽的多核苷酸,g)編碼具有根據(jù)SEQIDNO.2從1位至108位氨基酸序列的多肽的多核苷酸,h)編碼具有根據(jù)SEQIDNO.2從109位至383位氨基酸序列的多肽的多核苷酸,i)編碼本發(fā)明多肽的多核苷酸,j)根據(jù)(a)的多核苷酸的天然存在或人工產(chǎn)生的突變體或多晶型物或等位基因,其具有最多55個(gè)突變,優(yōu)選最多50個(gè)、45個(gè)、40個(gè)或30個(gè),更優(yōu)選最多25個(gè)、20個(gè)、15個(gè)或10個(gè),特別是最多9個(gè)、831個(gè)、7個(gè)、6個(gè)、5個(gè)、4個(gè)、3個(gè)或2個(gè)突變,尤其是恰好有1個(gè)突變。k)根據(jù)(b)或(c)的多核苷酸的天然存在或人工產(chǎn)生的突變體或多晶型物或等位基因,具有最多8個(gè)突變,優(yōu)選最多7個(gè)、6個(gè)或5個(gè),更優(yōu)選最多4個(gè)、3個(gè)或2個(gè)突變,尤其是恰好有l(wèi)個(gè)突變。1)根據(jù)(d)的多核苷酸的天然存在或人工產(chǎn)生的突變體或多晶型物或等位基因,具有最多40個(gè)突變,優(yōu)選最多35個(gè)、30個(gè)或25個(gè),更優(yōu)選最多20個(gè)、15個(gè)或10個(gè),特別是最多9個(gè)、8個(gè)、7個(gè)、6個(gè)、5個(gè)、4個(gè)、3個(gè)或2個(gè)突變,尤其是恰好有l(wèi)個(gè)突變。m)具有關(guān)于根據(jù)(a)的多核苷酸的序列同源性或至少95%序列同一性的多核苷酸,優(yōu)選至少96%或97%,更優(yōu)選至少98%,更優(yōu)選至少99%。n)具有關(guān)于根據(jù)(b)的多核苷酸的序列同源性或至少95%序列同一性的多核苷酸,o)具有關(guān)于根據(jù)(c)的多核苷酸的序列同源性或至少98%序列同一性的多核苷酸,p)具有關(guān)于根據(jù)(d)的多核苷酸的序列同源性或至少95.5%序列同一性的多核苷酸,優(yōu)選至少96或97%,更優(yōu)選至少98%,更優(yōu)選至少99%,q)與根據(jù)(a)、(b)、(c)或(d)的多核苷酸在嚴(yán)格條件下雜交的多核苷酸,其中術(shù)語"嚴(yán)格條件"優(yōu)選理解為在含O.lxSSC和0.1%十二烷基硫酸鈉(SDS)的溶液中60°C溫育,其中20xSSC表示含3M氯化鈉和0.3M枸櫞酸鈉(pH7.0)的溶液,r)包括根據(jù)(a)、(c)、(d)、(g)、(h)、(m)或(p)的多核苷酸的至少200個(gè)連續(xù)核酸,特別是至少250個(gè)、300個(gè)、350個(gè)或400個(gè)連續(xù)核酸,更優(yōu)選至少450個(gè)、500個(gè)、550個(gè)或600個(gè),特別是至少650個(gè)、700個(gè)、750個(gè)或800個(gè)連續(xù)核酸的多核苷酸,s)關(guān)于根據(jù)從(a)到(r)的多核苷酸,特別是關(guān)于(a)或(d)的多核苷酸,具有最多50個(gè)核苷酸缺失和/或插入和/或倒位,優(yōu)選最多40個(gè)、30個(gè)或20個(gè),更優(yōu)選最多15個(gè)、10個(gè)或5個(gè),特別是最多4個(gè)、3個(gè)或2個(gè)核苷酸,特別是恰好1個(gè)核苷酸的插入和/或缺失的多核苷酸,t)包括從(a)到(s)所述的多核苷酸中至少一種的多核苷酸,u)與根據(jù)從(a)到(t)的多核苷酸互補(bǔ)的多核苷酸。所述多核苷酸可以是單鏈或雙鏈形式。除脫氧核糖核酸之外,本發(fā)明的主題還包括同源和互補(bǔ)的核糖核酸??紤]用于表達(dá)的宿主生物體的不同密碼子使用,本發(fā)明的主題還特別包括那些其中特定區(qū)域已被其他區(qū)域取代以使得本發(fā)明的多肽能夠表達(dá)的多核苷酸。根據(jù)以上陳述,在上述本發(fā)明的核苷酸中,下列核苷酸優(yōu)選性增加一那些特征為可以從天然源(特別是從微生物)獲得的多核苷酸;一包括特征為微生物是革蘭陽性細(xì)菌的多核苷酸;一包括特征為革蘭陽性細(xì)菌是芽孢桿菌屬中一種的多核苷酸,和一包括那些其特征為芽孢桿菌種是短小芽孢桿菌,特別是依照本發(fā)明應(yīng)用的菌株。含有一種上述本發(fā)明的核苷酸區(qū)域的載體,特別是編碼上述本發(fā)明的多肽之一的一種載體,其構(gòu)成本發(fā)明一個(gè)單獨(dú)的主題。為了處理與本發(fā)明有關(guān)的核酸并因此特別為本發(fā)明多肽的生產(chǎn)做準(zhǔn)備,將它們適當(dāng)?shù)剡B接到載體中。在現(xiàn)有技術(shù)中詳述了所述載體及各操作方法。商業(yè)上可獲得大量和變異范圍廣泛的克隆和表達(dá)載體。這些載體包括例如源自細(xì)菌質(zhì)粒、噬菌體的載體或來自病毒的載體或主要合成的載體。此外,根據(jù)細(xì)胞(在其中它們能夠被建立)類型區(qū)分它們,例如根據(jù)用于革蘭陰性細(xì)菌、革蘭陽性細(xì)菌、酵母菌或高等真核生物的載體。它們形成適當(dāng)?shù)某霭l(fā)點(diǎn),例如用于分子生物學(xué)和生物化學(xué)中研究以及用于表達(dá)各基因或各蛋白質(zhì)。在一類實(shí)施方案中,本發(fā)明的載體是克隆載體??寺≥d體不僅適用于有關(guān)基因的貯藏、生物擴(kuò)增或分泌,還適用于根據(jù)分子生物學(xué)對所述基因進(jìn)行表征。它們同時(shí)是要求保護(hù)的核酸(所述核酸可以很好地運(yùn)送和貯藏)的形式,也構(gòu)成分子生物學(xué)方法的出發(fā)點(diǎn);例如它們不與細(xì)胞結(jié)合諸如PCR或體外誘變。在一類實(shí)施方案中,本發(fā)明的載體優(yōu)選表達(dá)載體。所述表達(dá)載體是在生物學(xué)生產(chǎn)系統(tǒng)中制備相應(yīng)核酸并由此產(chǎn)生各蛋白質(zhì)的基礎(chǔ)。本發(fā)明這一主題的優(yōu)選實(shí)施方案包括攜帶表達(dá)所需的遺傳元件的表達(dá)載體,所述遺傳元件例如最初位于該基因上游的天然啟動(dòng)子或來自其他生物體的啟動(dòng)子。這些元件可以例如排列成所謂的表達(dá)盒形式?;蛘?,也可通過各宿主細(xì)胞使個(gè)別調(diào)控元件或者所有調(diào)控元件可用。表達(dá)載體更優(yōu)選適應(yīng)額外的性質(zhì),例如最佳拷貝數(shù)、選擇的表達(dá)系統(tǒng),特別是宿主細(xì)胞(見下文)。如果表達(dá)載體優(yōu)選僅包含各基因作為插入片段,沒有任何大的5'或3'非編碼區(qū),那么高表達(dá)也是有利的。例如如果含限制性內(nèi)切酶的出發(fā)菌株的染色體DNA經(jīng)隨機(jī)處理后獲得片段,所述片段在序列測定后和整合到表達(dá)載體之前又以定向方式拼接,那么可以獲得所述插入片段。表達(dá)載體的一個(gè)例子是載體pAWA22。其他載體可由本領(lǐng)域技術(shù)人員由現(xiàn)有技術(shù)得到,而且在商業(yè)上大量提供。34在用基因工程方法修飾后,包含本發(fā)明的多核苷酸的細(xì)胞形成本發(fā)明單獨(dú)的主題。這些細(xì)胞包含合成本發(fā)明的蛋白質(zhì)的遺傳信息。與上文所述并要求權(quán)利的天然生物體生產(chǎn)者對比,這樣的細(xì)胞包括根據(jù)基本已知的方法已擁有本發(fā)明的核苷酸的細(xì)胞和/或由所述細(xì)胞衍生的細(xì)胞。為此目的,適當(dāng)?shù)剡x擇相對而言容易培養(yǎng)和/或提供高產(chǎn)率的宿主細(xì)胞。它們允許例如相應(yīng)基因的擴(kuò)增,并且也允許它們的誘變或轉(zhuǎn)錄和翻譯,以及最終生物技術(shù)生產(chǎn)各蛋白質(zhì)。這種遺傳信息可以作為獨(dú)立的遺傳元件存在于染色體外,即在細(xì)菌中質(zhì)粒局部,或者可以整合到染色體中。合適系統(tǒng)的選擇將依賴于待解決的問題,例如基因和/或生物體的貯藏類型和貯藏時(shí)間或者誘變或選擇的類型。因此在現(xiàn)有技術(shù)中描述了例如基于噬菌體——及其特定的宿主細(xì)胞——的誘變方法和選擇方法,用于開發(fā)洗滌劑用酶。本發(fā)明的多核苷酸優(yōu)選是上述指定的一種本發(fā)明的載體的部分,特別是克隆載體或表達(dá)載體。這樣,它們與本發(fā)明的實(shí)現(xiàn)有關(guān)。另外,表達(dá)和優(yōu)選分泌本發(fā)明的多肽的細(xì)胞是優(yōu)選的。只有形成蛋白質(zhì)的宿主細(xì)胞使該蛋白的生物技術(shù)生產(chǎn)成為可能。原則上所有生物體,即原核細(xì)胞、真核細(xì)胞或藍(lán)藻(cyanophytes)均適合作為用于蛋白質(zhì)表達(dá)的宿主細(xì)胞。優(yōu)選的是遺傳上可很好操作的這類宿主細(xì)胞,其涉及例如用表達(dá)載體轉(zhuǎn)化、其穩(wěn)定建立和表達(dá)的調(diào)節(jié),例如單細(xì)胞真菌或細(xì)菌。此外,優(yōu)選的宿主細(xì)胞特征在于有良好的微生物學(xué)和生物技術(shù)易操作性。例如,這涉及容易培養(yǎng)、高生長率、對發(fā)酵培養(yǎng)基需求低以及對外源蛋白好的生產(chǎn)率和分泌率。優(yōu)選針對表達(dá)的實(shí)驗(yàn)室菌株。這些菌株是商業(yè)上可得的或者一般可從菌株保藏機(jī)構(gòu)得到。理論上以這種方式可以從多數(shù)宿主生物體獲得每一種本發(fā)明的蛋白質(zhì)。依照現(xiàn)有技術(shù)可以得到的不同系統(tǒng),根據(jù)不同系統(tǒng)的豐度,對于個(gè)別情況的最佳表達(dá)系統(tǒng)必須通過實(shí)驗(yàn)確定。特別有利的是本身是蛋白酶陰性的宿主細(xì)胞,因此不降解形成的蛋白質(zhì)。優(yōu)選的實(shí)施方案包括活性可根據(jù)相應(yīng)遺傳元件調(diào)節(jié)的宿主細(xì)胞,例如通過控制添加化合物,通過改變培養(yǎng)條件或作為各細(xì)胞密度的一種功能。這種可控的表達(dá)允許非常經(jīng)濟(jì)地生產(chǎn)所討論的蛋白質(zhì);例如其可通過各載體上的相應(yīng)元件實(shí)現(xiàn)?;颉⒈磉_(dá)載體和宿主細(xì)胞彼此適當(dāng)配合,這涉及表達(dá)所需的遺傳元件(核糖體結(jié)合位點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子)或密碼子選擇。其中,優(yōu)選將形成的蛋白質(zhì)分泌至周圍介質(zhì)中的表達(dá)宿主,因?yàn)檫@使得處理比較簡單。還優(yōu)選的宿主細(xì)胞是細(xì)菌。細(xì)菌的特征在于傳代時(shí)間短,對培養(yǎng)條件需求低。因此,可以建立廉價(jià)的方法。另外,在發(fā)酵工藝中關(guān)于細(xì)菌有大量實(shí)踐財(cái)富。對于在個(gè)別情況下有待通過試驗(yàn)確定的多種理由而言,革蘭陰性細(xì)菌或革蘭陽性細(xì)菌可能適用于特定的生產(chǎn),所述理由例如營養(yǎng)源、產(chǎn)物形成速率、所需時(shí)間等。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中,細(xì)菌涉及革蘭陰性細(xì)菌,特別是大腸桿菌屬(Escherichiacoli)或克雷伯菌屬(Klebsiella)中的一種,特別是大腸桿菌K12菌株、大腸桿菌B菌株或植物克雷伯桿菌(Klebsiellaplanticola)菌株,最特別的是大腸桿菌BL21(DE3)、大腸桿菌RV308、大腸桿菌36DH5a、大腸桿菌JM109、大腸桿菌XL-1或植物克雷伯桿菌(Rf)菌株的衍生物。在革蘭陰性細(xì)菌如大腸桿菌的情況下,多數(shù)蛋白質(zhì)被分泌到細(xì)胞周質(zhì)間隙。這對特定的應(yīng)用可能是有利的。在專利申請WO01/81597中公開了一種方法用于得到即使在革蘭陰性細(xì)菌的情況下也分泌表達(dá)的蛋白質(zhì)的結(jié)果。這種系統(tǒng)也適用于生產(chǎn)本發(fā)明的蛋白質(zhì)。提到為優(yōu)選的革蘭陰性細(xì)菌通常容易得到,即商業(yè)上或通過公共菌株保藏機(jī)構(gòu),對于特定的生產(chǎn)條件,所述革蘭陰性細(xì)菌可以與其他也可以大量得到的成分如載體結(jié)合而被優(yōu)化。一種仍然優(yōu)選的可選的實(shí)施方案涉及一種革蘭陽性細(xì)菌,特別是芽孢桿菌屬(Bacillus)、葡萄球菌屬(Staphylococcus)或棒狀桿菌屬(Corynebacteria)中的一種,最尤其是遲緩芽孢桿菌(Bacilluslentus)、地衣芽孢桿菌(B.licheniformis)、解淀粉芽孢桿菌(B.amyloliquefaciens)、枯草芽孢桿菌(B.subtilis)、球芽孢桿菌(B.globigii)、吉氏芽孢桿菌(B.gibsonii)、短小芽孢桿菌(B.pumilus)、或嗜堿芽孢桿菌(B.alcalophilus)、肉葡萄球菌(Staphylococcuscarnosus)或谷氨酸棒狀桿菌(Corynebacteriumglutamicum)菌禾中中白勺——禾中。革蘭陽性細(xì)菌與革蘭陰性細(xì)菌相比具有根本區(qū)別,所述區(qū)別在于它們將分泌的蛋白質(zhì)直接釋放到細(xì)胞周圍的培養(yǎng)基中;如果需要,可以從培養(yǎng)基直接純化表達(dá)的本發(fā)明的蛋白質(zhì)。此外,它們與大多數(shù)工業(yè)上重要的枯草桿菌蛋白酶所來源的生物體相關(guān)或相同,并且通常本身形成可比較的枯草桿菌蛋白酶,所以它們具有相似的密碼子選擇,而且它們的蛋白質(zhì)合成設(shè)備相應(yīng)地自然也一致。另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)可能包括這樣一個(gè)事實(shí),即利用這種方法,可以得到本發(fā)明的蛋白質(zhì)與由宿主菌株內(nèi)源形成的枯草桿菌蛋白酶的混合物。這種共表達(dá)也在專利申請WO91/02792中公開。如果這是不需要的,那么宿主細(xì)胞中天然存在的蛋白酶基因必須永久或暫時(shí)滅活。還優(yōu)選真核細(xì)胞的宿主細(xì)胞,優(yōu)選酵母菌屬。其中例子包括真菌,例如放線菌或甚至酵母菌如酵母屬(Saccharomyces)或克魯維酵母屬(Kluyveromyces)。嗜熱真菌表達(dá)系統(tǒng)在例如WO96/02653Al中介紹。所述系統(tǒng)特別適合用于表達(dá)溫度穩(wěn)定型變異體。使真核系統(tǒng)可用的修飾,特別是與蛋白質(zhì)合成結(jié)合,包括例如低分子化合物(如膜錨著點(diǎn)或寡糖)的結(jié)合。所述寡糖修飾基因可能是期望的,例如用于降低變應(yīng)原性。與由這種細(xì)胞天然形成的酶(例如纖維素酶)共表達(dá)也可能是有利的。生產(chǎn)本發(fā)明的多肽的方法構(gòu)成本發(fā)明單獨(dú)的主題。這包括生產(chǎn)如上所述本發(fā)明的多肽的方法,例如化學(xué)合成方法。但另一方面,基于上文列舉的本發(fā)明的核酸,所有上文各方面已提到的并已在現(xiàn)有技術(shù)中已建立的分子生物學(xué)、微生物學(xué)和/或生物技術(shù)生產(chǎn)方法都是優(yōu)選的。根據(jù)以上所指出的,經(jīng)鑒定在序列表中以SEQIDNO.1所示的核酸或突變體或相應(yīng)地源自它們的其子序列可以用于此。這些是優(yōu)選的方法,其利用以前鑒定的載體進(jìn)行,更優(yōu)選利用以前鑒定的細(xì)胞,有利地是遺傳修飾細(xì)胞。以這種方式,相應(yīng)地使優(yōu)選的遺傳信息可用,以可微生物學(xué)上利用的形式。本發(fā)明的實(shí)施方案還可以是以各核酸序列為基礎(chǔ)的無細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng),其中蛋白質(zhì)生物合成在體外再現(xiàn)。所有上文已敘述的元件也可以組合以產(chǎn)生新的方法,用以生產(chǎn)本發(fā)明的蛋白質(zhì)。對于每種本發(fā)明的蛋白質(zhì),可想得到許多工藝步驟的可能組合,因此對于每種各個(gè)具體情況必須以實(shí)驗(yàn)確定最佳方法。根據(jù)以上所述,在上述方法中,優(yōu)選的是那些已使其中的核苷酸序列一個(gè)密碼子,優(yōu)選幾個(gè)密碼子,適合宿主菌株的密碼子選擇的方法。本發(fā)明的一個(gè)單獨(dú)主題包括試劑,其含有上述本發(fā)明的多肽。所有類型的試劑,特別是混合物、配劑、溶液等(它們的可用性通過添加一種上述本發(fā)明的蛋白質(zhì)而得以提高)都包括在本發(fā)明保護(hù)的范圍內(nèi)。依賴于應(yīng)用的領(lǐng)域,這些試劑可以是固體混合物例如含有冷凍干燥的或膠囊化的蛋白質(zhì)的粉末,或凝膠狀或液體試劑。優(yōu)選的配方包含例如緩沖物質(zhì)、穩(wěn)定劑、反應(yīng)物和/或蛋白酶的輔因子和/或與蛋白酶協(xié)同作用的其他成分。這些試劑特別包括用于以下提及的應(yīng)用領(lǐng)域的試劑。另外的應(yīng)用領(lǐng)域源自現(xiàn)有技術(shù),在例如H.Uhlig的手冊"IndustrialEnzymesandTheirApplications",Wiley-Verlag,NewYork,1998中討論。本說明書可能的應(yīng)用領(lǐng)域特別包括在紡織品生產(chǎn)中用于生產(chǎn)或處理原料或中間品,特別是用于除去織物上的污垢層,特別是羊毛或絲綢上的,以及用于護(hù)理含天然纖維的紡織品,特別是羊毛或絲綢。特別是天然纖維如羊毛或絲綢的特征在于特異性的微觀表面結(jié)構(gòu)。這種微觀結(jié)構(gòu)最后可能引起不希望的如氈縮這樣的影響,如在2000年4月1日的MelliandTextilberichte(第263頁)在R.Breier的文章中以羊毛為例所說明的。為了避免所述效應(yīng),用本發(fā)明的試劑處理天然原料,所述試劑有助于例如使基于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的鱗狀表面結(jié)構(gòu)變光滑從而阻止氈縮。本發(fā)明的主題相應(yīng)地還包括用于處理紡織品原料和用于紡織品護(hù)理的方法,其中本發(fā)明的多肽用在至少一個(gè)工藝步驟中。其中,用于紡織品原料、纖維或有天然成分的紡織品的優(yōu)選工藝特別是那些含有羊毛或絲綢的。例如,這些方法可能是制備原料用于加工以獲得紡織品的方法,例如用于防縮整理,或例如通過添加護(hù)理成分改善舊的紡織品清潔的方法。其他可能的應(yīng)用領(lǐng)域包括,例如一用于生物化學(xué)分析或者用于合成低分子化合物或蛋白質(zhì),優(yōu)選包括用于末端基團(tuán)測定,作為肽序列分析的一部分;—用于有價(jià)值的生物原料的天然物質(zhì)的制備、純化或合成;一用于處理天然原料,特別是用于表面處理,最特別用在處理皮革的方法中,特別是用于皮革脫毛;一用于處理膠片,特別是用于除去含明膠層或類似的保護(hù)層;和—用于生產(chǎn)食物或動(dòng)物飼料,特別是用于豆奶和/或豆奶制品的酶處理?;旧?,上述本發(fā)明的多肽在所有其他
技術(shù)領(lǐng)域:
(已發(fā)現(xiàn)其適用于所述
技術(shù)領(lǐng)域:
)中的應(yīng)用都包括在本專利申請的保護(hù)范圍內(nèi)。本發(fā)明的另一個(gè)可能的應(yīng)用是本發(fā)明的多肽在化妝品中的應(yīng)用。這些化妝品應(yīng)理解為包括所有類型用于人皮膚或人毛發(fā)的清潔劑和護(hù)理劑,特別是清潔劑。所述試劑還可以是藥物,取決于預(yù)期的應(yīng)用。蛋白酶在人皮膚的細(xì)胞更新過程(脫皮)中也起關(guān)鍵作用(T.Egelrud等,ActaDerm.Venerol.,vol.71(1991),第471-474頁)。相應(yīng)地,蛋白酶也在護(hù)膚劑中用作生物活性成分以加強(qiáng)橋粒結(jié)構(gòu)的退化,所述橋粒結(jié)構(gòu)在干性皮膚中增加。在位點(diǎn)R99G/A/S、S154D/E禾口/或L211D/E處有氨基酸替換的枯草桿菌蛋白酶用于化妝目的在例如WO97/07770Al中描述。根據(jù)上述說法,本發(fā)明的蛋白酶還可以進(jìn)一步通過相應(yīng)的定點(diǎn)誘變開發(fā)。本發(fā)明的蛋白酶,特別是那些活性受控的蛋白酶,例如通過誘變或通過添加與它們相互作用的相應(yīng)物質(zhì),因此也40適合在皮膚或毛發(fā)清潔劑或護(hù)理劑中作為活性成分。更優(yōu)選的是這些酶的這類制劑,其如上所述,例如通過偶合至高分子載體(cf.US5,230,891)而被穩(wěn)定化和/或通過在高變應(yīng)原性位點(diǎn)發(fā)生點(diǎn)突變而被衍生化,所以它們有更高的人皮膚耐受性。本發(fā)明的化妝品和/或藥物的例子包括洗發(fā)劑、肥皂、洗液、乳膏劑、脫屑劑,還有口腔、牙齒或牙科假體護(hù)理劑。這些試劑可能也特別包含如列于下文用于洗滌劑和清潔劑的成分。從而,相應(yīng)的美容清潔和護(hù)理方法以及所述蛋白水解酶用于美容目的的應(yīng)用也包括在本發(fā)明的這個(gè)主題中,特別是在相應(yīng)的試劑例如洗發(fā)劑、肥皂或洗液或在提供的護(hù)理劑(例如以乳膏劑的形式)中。在脫屑藥物中的應(yīng)用,例如用于其生產(chǎn),也包括在該主題中。包含本發(fā)明多肽的洗滌劑和清潔劑是根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)特別優(yōu)選的主題,因?yàn)槿绫緦@暾堉械睦拘詫?shí)施方案所示,與含傳統(tǒng)應(yīng)用的蛋白酶的試劑相比較,已令人驚訝地觀察到,利用根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的蛋白酶的洗滌劑和清潔劑的洗滌性能提高。從本專利申請的意義上說,洗滌劑和/或清潔劑的洗滌性能或清潔性能應(yīng)理解為指的是所討論的試劑對污染的物品(例如紡織品或有硬質(zhì)表面的物品)的作用。評(píng)價(jià)所述試劑的單獨(dú)成分,特別是本發(fā)明的酶,關(guān)于總體上它們對洗滌劑和/或清潔劑的洗滌性能或清潔性能的貢獻(xiàn)。在本說明書中特別應(yīng)考慮到的是,不可能容易地從其酶學(xué)性質(zhì)推論出酶對試劑洗滌效能的貢獻(xiàn)。而代之以,除酶學(xué)活性外,在本說明書中還特別由以下因素起作用,例如穩(wěn)定性、底物結(jié)合、與待清潔物質(zhì)的結(jié)合或者與洗滌劑或清潔劑的其他成分的相互作用,特別還可能是在除去污物時(shí)的協(xié)同作用。如上文所說明的,同源蛋白酶Q5XPN0、Q2HXI3、Q9KWR4和Q6SIX5在洗滌劑或清潔劑中的應(yīng)用尚未公開。本發(fā)明的另一個(gè)主題因此包括含多肽的洗滌劑和清潔劑,特別是含有表面活性劑和/或漂白劑的洗滌劑和清潔劑,所述多肽特別是水解酶,優(yōu)選蛋白酶,更優(yōu)選枯草桿菌蛋白酶型的堿性蛋白酶,所述多肽選自a)具有根據(jù)SEQIDNO.2的氨基酸序列的多肽,b)具有根據(jù)SEQIDNO.2從109位至383位氨基酸序列的多肽,c)根據(jù)(a)或(b)的多肽的天然存在或人工產(chǎn)生的突變體、多晶型物或等位基因,其具有最多50個(gè)突變,更優(yōu)選具有最多45個(gè)、40個(gè)、35個(gè)、30個(gè)、25個(gè)或20個(gè)突變,特別是具有最多15個(gè)、12個(gè)、10個(gè)、9個(gè)、8個(gè)、7個(gè)、6個(gè)或5個(gè)突變,更優(yōu)選具有最多4個(gè)、3個(gè)或2個(gè)突變,尤其是恰好l個(gè)突變,d)具有關(guān)于根據(jù)(a)或(b)的多肽的序列同源性或至少80%序列同一性的多肽,更優(yōu)選至少81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%或90%,特別優(yōu)選至少91%、92%、93%、94%或95%,尤其是至少96%、97%、98%或99%,e)包括根據(jù)(a)或(b)的氨基酸序列的至少50個(gè)連續(xù)氨基酸的多肽,更優(yōu)選至少60個(gè)、70個(gè)、80個(gè)、卯個(gè)或100個(gè),特別優(yōu)選至少120個(gè)、140個(gè)、160個(gè)、180個(gè)或200個(gè),特別是至少220個(gè)、240個(gè)、260個(gè)或270個(gè)連續(xù)氨基酸,f)具有關(guān)于根據(jù)(a)、(b)、(c)、(d)或(e)的多肽最多50個(gè)氨基酸插入和/或缺失和/或倒位的多肽,優(yōu)選最多40個(gè)、30個(gè)或20個(gè),更優(yōu)選最多15個(gè)、10個(gè)或5個(gè),特別是最多4個(gè)、3個(gè)或2個(gè)氨基酸,特別是恰好1個(gè)氨基酸的插入和/或缺失,g)包括從(a)到(f)所列出的多肽中至少一種的多肽,本說明書中本發(fā)明的主題優(yōu)選包括含有上文提到的本發(fā)明的多肽的洗滌劑和清潔劑,所述多肽與根據(jù)SEQIDNO.2的本發(fā)明多肽和/或與SEQIDNO.2從109位至383位的本發(fā)明多肽有更高同源性。42本發(fā)明的洗滌劑和清潔劑可包括所有想得到的類型的清潔劑,既包括濃縮劑也包括不用稀釋使用的試劑,對于商業(yè)規(guī)模上用于洗衣機(jī)或用于手洗和/或手工清潔。這些包括例如用于紡織品、地毯或天然纖維的洗滌劑,用于根據(jù)本發(fā)明的應(yīng)用的術(shù)語洗滌劑。這些還包括例如用于洗碗機(jī)的洗碗劑或手工洗碗劑或用于硬質(zhì)表面例如金屬、玻璃、瓷器、陶器、瓦、寶石、漆表面、塑料、木制品或皮革的清潔劑;根據(jù)本發(fā)明對于所述產(chǎn)品應(yīng)用術(shù)語清潔劑。廣義上,滅菌劑和消毒劑也可視為本發(fā)明意義上的洗滌劑和清潔劑。本發(fā)明的實(shí)施方案包括所有本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑的方便的劑型和/或根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)確定的方便的施用形式。這些施用形式包括例如固體、粉末、液體、凝膠劑或膏劑,也可選擇性地包括多相,壓縮的或不壓縮的;此外,這些施用形式還包括例如擠出物、顆粒劑、片劑或小袋,包裝在大容器中以及以小份包裝的那些。在優(yōu)選的實(shí)施方案中,本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑包含上述本發(fā)明的多肽,特別是枯草桿菌蛋白酶型的堿性蛋白酶,每克試劑含量2pg-20mg,優(yōu)選5pg-17.5mg,更優(yōu)選20險(xiǎn)15mg,最優(yōu)選50pg-10mg。這包括這些數(shù)值之間的所有整數(shù)和非整數(shù)值。所述試劑中蛋白酶活性可以根據(jù)Tenside[Surfactants],vol.7(1970),第125-132頁中所述的方法測定。相應(yīng)地以PE(蛋白酶單位)給出蛋白酶活性。在兩種洗滌劑用酶性能的比較中,如在本專利申請的實(shí)施例中,例如必須區(qū)別蛋白質(zhì)當(dāng)量應(yīng)用和活性當(dāng)量應(yīng)用。特別是在用基因工程生產(chǎn)并多半沒有次級(jí)活性的制劑情況中,提到了蛋白質(zhì)當(dāng)量的應(yīng)用。這可得到一個(gè)聲明,關(guān)于是否等量蛋白質(zhì)一一作為酶法生產(chǎn)產(chǎn)率的量度一一帶來可比較的結(jié)果。如果活性物質(zhì)與總蛋白的各個(gè)比例(比活值)非常不同,那么推薦活性當(dāng)量比較,因?yàn)榭梢杂眠@種方式比較各43酶學(xué)活性。大體上,通過添加大量蛋白質(zhì)可以補(bǔ)償?shù)捅然钍强陀^事實(shí)。這終究是一種出于經(jīng)濟(jì)性的考慮。除本發(fā)明的多肽外,本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑還可選擇性地包含其他成分,例如額外的酶,酶穩(wěn)定劑,表面活性劑如非離子、陰離子和/或兩性表面活性劑,和/或漂白劑和/或助洗劑,還選擇性地包括其他下文提到的常規(guī)成分。優(yōu)選用作非離子型表面活性劑的是垸氧基化醇、有利的是乙氧基化醇,特別是伯醇,優(yōu)選含有8-18個(gè)碳原子和平均每摩爾醇l-12mo1環(huán)氧乙烷(EO)的伯醇,其中醇基可以是直鏈的,或優(yōu)選可以在2位具有甲基支鏈,和/或可以在混合物中含有直鏈的和甲基支鏈的殘基,例如那些通常在含氧醇基中發(fā)現(xiàn)的。但是,特別優(yōu)選具有12-18個(gè)碳原子的、天然來源(例如源自椰子脂肪醇、棕櫚脂肪醇、動(dòng)物脂脂肪醇或油醇)的醇的直鏈殘基的醇乙氧基化物,優(yōu)選平均每摩爾醇2-8EO。優(yōu)選的乙氧基化醇包括例如含有3EO或4EO的(312-14醇、含有7EO的C9—u醇、含有3EO、5EO、7EO或8EO的C13—15醇、含有3EO、5EO或7EO的<:12.18醇及其混合物,例如含有3EO的(312-14醇和含有5EO的(312_18醇的混合物。上述乙氧基化的程度是統(tǒng)計(jì)學(xué)平均值,對于特定產(chǎn)品該值可以是整數(shù)或分?jǐn)?shù)。優(yōu)選的醇乙氧基化物具有窄的同系物分布(窄范圍乙氧基化物,NRE)。除了這些非離子型表面活性劑外,也可應(yīng)用具有超過12EO的脂肪醇。這些脂肪醇的例子包括含有14EO、25EO、30EO或40EO的動(dòng)物脂脂肪醇。另一類優(yōu)選應(yīng)用并可以或者單獨(dú)用作非離子型表面活性劑或者與其他非離子型表面活性劑聯(lián)合應(yīng)用的非離子型表面活性劑包括,烷氧基化脂肪酸烷基酯,優(yōu)選乙氧基化的,或者乙氧基化和丙氧基化的脂肪酸烷基酯,優(yōu)選垸基鏈中有l(wèi)-4個(gè)碳原子,特別是脂肪酸甲酯。另一類可有利地應(yīng)用的非離子型表面活性劑是垸基多糖苷(APG)??梢詰?yīng)用的烷基多糖苷符合通式RO(G)z,其中R代表直鏈或支鏈(特別是2位甲基支鏈)的、飽和或不飽和的、含有8-22個(gè)碳原子(優(yōu)選12-18個(gè)碳原子)的脂肪族殘基,符號(hào)G代表含有5個(gè)或6個(gè)碳原子的糖單元,優(yōu)選葡萄糖。本說明書中糖基化程度z為1.0-4.0,優(yōu)選1.0-2.0,特別是1.1-1.4。本說明書中優(yōu)選使用直鏈烷基多葡糖苷,即其中的多聚糖基是葡萄糖殘基、烷基是正-垸基殘基的烷基多糖苷。氧化胺類型的非離子型表面活性劑,例如N-椰子烷基-N,N-氧化二甲胺(N-cocoalkyl-N,N-dimethylamineoxide)和N-動(dòng)物脂烷基-N,N-氧化二羥乙胺(N-tallowalkyl-N,N-dihydroxyethylamineoxide),和脂肪酸鏈烷醇酰胺也可能適合作為非離子型表面活性劑。這些非離子型表面活性劑的量優(yōu)選不大于乙氧基化脂肪醇的量,特別是不超過其一半量。其他合適的表面活性劑包括式(II)的多羥基脂肪酸酰胺R1R-CO-N-P(H》其中,RCO代表含有6-22個(gè)碳原子的脂肪族?;?,W代表氫、含有1-4個(gè)碳原子的垸基或羥烷基,[Z]代表含有3-10個(gè)碳原子和3-10個(gè)羥基的直鏈或支鏈多羥基垸基。多羥基脂肪酸酰胺是已知物,其通常可以通過用銨、烷基胺或垸醇胺還原糖的還原胺化,隨后用脂肪酸、脂肪酸烷基酯或脂肪酸酰氯酰化而獲得。這組多羥基脂肪酸酰胺還包括式(III)的化合物R-CO蕃fZ](川)其中,R代表含有7-12個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基或烯基,RM戈表含有2-8個(gè)碳原子的直鏈、支鏈或環(huán)化的烷基或芳基,W代表含有l(wèi)-8個(gè)碳原子的直鏈、支鏈或環(huán)化的垸基或芳基或者是烷氧基,其中優(yōu)選CM垸基或苯基,[Z]代表直鏈多羥基烷基(其烷基鏈用至少兩個(gè)羥基取代),或所述基團(tuán)的烷氧基化衍生物,優(yōu)選乙氧基化或丙氧基化衍生物。優(yōu)選通過還原糖的還原胺化獲得[Z],所述還原糖例如葡萄糖、果糖、麥芽糖、乳糖、半乳糖、甘露糖或木糖。在有醇鹽作為催化劑時(shí),可以使N-垸氧基-或N-芳氧基取代的化合物與脂肪酸甲酯反應(yīng)從而轉(zhuǎn)變成所需的多羥基脂肪酸酰胺。應(yīng)用的陰離子型表面活性劑包括例如磺酸鹽和硫酸鹽類型的陰離子型表面活性劑??梢詢?yōu)選考慮的磺酸鹽類表面活性劑包括Cm3焼基苯磺酸鹽、烯烴磺酸鹽,即烯烴磺酸鹽和烯二磺酸鹽和羥垸基磺酸鹽和二磺酸鹽的混合物,例如那些通過氣態(tài)三氧化硫的磺化作用和隨后的磺化產(chǎn)物堿性水解或酸性水解,而從具有末端或內(nèi)部雙鍵的C,2.,8單烯烴獲得的那些。獲自C,W8垸類的鏈垸磺酸鹽也是合適的,例如通過氯磺化作用或磺化氧化作用與隨后的水解和/或中和。而且,a-磺化脂肪酸的酯(磺酸酯),例如氫化椰子脂肪酸、棕櫚仁脂肪酸或動(dòng)物脂脂肪酸的a-磺化甲酯,也是合適的。其他合適的陰離子型表面活性劑包括硫酸化脂肪酸甘油酯。脂肪酸甘油酯應(yīng)理解為包括單酯、二酯和三酯及其混合物,例如那些通過單甘油與l-3mol脂肪酸的酯化反應(yīng)生產(chǎn)或者酯交換反應(yīng)、或甘油三酯與0.3-2mol甘油而獲得的。優(yōu)選的硫酸化脂肪酸甘油酯是含有6-22個(gè)碳原子的飽和脂肪酸的硫酸化產(chǎn)物,所述飽和脂肪酸例如己酸、辛酸、癸酸、肉豆蔻酸、月桂酸、棕櫚酸、硬脂酸或山崳酸。優(yōu)選的烷基(烯基)硫酸鹽是堿金屬鹽,特別是Q2-d8脂肪醇的硫酸半酯的鈉鹽,例如來自椰子脂肪醇、動(dòng)物脂脂肪醇、月桂醇、肉豆蔻醇、鯨蠟醇或硬脂醇或者CnrC2。含氧醇以及具有這些鏈長的仲醇的半酯。還優(yōu)選具有上述鏈長的垸基(烯基)硫酸鹽,其含有基于石油化學(xué)生產(chǎn)的合成的直鏈烷基,并具有降解行為,類似于基于來自脂肪化學(xué)的原料的適當(dāng)化合物的降解行為。在洗滌劑的技術(shù)關(guān)注中,優(yōu)選C12-C16垸基硫酸酯和C12-C15烷基硫酸鹽和C14-C15烷基硫酸鹽。2,3-烷基硫酸鹽也是合適的陰離子型表面活性劑。用l-6mol環(huán)氧乙烷乙氧基化的直鏈或支鏈C7.2i醇的硫酸單酯也是合適的,例如含有平均3.5mo1環(huán)氧乙烷(EO)的2-甲基支鏈CVu醇或含有1-4EO的dw8脂肪醇。由于它們的高發(fā)泡行為,在清潔劑中只以相對小的量應(yīng)用,例如最多5wt。/。,通常是l-5wt。/。。其他合適的陰離子型表面活性劑還包括烷基硫代琥珀酸的鹽(其也稱為磺基丁二酸鹽或硫代琥珀酸酯)、含有醇的硫代琥珀酸的單酯和/或二酯,所述醇優(yōu)選脂肪醇,特別是乙氧基化脂肪醇。優(yōu)選的磺基丁二酸鹽包含C^8脂肪醇?xì)埢蚱浠旌衔?。?yōu)選的磺基丁二酸鹽特別包含源自乙氧基化脂肪醇的脂肪醇?xì)埢?,單?dú)考慮時(shí)其是非離子型表面活性劑(見上述)。還特別優(yōu)選其中脂肪醇?xì)埢醋跃哂姓秶葱苑植嫉囊已趸敬嫉幕腔《猁}。而且,應(yīng)用烷基(烯基)琥珀酸或其鹽也是可能的,所述烷基(烯基)琥珀酸的烷基(烯基)鏈中優(yōu)選具有8-18個(gè)碳原子??梢蕴貏e考慮肥皂作為另外的陰離子型表面活性劑。合適的肥皂包括飽和脂肪酸肥皂例如月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、氫化芥子酸和山崳酸的鹽,還有特別是源自天然脂肪酸的肥皂混合物,所述天然脂肪酸例如椰子脂肪酸、棕櫚仁脂肪酸或動(dòng)物脂脂肪酸。陰離子型表面活性劑(包括肥皂)可能以其鈉鹽、鉀鹽或銨鹽及作為有機(jī)堿(例如單乙醇胺、二乙醇胺或三乙醇胺)的可溶鹽的形式存在。陰離子型表面活性劑優(yōu)選以其鈉鹽或鉀鹽形式存在,特別是以鈉鹽形式。表面活性劑可以存在于本發(fā)明的清潔劑或洗滌劑中,總量優(yōu)選5wt%-50wt%,特別是8wt%-30wt%,以最終的試劑計(jì)。本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑可以包含漂白劑。在那些在水中可提供H202而充當(dāng)漂白劑的化合物中,過碳酸鈉、四水合過硼酸鈉和一水合過硼酸鈉是特別重要的。其他可用的漂白劑包括例如過氧化焦磷酸鹽、枸櫞酸過氧化氫合物和提供H202的過酸鹽或過酸如過硫酸鹽和/或過硫酸。也可以應(yīng)用脲過氧水合物過尿素,其可用化學(xué)式H2N-CO-NH2,H202描述。如果需要,它們也可以包含來自有機(jī)漂白劑類的漂白劑,特別是當(dāng)試劑用于清潔硬質(zhì)表面時(shí),例如用于洗碗機(jī)中,盡管原則上有機(jī)漂白劑應(yīng)用在洗滌紡織品的試劑中也是可能的。典型的有機(jī)漂白劑包括二?;^氧化物,例如過氧化苯甲酰。其他典型的有機(jī)漂白劑包括過氧酸,其中垸基過氧酸和芳基過氧酸作為例子可以特別提及。優(yōu)選的代表物包括過氧苯甲酸及其環(huán)取代的衍生物,例如垸基過氧苯甲酸,但也可能應(yīng)用過氧-oc-萘酸和單過鄰苯二甲酸鎂鹽、脂肪族或取代脂肪族過氧酸,例如過氧月桂酸、過氧硬脂酸、s-苯二甲酰亞胺基過氧己酸(苯二甲酰亞胺基過氧己酸,PAP)、o-羧基苯甲酰胺基過氧己酸、N-壬烯氨基過己二酸和N-壬烯氨基過琥珀酸鹽以及脂肪族和芳脂族過氧二羧酸,例如1,12-二過氧羧酸、1,9-二過氧壬二酸、二過氧癸二酸、二過氧巴西基酸、二過氧苯二甲酸、2-癸基-二過氧丁烷-l,4-二酸、N,N-對苯二酰二-(6-氨基過己酸)。洗漆劑或清潔劑的漂白劑含量總計(jì)可為lwt%-40wt%,特別是10wt%-20wt%,其中有利地使用一水合過硼酸鹽或過碳酸鹽。為了在60°C或更低溫度洗滌時(shí),特別是洗衣預(yù)處理中,達(dá)到提高的漂白效果,試劑還可以包含漂白活化劑。可以用作漂白活化劑的化合物在過水解條件下產(chǎn)生脂肪族過氧化羧酸,所述脂肪族過氧化羧酸優(yōu)選具有l(wèi)-10個(gè)碳原子,特別是2-4個(gè)碳原子,和/或任選取代的過苯甲酸。那些具有上述數(shù)目碳原子的O-和/或N-?;?或任選取代的苯甲?;奈镔|(zhì)是合適的。優(yōu)選的是從德國專利申請DE19616693和DE19616767得知的聚?;鶕味?特別是四乙酰乙二胺(TAED))、?;貉苌铩蔡貏e是1,5-二乙酰基-2,4-二氧六氫-1,3,5-三嗪(DADHT)〕、酰化甘脲(特別是1,3,4,6-四乙酰基甘脲(TAGU)〕、N-?;鶃啺?特別是N-壬酰琥珀酰亞胺(NOSI)〕、?;踊撬猁}(特別是正壬酰-或異壬酰酚磺酸鹽(正-和/或異-NOBS)〕、?;u基羧酸〔如三乙基-O-乙酰檸檬酸鹽(TEOC)〕、羧酸酸酐(特別是苯二甲酸酸酐、N-羧基鄰氨基苯甲酸酸酐和/或琥珀酸酸酐)、羧酸酰胺〔如N-甲基二乙?;贰场⒁医货?、?;鄡r(jià)醇特別是乙酸甘油酯、乙二醇雙醋酸酯、醋酸異丙烯基酯、2,5-雙乙酸基-2,5-二氫呋喃和烯醇酯,還有歐洲專利申請EP0525239(SORMAN)中所述的乙?;嚼娲己透事洞己?或它們的混合物,從國際專利申請WO94/27970、WO94/28102、WO94/28103、WO95/00626、WO95/14759和WO95/17498中得知的如下?;茄苌铩蔡貏e是五乙酰葡萄糖(PAG)、五乙酰果糖、四乙酰木糖和八乙酰乳糖),還有酰化的、任選的N-烷基化谷氨酰胺和/或葡糖酸內(nèi)酯、三唑和/或三唑衍生物和/或粒狀己內(nèi)酰胺和/或己內(nèi)酰胺衍生物,優(yōu)選N-?;瘍?nèi)酰胺(如N-苯甲酰己內(nèi)酰胺和N-乙酰己內(nèi)酰胺)。從德國專利申請DE19616770得知的親水取代的?;s醛和國際專利申請WO95/14075中所述的?;鶅?nèi)酰胺也優(yōu)選用于本發(fā)明。還可以應(yīng)用從德國專利申請DE4443177得知的常規(guī)漂白活化劑的組合。而且,還可以應(yīng)用腈衍生物,例如氰基吡啶、四腈等,如N-烴基銨乙腈和/或氨腈衍生物。優(yōu)選的漂白活化劑是4-辛酰基羥苯磺酸鈉、正壬酰或異壬酰酚磺酸鹽(正-和/或異-NOBS)、H^—烯酰羥苯磺酸鹽(UDOBS)、十二垸酰羥苯磺酸鈉(DOBS)、癸酰基氧苯甲酸(DOBA,OBC10)和/或十二垸酰羥苯磺酸鹽(OBS12),還有N-甲基嗎啉鎗乙腈(MMA)。所述漂白活化劑常用量的范圍可以是總組合物的0.01wt%-20wt%,優(yōu)選0.1-15wt%,特別是1wt%-10wt%。除了或代替常規(guī)的漂白活化劑,也可能存在所謂的漂白催化劑。這些物質(zhì)是屬于漂白促進(jìn)劑的過渡金屬鹽和/或過渡金屬絡(luò)合物,如Mn-、Fe-、Co-、Ru-或Mo-salene絡(luò)合物或-羰基絡(luò)合物。具有含氮的三角配體的Mn、Fe、Co、Ru、Mo、Ti、V和Cu的絡(luò)合物以及Co-、Fe-、Cu-和Ru-氨絡(luò)合物也適合作為漂白催化劑,優(yōu)選應(yīng)用如DE19709284Al中所述化合物。本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑通常包含一種或多種助洗劑(builders),特別是沸石、硅酸鹽、碳酸鹽、有機(jī)共助洗劑還有一一如果不因生態(tài)原因反對其應(yīng)用一一磷酸鹽。后者是特別優(yōu)選用在洗碗機(jī)清潔劑中的助洗劑。本說明書可述及通式為NaMSix02x+1.yH20的結(jié)晶層狀硅酸鈉,其中M表示鈉或氫,x是從1.6-4的數(shù)字,優(yōu)選1.9-4.0,y是0-20之間的數(shù)字,x的優(yōu)選值是2、3或4。所述結(jié)晶層狀硅酸鹽在例如歐洲專利申請EP164514中描述。所述通式中優(yōu)選的結(jié)晶層狀硅酸鹽是其中M代表鈉,x采用值2或3的那些。特別優(yōu)選(3-和S-二硅酸鈉Na2Si205.yH20。商業(yè)上可以商品名SKS(Clariant)得到所述化合物。SKS-6⑧主要是5-二硅酸鈉,其通式為Na2Si205.yH20;SKS-7⑧主要是(3-二硅酸鈉。通過與酸(例如檸檬酸或碳酸)反應(yīng),5-二硅酸鈉產(chǎn)生kanemiteNaHSi205.yH20,其是商業(yè)上可得到的,商品名3《8-9@和/或SKS-10(Clariant)。應(yīng)用這些層狀硅酸鹽的化學(xué)修飾也可能是有利的。例如,可以適當(dāng)?shù)馗淖儗訝罟杷猁}的堿度。與5-二硅酸鈉相比,摻雜磷酸鹽和/或碳酸鹽的層狀硅酸鹽具有修飾了的晶體形態(tài),它們與5-二硅酸鈉相比,溶解更迅速,鈣結(jié)合容量增加。通用經(jīng)驗(yàn)式xNa20.ySi02.zP205的層狀硅酸鹽在專利申請DE19601063中描述,其中x與y的比相當(dāng)于數(shù)值0.35-0.6,x與z的比相當(dāng)于數(shù)值1.75-1200,y與z的比相當(dāng)于數(shù)值4-2800。使用特別精細(xì)地分離的層狀硅酸鹽,則也可能增加層狀硅酸鹽的溶解度。還可能應(yīng)用帶有其他成分的結(jié)晶層50狀硅酸鹽的化合物。本說明書將特別提到的是有纖維素衍生物的化合物,其在崩解效應(yīng)方面有優(yōu)勢,特別用在洗滌劑片劑中,還有含有多羧酸鹽(例如檸檬酸)禾B/或聚合的多羧酸鹽(例如丙烯酸共聚物)的化合物。本說明書中還可以應(yīng)用Na20:Si02比值為1:2到1:3.3(優(yōu)選1:2到1:2.8,特別是1:2到1:2.6)的無定形硅酸鈉,其有延緩溶解和次級(jí)洗滌性質(zhì)。與常規(guī)的無定形硅酸鈉相比,所述延緩溶解可以以各種方式實(shí)現(xiàn),例如通過表面處理、混合、壓實(shí)/壓縮或通過過度干燥。在本發(fā)明的上下文中,術(shù)語"無定形"還可理解為"對X射線無定形"。這意味著在X射線衍射實(shí)驗(yàn)中,所述硅酸鹽不像那些典型的晶體物質(zhì)一樣產(chǎn)生強(qiáng)烈的X射線反射,而是產(chǎn)生一種或多種最大量的散射X射線輻射,其寬為幾度衍射角。然而,如果硅酸鹽顆粒在電子衍射實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生模糊的或甚至尖銳的衍射峰,其可能確實(shí)恰好獲得特別好的助洗劑性質(zhì)。這應(yīng)解釋為,產(chǎn)物有微晶區(qū),大小為10nm—直到幾百nm,優(yōu)選最大值最多50nm,特別是最大值最多20nm。特別優(yōu)選壓縮的/壓實(shí)的無定形硅酸鹽、混合的無定形硅酸鹽和過度干燥的X射線無定形硅酸鹽。也可以任選地應(yīng)用一種精細(xì)結(jié)晶的含有結(jié)合水的合成沸石,優(yōu)選沸石A和/或沸石P。特別優(yōu)選沸石MAP②(Crosfield公司的商品)作為沸石P。但沸石X和A、X和/或P的混合物也是合適的。對于本發(fā)明上下文中的應(yīng)用,商業(yè)上可得到的和優(yōu)選的還有例如沸石X和沸石A的共結(jié)晶產(chǎn)物(大約80wtyo的沸石X),其由CONDEAAugustaS.p.A.公司銷售,商品名為VEGOBONDAX,可用以下化學(xué)式來描述nNaO.(l-n)K20-Al203.(2-2.5)Si02.(3.5-5.5)H20合適的沸石平均粒度小于10pm(體積分布;測量方法庫爾特粒度儀),優(yōu)選含18wt%-22wt。/。結(jié)晶水,特別是20wt。/。-22wt%。應(yīng)用普遍公知的磷酸鹽作為助洗劑物質(zhì)當(dāng)然也是可能的,如果所述應(yīng)用不應(yīng)因生態(tài)原因回避。各種商業(yè)上可得的磷酸鹽中,堿金屬磷酸鹽在洗滌劑工業(yè)和清潔劑工業(yè)中最為重要,特別優(yōu)選三磷酸五鈉和/或三磷酸五鉀(鈉和/或鉀的三聚磷酸鹽)。堿金屬磷酸鹽是各種磷酸的堿金屬鹽(特別是鈉鹽和鉀鹽)的總稱,可以分為偏磷酸(HP03)n和正磷酸H3P04,此外還有更高分子的代表。所述磷酸鹽兼有幾種優(yōu)點(diǎn)它們充當(dāng)堿載體、阻止氧化鈣沉淀物沉積在機(jī)器零件上和/或氧化鈣結(jié)殼在織物上,還有助于清潔性能。磷酸二氫鈉(NaH2P04)以二水合物(密度1.91g.cm—3,熔點(diǎn)60°C)和一水合物(密度2.04g.cm—3)存在。兩種鹽都是白色粉末,極易溶于水,200°C加熱時(shí)失去結(jié)晶水,轉(zhuǎn)變成弱酸性的二磷酸鹽(二磷酸氫二鈉,Na2H2P207);溫度更高時(shí)轉(zhuǎn)變成三偏磷酸鈉(Na3P309)和Maddrell鹽(見下文)。NaH2P04顯酸性反應(yīng);用氫氧化鈉溶液將磷酸調(diào)節(jié)至pH4.5并干燥漿料時(shí)就形成NaH2P04。磷酸二氫鉀(初級(jí)或一元磷酸鉀、二磷酸鉀,KDP),KH2P04是白色的鹽,密度2.33g.cm-3,熔點(diǎn)253°C〔分解,形成多聚磷酸鉀(KP03)x〕,易溶于水。磷酸氫二鈉Na2HP04是一種無色結(jié)晶、高水溶性的鹽。其以無水以及帶2mo1水(密度2.066g.cm-3,95°C失水)、7mol水(密度1.68g.cm-3,熔點(diǎn)48°C失5H20)禾卩12mol水(密度1.52g-cm-3,熔點(diǎn)35°C失5H20)的形式存在,在100°C變成無水形式,繼續(xù)加熱轉(zhuǎn)變成二磷酸鹽Na4P207。通過用碳酸鈉溶液中和磷酸而產(chǎn)生磷酸氫二鈉,用酚酞作指示劑。磷酸氫二鉀(次級(jí)或二元磷酸鉀)K2HP04是無定形白色鹽,易溶于水。磷酸三鈉,叔磷酸鈉,Na3P04是無色結(jié)晶,為十二水合物時(shí),密度1.62g.cm-3,熔點(diǎn)73-76°C(分解),為十水合物時(shí)(相當(dāng)于19-20%52P205),熔點(diǎn)100°C,無水形式(相當(dāng)于39-40%P205)的密度2.536g.cm氣磷酸三鈉易溶于水,呈堿性反應(yīng),通過蒸發(fā)恰好lmol磷酸二鈉和lmolNaOH的溶液而制備。磷酸三鉀(三級(jí)或三元磷酸鉀)K3P04是白色易潮解粒狀粉末,密度2.56g,cm—3,熔點(diǎn)1340°C,易溶于水,呈堿性反應(yīng)。其通過例如碳和硫酸鉀與托馬斯?fàn)t渣一起加熱而形成。與相應(yīng)的鈉化合物比較,磷酸鉀雖然價(jià)格更高,但是更易溶并因此更有效,所以更優(yōu)選用在清潔劑工業(yè)中。二磷酸四鈉(焦磷酸鈉)Na4P207以無水形式存在(密度2.534g.cm—3,熔點(diǎn)988°C,也有顯示為880°C),也作為十水合物存在(密度1.815-1.836g.cm—3,熔點(diǎn)94°C失水)。兩種物質(zhì)都是無色結(jié)晶,溶于水,呈堿性反應(yīng)。通過將磷酸二鈉加熱至超過200。C而形成Na4P207,或者通過使磷酸與碳酸鈉以化學(xué)計(jì)量比反應(yīng)并用噴霧法使溶液脫水而形成。十水合物絡(luò)合重金屬鹽和引起水硬度的鹽,因此降低了水的硬度。二磷酸鉀(焦磷酸鉀)K4P207以三水合物形式存在,為無色吸濕性粉末,密度2.33g.cm人其溶于水,且25°C下1%溶液的pH為10.4。通過NaH2P04和/或KH2P04的縮合,形成更高分子量的磷酸鈉和磷酸鉀;可分為環(huán)狀代表物(偏磷酸鈉和/或偏磷酸鉀)和鏈形物質(zhì)(多聚磷酸鈉和/或多聚磷酸鉀)。有許多術(shù)語已用于后者熔融的或燒制的磷酸鹽、Graham鹽、Kurrol鹽和Maddrell鹽。所有更高級(jí)的磷酸鈉和磷酸鉀統(tǒng)稱為濃縮的磷酸鹽。工業(yè)上重要的三磷酸五鈉(Na5P30K);三聚磷酸鈉)是通式為NaO-[P(O)(ONa)-O]n-Na的非吸濕性、白色、水溶性鹽,其中n=3;其可能是無水的或可能帶有6H2O的結(jié)晶。100g水中室溫大約溶解17g;60°C大約20g;大約32g無結(jié)晶水的鹽會(huì)在100°C溶解;100°C加熱溶液2小時(shí)后,通過水解作用形成大約8%正磷酸鹽和15%二磷酸鹽。在三磷酸五鈉的生產(chǎn)中,使磷酸與碳酸鈉溶液或氫氧化鈉溶液以化學(xué)計(jì)量比反應(yīng),用噴霧法使溶液脫水。像Graham鹽和磷酸鈉一樣,三磷酸五鈉會(huì)溶解許多不溶性金屬化合物(甚至是石灰皂等)。三磷酸五鉀&5301()(三聚磷酸鉀)是商業(yè)上可得到的,例如以50wt。/。溶液023。/。P20s,25。/。K20)的形式。多聚磷酸鉀廣泛用于洗滌劑和清潔劑工業(yè)中。而且,還有三聚磷酸鈉鉀,其也可以在本發(fā)明的范圍內(nèi)應(yīng)用。例如當(dāng)用KOH水解三偏磷酸鈉時(shí)形成三聚磷酸鈉鉀(NaP03)3+2KOH~>Na3K2P3O10+H20這些可以根據(jù)本發(fā)明應(yīng)用,正如三聚磷酸鈉、三聚磷酸鉀或這兩者的混合物;三聚磷酸鈉和三聚磷酸鈉鉀的混合物或三聚磷酸鉀和三聚磷酸鈉鉀的混合物或三聚磷酸鈉和三聚磷酸鉀和三聚磷酸鈉鉀的混合物也可以根據(jù)本發(fā)明應(yīng)用??捎迷诒景l(fā)明洗滌劑和清潔劑中的有機(jī)共助洗劑特別包括多羧酸鹽或多羧酸、聚合物多羧酸鹽、聚天冬氨酸、聚縮醛、任選氧化的糊精、其他有機(jī)共助洗劑(見下文)和膦酸鹽。這些類別的物質(zhì)描述如下??蓱?yīng)用的有機(jī)助洗劑物質(zhì)包括例如多羧酸(可以其鈉鹽形式應(yīng)用),其中多羧酸應(yīng)理解為具有超過一個(gè)酸性官能團(tuán)的羧酸。例如,如果所述應(yīng)用不因生態(tài)學(xué)原因而回避,那么這些羧酸包括檸檬酸、己二酸、琥珀酸、戊二酸、蘋果酸、酒石酸、馬來酸、延胡索酸、糖酸、氨基羧酸、硝基三乙酸(NTA),還有它們的混合物。優(yōu)選的鹽是多羧酸的鹽,所述羧酸例如檸檬酸、己二酸、琥珀酸、戊二酸、酒石酸、糖酸和它們的混合物。所述酸本身也可以應(yīng)用。除助洗效應(yīng)外,它們還通常具有酸化成分的性質(zhì),因此如果不希望混合其他成分得到pH,它們也用于將洗滌劑或清潔劑pH調(diào)至更低和更適中。本說明書將特別談到的是與所述系統(tǒng)相容并且生態(tài)上可接受的酸,例如檸檬酸、乙酸、酒石酸、馬來酸、乳酸、羥乙酸、琥珀酸、戊二酸、己二酸、葡糖酸和它們的任意混合物。但無機(jī)酸(特別是硫酸)或堿(特別是氫氧化銨或堿金屬氫氧化物)也可以用作pH調(diào)節(jié)劑。所述調(diào)節(jié)劑在本發(fā)明的試劑中存在的量優(yōu)選不超過20wt%,特別是1.2wt%-17wt%。適宜的助洗劑還有聚合物多羧酸鹽,其包括例如聚丙烯酸或聚甲基丙烯酸的堿金屬鹽,如相對分子量500g/mol-70,000g/mol的那些。從本文件的意義上說,給出的聚合物多羧酸鹽的分子量是各個(gè)酸形式的重均分子量Mw,其已主要利用紫外檢測器通過凝膠滲透色譜(GPC)法測定。測量對照聚丙烯酸外標(biāo)完成,所述外標(biāo)提供實(shí)際的分子量值,由于其與研究的聚合物的結(jié)構(gòu)關(guān)系。用聚苯乙烯磺酸作為標(biāo)準(zhǔn)的數(shù)據(jù)明顯地偏離分子量數(shù)據(jù)。對照聚苯乙烯磺酸測量的分子量通常比本文件給出的分子量更高得多。適宜的聚合物特別是聚丙烯酸酯,其優(yōu)選具有2000g/mol-20,000g/mol的分子量。還可從該組中優(yōu)選分子量2000g/mol-10,000g/mol(更優(yōu)選3000g/mol-5000g/mol)的短鏈聚丙烯酸酯,由于它們的溶解度較大。共聚合多羧酸鹽也是適合的,特別是丙烯酸與甲基丙烯酸以及丙烯酸或甲基丙烯酸與馬來酸的共聚合多羧酸鹽。丙烯酸與馬來酸的共聚物含50wt%-90wt。/。的丙烯酸和50wt%-10wt。/。的馬來酸,已證明其是尤其合適的。它們的相對分子量(以游離酸計(jì))通常是2000g/mol-70,000g/mol,優(yōu)選20,000g/mol-50,000g/mol,特別是30,000g/mol-40,000g/mol。聚合物(共聚合)多羧酸鹽可以粉末或水溶液應(yīng)用。試劑中含有的聚合物(共聚合)多羧酸鹽的量可以是0.5wt%-20wt%,特別是1wt%-10wt%。為了提高水溶性,所述聚合物還可以含有垸基磺酸,例如烯丙氧基苯磺酸和甲基烯丙基磺酸作為單體。還特別優(yōu)選超過兩個(gè)不同的單體單元的生物可降解聚合物,例如含有丙烯酸和馬來酸的鹽作為單體的那些,還有乙烯醇和/或乙烯醇衍生物或含有丙烯酸和2-垸基烯丙基磺酸及糖衍生物的鹽作為單體的那些。其他優(yōu)選的共聚物是那些優(yōu)選含有丙烯醛和丙烯酸/丙烯酸鹽和/或丙烯醛和乙酸乙烯酯作為單體的共聚物。同樣地,將談到的其他優(yōu)選的助洗劑物質(zhì)包括聚合的氨基二羧酸、它們的鹽或它們的前體物質(zhì)。特別優(yōu)選聚天冬氨酸和/或它們的鹽和衍生物。其他合適的助洗劑物質(zhì)包括聚縮醛,其可以通過使二醛與多元醇羧酸(含有5-7個(gè)碳原子和至少3個(gè)羥基)反應(yīng)而獲得。優(yōu)選的聚縮醛獲自二醛,例如乙二醛、戊二醛、對酞醛及其混合物,以及獲自多元醇羧酸,例如葡糖酸和/或葡庚糖酸。其他適宜的有機(jī)助洗劑物質(zhì)包括糊精,例如可通過淀粉部分水解得到的糖類的寡聚體或多聚體。水解可以根據(jù)常規(guī)工藝進(jìn)行,例如酸催化工藝或酶催化工藝。優(yōu)選平均分子量在400g/mol-500,000g/mol的水解產(chǎn)物。優(yōu)選葡萄糖當(dāng)量(DE)在0.5-40范圍內(nèi)的多糖,特別是2-30,其中DE是多糖的還原作用的常用量度,與葡萄糖(其DE為IOO)相比較。還可優(yōu)選DE為3-20的麥芽糊精和DE為20-37的干葡萄糖漿,還有較高分子量(2000g/mol-30,000g/mol范圍內(nèi))的所謂黃糊精和白糊精。所述糊精的氧化衍生物是其與氧化劑的反應(yīng)產(chǎn)物,所述氧化劑能夠?qū)⒅辽僖粋€(gè)糖環(huán)的醇官能基氧化成羧酸官能基。根據(jù)專利申請EP472042、WO97/25399和EP755944,特別優(yōu)選用于本發(fā)明試劑的有機(jī)助洗劑包括氧化淀粉和/或它們的衍生物。其他合適的共助洗劑包括氧化二琥珀酸鹽和二琥珀酸鹽的其他衍生物,優(yōu)選乙二胺二琥珀酸鹽。乙二胺-N,N'-二琥珀酸鹽(EDDS)優(yōu)選以其鈉鹽或鎂鹽的形式應(yīng)用。在本文上下文中,甘油二琥珀酸鹽和甘油三琥珀酸鹽也是優(yōu)選的。在含沸石、碳酸鹽和/或硅酸鹽的配方中適宜用量是3wt%-15wt%。其他也可應(yīng)用的有機(jī)共助洗劑包括例如乙?;u基羧酸和/或它們的鹽,其也可選擇性地以內(nèi)酯的形式出現(xiàn),其含有至少4個(gè)碳原子和至少1個(gè)羥基加上最多兩個(gè)酸性基團(tuán)。膦酸鹽是另一類有共助洗劑性質(zhì)的物質(zhì)。這些膦酸鹽特別包括羥基烷膦酸鹽和/或氨基垸膦酸鹽。在羥基烷膦酸鹽中,l-羥基-乙垸-l,l-二膦酸鹽(HEDP)作為共助洗劑尤其重要。其優(yōu)選用作鈉鹽,其中二鈉鹽提供中性反應(yīng),四鈉鹽提供堿性反應(yīng)(pH9)。優(yōu)選可以認(rèn)為乙二胺四亞甲基磷酸鹽(EDTMP)、二乙烯三胺五亞甲基膦酸鹽(DTPMP)和它們的高級(jí)同系物是氨基烷膦酸鹽。它們優(yōu)選以中性反應(yīng)的鈉鹽形式應(yīng)用,例如作為EDTMP的六鈉鹽和/或作為DTPMP的七鈉鹽和八鈉鹽。從膦酸鹽類中,優(yōu)選HEDP用作助洗劑。氨基烷膦酸鹽還具有較強(qiáng)的重金屬結(jié)合能力。因此,也優(yōu)選使用氨基垸膦酸鹽,特別是DTPMP,或所述膦酸鹽的混合物,特別是當(dāng)試劑還含有漂白劑時(shí)。另外,所有能與堿土金屬離子形成絡(luò)合物的化合物都可以用作共助洗劑。助洗劑物質(zhì)可以選擇性地以最多90wt。/。的量存在于本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑中。它們優(yōu)選以最多75wt。/。的量存在。本發(fā)明的洗滌劑尤57其含有5wt。/。-50Wt%的助洗劑含量。在本發(fā)明的用于清潔硬質(zhì)表面的試劑中,特別是用于餐具的機(jī)械清潔,助洗劑物質(zhì)含量特別是5wt。/。-88wt%,但優(yōu)選非水不溶性助洗物質(zhì)用在所述試劑中。在本發(fā)明特別用于餐具洗滌機(jī)的試劑的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中,含有20wt。/。-40wt。/。水溶性有機(jī)助洗劑,特別是堿金屬檸檬酸鹽、5wt%-15wt。/。堿金屬碳酸鹽和20wt%-40wt。/。堿金屬二硅酸鹽??梢杂迷谙礈靹┖颓鍧崉┑囊后w至凝膠組合物中的溶劑源于下組例如單價(jià)或多價(jià)醇、垸醇胺或乙二醇醚,如果它們在給定的濃度范圍內(nèi)可與水混合。所述溶劑優(yōu)選選自乙醇,正丙醇或異丙醇,丁醇,乙二醇甲醚,乙二醇乙醚,乙二醇丙醚,乙二醇單正丁醚,二乙二醇甲醚,二乙二醇乙醚,丙二醇甲醚,丙二醇乙醚或丙二醇丙醚,甲氧基-、乙氧基-或丁氧基三甘醇,l-丁氧基乙氧基-2-丙醇,3-甲基-3-甲氧基丁醇,丙烯二醇叔丁基醚,還有這些溶劑的混合物。溶劑可以用在本發(fā)明的液體至凝膠形式的洗滌劑和清潔劑中,用量為0.1-20wt%,但優(yōu)選小于15wt%,特別是小于10wt%。為了調(diào)節(jié)黏度,可將一種或多種增稠劑和/或濃縮體系加至本發(fā)明的組合物中。這些高分子量物質(zhì)(也稱為溶脹劑)主要吸收液體并在此過程中膨脹,最后變成粘性膠體溶液或真溶液。合適的增稠劑是無機(jī)或聚合有機(jī)化合物。無機(jī)增稠劑包括例如聚硅酸、黏土礦物如蒙脫石、沸石、硅酸和膨潤土。有機(jī)增稠劑來自下組天然聚合物、改性的天然聚合物和全合成聚合物。所述天然存在的聚合物包括例如瓊脂、卡拉膠、黃蓍樹膠、阿拉伯樹膠、藻酸鹽、果膠、多糖、古柯粉、角豆粉、淀粉、糊精、明膠和酪蛋白。用作增稠劑的改性的天然物質(zhì)主要源自下組變性淀粉和變性纖維素。本說明書的例子包括羧甲基纖維素和其他纖維素醚、羥乙纖維素和羥丙纖維素,還有kernelmealether(樹膠醚)。全合成增稠劑是聚合物例如58聚丙烯基化合物和聚甲基丙烯化合物、乙烯基聚合物、聚羧酸、聚醚、聚亞胺、聚酰胺和聚氨基甲酸酯。增稠劑用量可最多5wto/o,優(yōu)選0.05-2wt。/。,更優(yōu)選0.1to1.5wt%,以最終組合物計(jì)。本發(fā)明的洗滌劑和清潔劑可選擇性地包含螯合劑、電解質(zhì)和額外的添加劑如熒光增白劑、泛灰抑制劑、銀緩蝕劑、染料轉(zhuǎn)移抑制劑、抑泡劑、研磨劑、染料和/或香料,還有微生物有效成分、紫外線吸收劑和/或酶穩(wěn)定劑作為額外的常規(guī)成分。本發(fā)明的紡織品洗滌劑可含有二氨基芪二磺酸的衍生物和/或其堿金屬鹽作為熒光增白劑。合適的例子包括4,4'-雙(2-苯胺基-4-嗎啉代-1,3,5-三嗪基-6-氨基)均二苯代乙烯-2,2'-二磺酸的鹽,或者有類似結(jié)構(gòu)的化合物,所述化合物含有二乙醇氨基、甲氨基、苯胺基或甲氧乙氨基代替嗎啉代基。另外,也可有取代的二苯基苯乙烯類型的增白劑,例如4,4'-雙(2-硫代苯乙烯基)聯(lián)苯、4,4'-雙(4-氯代-3-硫代苯乙烯基)聯(lián)苯或4-(4-氯代苯乙烯基)-4'-(2-硫代苯乙烯基)聯(lián)苯的堿金屬鹽。也可以應(yīng)用上述熒光增白劑的混合物。泛灰抑制劑的作用是使從紡織品纖維上釋放出的污物保持懸于溶液中。水溶性膠體(通常是天然有機(jī)物的)適合用于此目的,例如淀粉、動(dòng)物膠、凝膠、淀粉或纖維素的醚羧酸或醚磺酸的鹽,或者纖維素或淀粉的酸性硫酸酯的鹽。含酸性基團(tuán)的水溶性聚酰胺也適合用于此目的。另外,淀粉衍生物(除上列那些外)也可以應(yīng)用,例如醛淀粉。優(yōu)選應(yīng)用纖維素醚,例如羧甲基纖維素(鈉鹽)、甲基纖維素、羥烷基纖維素和混合醚,如甲基羥乙基纖維素、甲基羥丙基纖維素、甲基羧甲基纖維素和其混合物,如用量為0.1-5wt%(以試劑計(jì))。為了保護(hù)銀器不受腐蝕,銀緩蝕劑可用在本發(fā)明的餐具清潔劑中。所述緩蝕劑從現(xiàn)有技術(shù)是已知的,如苯并三唑、氯化鐵(III)或CoS04。如從歐洲專利EP0736084B1得知的,特別適合與酶共用的銀緩蝕劑包括例如錳鹽、鈦鹽、鋯鹽、鉿鹽、釩鹽、鈷鹽或鈰鹽和/或其中所述金屬以氧化狀態(tài)II、III、IV、V或VI中的一種存在的絡(luò)合物。所述化合物的例子包括MnS04、V205、V204、V02、TiOS04、K2TiF6、K2ZrF6、Co(N03)2、Co(N03)3,還有其混合物。去污活性成分或防污劑通常是聚合物,其用在洗滌劑中使洗滌的纖維具有防污活性和/或增強(qiáng)其他洗滌劑成分的污物釋放能力。當(dāng)這些聚合物用在用于硬質(zhì)表面的清潔劑中時(shí),也可以觀察到可比較的效果。特別有效并長期以來已知道的去污活性成分是具有二羧酸單元、烷撐二醇單元和聚烷撐二醇單元的共聚酯。例子包括聚對苯二甲酸乙酯和聚氧乙烯二醇的共聚物或聚合物混合物(DT1617141和/或DT2200911)。未審查的德國專利申請DT2253063提到含有(除了別的之外)二元羧酸和烷撐的共聚物或環(huán)烷撐聚乙二醇的酸性試劑。在文件DE2857292禾卩DE3324258以及歐洲專利EP0253567中描述了對苯二甲酸乙二酯和聚環(huán)氧乙垸對苯二酸鹽的聚合物和它們在洗漆劑中的應(yīng)用。歐洲專利EP066944涉及含有乙二醇、聚乙二醇、芳香二羧酸和磺化芳香二羧酸(以一定的摩爾比值)的共聚酯的試劑。歐洲專利EP0185427公開了甲基或乙基封端的聚酯(其含有乙烯和/或丙烯對苯二酸鹽和聚環(huán)氧乙垸對苯二酸鹽單元)和含所述去污聚合物的洗滌劑。歐洲專利EP0241984涉及一種聚酯,其除氧乙烯基和對苯二甲酸單元外,還含有取代的乙烯單元和二醇單元。歐洲專利EP0241985描述了聚酯,其另外含有氧乙烯基和對苯二甲酸單元、1,2-丙烯基、1,2-丁烯基禾n/或3-甲氧基-l,2-丙烯基以及甘油單元,并由Cl至C4垸基封端。歐洲專利申請EP0272033公開了至少部分由Q—4烷基或丙烯基封端并含有聚丙烯對苯二酸鹽單元和聚氧乙烯對苯二酸鹽單元的聚酯。歐洲專利EP0274907描述了磺乙基封端的含對苯二酸鹽的去污聚酯。根據(jù)歐洲專利申請EP0357280,含有對苯二酸鹽單元、烷撐二醇單元和聚-C2-4-二醇單元的去污聚酯可以通過不飽和末端基團(tuán)的磺化作用產(chǎn)生。國際專利申請WO95/32232涉及酸性、芳香的可去污聚酯。國際專利申請WO97/31085公開了用于來自棉織物的非聚合防污活性成分,其含有多個(gè)功能官能基第一個(gè)單位例如(可以是陽離子的)能通過靜電相互作用吸附到棉表面,第二個(gè)單位(憎水的)負(fù)責(zé)使活性成分保留在水/棉界面。可考慮用在本發(fā)明紡織品洗滌劑中的染料轉(zhuǎn)移抑制劑特別包括聚乙烯吡咯垸酮、聚乙烯咪唑、聚合N-氧化物如聚(乙烯吡啶N-氧化物)以及乙烯基吡咯烷酮與乙烯咪唑的共聚物。當(dāng)用在機(jī)械清潔方法中時(shí),向各試劑中添加抑泡劑可能是有利的。合適的抑泡劑包括例如天然或合成來源的含大量C18-C24脂肪酸的肥皂。合適的非表面活性劑抑泡劑包括例如有機(jī)聚硅氧垸及其與微細(xì)粒硅酸(選擇性硅垸化的硅酸)的混合物,還有石蠟、蠟、微晶蠟或其與硅垸化硅酸或雙-硬脂酰乙烯二酰胺的混合物。不同抑泡劑的混合物也可以有效利用,例如硅酮、石蠟或蠟的混合物。優(yōu)選將抑泡劑,特別是含硅酮和/或石蠟的抑泡劑,與粒狀、水溶性和/或可分散的載體物質(zhì)結(jié)合。特別地,優(yōu)選石蠟和雙-硬脂酰乙烯二酰胺的混合物。本發(fā)明用于硬質(zhì)表面的清潔劑還可以包含研磨劑成分,特別是選自下列的形式粉末石英、鋸末、粉末塑料、白堊和玻璃微珠,還有其混合物。本發(fā)明的清潔劑中包含研磨劑,優(yōu)選量不超過20wty。,特別是5wt%-15wt。/。的量。將染料和香料加到洗滌劑和清潔劑中以提高產(chǎn)品的審美印象,并使得消費(fèi)者可得到除洗滌和清潔效能外,視覺上和感官上"獨(dú)特的和不易錯(cuò)認(rèn)的"產(chǎn)品。可以應(yīng)用的芳香油和/或香料包括各香精,例如以下類型的合成產(chǎn)品酯、醚、醛、酮、醇和烴。酯類的香精包括例如醋酰芐酯、異丁酸苯氧乙基酯、對叔丁基醋酸環(huán)己酯、乙酸芳樟酯、乙酸二甲基芐基原酯、乙酸苯乙酯、苯甲酸芳樟酯、甲酸芐酯、乙基甲苯基甘氨酸鹽、環(huán)己基丙酸烯丙酯、丙酸蘇合香酯和水楊酸芐酯。醚類包括例如芐基乙基醚;醛類包括例如含有8-18個(gè)碳原子的直鏈鏈烷醛、檸檬醛、香茅醛、香茅基含氧乙醛、仙客來醛、羥基香茅醛、鈴蘭醛和波潔洪醛;酮類包括例如紫羅蘭酮、OC-異甲基紫羅蘭酮和甲基柏木酮;醇類包括茴香腦、香茅醇、丁香油酚、繼牛兒醇、芳樟醇、苯乙基醇和松油醇;烴類主要包括萜類例如苧烯和蒎烯。但優(yōu)選不同香料的混合物,其共同產(chǎn)生誘人的氣味。所述芳香油還可以作為天然香料混合物存在,例如可從植物資源中得到的,如松油、檸檬油、茉莉油、廣藿香油、玫瑰油或衣蘭油。適合的還有肉豆蔻酒、洋蘇葉油、甘菊油、丁香油、香蜂葉油、薄荷油、肉桂油、椴樹花油、杜松子油、巖石草油、乳香油、白松香油和勞丹油,還有橙花油、橙花油、橙皮油和檀香木油。染料在洗滌劑和清潔劑中的量通常低于0.1wt%,而香料最多可占總配方的2wt%。香料可以直接混合到洗滌劑或清潔劑中,但是下述應(yīng)用也是有利的,即將其應(yīng)用到載體(所述載體增強(qiáng)香料與待清潔材料的附著力),確保特別是處理過的紡織品香味更緩慢地釋放長效芳香。已證明所述載體材料例如是環(huán)糊精,其中環(huán)糊精一香料復(fù)合體可以用其他添加劑額外涂覆。另一種優(yōu)選的香料載體是上述沸石X,其還可以代替或與表面活性劑混合吸附香料。因此,優(yōu)選含有上述沸石X和香料(其優(yōu)選至少部分地吸附到沸石上)的洗滌劑和清潔劑。優(yōu)選的染料(其選擇對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說不引起任何問題)有極好的貯藏穩(wěn)定性,并對試劑的其他成分和對光不敏感,以及不對紡織品纖維具有任何顯著的直接性從而不染污它們。為對抗微生物,洗滌劑或清潔劑可以含有抗微生物活性成分。本說明書中根據(jù)抗微生物譜和作用機(jī)制分為抑菌劑和殺菌劑,抑真菌劑和殺真菌劑等。來自這些組的重要物質(zhì)包括例如苯扎氯銨、垸基芳基62磺酸鹽、鹵素酚和苯酚乙酸汞。術(shù)語"抗微生物作用"和"抗微生物活性成分"在本發(fā)明所講的上下文中具有本領(lǐng)域的常規(guī)意義,例如如K.H.Wallhauser在"PraxisderSterilisation,Desinfektion—Konservierung:Keimidentifizierung-Betriebshygiene"[PracticeofSterilization,Disinfection—Preservation:Identi-ficationofMicrobes—PlantHygiene](5thedition,Stuttgart,NewYork,Thieme,1995)中所解釋的,其中可以使用所有具有本說明書所述的抗微生物作用的物質(zhì)。合適的抗微生物活性成分優(yōu)選選自下列醇、胺、醛、抗微生物酸和/或其鹽、羧酸酯、酰胺、酚、苯酚衍生物、聯(lián)苯、聯(lián)苯垸、脲衍生物、氧縮醛、氮縮醛和甲醛水溶液、芐脒、異噻唑啉、鄰苯二甲酰亞胺衍生物、吡啶衍生物、抗微生物表面活性化合物、胍、抗微生物兩性化合物、喹啉、1,2-二溴代-2,4-二氰基丁烷、碘代-2-丙基丁基氨基甲酸鹽、碘、碘附、過氧化化合物、鹵素化合物和上述的任意混合物。抗微生物活性成分可選自例如下組乙醇、正丙醇、異丙醇、1,3-丁二醇、苯氧乙醇、1,2-丙二醇、甘油、H^—碳烯酸、苯甲酸、水楊酸、二水合乙酸、鄰苯基苯酚、N-甲基嗎啉鎰乙腈(MMA)、2-芐基-4-氯酚、2,2'-亞甲基-雙-(6-溴代-4-氯酚)、4,4'-二氯-2'-羥二苯醚(dichlosan)、2,4,4'-三氯-2'-羥二苯醚(trichlosan)、氯己定、N-(4-氯苯基)-N-(3,4-二氯苯基)脲、N,N'-(l,10-癸垸-二基二-l-吡啶基-4-亞基)-雙-(l-辛胺)二氫氯化物、N,N'-雙(4-氯苯基)-3,12-二亞胺基-2,4,ll,13-四氮雜十四垸二酰亞胺基酰胺、葡萄糖魚精蛋白、抗微生物表面活性劑四元化合物、胍(包括例如雙胍和多胍)如1,6-雙-(2-乙基己基二胍基己烷)二氫氯化物、1,6-二-(N,,N-苯基二胍基-N5,N5')己烷四氫氯化物、1,6-二-(Ni,Ni'-苯基-Ni,N廠甲基二胍基-N5,N5')己烷二氫氯化物、1,6-二-(N!,Ni'-鄰-氯苯基二胍基-N5,N5')己垸二氫氯化物、1,6-二-(NhN,'-2,6-二氯苯基二胍基-N5,N5')己垸二氫氯化物、1,6-二-[>11^1'-(5-(對-甲氧基苯基)二胍基-N5,N5']己垸二氫氯化物、631,6-二-(^,>^'-01-甲基-(3-苯基二胍基-N5,N5')己垸二氫氯化物、1,6-二-(^,^-對-硝基苯基二胍基-N5,N5')己烷二氫氯化物、":"-二-(N!,N一苯基二胍基-Ns,N5')-二-正丙醚二氫氯化物、":"'-二-(Ni,N-對-氯苯基二胍基-N5,N5')-二-正丙醚四氫氯化物、1,6-二-(Ni,N!'-2,4-二氯苯基二胍基-N5,N5')己烷四氫氯化物、1,6-二-(Ni,N!'-對-甲苯基二胍基-N5,N5')己垸二氫氯化物、1,6-二-(N!,Ni'-2,4,5-三氯苯基二胍基-N5,N5')己垸四氫氯化物、1,6-二-[NhN!'-a-(對-氯苯基)乙基二胍基-N5,N5')己烷二氫氯化物、":"-二-(N!,N-對-氯苯基二胍基-Ns,N5')-間-二甲苯二氫氯化物、1,12-二-(NhN,'-對-氯苯基二胍基-N5,N5')十二垸二氫氯化物、1,10-二-(N!,N,'-苯基二胍基-N5,N5')癸垸四氫氯化物、1,12-二-(NhN一苯基二胍基-N5,N5')十二垸四氫氯化物、1,6-二-(^,^-鄰-氯苯基二胍基-N5,N5')己垸二氫氯化物、1,6-二-(>^,>^-鄰-氯苯基二胍基-N5,N5')己垸四氫氯化物、乙烯-雙-(l-甲苯基雙胍)、乙烯-雙-(對-甲苯基雙胍)、乙烯-雙-(3,5-二甲基-苯雙胍)、乙烯-雙-(對-叔戊基苯雙胍)、乙烯-雙-(壬基-苯雙胍)、乙烯-雙-(苯雙胍)、乙烯-雙-(正丁酰苯雙胍)、乙烯-雙-(2,5-二乙氧基苯雙胍)、乙烯-雙-(2,4-二甲基-苯雙胍)、乙烯-雙-(鄰-二苯雙胍)、乙烯-雙-(混合戊基萘雙胍)、N-丁基乙烯-雙-(苯雙胍)、環(huán)丙垸-雙-(鄰-甲苯基-雙胍)、N-丁酰環(huán)丙垸-雙-(苯雙胍)以及相應(yīng)的鹽,例如乙酸鹽、葡萄糖酸鹽、氫氯化物、氫溴酸鹽、檸檬酸鹽、亞硫酸氫鹽、氟化物、聚馬來酸鹽、N-椰子垸基肌氨酸鹽、亞磷酸酯、次磷酸鹽、過氟辛酸鹽、硅酸鹽、山梨酸酯、水楊酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、延胡索酸鹽、乙二胺四乙酸鹽、亞氨基二乙酸鹽、肉桂酸鹽、硫氰酸鹽、精氨酸鹽、均苯四酸酯、四羧基丁酸鹽、苯甲酸鹽、戊二酸鹽、單氟磷酸鹽、過氟丙酸鹽和其任意混合物。適合的還有鹵代二甲苯和甲酚衍生物如對-氯間甲酚或?qū)?氯間二甲苯,還有植物來源(例如來自香料或藥草)、動(dòng)物和微生物來源的天然抗微生物活性成分??蓛?yōu)選抗微生物活性的表面活性四元化合物,一種植物來源的天然抗微生物活性成分和/或一種動(dòng)物來源的天然抗微生物活性成分;還可應(yīng)用極優(yōu)選的或至少一種選自下列的植物來源的天然抗微生物活性成分咖啡因、可可堿和茶堿,還有芳香油如丁香油酚、麝香草酚和櫳牛兒醇和/或至少一種動(dòng)物來源的天然抗微生物活性成分選自下列酶,如來自牛奶的蛋白質(zhì)、溶菌酶以及乳過氧化物酶和/或至少一種抗微生物活性的表面活性劑四元化合物(帶有銨基、锍基、磷基、碘基或砷基)、過氧化化合物和氯化合物。微生物來源的物質(zhì),即所謂"細(xì)菌素"也可以使用。適合作為抗微生物活性成分的季胺類化合物(QAC)具有通式(R"(je)(RS)(R"N+X,其中R1到R"表示相同或不同的C1-C22垸基、C7-C28芳垸基或雜環(huán)基,其中兩個(gè)基團(tuán)或,在如吡啶中的芳香鍵的情況下,甚至三個(gè)基團(tuán)與氮原子一起形成雜環(huán),例如吡啶化合物或咪唑啉化合物,X-表示鹵化物離子、硫酸鹽離子、氫氧化物離子或類似的離子。為了達(dá)到最佳的抗微生物作用,至少一種基團(tuán)優(yōu)選具有8-18個(gè)碳原子的鏈長,特別是12-16個(gè)碳原子。QACs可以通過叔胺與烷化劑反應(yīng)而產(chǎn)生,所述垸化劑例如氯甲烷、氯苯、硫酸二甲酯、十二烷基溴化物以及環(huán)氧乙烷。帶有一個(gè)長烷基和兩個(gè)甲基的叔胺的垸化作用特別容易成功;還可在溫和條件下在氯甲烷的幫助下進(jìn)行帶有兩個(gè)長基團(tuán)和一個(gè)甲基的叔胺的季胺化。具有三個(gè)長烷基或羥基取代的垸基的胺反應(yīng)性低,優(yōu)選用硫酸二甲酯季胺化。合適的QACs包括例如苯扎氯銨(N-垸基-N,N-二甲芐基氯化銨,CASno.8001-54-5)、benzalkoneB(間,對-二氯芐基二甲基-(312-烴基氯化銨,CASno.58390-78-6)、苯佐氯銨(芐基十二垸基-雙-(2-羥乙基)氯化銨)、西曲溴銨(N-十六垸基-N,N-三甲銨溴化物,CASno.57-09-0)、芐索氯銨(N,N-二甲基-N-[2-[2-[對-(l,l,3,3-四甲基丁基)苯氧基]乙氧基]乙基]芐基氯化銨,CASno.121-54-0)、二垸基二甲基氯化銨如二-正癸基二甲基氯化銨(CASno.7173-51-5-5)、二癸基二甲基溴化銨(CASno.2390-68-3)、二辛基二甲基氯化銨、1-十六垸基-吡啶氯化物(CASno.123-03-5)和噻唑啉碘化物(CASno.15764-48-1),還有其混合物。特別優(yōu)選的QACs是有CVd8垸基的苯扎氯銨,特別是C12-C14烷基芐基二甲基氯化銨。苯甲烴銨鹵化物和/或取代的苯甲烴銨鹵化物是商業(yè)上可得到的,例如來自Lonza的Barquat②、來自Mason的Marquat⑧、來自Witco/Sherex的Variquat及來自Lonza的Hyamine,還有來自Lonza的Bardac。其他商業(yè)上可得到的抗微生物活性成分包括氯烯氮金剛垸(如來自Dow的Dowicide⑧和Dowicil)、節(jié)索氯銨(如來自Rohm&Haas的Hyamine1622)、甲節(jié)索氯銨(如來自Rohm&Haas的Hyamine10x)、西吡氯銨(如來自MerrellLabs的鯨蠟基氯吡啶)。抗微生物活性成分用量為0.001wt%-lwt%,優(yōu)選0.001wt%-0.8wt%,更優(yōu)選0.005wt%-0.3wt%,特別是0.01-0.2wt%。本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑可以包含紫外線吸收劑,所述紫外線吸收劑可吸附到經(jīng)處理的紡織品上,改善纖維的耐光性和/或處方中其他成分的耐光性。紫外線吸收劑應(yīng)為有機(jī)物(濾光劑),其能夠吸收紫外線并將由此吸收的能量以長波長輻射的形式(如熱)釋放。具有這些所需性質(zhì)的化合物有例如二苯甲酮的化合物和衍生物,其在2位和/或4位有取代基,通過非輻射鈍化作用而有活性。另外,還有取代的苯并三唑、3位苯基取代的丙烯酸鹽(肉桂酸衍生物,可選擇地在2位氰基取代)、水楊酸鹽、有機(jī)鎳復(fù)合物和天然物質(zhì)如7-羥香豆素和內(nèi)源性尿刊酸。聯(lián)苯衍生物以及特別是均二苯代乙烯衍生物已具有特別的重要性,如在例如EP0728749A中所述和商業(yè)上可得的來自Ciba的TinosorbFD或TinosorbFR。UV-B吸收劑的例子包括3-亞芐基樟腦和/或3-亞芐基降樟腦及其衍生物,例如3-(4-甲基苯亞甲基)樟腦,如EP0693471B1中所述;4-氨基苯甲酸衍生物,優(yōu)選4-(二甲氨基)苯甲酸2-乙基己基酯、4-(二甲氨基)苯甲酸2-辛基酯和4-(二甲氨基)苯甲酸戊基酯;肉桂酸的酯,優(yōu)選4-甲氧基肉桂酸-2-乙基己基酯、4-甲氧基肉桂酸丙酯、4-甲氧基肉桂酸異戊基酯、2-氰基-3,3-苯基肉桂酸2-乙基己基酯(氰雙苯丙烯酸辛酯);水楊酸的酯,優(yōu)選水楊酸2-乙基己基酯、水楊酸4-異丙基芐基酯、水楊酸高薄荷基酯;二苯甲酮的衍生物,優(yōu)選2-羥基-4-甲氧基二苯甲酮、2-羥基-4-甲氧基-4'-甲基二苯甲酮、2,2'-二羥基-4-甲氧基二苯甲酮;亞芐基丙二酸的酯,優(yōu)選4-甲氧基亞芐基丙二酸二-2-乙基己基酯;三嗪衍生物,例如2,4,6-三苯胺基-(對-羰基-2'-乙基-l'-己基氧)-l,3,5-三嗪和如EP0818450Al中所述的辛垸基三嗪酮或二辛基丁氨基三嗪酮(Uvasorb⑧HEB);丙烷-1,3-二酮。例如l-(4-叔丁基苯基)-3-(4'-甲氧基苯基)丙烷-l,3-二酮;EP0694521Bl中所述的酮三環(huán)-(5.2丄0)-癸烷衍生物。適合的還有2-苯基苯并咪唑_5-磺酸和其堿金屬鹽、堿土金屬鹽、銨鹽、烴基銨鹽、烷醇銨鹽和葡萄糖銨鹽;二苯甲酮的磺酸衍生物,優(yōu)選2-羥基-4-甲氧基二苯甲酮_5_磺酸和其鹽;3-苯亞甲基樟腦的磺酸衍生物,例如4-(2-氧-3-冰片基亞基-甲基)苯磺酸和2-甲基-5-(2-氧-3-冰片基亞基)磺酸和它們的鹽。典型的UV-A過濾劑特別包括苯甲酰甲垸的衍生物,如l-(4'-叔丁基苯基)_3-(4'-甲氧基苯基)丙烷-1,3-二酮、4-叔丁基-4'-甲氧基二苯甲酰甲烷(Parsol1789)、l-苯基-3-(4'-異丙基苯基)丙烷-l,3-二酮,還有烯胺化合物,如DE19712033Al(BASF)中所述。UV-A和UV-B過濾劑當(dāng)然還可以用于混合物。除上述可溶物質(zhì)之外,不溶的光防護(hù)顏料,即細(xì)微分散的,優(yōu)選毫微化的金屬氧化物和/或鹽也可用于此目的。合適的金屬氧化物的例子特別包括氧化鋅和二氧化鈦以及氧化物或鐵、鋯、硅、錳、鋁和鈰,還有其混合物??梢詰?yīng)用的鹽包括硅酸鹽(滑石)、硫酸鋇或硬脂酸鋅。氧化物和鹽已經(jīng)以顏料的形式用于皮膚護(hù)理和皮膚防護(hù)乳劑和裝飾性化妝品。顆粒平均直徑應(yīng)小于100nm,優(yōu)選5-50nm,特別是15-30nm。它們可以是球形的,但也可以應(yīng)用橢圓形的顆粒或偏離球形的其他形狀的顆粒。所述顏料也可以經(jīng)表面處理,即使其親水或疏水。典型例子包括包覆的二氧化鈦,例如二氧化鈦T805(Degussa)或EusolexT2000(Merck),為此目的優(yōu)選硅酮,更優(yōu)選三烷氧基辛基甲硅垸或二甲基硅油用作憎水包覆材料。優(yōu)選應(yīng)用微粉化氧化鋅。其他合適的UV光防護(hù)過濾劑可在P.Finkel的綜述〔SOFWJournal122(1996),p.543〕中找到。紫外線吸收劑通常用量為0.01wt%-5wt%,優(yōu)選0.03wt%-lwt%。本發(fā)明的試劑除包含本發(fā)明的蛋白質(zhì)外,可以包含額外的酶以提高洗滌性能和/或清潔性能,其中原則上所有現(xiàn)有技術(shù)已知的酶都可以用于此目的。這些酶特別包括其他蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、半纖維素酶、纖維素酶或氧化還原酶,還有優(yōu)選的其混合物。這些酶基本上是天然來源的;從天然分子出發(fā),可將相應(yīng)優(yōu)選使用的改良的變異體用在洗滌劑和清潔劑中。本發(fā)明的試劑包含這些其他的酶,優(yōu)選總量1x10—6-5wt%,以活性蛋白質(zhì)計(jì)。在其他蛋白酶中,優(yōu)選枯草桿菌蛋白酶型的蛋白酶。其中例子包括枯草桿菌蛋白酶BPN'和Carlsberg、蛋白酶BP92、枯草桿菌蛋白酶147和309、來自遲緩芽孢桿菌的堿性蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶DY和將被分類為枯草桿菌酶但狹義上不再屬于枯草桿菌蛋白酶的酶,即熱酶、蛋白酶K和蛋白酶TW3禾nTW7。從丹麥包威斯NovozymesA/S公司可以得到進(jìn)一步開發(fā)形式的枯草桿菌蛋白酶Carlsberg,商品名Alcalase??莶輻U菌蛋白酶147和309由Novozymes公司銷售,商品名£861^6@和/或Savinase⑧。以商品名BI^J^得到并特別在WO92/21760Al、WO95/23221Al、WO02/088340A2和WO03/038082A2中描述的變異體源自來自遲緩芽孢桿菌DSM5483的蛋白酶(WO91/02792Al)。來自各種芽孢桿菌屬和吉氏芽孢桿菌菌種的其他可用的蛋白酶可在專利申請WO03/054185、WO03/056017、WO03/055974和WO03/054184中找到。68其他可用的蛋白酶包括例如可從Novozymes公司得到的酶(商品名Durazym、Relase②、Everlase、Nafizym、Natalase、Kannase禾口Ovozymes),可從Genencor公司得到的酶(商品名Purafect、PurafectOxP禾口Properase),可從AdvancedBiochemicalsLtd.,Thane,India公司得到的酶(商品名Protosol),可從WuxiSnyderBioproductsLtd.,China公司得到的酶(商品名Wuxi),可從AmanoPharmaceuticalsLtd.,Nagoya,Japan公司得到的酶(商品名Proleather⑧和ProteaseP)以及可從KaoCorp.,Tokyo,Japan公司得到的酶(商品名ProteinaseK-16)。根據(jù)本發(fā)明可應(yīng)用的淀粉酶的例子包括來自地衣芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌或嗜熱脂肪芽孢桿菌的a-淀粉酶,還有它們的進(jìn)一步開發(fā)產(chǎn)品,已改進(jìn)以用在洗滌劑和清潔劑中。來自地衣芽孢桿菌的酶可從Novozymes公司(商品名Termamyl)和Genencor公司(商品名PurastarST)得到。這些a-淀粉酶進(jìn)一步開發(fā)的產(chǎn)品可以從Novozymes公司(商品名Duramyl禾卩Termamylultra)、Genencor公司(商品名PurastarOxAm)禾口DaiwaSeikoInc.,Tokyo,Japan公司(Keistase)得至U。來自解淀粉芽孢桿菌的a-淀粉酶由Novozymes公司銷售(名稱BAN⑧),來自嗜熱脂肪芽孢桿菌的a-淀粉酶的衍生變異體也由Novozymes公司銷售(商品名BSG⑧禾PNovamy^)。其他可以應(yīng)用的商業(yè)產(chǎn)品包括例如AmylaseLT禾PStainzyme,后者也來自Novozymes公司。另外,為此目的,還應(yīng)該指出,專利申請WO02/10356A2中公開的來自芽孢桿菌屬A7-7(DSM12368)的a-淀粉酶和專利申請WO02/44350A2中所述的來自B.agaradherens(DSM9948)的環(huán)糊精葡聚糖基轉(zhuǎn)移酶(CGTase)。此外,還可應(yīng)用屬于a-淀粉酶序列范圍的解淀粉酶(在專利申請WO03/002711A2中限定)和在專利申請WO03/054177A2中描述的解淀粉酶。同樣地,還可應(yīng)用所述分子的融合蛋白,例如從專利申請DE10138753Al已知的。此外,可從Novozymes公司得到的來自黑曲霉菌(Aspergillusniger)和米曲霉菌(A.oryzae)的a-淀粉酶(商品名Fungamyl)的進(jìn)一步開發(fā)產(chǎn)品也是合適的。例如另一種商業(yè)產(chǎn)品是AmylaseLT。本發(fā)明的試劑可以包含脂肪酶或角質(zhì)酶,特別是由于它們的甘油三酯剪切活性,但也為了從適當(dāng)?shù)那绑w原位產(chǎn)生過酸。這些包括例如可以從Humicolalanuginosa(Thermomyceslanuginosus)得至lj的月旨肪酉每禾口/或已進(jìn)一步開發(fā)的脂肪酶,特別是有氨基酸替換D96L的那些。它們例如由Novozymes公司銷售,商品名Lipolase、LipolaseUlra、LipoPrime、Lipozyme和Lipex。另外,也可以應(yīng)用例如角質(zhì)酶,其最初從Fusariumsolanipisi和Humicolainsolens分離。同樣地,也可從Amano公司得到可用的脂肪酶,商品名LipaseCE、LipaseP、LipaseB禾口/或LipaseCES、LipaseAKG、Bacillussp.Lipase、LipaseAP、LipaseM-AP⑧和LipaseAML。也可應(yīng)用來自Genencor公司的脂肪酶和/或角質(zhì)酶,它們的出發(fā)酶最初從門多薩假單胞菌(Pseudomonasmendocina)和腐皮鐮刀菌(Fusariumsolanii)分離。其他可提及的重要的商業(yè)產(chǎn)品包括最初由Gist-Brocades公司銷售的制劑MlLipase和Lipomax⑧以及由MeitoSangyoK.K.,Japan公司銷售的酶(商品名LipaseMY-30、LipaseOF禾卩LipasePL),還有來自Genencor公司的產(chǎn)品Lumafast。本發(fā)明的試劑可以包含纖維素酶,如純酶、酶制劑或以混合物的形式,在其中它們有利地補(bǔ)充各成分的不同性能方面,依賴于預(yù)期目的,特別是如果欲用它們處理紡織品。這些性能方面特別包括對試劑的初級(jí)洗滌性能、對試劑的次級(jí)洗滌性能(抗再沉積效應(yīng)或泛灰抑制)的貢獻(xiàn),最終(織物效果)達(dá)到包括具有"石洗"效果??捎玫母缓暇厶莾?nèi)切酶(EG)的真菌纖維素酶制劑和/或其進(jìn)一步開發(fā)產(chǎn)品由Novozymes公司提供,商品名Celluzyme。來自腐質(zhì)霉DSM1800的產(chǎn)品Endolase和Carezyme⑧也可以從Novozymes公司得到,分別以50kDEG和43kDEG為基礎(chǔ)。其他來自該公司的此處可70用的商業(yè)產(chǎn)品包括061111180&@和RenOZyme。后者基于專利申請WO96/29397Al。例如專利申請WO98/12307Al中公開了性能有改良的纖維素酶變異體。同樣地,還可應(yīng)用專利申請WO97/14804Al中公開的纖維素酶;例如,還可以應(yīng)用可從芬蘭ABEnzymes公司得到的來自Melanocarpus的20kDEG,商品名Ecostone禾PBiotouch。其他來自ABEnzymes公司的商業(yè)產(chǎn)品包括£001^56@和Ecopulp。其他來自芽孢桿菌屬CBS670.93和CBS669.93的合適的纖維素酶在WO96/34092A2中公開,其中來自芽孢桿菌屬CBS670.93的產(chǎn)品可從Genencor公司得到,商品名Puradex。其他來自該公司的商業(yè)產(chǎn)品包括"Genencor洗滌劑纖維素酶L"和IndiAgeNeutra。本發(fā)明的試劑可以包含(除了本發(fā)明的多肽之外)概括在術(shù)語半纖維素酶下的其他的酶,特別是為了除去某種問題污物。這些酶包括例如甘露聚糖酶、黃原膠裂合酶、果膠裂合酶(=果膠酶)、果膠脂酶、果膠酸裂合酶、木葡聚糖酶(-木聚糖酶)支鏈淀粉酶和(3-葡聚糖酶。合適的甘露聚糖酶可以從例如Novozymes公司(商品名0&!1^113^@和PektinexAR)、ABEnzymes公司(商品名RohapecB1L)禾口DiversaCorp.,SanDiego,CA,USA公司(商品名Pyrolase)得到。來自嗜堿芽孢桿菌的合適的P-葡聚糖酶在例如專利申請WO99/06573Al中公開。獲自枯草芽孢桿菌的(3-葡聚糖酶可以從Novozymes公司得到,商品名Cereflo。為了增加漂白作用,本發(fā)明的洗滌劑和清潔劑可以包含氧化還原酶類,例如氧化酶、加氧酶、過氧化氫酶、過氧化物酶(如鹵素、氯、溴、木素、葡萄糖或錳過氧化物酶)、加雙氧酶或漆酶(酚氧化酶、多酚氧化酶)。合適的商業(yè)產(chǎn)品包括來自Novozymes公司的061^化6@1和2。另外,還優(yōu)選有利地加入有機(jī)化合物,更優(yōu)選與酶相互作用的芳香化合物,以增強(qiáng)各氧化還原酶的活性(增強(qiáng)子)或在氧化酶和污物之間氧化還原電位極不同的情況下確保電子傳遞(介質(zhì))。71額外應(yīng)用在本發(fā)明試劑中的酶最初或者源自微生物如芽孢桿菌屬、鏈霉菌屬、腐質(zhì)霉屬或假單胞菌屬,和/或由適當(dāng)?shù)奈⑸锔鶕?jù)已知的生物技術(shù)方法產(chǎn)生,例如通過芽孢桿菌屬或絲狀真菌屬的轉(zhuǎn)基因表達(dá)宿主。各個(gè)酶通過己知的方法有利地進(jìn)行純化,例如通過沉淀、沉降、濃縮、液相過濾、微濾、超濾、化學(xué)品作用、除臭或這些步驟的適當(dāng)組合??梢詫⒈景l(fā)明的多肽以及額外應(yīng)用的酶以根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)已知的任意形式添加到本發(fā)明的試劑中。這些包括例如通過制粒、擠壓或冷凍干燥得到的固體制劑,或者(特別是在液體或凝膠試劑的情況下)有利地盡可能濃縮、含水量低和/或與穩(wěn)定劑混合的酶溶液??蛇x地,這些蛋白質(zhì)固體劑型和液體劑型都可以被膠囊化,例如通過噴霧干燥或酶溶液與聚合物(優(yōu)選天然的)一起擠出,或者以膠囊的形式,例如那些其中酶如用固化凝膠包住的或者以核殼類型,其中用不透水、空氣和/或化學(xué)藥品的保護(hù)層包裹含有酶的核。其他活性成分(例如穩(wěn)定劑、乳化劑、顏料、漂白劑或染色劑)可以另外應(yīng)用于附加層中。所述膠囊通過基本已知的方法生產(chǎn),例如通過搖擺制?;驖L動(dòng)制粒或以流化床工藝。所述顆粒有利地具有低含塵量,例如由于聚合成膜劑的應(yīng)用,并且因包衣而在貯藏時(shí)穩(wěn)定。另外,將兩種或多種酶、一種本發(fā)明的多肽和另一種酶一起精制,從而單個(gè)顆粒具有多種酶活性,這也是可能的。包含在發(fā)明的試劑中的一種蛋白質(zhì),特別是本發(fā)明的多肽,可以被保護(hù)(特別在貯藏期間)使其免于因物理影響、氧化或溶蛋白性裂解而損失,例如失活、變性或分解。關(guān)于蛋白質(zhì)和/或酶的微生物生產(chǎn),特別優(yōu)選蛋白酶解的抑制作用,特別是當(dāng)試劑也含有蛋白酶時(shí)。為此優(yōu)選本發(fā)明的試劑含有穩(wěn)定劑。一組穩(wěn)定劑包括可逆的蛋白酶抑制劑。為此常用苯甲脒鹽酸鹽、硼砂、硼酸、硼酸化物或它們的鹽或酯,特別包括含芳基的衍生物,例如鄰位-、間位-或?qū)ξ蝗〈谋交鹚峄铮貏e是4-甲?;脚鹚岷?或上述化合物的鹽或酯。為此應(yīng)用肽醛,即含還原C末端的寡肽,特別是那些2-50個(gè)單體的肽醛。肽的可逆蛋白酶抑制劑其中包括卵類粘蛋白和亮抑蛋白酶肽。用于枯草桿菌蛋白酶的特定的可逆肽抑制劑以及來自蛋白酶的融合蛋白和特定的肽抑制劑也適合用于此目的。另外的酶穩(wěn)定劑是氨基醇例如單-、二-、三乙醇-和丙醇胺及其混合物,最多達(dá)Q2的脂肪族羧酸如琥珀酸,其他二羧酸或所述酸的鹽。末端封端的脂肪酸酰胺烷氧酸鹽也適合用于此目的。如WO97/18287中所公開的,某些用作助洗劑的有機(jī)酸能夠額外穩(wěn)定包含在本試劑中的酶。低級(jí)脂肪醇,尤其是多元醇,例如甘油、乙二醇、丙二醇或山梨醇,是經(jīng)常使用的其他酶穩(wěn)定劑。二甘油磷酸也可使其免于因物理影響而發(fā)生變性。同樣地可使用鈣鹽和/或鎂鹽例如醋酸鈣或甲酸鈣。聚酰胺寡聚體或多聚體化合物如木素、水溶性乙烯基共聚物或纖維素醚、丙烯酸類聚合物和/或聚酰胺可穩(wěn)定酶制劑,以克服尤其是物理影響或pH波動(dòng)。包含多胺N-氧化物的聚合物充當(dāng)酶穩(wěn)定劑,同時(shí)充當(dāng)染料轉(zhuǎn)移抑制劑。其他聚合物穩(wěn)定劑包括直鏈的Q-ds聚氧化烯。烷基聚糖苷也能穩(wěn)定本發(fā)明試劑的酶成分,并優(yōu)選能夠額外提高它們的性能。含氮的交聯(lián)化合物優(yōu)選實(shí)現(xiàn)雙重作用,即作為去污劑和作為酶穩(wěn)定劑。憎水非離子型聚合物特別可穩(wěn)定也可選擇性地存在的纖維素酶。還原劑和抗氧化劑增強(qiáng)酶對氧化降解反應(yīng)的穩(wěn)定性;例如,含硫的還原劑通常用于此目的。其他例子包括亞硫酸鹽和還原糖。特別優(yōu)選穩(wěn)定劑的聯(lián)合,例如多元醇、硼酸和/或硼砂的聯(lián)合,硼酸或硼酸鹽、還原鹽和琥珀酸或其他二羧酸的聯(lián)合,或者硼酸或硼酸鹽與多元醇或聚胺化合物及與還原鹽的聯(lián)合。肽-醛穩(wěn)定劑的作用可通過與硼酸和/或硼酸衍生物和多元醇的聯(lián)合得到有利增強(qiáng),甚至進(jìn)一步通過二價(jià)陽離子(如鈣離子)的附加作用增強(qiáng)。由于本發(fā)明的試劑可以以所有想得到的形式提供,方便加入各試劑中的以所有配方的本發(fā)明多肽構(gòu)成了本發(fā)明的各個(gè)實(shí)施方案。這些包括例如液體配方、固體顆?;蚰z囊。推薦膠囊包封形式以保護(hù)酶或其他成分免受其他組分例如漂白劑的影響,或者使其可以控制釋放。根據(jù)這些膠囊的大小,將特別優(yōu)選用于酶的微膠囊劃分為毫膠囊、微膠囊和納米膠囊。所述膠囊在例如專利申請WO97/24177和DE19918267中公開。一種可能的包封方法包括這樣一個(gè)事實(shí),即從蛋白質(zhì)溶液與淀粉或淀粉衍生物的溶液或懸浮液的混合物開始,將蛋白質(zhì)包裹在該物質(zhì)中。專利申請WO01/38471中描述了所述包封方法。在固體試劑的情況下,可以應(yīng)用蛋白質(zhì)一本發(fā)明的多肽以及可選擇地包含在其中的額外的酶,例如以干燥的、制粒的和/或包封形式應(yīng)用。它們可以被單獨(dú)加入(即作為獨(dú)立相),或者與其他成分一起在同相中,壓實(shí)或者不壓實(shí)。如果欲以固體形式生產(chǎn)微囊化的酶,則可根據(jù)利用現(xiàn)有技術(shù)得知的方法從得自污跡的水溶液中除去水,例如噴霧干燥、離心或再增溶作用。以這種方式得到的顆粒通常粒度為50,-200,??梢詮牡鞍踪|(zhì)生產(chǎn)(根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)進(jìn)行的)和制備開始,將蛋白質(zhì)以濃縮水溶液或非水溶液、懸浮液或乳液的形式加入到液體、凝膠74或膏狀的本發(fā)明的試劑中,并且也可以凝膠形式或膠囊化或作為干粉加入。本發(fā)明的這種洗滌劑或清潔劑通常通過簡單混合成分而生產(chǎn),所述成分可以以物質(zhì)本身或作為溶液加入自動(dòng)混合器中。本發(fā)明的清潔劑,特別是用于硬質(zhì)表面的本發(fā)明的清潔劑,還可以包含一種或多種推進(jìn)劑(INCI推進(jìn)劑),通常量為1-80Wt%,優(yōu)選1.5-30wt%,特別是2-10wt%,更優(yōu)選2.5-8wt%,非常優(yōu)選3-6wt%。推進(jìn)劑是根據(jù)本發(fā)明的常規(guī)推進(jìn)氣體,特別是液化氣體或壓縮氣體。其選擇依賴于待噴霧的產(chǎn)品和應(yīng)用領(lǐng)域。當(dāng)利用壓縮氣體如氮、二氧化碳或氧化亞氮(它們通常不溶于液體清潔劑)時(shí),操作壓力隨每次操作值下降。作為推進(jìn)劑的液化氣體(液化天然氣)溶于清潔劑或本身充當(dāng)溶劑,所述液化氣體具有一致的操作壓力和均勻分布的優(yōu)勢,因?yàn)樗鐾七M(jìn)劑在空氣中揮發(fā)并占幾百倍大的體積。因此以下根據(jù)INCI命名的推進(jìn)劑是合適的丁垸、二氧化碳、碳酸二甲酯、二甲醚、乙烷、含氯氟烴22、含氯氟烴142b、氫氟烴152a、氫氟烴134a、氫氟烴227ea、異丁垸、異戊垸、氮、氧化亞氮、戊烷、丙烷。但優(yōu)選大量省去作為推進(jìn)劑的氯氟烴(氯氟烴,F(xiàn)CHC),特別是完全省去,由于它們對大氣臭氧屏(所謂的臭氧層,保護(hù)免受強(qiáng)紫外線輻射)的有害影響。優(yōu)選的推進(jìn)劑是液化天然氣。液化天然氣是在低壓下20°C通??梢詮臍鈶B(tài)轉(zhuǎn)化成液態(tài)的氣體。但液化天然氣應(yīng)特別地理解為包括烴類丙烷、丙烯、丁烷、丁烯、異丁垸(2-甲基丙垸)、異丁烯(2-甲基丙烯、異丁烯)和其混合物,它們可以在煉油廠(作為石油蒸餾和裂化的副產(chǎn)品)和在汽油分離中的天然氣加工中得到。清潔劑特別優(yōu)選包含丙烷、丁垸和/或異丁垸,特別是丙烷和丁烷,非常優(yōu)選丙烷丁烷和異丁垸作為一種或多種推進(jìn)劑。酶制劑(特別是本發(fā)明的多肽)一個(gè)重要的作用是(如前所述的)初級(jí)洗滌性能。但除了初級(jí)洗滌性能之外,洗滌劑中包含的蛋白酶還可以實(shí)現(xiàn)通過相應(yīng)的處理時(shí)間之后的溶蛋白性裂解活化其他酶組分或使它們失活的功能。本發(fā)明的一類實(shí)施方案還包括含有蛋白酶敏感材料的膠囊的試劑,其由例如本發(fā)明的蛋白質(zhì)在預(yù)期的時(shí)間點(diǎn)水解并釋放其內(nèi)容物。本發(fā)明的多肽因此還可用于失活反應(yīng)、活化反應(yīng)或釋放反應(yīng),特別是以多相試劑。本發(fā)明該主題的另一類實(shí)施方案因此還相應(yīng)地包括本發(fā)明對活化的多肽的應(yīng)用,用來活化或釋放洗滌劑或清潔劑的成分。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中,用本發(fā)明的多肽設(shè)計(jì)試劑以使其可以常規(guī)地用作護(hù)理劑,例如通過將其加入洗漆過程、洗滌后使用它或獨(dú)立于洗滌之外應(yīng)用它。預(yù)期效應(yīng)包括使紡織品的光滑表面結(jié)構(gòu)維持較長時(shí)間和/或防止和/或降低對織物的損害。紡織品或硬質(zhì)表面的機(jī)械清潔方法構(gòu)成了本發(fā)明的一個(gè)單獨(dú)的主題,在所述方法中至少一個(gè)過程步驟中應(yīng)用本發(fā)明的多肽。其中,優(yōu)選本發(fā)明的多肽每次用量40pg-4g的方法,優(yōu)選50pg-3g,更優(yōu)選100pg-2g,最優(yōu)選200pg-lg的方法。這包括這些數(shù)值之間所有整數(shù)值和非整數(shù)值。這些方法包括手工和機(jī)械過程,但是優(yōu)選機(jī)械過程,由于它們對例如用量和處理時(shí)間更精確的可控性。清洗紡織品的方法通常特征在于,在若干過程步驟中將不同清洗活性的物質(zhì)應(yīng)用到待清洗材料,然后在處理時(shí)間后洗去,或者用洗滌劑或該試劑的溶液另外處理所述待清洗物質(zhì)。這同樣適合于清洗除紡織品外所有其他材料的方法,這些材料被概括在硬質(zhì)表面這一標(biāo)題下??梢栽谥辽僖粋€(gè)過程步驟中用本發(fā)明的蛋白質(zhì)改良所有想得到洗滌或清潔方法,于是構(gòu)成了本發(fā)明的實(shí)施方案。由于優(yōu)選的本發(fā)明的多肽已天然具有蛋白質(zhì)溶解活性,甚至在不另外具有任何清潔性能的介質(zhì)中(例如在單純緩沖液中)都顯示這一點(diǎn),所以這種用于機(jī)械清潔紡織品的過程中的子步驟可以包括這樣的事實(shí),即如果需要,將本發(fā)明的多肽用作除穩(wěn)定化合物、鹽或緩沖物質(zhì)外,唯一的具有活性清洗作用的成分。這構(gòu)成了本發(fā)明一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案。在所述過程另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中,本發(fā)明的各多肽提供在一種上述用于本發(fā)明的試劑(優(yōu)選本發(fā)明的洗滌劑和/或清潔劑)的配方的范疇內(nèi)。本發(fā)明一個(gè)單獨(dú)的主題包括將如上所述本發(fā)明的堿性蛋白酶用于清洗紡織品或硬質(zhì)表面。上文給出的濃度范圍也相應(yīng)優(yōu)選用于這些應(yīng)用。本發(fā)明的蛋白酶可以根據(jù)上述性質(zhì)和上述方法特別用于從紡織品或從硬質(zhì)表面除去基于蛋白質(zhì)的污物。具體包括例如手洗、手工從紡織品或從硬質(zhì)表面除去污物或者與機(jī)械方法聯(lián)合應(yīng)用。在本申請一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中,本發(fā)明的各堿性蛋白酶優(yōu)選提供在一種上述用于本發(fā)明的試劑(優(yōu)選本發(fā)明的洗滌劑和/或清潔劑)的配方的范疇內(nèi)。本發(fā)明另一個(gè)主題還是一種產(chǎn)品,其含有本發(fā)明的組合物和/或本發(fā)明的洗滌劑或清潔劑,特別是本發(fā)明的用于硬質(zhì)表面的清潔器和噴霧分散器。所述產(chǎn)品可以是單層容器,還可以是多層容器,特別是兩層容器。本說明書的噴霧分散器優(yōu)選手工起動(dòng)噴霧分散器,特別選自下列氣霧噴霧分散器(加壓的氣體容器,也稱為噴壺)、自動(dòng)增壓的噴霧分散器、泵式噴霧分散器和觸發(fā)式噴霧分散器,特別是用透明的聚乙烯或聚對苯二甲酸乙酯制成的泵式噴霧分散器和觸發(fā)式噴霧分散器。噴霧分散器更詳細(xì)地描述于WO96/04940(Procter&Gamble)和其中引述噴霧分散器的美國專利,在這一點(diǎn)上參考所有這些文獻(xiàn),并且其內(nèi)容同時(shí)包括在本專利申請中。與壓縮氣體容器相比,觸發(fā)式噴霧分散器和泵式霧化器具有不需要使用推進(jìn)劑的優(yōu)勢??梢詫⒃搶?shí)施方案中的酶(任選甚至以固定在顆粒上的形式)加入試劑中,從而通過適當(dāng)?shù)母郊?、噴嘴?可通過其將顆粒傳遞到噴霧分散器上(所謂的噴嘴閥)〕將其配成清潔泡沫。以下實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明而非限制本發(fā)明。示例性實(shí)施方式所有分子生物學(xué)的操作步驟遵循標(biāo)準(zhǔn)方法,如在例如Fritsch,Sambrook和Maniatis"分子克隆實(shí)驗(yàn)室手冊",ColdSpringHarbourLaboratoryPress,NewYork,1989或可比較的參考文獻(xiàn)中描述的方法。酶和試劑盒根據(jù)各廠商的說明書使用。實(shí)施例1蛋白水解活性菌株的分離和鑒定將0.1g污物試樣懸于lmL無菌NaCl中,置于含奶粉的瓊脂平板上(1.5%瓊脂,0.1%K2NPO4,0.5%酵母提取液,1%蛋白胨,1%奶粉,0.02%MgS04.7H20,0.4%Na2C03,pH9.6),30°C溫育。根據(jù)亮區(qū)分離蛋白水解活性菌,所述蛋白水解活性菌由德國微生物細(xì)胞培養(yǎng)物保藏中心(DSMZ)鑒定為短小芽孢桿菌(Bacilluspumilus)。表l.短小芽孢桿菌菌株的微生物學(xué)性質(zhì)(由DSMZ測定)<table>tableseeoriginaldocumentpage79</column></row><table>水解作用淀粉陰性明膠陽性吐溫80陽性酪蛋白陽性下列鹽的應(yīng)用檸檬酸鹽(Koser)陽性丙酸鹽陰性溶菌酶培養(yǎng)基陽性吲哚反應(yīng)陰性苯丙氨酸脫氨酶陰性精氨酸二水解酶陰性細(xì)胞脂肪酸的樣品典型的枯草芽孢桿菌16S-rDNA的部分序列測定與短小芽孢桿菌99.6%相似實(shí)施例2成熟蛋白酶的克隆和序列測定根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方法從短小芽孢桿菌制備染色體DNA,用限制性核酸內(nèi)切酶Sau3A處理,將產(chǎn)生的片段克隆到載體pAWA22。這是一種源自用在芽孢桿菌菌種中的pBC16的表達(dá)載體(Bernhard等(1978),J.Bacteriol.,vol.133(2),第897-903頁)。將該載體轉(zhuǎn)化到宿主菌株枯草芽孢桿菌DB104(KawamuraandDoi(1984),J.Bacteriol.,vol.160(1),第442-444頁)。轉(zhuǎn)化體首先在DM3培養(yǎng)基(8g/L瓊脂,0.5M琥珀酸,3.5g/LK2HP04,1.5g/LKH2P04,20mMMgCl2,5g/L酪蛋白氨基酸(casiaminoacids),5g/L酵母提取液,6g/L葡萄糖,0.1g/LBSA)上再生,然后轉(zhuǎn)移接種到TBY脫脂乳平板上〔10g/L蛋白胨,10g/L奶粉(見上文),5g/L酵母,5g/LNaCl,15g/L瓊脂〕。根據(jù)它們的溶菌圈鑒定蛋白水解活性克隆。選擇一種產(chǎn)生的蛋白水解活性克隆,分離其質(zhì)粒,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方80法對插入片段進(jìn)行序列測定。產(chǎn)生的插入片段含有約1.2kb的開放閱讀框架。其序列在序列表中給出,表示為SEQIDNO.1。其包括1152bp。源自其的氨基酸序列包括383個(gè)氨基酸,隨后是終止密碼子。它在序列表中SEQIDNO.2下給出。其中,推測成熟蛋白中不包括開始的108個(gè)氨基酸,因此推測產(chǎn)生長度為275個(gè)氨基酸的成熟蛋白。將這些序列與從普遍可得到的數(shù)據(jù)庫Swiss-Prot(GenevaBioinformatics(GeneBio)S.A.,Geneva,Switzerland:http:〃www.genebio.coNCBI,NationalInstitutesofHealth,Bethesda,MD,USA)中可以得到的蛋白酶序列進(jìn)行比較。概括于下表2中的酶被鑒定為最接近的類似的酶。表2:來自短小芽孢桿菌的堿性蛋白酶與最接近的類似蛋白的同源性其中含義如下IDIdent.k.DNAIdent.m.DNA同一性,%Ident.PropreIdent.m.Prot.n在GenBank和Swiss-Prot數(shù)據(jù)庫中的登記號(hào)在DNA水平上對完整DNA的DNA同一性,%在DNA水平上對編碼成熟蛋白的DNA的DNA在氨基酸水平上的同一性,基于前蛋白原,%在氨基酸水平上的同一性,基于成熟蛋白,%數(shù)據(jù)庫中未提供。<table>tableseeoriginaldocumentpage82</column></row><table>還將這些蛋白酶的氨基酸序列在圖1的比對中互相比較。實(shí)施例3SDS聚丙烯凝膠電泳和等電聚焦在瑞典Pharmacia-AmershamBiotech的PHAST⑧系統(tǒng)中進(jìn)行的變性SDS聚丙烯凝膠電泳中,根據(jù)實(shí)施例2和實(shí)施例3獲得的來自短小芽孢桿菌的堿性蛋白酶分子量為27kD。根據(jù)等電聚焦,也在Pharmacia-AmershamBiotech的PHAST⑧系統(tǒng)中,來自吉氏芽孢桿菌的堿性蛋白酶的等電點(diǎn)超過8.5。實(shí)施例4用在商業(yè)液體洗滌劑中時(shí)測定洗滌性能對于該實(shí)施例,使用了含有標(biāo)準(zhǔn)化污物的紡織品,從瑞士SwissMaterialsTestingandExperimentalInstituteinSt.Gallen(EMPA)或克里菲爾德LaundryResearchInstitute處訂購。應(yīng)用了下列污物和紡織品A(棉上的色拉調(diào)味汁,CFTCS-6)、B(棉上的草,CFTCS-8)、C(棉上的血,EMPAE-111)和D(棉上的乳汁/可可,EMPAE-112)。此外,形成對于所有檢領(lǐng)'j的污物(E)的平均值。用該試驗(yàn)材料,經(jīng)耐洗牢度試驗(yàn)(launderometrically)檢測了各種洗滌劑配方的洗滌性能。為此,將浴比調(diào)節(jié)為1:12,在30°C和/或60。C溫度下洗滌紡織品30分鐘。每升洗槽各試劑用量為4.4g。水的硬度為16°([German]7夂硬度)。以下組合的基礎(chǔ)洗滌劑配方被用作對照洗滌劑(所有值以wt%計(jì)):0.3-0.5%黃原膠、0.2-0.4%消泡劑、6-7%甘油、0.3-0.5%乙醇、4-7%FAEOS、24-28%非離子型表面活性劑、1%硼酸、1-2%檸檬酸鈉(二水合物)、2-4%碳酸鈉、14-16%椰子脂肪酸、0.5%HEDP、0-0.4%PVP、0-0.05%熒光增白劑、0-0.001%染料、其余為去離子水。將其與以下用于各種實(shí)驗(yàn)系列的蛋白酶混合,以便在每種情況下得到每升洗槽蛋白水解活性5625PE的終濃度遲緩芽孢桿菌堿性蛋白酶F49(WO95/23221)、遲緩芽孢桿菌堿性蛋白酶X(WO92/21760)和/或來自短小芽孢桿菌的本發(fā)明的蛋白酶。洗滌之后,測量所洗滌紡織品的白度。在DatacolorSF500-2分光計(jì)上進(jìn)行測量,460nm(UV截止濾波器3)、30mm光圈、無玻璃、D65型光、10°、d/8°。分別給出4次測量的平均值??蓮倪@些平均值直接推斷試劑中所含的酶對所用試劑洗滌性能的貢獻(xiàn)。表3:30°C洗滌結(jié)果基礎(chǔ)洗滌劑ABCDE來自短小芽孢桿菌的本發(fā)明蛋白酶55.573.753.754.059.2遲緩芽孢桿菌堿性蛋白酶F4950.969.144.349.653.4遲緩芽孢桿菌堿性蛋白酶x50.669.445.850.654.1LSD1.41.12.82.4表4:60°C洗滌結(jié)果基礎(chǔ)洗滌劑ABCDE來自短小芽孢桿菌的本發(fā)明蛋白酶61.577.056.857.963.3遲緩芽孢桿菌堿性蛋白酶F4956.372.945.656.157.7遲緩芽孢桿菌堿性蛋白酶x56.473.645.355.757.883可以看出,來自短小芽孢桿菌的本發(fā)明的蛋白酶在所有試驗(yàn)的污物方面和兩種試驗(yàn)溫度下都優(yōu)于已知的蛋白酶遲緩芽孢桿菌堿性蛋白酶F49和遲緩芽孢桿菌堿性蛋白酶X。實(shí)施例5酶學(xué)性質(zhì)利用本發(fā)明的從短小芽孢桿菌純化的堿性蛋白酶,用酪蛋白在不同溫度和不同pH水平進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。發(fā)現(xiàn)酪蛋白剪切的最適活性在60。C,而酪蛋白剪切的最適pH是10.5。圖1:來自短小芽孢桿菌的本發(fā)明的蛋白酶與最相似的已知枯草桿菌蛋白酶的氨基酸序列比對,每種蛋白酶均為成熟形式,即經(jīng)加工的形式。下列數(shù)字代表下列蛋白酶1來自短小芽孢桿菌的本發(fā)明的蛋白酶2來自短小芽孢桿菌的蛋白酶Q5XPN0(Swiss-Prot)3來自短小芽孢桿菌的蛋白酶Q6SIX5(Swiss-Prot)4來自短小芽孢桿菌的蛋白酶Q9KWR4(Swiss-Prot)5來自短小芽孢桿菌的蛋白酶Q2HXI3(Swiss-Prot)圖2:源自pBC16的表達(dá)載體pAWA22,具有一個(gè)來自地衣芽孢桿菌(B.licheniformis)的啟動(dòng)子(PromPLi),其下游是一個(gè)BelI剪接位點(diǎn)(參考實(shí)施例2和Bernhard等(1978),J.Bacteriol.133(2),第879-卯3頁)。權(quán)利要求1.選自下列的多核苷酸a)具有根據(jù)SEQIDNO.1的核酸序列的多核苷酸,b)具有根據(jù)SEQIDNO.1從1位至153位核酸序列的多核苷酸,c)具有根據(jù)SEQIDNO.1從1位至324位核酸序列的多核苷酸,d)具有根據(jù)SEQIDNO.1從325位至1152位核酸序列的多核苷酸,e)編碼具有根據(jù)SEQIDNO.2的氨基酸序列的多肽的多核苷酸,f)編碼具有根據(jù)SEQIDNO.2從1位至51位氨基酸序列的多肽的多核苷酸,g)編碼具有根據(jù)SEQIDNO.2從1位至108位氨基酸序列的多肽的多核苷酸,h)編碼具有根據(jù)SEQIDNO.2從109位至383位氨基酸序列的多肽的多核苷酸,i)編碼根據(jù)權(quán)利要求13的多肽的多核苷酸,j)根據(jù)(a)的多核苷酸的天然存在或人工產(chǎn)生的突變體或多晶型物或等位基因,其最多具有55個(gè)突變,k)根據(jù)(b)或(c)的多核苷酸的天然存在或人工產(chǎn)生的突變體或多晶型物或等位基因,其最多具有8個(gè)突變,l)根據(jù)(d)的多核苷酸的天然存在或人工產(chǎn)生的突變體或多晶型物或等位基因,其最多具有40個(gè)突變,m)具有關(guān)于根據(jù)(a)的多核苷酸的序列同源性或至少95%序列同一性的多核苷酸,n)具有關(guān)于根據(jù)(b)的多核苷酸的序列同源性或至少95%序列同一性的多核苷酸,o)具有關(guān)于根據(jù)(c)的多核苷酸的序列同源性或至少98%序列同一性的多核苷酸,p)具有關(guān)于根據(jù)(d)的多核苷酸的序列同源性或至少95.5%序列同一性的多核苷酸,q)與根據(jù)(a)、(b)、(c)或(d)的多核苷酸在嚴(yán)格條件下雜交的多核苷酸,r)包括根據(jù)(a)、(c)、(d)、(g)、(h)、(m)、(o)或(p)的多核苷酸的至少200個(gè)連續(xù)核酸的多核苷酸,s)與根據(jù)從(a)到(r)的多核苷酸比較,最多具有50個(gè)核苷酸缺失和/或插入和/或倒位的多核苷酸,t)包括從(a)到(s)所述的多核苷酸中至少一種的多核苷酸,u)與根據(jù)從(a)到(t)的多核苷酸互補(bǔ)的多核苷酸。2.根據(jù)權(quán)利要求1的多核苷酸,其中多核苷酸編碼水解酶。3.根據(jù)權(quán)利要求2的多核苷酸,其中水解酶是一種蛋白酶。4.根據(jù)權(quán)利要求3的多核苷酸,其中蛋白酶是枯草桿菌蛋白酶型的堿性蛋白酶。5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的多核苷酸,其中所編碼的多肽能夠剪切肽鍵。6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的多核苷酸,其中多核苷酸能從天然來源得到,尤其是從微生物。7.根據(jù)權(quán)利要求6的多核苷酸,其中微生物是革蘭陽性細(xì)菌。8.根據(jù)權(quán)利要求7的多核苷酸,其中革蘭陽性細(xì)菌是芽孢桿菌(Bacillus)屬中的一種。9.根據(jù)權(quán)利要求8的多核苷酸,其中芽孢桿菌種類是短小芽孢桿菌(Bacilluspumilus)。10.—種生產(chǎn)和/或鑒別根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的多核苷酸的方法,其中多核苷酸是化學(xué)合成的,以探針為基礎(chǔ)從基因庫分離或通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)獲得。11.載體,其包括根據(jù)權(quán)利要求l-9中任一項(xiàng)的多核苷酸。12.根據(jù)權(quán)利要求ll的載體,其中載體是克隆載體或表達(dá)載體。13.選自下列的多肽a)具有根據(jù)SEQIDN0.2的氨基酸序列的多肽,b)具有根據(jù)SEQIDNO.1從1位至51位氨基酸序列的多肽,c)具有根據(jù)SEQIDNO.1從1位至108位氨基酸序列的多肽,d)具有根據(jù)SEQIDN0.2從109位至383位氨基酸序列的多肽,e)具有SEQIDNO.2中給出的序列從207位至378位氨基酸序列的多肽。f)根據(jù)(a)的多肽的天然存在或人工產(chǎn)生的突變體、多晶型物或等位基因,其最多具有6個(gè)突變,g)根據(jù)(b)或(c)的多肽的天然存在或人工產(chǎn)生的突變體、多晶型物或等位基因,其具有l(wèi)個(gè)突變,h)根據(jù)(d)或(e)的多肽的天然存在或人工產(chǎn)生的突變體、多晶型物或等位基因,其最多具有4個(gè)突變,i)具有關(guān)于根據(jù)(a)或(d)的多肽的序列同源性或至少98.5%序列同一性的多肽,j)由根據(jù)權(quán)利要求1的多核苷酸編碼的多肽,k)包括根據(jù)(d)的氨基酸序列的至少IOO個(gè)連續(xù)氨基酸的多肽,1)包括根據(jù)(d)的氨基酸序列的至少185個(gè)連續(xù)氨基酸的多肽,其中任選有1個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差,m)包括根據(jù)(d)的氨基酸序列的至少225個(gè)連續(xù)氨基酸的多肽,其中可任選有最多2個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差,n)包括根據(jù)(d)的氨基酸序列的至少230個(gè)連續(xù)氨基酸的多肽,其中可任選有最多3個(gè)氨基酸位點(diǎn)偏差,o)關(guān)于根據(jù)從(a)到(o)的多肽,最多具有50個(gè)氨基酸插入和/或缺失和/或倒位的多肽,p)包括從(a)到(p)所述的多肽中至少一種的多肽。14.根據(jù)權(quán)利要求13的多肽,其中多肽是水解酶。15.根據(jù)權(quán)利要求14的多肽,其中水解酶是蛋白酶。16.根據(jù)權(quán)利要求15的多肽,其中蛋白酶是枯草桿菌型的堿性蛋白酶。17.根據(jù)權(quán)利要求13-16中任一項(xiàng)的多肽,其中多肽能夠剪切肽鍵。18.根據(jù)權(quán)利要求13-17中任一項(xiàng)的多肽,其中多肽額外被衍生化。19.根據(jù)權(quán)利要求13-18中任一項(xiàng)的多肽,其中多肽額外被穩(wěn)定化。20.權(quán)利要求13-19中任一項(xiàng)的多肽,其中多肽能從微生物獲得。21.根據(jù)權(quán)利要求20的多肽,其中微生物是革蘭陽性細(xì)菌。22.根據(jù)權(quán)利要求21的多肽,其中革蘭陽性細(xì)菌是芽孢桿菌(Bacillus)屬中的一種。23.根據(jù)權(quán)利要求22的多肽,其中芽孢桿菌種類是短小芽孢桿菌(Bacilluspumilus)。24.細(xì)胞,其包括根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的核酸或者根據(jù)權(quán)利要求11或權(quán)利要求12的載體。25.細(xì)胞,其表達(dá)權(quán)利要求1-23中所鑒定的一種多肽或者可以受刺激而表達(dá)所述多肽,特別是利用權(quán)利要求1-9中所鑒定的多核苷酸和/或利用根據(jù)權(quán)利要求11或權(quán)利要求12的載體。26.根據(jù)權(quán)利要求25的細(xì)胞,其中細(xì)胞是細(xì)菌,特別是一種將形成的蛋白質(zhì)分泌至周圍介質(zhì)的細(xì)菌。27.根據(jù)權(quán)利要求26的細(xì)胞,其中細(xì)胞是革蘭陰性細(xì)菌,特別是大腸桿菌屬(Escherichiacoli)或克雷伯菌屬(Klebsiella)中的一種,特別是大腸桿菌K12、大腸桿菌B或植物克雷伯桿菌的菌株,最特別是大腸桿菌BL21(DE3)、大腸桿菌RV308、大腸桿菌DH5a、大腸桿菌JM109、大腸桿菌XL-1或植物克雷伯桿菌(Rf)菌株的衍生物。28.根據(jù)權(quán)利要求26的細(xì)胞,其中細(xì)胞是革蘭陽性細(xì)菌,特別是芽孢桿菌屬(Bacillus)、葡萄球菌屬(Staphylococcus)或棒桿菌屬(Corynebacterium)中的一種,最特別地是遲緩芽孢桿菌(Bacilluslentus)、地衣芽孢桿菌(B.licheniformis)、解淀粉芽孢桿菌(B.amyloliquefaciens)、枯草芽孢桿菌(B.subtilis)、球芽孢桿菌(B.globigii)、吉氏芽孢桿菌(B.gibsonii)、短小芽孢桿菌(B.pumilus)、嗜堿芽孢桿菌(B.alcalophilus)、肉葡萄球菌(Staphylococcuscarnosus)或谷氨酸棒狀桿菌(Corynebacteriumglutamicum)。29.根據(jù)權(quán)利要求25的細(xì)胞,其中細(xì)胞是真核細(xì)胞,優(yōu)選酵母菌屬(Saccharomyces)中的——禾中。30.—種生產(chǎn)根據(jù)權(quán)利要求13-23中任一項(xiàng)的多肽的方法,其中利用根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的多核苷酸和/或根據(jù)權(quán)利要求11或權(quán)利要求12的載體和/或根據(jù)權(quán)利要求24-29中任一項(xiàng)的細(xì)胞進(jìn)行生產(chǎn),其中核酸序列可選擇地適合宿主細(xì)胞的密碼子選擇。31.組合物,其中組合物包含至少一種根據(jù)權(quán)利要求13-23中任一項(xiàng)的多肽。32.根據(jù)權(quán)利要求31的組合物,其中組合物是洗漆劑或清潔劑。33.根據(jù)權(quán)利要求31的組合物,其中組合物是美容劑或藥物。34.根據(jù)權(quán)利要求33的組合物,其中組合物是洗發(fā)劑,肥皂,洗液,乳膏,脫屑或口腔、牙齒或牙科假體護(hù)理劑。35.選自洗滌劑或清潔劑的組合物,其中組合物包含至少一種選自下列的多肽a)具有根據(jù)SEQIDNO.2的氨基酸序列的多肽,b)具有根據(jù)SEQIDNO.2從109位至383位氨基酸序列的多肽,c)根據(jù)(a)或(b)的多肽的天然存在或人工產(chǎn)生的突變體、多晶型物或等位基因,其最多具有50個(gè)突變,d)具有關(guān)于根據(jù)(a)或(b)的多肽的序列同源性或至少80%序列同一性的多肽,e)包括根據(jù)(a)或(b)的氨基酸序列的至少50個(gè)連續(xù)氨基酸的多肽,f)關(guān)于根據(jù)(a)、(b)、(c)、(d)或(e)的多肽,最多具有50個(gè)氨基酸插入和/或缺失和/或倒位的多肽,g)包括列于(a)至(f)下的多肽中至少一種的多肽。36.根據(jù)權(quán)利要求31-35中任一項(xiàng)的組合物,其中組合物包含多肽的量為每克試劑2|ig-20mg,優(yōu)選5pg-17.5mg,更優(yōu)選20pg-15mg,更優(yōu)選50jig-10mg。37.根據(jù)權(quán)利要求31-36中任一項(xiàng)的組合物,其中組合物包含額外的酶,特別是其他蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶、半纖維素酶、氧化還原酶和/或脂肪酶。38.根據(jù)權(quán)利要求31-37中任一項(xiàng)的組合物,其中組合物包含至少一種選自下列的額外的成分表面活性劑、助洗劑、酸、堿性物質(zhì)、助水溶物、溶劑、增稠劑、漂白劑、染料、香料、緩蝕劑、螯合劑、電解質(zhì)、熒光增白劑、泛灰抑制劑、銀緩蝕劑、染料轉(zhuǎn)移抑制劑、抑泡劑、紫外線吸收劑、溶劑、研磨劑、防電劑、珠光劑和護(hù)膚劑。39.根據(jù)權(quán)利要求31-38中任一項(xiàng)的組合物,其中組合物是固體、凝膠、膏劑或液體組合物。40.產(chǎn)品,其包含根據(jù)權(quán)利要求13-23中任一項(xiàng)的多肽或根據(jù)權(quán)利要求31-39中任一項(xiàng)的組合物以及噴霧分散器,所述噴霧分散器用于將酶制劑或清潔劑配成氣霧劑和/或泡沫。41.一種機(jī)械清潔紡織品或硬質(zhì)表面的方法,其中在至少一個(gè)方法步驟中,根據(jù)權(quán)利要求13-23中任一項(xiàng)的多肽是活性的,特別是每次應(yīng)用的量為40pg-96g,優(yōu)選50pg-72g,更優(yōu)選100pg-48g,最優(yōu)選200pg-24g。42.—種用于處理紡織品原料或用于紡織品護(hù)理的方法,其中在至少一個(gè)方法步驟中,根據(jù)權(quán)利要求13-23中任一項(xiàng)的多肽是活性的,特別是用于紡織品原料、纖維或含天然成分的紡織品,最特別是用于含羊毛或絲綢的紡織品。43.—種方法,其用于水解表面生物膜或從表面除去殘留污物,通過用根據(jù)權(quán)利要求13-23中任一項(xiàng)的多肽或根據(jù)權(quán)利要求31-39中任一項(xiàng)的組合物溫育,可任選利用根據(jù)權(quán)利要求40的產(chǎn)品,其中待處理的表面用多肽和/或組合物處理。44.根據(jù)權(quán)利要求13-23中任一項(xiàng)的多肽、根據(jù)權(quán)利要求31-39中任一項(xiàng)的組合物或根據(jù)權(quán)利要求40的產(chǎn)品的用途,所述用途用于破壞和/或除去生物膜和/或用于從表面除去殘留污物和/或用于清潔紡織品。45.根據(jù)權(quán)利要求13-23中任一項(xiàng)的多肽的用途,其用于洗滌劑或清潔劑成分的活化或鈍化。46.根據(jù)權(quán)利要求13-23中任一項(xiàng)的多肽、根據(jù)權(quán)利要求31-39中任一項(xiàng)的組合物或根據(jù)權(quán)利要求40的產(chǎn)品的用途,其用于水解剪切肽鍵。47.根據(jù)權(quán)利要求13-23中任一項(xiàng)的多肽的用途,其用于生物化學(xué)分析或者用于合成低分子化合物或蛋白質(zhì)。48.根據(jù)權(quán)利要求13-23中任一項(xiàng)的多肽的用途,其用于制備、純化或合成天然物質(zhì)或有價(jià)值的生物物質(zhì)。49.根據(jù)權(quán)利要求13-23中任一項(xiàng)的多肽的用途,其用于處理天然原料,特別是用于表面處理,最特別用在處理皮革的方法中。50.根據(jù)權(quán)利要求13-23中任一項(xiàng)的多肽的用途,其在紡織產(chǎn)品中用于提取或處理原料或中間產(chǎn)物,特別是用于除去織物上的保護(hù)層。51.根據(jù)權(quán)利要求13-23中任一項(xiàng)的多肽的用途,其用于處理紡織品原料或用于紡織品護(hù)理,特別是用于處理羊毛或絲綢或者含羊毛或絲綢的紡織品混合物。52.根據(jù)權(quán)利要求13-23中任一項(xiàng)的多肽的用途,其用于處理膠片,特別是用于除去含明膠等的保護(hù)層。53.根據(jù)權(quán)利要求13-23中任一項(xiàng)的多肽的用途,其用于生產(chǎn)食品或飼料。54.根據(jù)權(quán)利要求31-39中任一項(xiàng)的組合物的產(chǎn)品和多層容器。55.根據(jù)權(quán)利要求13-23中任一項(xiàng)的多肽的用途,其用于生產(chǎn)美容劑或藥物組合物。全文摘要本發(fā)明涉及一種來自短小芽孢桿菌的枯草桿菌蛋白酶型的新型堿性蛋白酶,以及十分相關(guān)的蛋白質(zhì)及其衍生物。本發(fā)明還涉及含有這種枯草桿菌蛋白酶型的新型堿性蛋白酶、十分相關(guān)的蛋白質(zhì)及其衍生物的洗滌劑和清潔劑,它們在洗滌劑和清潔劑中相應(yīng)的洗滌和清潔方法及應(yīng)用,還有其他可能的技術(shù)應(yīng)用。文檔編號(hào)C12N9/54GK101506361SQ200780016927公開日2009年8月12日申請日期2007年5月7日優(yōu)先權(quán)日2006年5月11日發(fā)明者卡爾-海因茨·毛雷爾,彼得拉·西格特,科尼利厄斯·貝斯勒,蘇珊·維蘭特,馬里恩·默克爾申請人:漢高兩合股份公司