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一種紫玉簪的組織培養(yǎng)快速繁殖方法與流程

文檔序號:11784372閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種紫玉簪的組織培養(yǎng)快速繁殖方法,其特征在于:該方法包括以下步驟:

(1)外植體的選擇與消毒:取紫玉簪側芽作為外植體,依次用2%(v/v)洗潔精水溶液浸泡5min、線狀自來水沖洗15-30min、添加了2-3滴吐溫-20的100毫升0.1%(v/v)升汞消毒8-10min、無菌水沖洗3-5次,最后用消毒濾紙吸去表面水分,得到外植體,其中無菌水為經(jīng)高溫高壓滅菌的蒸餾水;

(2)側芽分化獲得叢生芽快速繁殖培養(yǎng):將步驟(1)得到的外植體接種到MS培養(yǎng)基中,在培養(yǎng)溫度為23-26℃,光照強度1400-2000lux,光照時間為10-12小時/天的條件下培養(yǎng)30天,側芽分化后獲得叢生芽,其中MS培養(yǎng)基中加入0.5-1.5mg/L的6-BA、0.1-0.3mg/L的IAA、50-60g/L蔗糖和3.8-4.8g/L的瓊脂,培養(yǎng)基的pH值為5.8;

(3)叢生芽壯苗培養(yǎng):將步驟(2)中得到的試管苗叢生芽置于MS壯苗培養(yǎng)基中,在培養(yǎng)溫度23-26℃,光照強度1400-2000lux,光照時間為10-12小時/天的條件下培養(yǎng)30天得到健壯植株,其中MS壯苗培養(yǎng)基中加入0.5-1.5mg/L的6-BA、0.1-0.3mg/L的IAA、25-30g/L蔗糖和3.8-4.8g/L的瓊脂,培養(yǎng)基的pH值為5.8;

(4)健壯植株生根培養(yǎng):將步驟(3)中得到的健壯植株置于1/2MS生根培養(yǎng)基中,在培養(yǎng)溫度23-26℃,光照強度1400-2000lux,光照時間為10-12小時/天的條件下培養(yǎng)20天得到帶根的完整植株,其中1/2MS生根培養(yǎng)基中加入0.1-0.3mg/L的NAA、10-15g/L蔗糖和3.8-4.8g/L的瓊脂,培養(yǎng)基的pH值為5.8;

(5)煉苗與移栽:步驟(4)獲得帶根的完整植株后,在室溫為25℃的室內(nèi)打開瓶蓋,煉苗2-4天,洗凈根部培養(yǎng)基,立即移栽到通風良好且弱光沙土壤中,在沙土壤中生長一個半月后移栽大田。

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