本發(fā)明屬于植物培育技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種紅豆杉的組織培育方法。

背景技術(shù)：

從紅豆杉植物中提取的紫杉醇是近年來開發(fā)的一種新型抗癌藥物，對(duì)癌癥有較好的治療效果，同時(shí)紅豆杉是國(guó)家一級(jí)保護(hù)瀕危珍惜物種，尤其是野生紅豆杉已經(jīng)被濫砍濫伐消耗殆盡。由于市場(chǎng)上對(duì)抗癌藥物的巨大需求，紅豆杉的人工種植顯得尤為重要。

目前紅豆杉的人工培育方法主要分為三種:先育種植法、組織培養(yǎng)法、人工扦插法。采用先育種植法和人工扦插法會(huì)受到種苗資源的限制，加之發(fā)芽率和成活率低，生長(zhǎng)周期緩慢，嚴(yán)重影響紅豆杉的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。組織培養(yǎng)法利用植物細(xì)胞的全能性和可克隆性，適合大批量的生產(chǎn)和培育特定的植物組織和幼苗。為了滿足市場(chǎng)對(duì)于紅豆杉的大規(guī)模需求，采用合適的組織培養(yǎng)法大規(guī)?？焖倥嘤t豆杉幼苗顯得格外重要。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)方案是提供一種紅豆杉的組織培育方法，具有周期短，成活率高、適合大規(guī)模培育的優(yōu)良特點(diǎn)。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

一種紅豆杉的組織培育方法，其中，包括以下步驟：

（1）選取東北紅豆杉新生枝條的中層細(xì)胞，處理成2cm的組織切片，經(jīng)過消毒在B5培養(yǎng)基中培養(yǎng)15-20天，形成10-12cm的組織，選取中間5-6cm進(jìn)行下一步培養(yǎng)；

（2）將上述愈傷組織移植到生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)，并且前3天保持黑暗環(huán)境，3天之后，保持光照時(shí)間12-14h/d，直到長(zhǎng)出3cm的主根。

上述的紅豆杉的組織培育方法，其中，所述消毒先用3%的高錳酸鉀進(jìn)行擦拭，再用90%的乙醇溶液擦拭。

上述的紅豆杉的組織培育方法，其中，所述B5培養(yǎng)基中含有0.3-0.5mg/L的1-萘乙酸和1.3-1.5%的水解絡(luò)蛋白，并且保持溫度為20-22℃，室內(nèi)濕度為60-62%。

上述的紅豆杉的組織培育方法，其中，所述生根培養(yǎng)基中含有2-3mg/L的1-萘乙酸，1-2mg/L的吲哚乙酸，0.5-1.0mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸。

本發(fā)明相比現(xiàn)有技術(shù)的有益效果為：選用東北紅豆杉新生枝條的中層細(xì)胞，紫杉醇含量豐富，并且中層細(xì)胞增殖能力旺盛，使得紅豆杉的組織培育周期短，成活率高；選用的培養(yǎng)基簡(jiǎn)單易得，適合大規(guī)模培育紅豆杉幼苗。

具體實(shí)施方式

為了加深對(duì)本發(fā)明的理解，下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明，以下實(shí)施例僅用來解釋本發(fā)明，并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限定。

實(shí)施例1

（1）選取東北紅豆杉新生枝條的中層細(xì)胞，處理成2cm的組織切片，先用3%的高錳酸鉀進(jìn)行擦拭，再用90%的乙醇溶液擦拭進(jìn)行消毒；在B5培養(yǎng)基中加入0.3mg/L的1-萘乙酸和1.5%的水解絡(luò)蛋白，并且保持溫度為20℃，室內(nèi)濕度為62%，將消毒后的組織切片在上述B5培養(yǎng)基中培養(yǎng)15天，形成12cm的組織，選取中間5cm進(jìn)行下一步培養(yǎng)；

（2）在生根培養(yǎng)基中加入2mg/L的1-萘乙酸， 2mg/L的吲哚乙酸，0.5mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸；將上述愈傷組織移植到生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)，并且前3天保持黑暗環(huán)境，3天之后，保持光照時(shí)間14h/d，直到長(zhǎng)出3cm的主根。

實(shí)施例2

（1）選取東北紅豆杉新生枝條的中層細(xì)胞，處理成1cm的組織切片，先用3%的高錳酸鉀進(jìn)行擦拭，再用90%的乙醇溶液擦拭進(jìn)行消毒；在B5培養(yǎng)基中加入0.5mg/L的1-萘乙酸和1.3%的水解絡(luò)蛋白，并且保持溫度為22℃，室內(nèi)濕度為60%，將消毒后的組織切片在上述B5培養(yǎng)基中培養(yǎng)20天，形成10cm的組織，選取中間6cm進(jìn)行下一步培養(yǎng)；

（2）在生根培養(yǎng)基中加入3mg/L的1-萘乙酸，1mg/L的吲哚乙酸， 1.0mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸；將上述愈傷組織移植到生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)，并且前3天保持黑暗環(huán)境，3天之后，保持光照時(shí)間12h/d，直到長(zhǎng)出30mm的主根。

實(shí)施例3

（1）選取東北紅豆杉新生枝條的中層細(xì)胞，處理成2cm的組織切片，先用3%的高錳酸鉀進(jìn)行擦拭，再用90%的乙醇溶液擦拭進(jìn)行消毒；在B5培養(yǎng)基中加入0.4mg/L的1-萘乙酸和1.4%的水解絡(luò)蛋白，并且保持溫度為21℃，室內(nèi)濕度為61%，將消毒后的組織切片在上述B5培養(yǎng)基中培養(yǎng)17天，形成11cm的組織，選取中間5-6cm進(jìn)行下一步培養(yǎng)；

（2）在生根培養(yǎng)基中加入2.5mg/L的1-萘乙酸，1.5mg/L的吲哚乙酸，0.7mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸；將上述愈傷組織移植到生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)，并且前3天保持黑暗環(huán)境，3天之后，保持光照時(shí)間13h/d，直到長(zhǎng)出3cm的主根。

本發(fā)明的有益效果為：（1）選用東北紅豆杉新生枝條的中層細(xì)胞，紫杉醇含量豐富，并且中層細(xì)胞增殖能力旺盛，使得紅豆杉的組織培育周期短，成活率高；（2）選用的培養(yǎng)基簡(jiǎn)單易得，適合大規(guī)模培育紅豆杉幼苗。

應(yīng)該理解的是，本發(fā)明的實(shí)施例僅僅是用于說明本發(fā)明，而不是對(duì)本發(fā)明的限制，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求書及其等效物界定。