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一種具有稀土元素的香蕉誘導培養(yǎng)基篩選方法與流程

文檔序號:12797391閱讀:408來源:國知局

本發(fā)明屬于香蕉組織培養(yǎng)技術領域,尤其涉及一種具有稀土元素的香蕉誘導培養(yǎng)基篩選方法。



背景技術:

香蕉(學名:musananalour.)芭蕉科芭蕉屬植物,又指其果實。熱帶地區(qū)廣泛栽培食用。香蕉味香、富含營養(yǎng),終年可收獲,在溫帶地區(qū)也很受重視。植株為大型草本,從根狀莖發(fā)出,由葉鞘下部形成高3~6公尺(10~20尺)的假桿;葉長圓形至橢圓形,有的長達3~3.5公尺(10~11.5尺),寬65公分(26寸),10~20枚簇生莖頂。穗狀花序下垂[1],由假桿頂端抽出,花多數,淡黃色;果序彎垂,結果10~20串,約50~150個。植株結果后枯死,由根狀莖長出的吸根繼續(xù)繁殖,每一根株可活多年。原產亞洲東南部:臺灣、海南、廣東、廣西等地區(qū)均有栽培。目前香蕉是一種廣受歡迎的水果,也是部分地區(qū)的主要糧食,擁有極大市場需求量,對香蕉進行快速繁殖的研究具有一定的必要性,不僅能解決龐大的市場需求量,也能在一定程度上保存優(yōu)良的香蕉品種,組織培養(yǎng)是香蕉快速繁殖的方法之一,選擇合適的培養(yǎng)基是提高組織培養(yǎng)效率途徑之一,然而目前的培養(yǎng)基篩選方法都是以科研為目的的篩選方法,不能商業(yè)工廠化生產的需求。

稀土元素是17種特殊的元素的統(tǒng)稱,它的得名是因為瑞典科學家在提取稀土元素時應用了稀土化合物,所以得名稀土元素。然而稀土是歷史遺留下來的名稱,稀土是從18世紀末開始陸續(xù)發(fā)現,當時人們常把不溶于水的固體氧化物稱為土,例如,將氧化鋁稱為“陶土”,氧化鈣稱為”堿土“等。稀土一般是以氧化物狀態(tài)分離出來的,當時比較稀少,因而得名為稀土(rareearth,簡稱re或r),然而經過大量的科學研究,在組織培養(yǎng)當中添加了稀土元素會大大地提高組織培養(yǎng)的質量。

鈰是周期系第ιιι族副族鑭系元素,一種稀土元素。原子序數58。穩(wěn)定同位素:136、138、140、142。灰色金屬,有展性。密度:正方晶體6.9,立方晶體6.7。熔點799℃,沸點3426℃。鈰是一種銀灰色的活潑金屬,粉末在空氣中易自燃,易溶于酸。鈰的名稱來源于小行星谷神星的英文名。鈰在地殼中的含量約0.0046%,是稀土元素中豐度最高的。



技術實現要素:

基于現有技術中香蕉的組培誘導培養(yǎng)基的篩選方法中偏向于科研,不適合商業(yè)工廠化生產的問題,本發(fā)明提供一種具有稀土元素的香蕉誘導培養(yǎng)基篩選方法,其通過單一變量法對香蕉花藥進行誘導培養(yǎng),分析統(tǒng)計誘導率、褐化率和生長量,在評價當中不僅僅以成功誘導作為唯一評價標準,結合生長量作為評價標注更加符合商業(yè)工廠化的生產。

一種具有稀土元素的香蕉誘導培養(yǎng)基篩選方法,其包括以下步驟:

步驟s10確定初步篩選范圍,檢索查閱相關文獻資料,對比其他植物物種組培誘導過程中添加稀土元素的量并確定稀土元素初步篩選范圍;

步驟s20選擇外植體,選擇健康、生長環(huán)境一致并且生長狀態(tài)相似的香蕉花藥作為外植體,對外植體進行同一的消毒滅菌處理;

步驟s30對照培養(yǎng),使用同一變量法配制不同濃度稀土元素添加量的培養(yǎng)基,分別接種相同量的香蕉花藥,并進行常規(guī)誘導組織培養(yǎng);

步驟s40記錄檢測參數,培養(yǎng)30天后統(tǒng)計每個稀土元素濃度梯度中萌發(fā)的數量和褐化的數量,并計算萌發(fā)率和褐化率;

步驟s50生長量計算,分別將相同濃度梯度的每個平行實驗組中的愈傷組織取出,用清水沖洗干凈,擦干表面水分并對愈傷組織進行稱重,記錄重量;

步驟s60計算評估因數,將重量數值縮小10倍,再加上萌發(fā)率減去褐化率計算出評估因數,對比不同濃度梯度的評估因數,挑選出數值最大的評估因數對應的稀土元素濃度梯度;

步驟s70縮小篩選范圍,使用步驟s60中挑選出的濃度梯度范圍重復進行步驟s10-s60縮小篩選范圍或者確定最適濃度;

步驟s80反向篩選基礎培養(yǎng)基,使用步驟s70確定的最適濃度搭配不同基礎培養(yǎng)基,重復步驟s40和步驟s50,并使用步驟s60的計算方法計算評估因數,確定最適基礎培養(yǎng)基。

優(yōu)選地,所述的步驟s30中配制不同濃度是設置5-15個濃度梯度。

優(yōu)選地,所述的步驟s30中接種的香蕉花藥的培養(yǎng)基的數量為每個濃度梯度的培養(yǎng)基設置10-20組平行實驗組。

優(yōu)選地,所述的稀土元素是鈰元素。

優(yōu)選地,所述的步驟s70中重復的次數是2-3次。

優(yōu)選地,所述的步驟s80中不同的基礎培養(yǎng)基包括ms培養(yǎng)基、n6培養(yǎng)基、b5培養(yǎng)基、nitsh培養(yǎng)基、white培養(yǎng)基和miller培養(yǎng)基。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發(fā)明作進一步的描述。

一種具有稀土元素的香蕉誘導培養(yǎng)基篩選方法,其包括以下步驟:

步驟s10確定初步篩選范圍,檢索查閱相關文獻資料,對比其他植物物種組培誘導過程中添加稀土元素鈰的量并確定稀土元素鈰初步篩選范圍;

步驟s20選擇外植體,選擇健康、生長環(huán)境一致并且生長狀態(tài)相似的香蕉花藥作為外植體,對外植體進行同一的消毒滅菌處理;

步驟s30對照培養(yǎng),使用同一變量法配制不同濃度稀土元素鈰添加量的培養(yǎng)基,分別接種相同量的香蕉花藥,并進行常規(guī)誘導組織培養(yǎng);

步驟s40記錄檢測參數,培養(yǎng)30天后統(tǒng)計每個稀土元素鈰濃度梯度中萌發(fā)的數量和褐化的數量,并計算萌發(fā)率和褐化率;

步驟s50生長量計算,分別將相同濃度梯度的每個平行實驗組中的愈傷組織取出,用清水沖洗干凈,擦干表面水分并對愈傷組織進行稱重,記錄重量;

步驟s60計算評估因數,將重量數值縮小10倍,再加上萌發(fā)率減去褐化率計算出評估因數,對比不同濃度梯度的評估因數,挑選出數值最大的評估因數對應的稀土元素鈰濃度梯度;

步驟s70縮小篩選范圍,使用步驟s60中挑選出的濃度梯度范圍重復進行步驟s10-s60縮小篩選范圍或者確定最適濃度;

步驟s80反向篩選基礎培養(yǎng)基,使用步驟s70確定的最適濃度搭配不同基礎培養(yǎng)基,重復步驟s40和步驟s50,并使用步驟s60的計算方法計算評估因數,確定最適基礎培養(yǎng)基。

作為優(yōu)選實施例,所述的步驟s30中配制不同濃度是設置10個濃度梯度。

作為優(yōu)選實施例,所述的步驟s30中接種的香蕉花藥的培養(yǎng)基的數量為每個濃度梯度的培養(yǎng)基設置10組平行實驗組。

作為優(yōu)選實施例,所述的步驟s70中重復的次數是2次。

作為優(yōu)選實施例,所述的步驟s80中不同的基礎培養(yǎng)基包括ms培養(yǎng)基、n6培養(yǎng)基、b5培養(yǎng)基、nitsh培養(yǎng)基、white培養(yǎng)基和miller培養(yǎng)基。

經過篩選出以n6培養(yǎng)基為基礎培養(yǎng)基,添加tdz(噻苯隆)的濃度為0.5mg/l、2,4-d(2,4-二氯苯氧乙酸)的濃度為2.5mg/l、活性炭的濃度為0.15mg/l、硝酸鈰的濃度為3g/l,維生素的濃度為0.3mg/l,瓊脂粉的濃度為10g/l、白砂糖的濃度為7g/l,最適合香蕉花藥工廠化誘導生產。

以上所述實施例僅表達了本發(fā)明的一種實施方式,其描述較為具體和詳細,但并不能因此而理解為對本發(fā)明專利范圍的限制。應當指出的是,對于本領域的普通技術人員來說,在不脫離本發(fā)明構思的前提下,還可以做出若干變形和改進,這些都屬于本發(fā)明的保護范圍。因此,本發(fā)明專利的保護范圍應以所附權利要求為準。

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