本發(fā)明屬于鐵皮石斛種植技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種提高生物堿的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基及其制備方法。

背景技術(shù)：

鐵皮石斛是蘭科植物，石斛可分為黃草、金釵、馬鞭等數(shù)十種，主要有效成分為生物堿、多糖、氨基酸。鐵皮石斛為石斛之極品，它因表皮呈鐵綠色而得名，它生長在懸崖峭壁的背陰之處，根不入土，具有滋養(yǎng)陰津、增強(qiáng)體質(zhì)、補(bǔ)益脾胃、護(hù)肝利膽、強(qiáng)筋降脂、降低血糖、抑制腫瘤、明亮眼目、滋養(yǎng)肌膚以及延年益壽等功效?！吨袊帉W(xué)大詞典》稱鐵皮石斛“專治肺胃之氣液、氣液沖旺、腎水自生”。善于滋陰生津，治療陰虛津虧諸癥?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》記載：“石斛除痹下氣、補(bǔ)五臟虛勞瀛瘦，強(qiáng)陰益精，久服，厚腸胃”，稱其有“主傷中，除痹下氣，補(bǔ)五臟虛勞”的功效。

目前，在鐵皮石斛試管苗的繁殖體系中，生根培養(yǎng)基采用的多是固體培養(yǎng)基，如發(fā)明專利“鐵皮石斛的人工大面積栽培方法(專利號：ZL200410084496.1)”公開了一種固體練苗培養(yǎng)基，是以刨木花、珍珠巖、草炭土按體積比1:1:1組成的，采用該培養(yǎng)基組培苗，移栽存活率90％以上；又如發(fā)明專利“鐵皮石斛的快速繁殖方法(專利號：ZL201310156723.6)”公開了一種固體培養(yǎng)基，是以樹皮粉、腐殖質(zhì)、珍珠巖按體積比1:0.5:0.5組成的，采用該培養(yǎng)基組培苗，移栽存活率94.8％。以上現(xiàn)有技術(shù)中固體培養(yǎng)基的應(yīng)用，存在著取苗時容易造成根部傷害，降低了移栽存活率，從而提高了生產(chǎn)成本。

在培養(yǎng)基制備方法中，現(xiàn)有技術(shù)對制備好的培養(yǎng)基多采用高壓滅菌，如發(fā)明專利“一種應(yīng)用鐵皮石斛激素自養(yǎng)型莖尖培養(yǎng)生產(chǎn)藥材的方法(專利號：ZL02136925.9)”公開了一種培養(yǎng)基高壓滅菌的方法，是在壓力為100-120KPa下進(jìn)行的，滅菌時間為15-25min；又如發(fā)明專利“提高鐵皮石斛原球莖增殖倍數(shù)的方法(專利號：ZL201110200498.2)”也公開了一種培養(yǎng)基高壓滅菌的方法，是在壓力為70-135KPa下進(jìn)行的，滅菌時間為20-25min。以上現(xiàn)有技術(shù)由于滅菌壓力普遍不高，存在著消毒時間長、滅菌效果可靠性差等問題，造成產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)效率低下，生產(chǎn)成本高。

專利文獻(xiàn)“一種鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基(公開號：CN104509438B)”公開了一種鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基，所述的培養(yǎng)基由以下組成：蘋果泥、香蕉泥、白糖、硫酸亞鐵、硝酸銨、硝酸鉀、硫酸鎂、磷酸二氫鉀、硼酸、甘氨酸、維生素B1、維生素B2、糖氨基酸、萘乙酸、自來水，該發(fā)明的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基，搭配合理，營養(yǎng)全面，能夠快速促根生莖，提高鐵皮石斛多糖含量和氨基酸含量，縮短鐵皮石斛培養(yǎng)周期，提高鐵皮石斛移栽存活率；專利文獻(xiàn)“一種鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基及其制備方法(公開號：CN104509440B)”公開了一種鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基，包括以下組分：土豆泥、蘋果泥、香蕉泥、白糖、硝酸銨、硝酸鉀、磷酸二氫鉀、硼酸、氨基酸、維生素、IBA、GA、6-BA、純凈水，該發(fā)明的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基營養(yǎng)全面，能夠縮短鐵皮石斛培養(yǎng)周期，提高鐵皮石斛移栽存活率。

鐵皮石斛的主要有效成分為生物堿、多糖、氨基酸，如何同時提高這三種有效成份的量，提高經(jīng)濟(jì)效益，現(xiàn)有技術(shù)未公開報道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供一種提高生物堿的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基及其制備方法，以解決現(xiàn)有組織培養(yǎng)基如何提高鐵皮石斛的主要有效成分生物堿、多糖、氨基酸的含量，提高經(jīng)濟(jì)效益等問題。采用本發(fā)明的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基組培鐵皮石斛所獲得的種苗質(zhì)量好，成活率高，能有效提高生物堿、多糖、氨基酸的含量。

為解決以上技術(shù)問題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

一種提高生物堿的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基，以重量份為單位，包括以下原料：蘋果汁162-395份、檸檬酸2.6-3.4份、鄰苯甲?；酋啺封c0.02-0.05份、茶多酚1.5-2.8份、鉀鹽2.6-4.2份、磷鹽1.5-3.8份、氮鹽1.2-2.6份、鈣鹽0.8-1.3份、鎂鹽0.7-1.2份、碘鹽0.4-0.6份、硼鹽0.2-0.4份、鉬鹽0.2-0.3份、鋅鹽0.3-0.4份、錳鹽0.1-0.3份、銅鹽0.1-0.2份、鐵鹽0.1-0.2份、維生素0.12-0.28份、氨基酸0.1-0.22份、吲哚丁酸0.08-0.14份、赤霉素0.08-0.12份、6-芐基腺膘呤0.07-0.09份、萘乙酸0.08-0.14份、激動素0.05-0.09份、天冬門素0.14-0.26份、調(diào)理劑0.19-0.26份、助溶劑1.6-3.2份、分散劑1.4-2.5份、相容劑1.3-1.9份、穩(wěn)定劑1-1.6份、抗菌劑1.4-2.7份、水2800-4000份。

進(jìn)一步地，所述鉀鹽為硫酸鉀；所述磷鹽為磷酸鈉；所述氮鹽為碳酸銨；所述鈣鹽為氯化鈣；所述鎂鹽為甘氨酸鎂；所述碘鹽為碘化鉀；所述硼鹽為硼酸鉀；所述鉬鹽為鉬酸鉀；所述鋅鹽為氯化鋅；所述錳鹽為甘氨酸錳；所述銅鹽為甘氨酸銅；所述鐵鹽為硫酸亞鐵。

進(jìn)一步地，所述維生素為維生素B；所述氨基酸為甘氨酸。

進(jìn)一步地，所述調(diào)理劑為腐殖酸。

進(jìn)一步地，所述助溶劑為聚乙烯吡咯烷酮。

進(jìn)一步地，所述分散劑以重量份為單位，包括以下原料：羧甲基纖維素鈉8-13份、瓊脂5-7份、改性淀粉6-9份、聚丙烯酸鉀5-7份、海藻酸鉀3-5份。

進(jìn)一步地，所述相容劑為美國杜邦EEA2112AC。

進(jìn)一步地，所述穩(wěn)定劑為卡拉膠。

進(jìn)一步地，所述抗菌劑為富馬酸糠醇甲酯。

本發(fā)明還提供一種提高生物堿的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟：

S1：將蘋果用攪碎機(jī)將蘋果攪碎，加800-1500份水，所得榨汁過3000-5000目篩，制得蘋果汁；

S2：將步驟S1制得的蘋果汁、檸檬酸、鄰苯甲?；酋啺封c、茶多酚、鉀鹽、磷鹽、氮鹽、鈣鹽、鎂鹽、碘鹽、硼鹽、鉬鹽、鋅鹽、錳鹽、銅鹽、鐵鹽、維生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-芐基腺膘呤、萘乙酸、激動素、天冬門素、助溶劑、分散劑、相容劑、2000-2500份水混合，在微波功率為132-175W，溫度為55-60℃，轉(zhuǎn)速為200-400r/min下攪拌25-53min，制得混合液A；

S3：向步驟S2制得的混合液A中加入調(diào)理劑、穩(wěn)定劑、抗菌劑，在溫度為42-52℃，轉(zhuǎn)速為100-300r/min下攪拌13-21min，制得混合液B；

S4：將步驟S3制得的混合液B的pH值調(diào)節(jié)至5.3-5.8，接著在溫度為134-136℃，壓力為210-230KPa下，滅菌4-6min，制得提高生物堿的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基。

本發(fā)明培養(yǎng)基成分的作用如下：

蘋果汁的添加有利于多糖含量的積累。

檸檬酸的存在有利于植物的吸收。

鄰苯甲?；酋啺封c有利于多糖含量的積累。

茶多酚作為一種抗氧劑，既能使細(xì)胞生長緩慢，也可以促進(jìn)黃酮類化合物等有效成分的積累。

鉀元素的營養(yǎng)功效可以提高光合作用的強(qiáng)度，促進(jìn)作物體內(nèi)淀粉和糖的形成，增強(qiáng)作物的抗逆性和抗病能力，還能提高作物對氮的吸收利用。

磷是形成細(xì)胞核蛋白、卵磷脂等不可缺少的元素。磷元素能加速細(xì)胞分裂，促使根系和地上部加快生長，促進(jìn)花芽分化，提早成熟，提高果實(shí)品質(zhì)。

氮是蛋白質(zhì)構(gòu)成的主要元素，蛋白質(zhì)是細(xì)胞原生質(zhì)組成中的基本物質(zhì)。氮元素能促進(jìn)蛋白質(zhì)和葉綠素的形成，使葉色深綠，葉面積增大，促進(jìn)碳的同化，有利于產(chǎn)量增加，品質(zhì)改善。

缺少鈣植物分生組織的生長變慢，缺鈣和癥初在生長點(diǎn)和幼葉，嚴(yán)重時，葉子變形和失綠，在葉子的邊緣出現(xiàn)壞死斑點(diǎn)。

鎂是葉綠素的組成成分。如果缺少鎂，葉片失去了綠色，不能制造營養(yǎng)物質(zhì)。碘是植物生長不可缺少的元素，被譽(yù)為生命元素、智慧元素。

硼在植物體內(nèi)比較集中于莖尖、根尖、葉片和花器官中，雙子葉植物中的含量常常高于單子葉植物。硼可以提高豆科作物根瘤菌的固氮活性，增加固氮量，缺硼時，根留不發(fā)達(dá)，影響固氮量。硼還能增強(qiáng)作物抗逆性。

鉬是固氮微生物，特別是與豆科作物共生的根瘤菌固定大氣氮素時所必需的。同時又能增進(jìn)葉片光合作用強(qiáng)度。缺鉬時植株矮小，葉片脈間失綠，葉緣枯焦，向內(nèi)卷曲，成萎蔫態(tài)。

鋅能促進(jìn)作物進(jìn)行光合作用，它是多種酶的組成成分，缺鋅時作物生長發(fā)育出現(xiàn)停滯。

植物葉綠體中含有錳，錳能促進(jìn)種子發(fā)芽和幼苗時期生長，缺錳時影響作物的光合作用、呼吸作用、硝態(tài)氮在體內(nèi)的積累。表現(xiàn)為葉片脈間失綠黃化，有褐色斑點(diǎn)。

銅參加植物的光合作用、呼吸作用、氮代謝、增強(qiáng)植物的抗性。缺銅時植株生長瘦弱，新葉發(fā)黃，凋萎干枯，葉尖卷曲發(fā)白，有壞死斑點(diǎn)。

鐵是葉綠素形成不可缺少的，在植株體內(nèi)很難轉(zhuǎn)移，所以葉片“失綠癥”是植物缺鐵的表現(xiàn)，并且這種失綠首先表現(xiàn)在幼嫩葉片上。

維生素對植物的生根有效應(yīng)，能夠促進(jìn)植物生根。

氨基酸是植物生長所必需的營養(yǎng)物質(zhì)，由于氨基酸本身的特性，對植物生長特別是光合作用具有獨(dú)特的促進(jìn)作用，它可以增加植物葉綠素含量，提高酶的活性，促進(jìn)二氧化碳的滲透，使光合作用更加旺盛，對提高作物品質(zhì)，增加Vc和糖的含量都有著重要作用。

吲哚丁酸主要用于插條生根，可誘導(dǎo)根原體的形成，促進(jìn)細(xì)胞分化和分裂，有利于新根生成和維管束系統(tǒng)的分化，促進(jìn)插條不定根的形成。

赤霉素，是廣泛存在的一類植物激素。其化學(xué)結(jié)構(gòu)屬于二萜類酸，由四環(huán)骨架衍生而得，可刺激葉和芽的生長。

6-芐基腺嘌呤，中文別名為2-芐氨基嘌呤，N-芐基腺苷，丙烯酸正丁酯，白色或類白色晶體，難溶于水，微溶于乙醇，在酸、堿中穩(wěn)定，屬廣譜性植物生長調(diào)節(jié)劑，可促進(jìn)植物細(xì)胞生長，抑制植物葉綠素的降解，提高氨基酸的含量，延緩葉片衰老等。

萘乙酸(1-Naphthaleneacetic acid)，簡稱NAA，是一種有機(jī)化合物，是一種易溶于有機(jī)溶劑的無色固體，它的結(jié)構(gòu)為萘的1號位置以羧甲基取代，它是一種植物激素生長素，常用于商用的發(fā)根粉或發(fā)根劑中，在植物使用扦插法繁殖時使用。它也可用于植物組織培養(yǎng)。

激動素是一種非天然的細(xì)胞分裂素，化學(xué)名稱為6-糖基氨基嘌呤(或N6-呋喃甲基腺嘌呤)。不溶于水，溶于強(qiáng)酸、堿及冰醋酸中；除具有促進(jìn)細(xì)胞分裂的作用外，還具有延緩離體葉片和切花衰老，誘導(dǎo)芽分化和發(fā)育及增加氣孔開度的作用。

天冬門素對植物生長特別是光合作用具有獨(dú)特的促進(jìn)作用，它可以提高酶的活性，促進(jìn)二氧化碳的滲透，使光合作用更加旺盛，對提高作物品質(zhì)，增加Vc、糖、生物堿、氨基酸的含量都有著重要作用。

調(diào)理劑可以促進(jìn)根系的發(fā)育和有益微生物的活動。

助溶劑增加培養(yǎng)基在溶劑中的溶解度。

分散劑可防止絮凝，防止沉降。

相容劑是指借助于分子間的鍵合力，促使不相容的兩種聚合物結(jié)合在一體，進(jìn)而得到穩(wěn)定的共混物的助劑。

穩(wěn)定劑能增加溶液、膠體、固體、混合物的穩(wěn)定性。

抗菌劑是能夠在一定時間內(nèi)，使某些微生物(細(xì)菌、真菌、酵母菌、藻類及病毒等)的生長或繁殖保持在必要水平以下的化學(xué)物質(zhì)。

本發(fā)明具有以下有益效果：

(1)采用本發(fā)明的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基組培鐵皮石斛所獲得的種苗質(zhì)量好，成活率高，能有效提高生物堿、多糖、氨基酸的含量；

(2)采用本發(fā)明的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基制備方法，能夠縮短消毒時間，提高滅菌效果可靠性和產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)效率，降低生產(chǎn)成本；

(3)本發(fā)明的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基制備方法，操作簡單，易于實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化、規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)。

【具體實(shí)施方式】

為便于更好地理解本發(fā)明，通過以下實(shí)施例加以說明，這些實(shí)施例屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍，但不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。

在實(shí)施例中，所述提高生物堿的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基，以重量份為單位，包括以下原料：蘋果汁162-395份、檸檬酸2.6-3.4份、鄰苯甲酰磺酰亞胺鈉0.02-0.05份、茶多酚1.5-2.8份、鉀鹽2.6-4.2份、磷鹽1.5-3.8份、氮鹽1.2-2.6份、鈣鹽0.8-1.3份、鎂鹽0.7-1.2份、碘鹽0.4-0.6份、硼鹽0.2-0.4份、鉬鹽0.2-0.3份、鋅鹽0.3-0.4份、錳鹽0.1-0.3份、銅鹽0.1-0.2份、鐵鹽0.1-0.2份、維生素0.12-0.28份、氨基酸0.1-0.22份、吲哚丁酸0.08-0.14份、赤霉素0.08-0.12份、6-芐基腺膘呤0.07-0.09份、萘乙酸0.08-0.14份、激動素0.05-0.09份、天冬門素0.14-0.26份、調(diào)理劑0.19-0.26份、助溶劑1.6-3.2份、分散劑1.4-2.5份、相容劑1.3-1.9份、穩(wěn)定劑1-1.6份、抗菌劑1.4-2.7份、水2800-4000份。

所述鉀鹽為硫酸鉀；所述磷鹽為磷酸鈉；所述氮鹽為碳酸銨；所述鈣鹽為氯化鈣；所述鎂鹽為甘氨酸鎂；所述碘鹽為碘化鉀；所述硼鹽為硼酸鉀；所述鉬鹽為鉬酸鉀；所述鋅鹽為氯化鋅；所述錳鹽為甘氨酸錳；所述銅鹽為甘氨酸銅；所述鐵鹽為硫酸亞鐵。

所述維生素為維生素B；所述氨基酸為甘氨酸。

所述調(diào)理劑為腐殖酸。

所述助溶劑為聚乙烯吡咯烷酮。

所述分散劑以重量份為單位，包括以下原料：羧甲基纖維素鈉8-13份、瓊脂5-7份、改性淀粉6-9份、聚丙烯酸鉀5-7份、海藻酸鉀3-5份。

所述相容劑為美國杜邦EEA2112AC。

所述穩(wěn)定劑為卡拉膠。

所述抗菌劑為富馬酸糠醇甲酯。

所述提高生物堿的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟：

S1：將蘋果用攪碎機(jī)將蘋果攪碎，加800-1500份水，所得榨汁過3000-5000目篩，制得蘋果汁；

S2：將步驟S1制得的蘋果汁、檸檬酸、鄰苯甲?；酋啺封c、茶多酚、鉀鹽、磷鹽、氮鹽、鈣鹽、鎂鹽、碘鹽、硼鹽、鉬鹽、鋅鹽、錳鹽、銅鹽、鐵鹽、維生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-芐基腺膘呤、萘乙酸、激動素、天冬門素、助溶劑、分散劑、相容劑、2000-2500份水混合，在微波功率為132-175W，溫度為55-60℃，轉(zhuǎn)速為200-400r/min下攪拌25-53min，制得混合液A；

S3：向步驟S2制得的混合液A中加入調(diào)理劑、穩(wěn)定劑、抗菌劑，在溫度為42-52℃，轉(zhuǎn)速為100-300r/min下攪拌13-21min，制得混合液B；

S4：將步驟S3制得的混合液B的pH值調(diào)節(jié)至5.3-5.8，接著在溫度為134-136℃，壓力為210-230KPa下，滅菌4-6min，制得提高生物堿的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基。

實(shí)施例1

一種提高生物堿的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基，以重量份為單位，包括以下原料：蘋果汁280份、檸檬酸3份、鄰苯甲?；酋啺封c0.04份、茶多酚2.2份、鉀鹽3.5份、磷鹽2.6份、氮鹽2.2份、鈣鹽1份、鎂鹽1份、碘鹽0.5份、硼鹽0.3份、鉬鹽0.25份、鋅鹽0.35份、錳鹽0.2份、銅鹽0.15份、鐵鹽0.16份、維生素0.2份、氨基酸0.16份、吲哚丁酸0.1份、赤霉素0.1份、6-芐基腺膘呤0.08份、萘乙酸0.12份、激動素0.08份、天冬門素02份、調(diào)理劑0.22份、助溶劑2.5份、分散劑2份、相容劑1.6份、穩(wěn)定劑1.3份、抗菌劑2份、水3500份。

所述鉀鹽為硫酸鉀；所述磷鹽為磷酸鈉；所述氮鹽為碳酸銨；所述鈣鹽為氯化鈣；所述鎂鹽為甘氨酸鎂；所述碘鹽為碘化鉀；所述硼鹽為硼酸鉀；所述鉬鹽為鉬酸鉀；所述鋅鹽為氯化鋅；所述錳鹽為甘氨酸錳；所述銅鹽為甘氨酸銅；所述鐵鹽為硫酸亞鐵。

所述維生素為維生素B；所述氨基酸為甘氨酸。

所述調(diào)理劑為腐殖酸。

所述助溶劑為聚乙烯吡咯烷酮。

所述分散劑以重量份為單位，包括以下原料：羧甲基纖維素鈉10份、瓊脂6份、改性淀粉8份、聚丙烯酸鉀6份、海藻酸鉀4份。

所述相容劑為美國杜邦EEA2112AC。

所述穩(wěn)定劑為卡拉膠。

所述抗菌劑為富馬酸糠醇甲酯。

所述提高生物堿的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟：

S1：將蘋果用攪碎機(jī)將蘋果攪碎，加1200份水，所得榨汁過4000目篩，制得蘋果汁；

S2：將步驟S1制得的蘋果汁、檸檬酸、鄰苯甲?；酋啺封c、茶多酚、鉀鹽、磷鹽、氮鹽、鈣鹽、鎂鹽、碘鹽、硼鹽、鉬鹽、鋅鹽、錳鹽、銅鹽、鐵鹽、維生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-芐基腺膘呤、萘乙酸、激動素、天冬門素、助溶劑、分散劑、相容劑、2300份水混合，在微波功率為150W，溫度為58℃，轉(zhuǎn)速為300r/min下攪拌40min，制得混合液A；

S3：向步驟S2制得的混合液A中加入調(diào)理劑、穩(wěn)定劑、抗菌劑，在溫度為48℃，轉(zhuǎn)速為200r/min下攪拌18min，制得混合液B；

S4：將步驟S3制得的混合液B的pH值調(diào)節(jié)至5.6，接著在溫度為135℃，壓力為220KPa下，滅菌5min，制得提高生物堿的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基。

實(shí)施例2

一種提高生物堿的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基，以重量份為單位，包括以下原料：蘋果汁162份、檸檬酸2.6份、鄰苯甲?；酋啺封c0.02份、茶多酚1.5份、鉀鹽2.6份、磷鹽1.5份、氮鹽1.2份、鈣鹽0.8份、鎂鹽0.7份、碘鹽0.4份、硼鹽0.2份、鉬鹽0.2份、鋅鹽0.3份、錳鹽0.1份、銅鹽0.1份、鐵鹽0.1份、維生素0.12份、氨基酸0.1份、吲哚丁酸0.08份、赤霉素0.08份、6-芐基腺膘呤0.07份、萘乙酸0.08份、激動素0.05份、天冬門素0.14份、調(diào)理劑0.19份、助溶劑1.6份、分散劑1.4份、相容劑1.3份、穩(wěn)定劑1份、抗菌劑1.4份、水2800份。

所述鉀鹽為硫酸鉀；所述磷鹽為磷酸鈉；所述氮鹽為碳酸銨；所述鈣鹽為氯化鈣；所述鎂鹽為甘氨酸鎂；所述碘鹽為碘化鉀；所述硼鹽為硼酸鉀；所述鉬鹽為鉬酸鉀；所述鋅鹽為氯化鋅；所述錳鹽為甘氨酸錳；所述銅鹽為甘氨酸銅；所述鐵鹽為硫酸亞鐵。

所述維生素為維生素B；所述氨基酸為甘氨酸。

所述調(diào)理劑為腐殖酸。

所述助溶劑為聚乙烯吡咯烷酮。

所述分散劑以重量份為單位，包括以下原料：羧甲基纖維素鈉8份、瓊脂5份、改性淀粉6份、聚丙烯酸鉀5份、海藻酸鉀3份。

所述相容劑為美國杜邦EEA2112AC。

所述穩(wěn)定劑為卡拉膠。

所述抗菌劑為富馬酸糠醇甲酯。

所述提高生物堿的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟：

S1：將蘋果用攪碎機(jī)將蘋果攪碎，加800份水，所得榨汁過3000目篩，制得蘋果汁；

S2：將步驟S1制得的蘋果汁、檸檬酸、鄰苯甲酰磺酰亞胺鈉、茶多酚、鉀鹽、磷鹽、氮鹽、鈣鹽、鎂鹽、碘鹽、硼鹽、鉬鹽、鋅鹽、錳鹽、銅鹽、鐵鹽、維生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-芐基腺膘呤、萘乙酸、激動素、天冬門素、助溶劑、分散劑、相容劑、2000份水混合，在微波功率為132W，溫度為55℃，轉(zhuǎn)速為200r/min下攪拌53min，制得混合液A；

S3：向步驟S2制得的混合液A中加入調(diào)理劑、穩(wěn)定劑、抗菌劑，在溫度為42℃，轉(zhuǎn)速為100r/min下攪拌21min，制得混合液B；

S4：將步驟S3制得的混合液B的pH值調(diào)節(jié)至5.3，接著在溫度為134℃，壓力為210KPa下，滅菌6min，制得提高生物堿的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基。

實(shí)施例3

一種提高生物堿的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基，以重量份為單位，包括以下原料：蘋果汁395份、檸檬酸3.4份、鄰苯甲?；酋啺封c0.05份、茶多酚2.8份、鉀鹽4.2份、磷鹽3.8份、氮鹽2.6份、鈣鹽1.3份、鎂鹽1.2份、碘鹽0.6份、硼鹽0.4份、鉬鹽0.3份、鋅鹽0.4份、錳鹽0.3份、銅鹽0.2份、鐵鹽0.2份、維生素0.28份、氨基酸0.22份、吲哚丁酸0.14份、赤霉素0.12份、6-芐基腺膘呤0.09份、萘乙酸0.14份、激動素0.09份、天冬門素0.26份、調(diào)理劑0.26份、助溶劑3.2份、分散劑2.5份、相容劑1.9份、穩(wěn)定劑1.6份、抗菌劑2.7份、水4000份。

所述鉀鹽為硫酸鉀；所述磷鹽為磷酸鈉；所述氮鹽為碳酸銨；所述鈣鹽為氯化鈣；所述鎂鹽為甘氨酸鎂；所述碘鹽為碘化鉀；所述硼鹽為硼酸鉀；所述鉬鹽為鉬酸鉀；所述鋅鹽為氯化鋅；所述錳鹽為甘氨酸錳；所述銅鹽為甘氨酸銅；所述鐵鹽為硫酸亞鐵。

所述維生素為維生素B；所述氨基酸為甘氨酸。

所述調(diào)理劑為腐殖酸。

所述助溶劑為聚乙烯吡咯烷酮。

所述分散劑以重量份為單位，包括以下原料：羧甲基纖維素鈉13份、瓊脂7份、改性淀粉9份、聚丙烯酸鉀7份、海藻酸鉀5份。

所述相容劑為美國杜邦EEA2112AC。

所述穩(wěn)定劑為卡拉膠。

所述抗菌劑為富馬酸糠醇甲酯。

所述提高生物堿的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟：

S1：將蘋果用攪碎機(jī)將蘋果攪碎，加1500份水，所得榨汁過5000目篩，制得蘋果汁；

S2：將步驟S1制得的蘋果汁、檸檬酸、鄰苯甲酰磺酰亞胺鈉、茶多酚、鉀鹽、磷鹽、氮鹽、鈣鹽、鎂鹽、碘鹽、硼鹽、鉬鹽、鋅鹽、錳鹽、銅鹽、鐵鹽、維生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-芐基腺膘呤、萘乙酸、激動素、天冬門素、助溶劑、分散劑、相容劑、2500份水混合，在微波功率為175W，溫度為60℃，轉(zhuǎn)速為400r/min下攪拌25min，制得混合液A；

S3：向步驟S2制得的混合液A中加入調(diào)理劑、穩(wěn)定劑、抗菌劑，在溫度為52℃，轉(zhuǎn)速為300r/min下攪拌13min，制得混合液B；

S4：將步驟S3制得的混合液B的pH值調(diào)節(jié)至5.8，接著在溫度為136℃，壓力為230KPa下，滅菌4min，制得提高生物堿的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基。

分別采用本發(fā)明實(shí)施例1-3的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基與現(xiàn)有技術(shù)“一種鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基(公開號：CN104509438B)”的培養(yǎng)基(對照組1，設(shè)生物堿、多糖、氨基酸提高率均為0，其他組與其對比)、“一種鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基及其制備方法(公開號：CN104509440B)”的培養(yǎng)基(對照組2)組培鐵皮石斛苗，培養(yǎng)基組分不同，量相同，其他組培條件基本一致，每個實(shí)施例或?qū)φ战M組培100株，結(jié)果如下表所示。

由表可知，采用本發(fā)明的鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)基組培鐵皮石斛所獲得的種苗質(zhì)量好，成活率高，能有效提高生物堿、多糖、氨基酸的含量。

以上內(nèi)容不能認(rèn)定本發(fā)明的具體實(shí)施只局限于這些說明，對于本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡單推演或替換，都應(yīng)當(dāng)視為屬于本發(fā)明由所提交的權(quán)利要求書確定的專利保護(hù)范圍。