一種用于防治油菜白銹病的復(fù)合微生物制劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種用于防治油菜白銹病的復(fù)合微生物制劑及其制備方法，所述的微生物制劑，由22-30重量份數(shù)的菌種培養(yǎng)物和70-78重量份數(shù)的微生物載體組成；其中，菌種培養(yǎng)物的組分及重量份數(shù)為：苦草芽孢桿菌1-2份、巨大芽孢桿菌3-4份、糞鏈球菌1-4份、根瘤菌5-6份、酵母菌12-18份。所述復(fù)合微生物制劑的制備方法為苦草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、糞鏈球菌混合培養(yǎng)，根瘤菌單獨(dú)培養(yǎng)，發(fā)酵完成后離心干燥，按比例配合即可。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是，增強(qiáng)有益菌群優(yōu)勢，抑制鞭毛菌亞門真菌生長，預(yù)防及治療油菜白銹病的發(fā)生，減少化學(xué)農(nóng)藥的使用，經(jīng)濟(jì)環(huán)保，同時(shí)加速葉面光合作用、增加根系對于營養(yǎng)元素的吸收，促進(jìn)油菜生長，減少化肥的使用。
【專利說明】一種用于防治油菜白銹病的復(fù)合微生物制劑及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
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[0001]本發(fā)明涉及一種化學(xué)肥料，尤其涉及一種用于防治油菜白銹病的復(fù)合微生物制劑及其制備方法。

【背景技術(shù)】
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[0002]油菜屬于十字花科，蕓薹屬，一年生或越年生草本植物，是我國植物油脂和蛋白質(zhì)的重要來源。油菜生產(chǎn)對于保證我國食用植物油脂和飼用蛋白質(zhì)供應(yīng)、改善食物結(jié)構(gòu)、促進(jìn)養(yǎng)殖業(yè)和加工業(yè)發(fā)展均有重要影響。
[0003]油菜白銹病又叫“龍頭病”，病原菌是一種專性寄生菌白銹病菌，屬于鞭毛菌亞門真菌。油菜受白銹病危害后，初期癥狀為出現(xiàn)淡綠色小點(diǎn)，逐漸變黃后在葉背病斑上長出稍微隆起的有白色光澤的小皰斑，破裂后撒發(fā)出白色粉末，嚴(yán)重時(shí)整個(gè)葉片枯黃，幼莖和花軸受到傷害后腫大彎曲形似“龍頭”，上面著生白色皰斑，多不能結(jié)實(shí)。油菜各個(gè)生育階段都可發(fā)生該病，冬油菜區(qū)發(fā)病普遍，尤其以江浙滬、云貴高原等地嚴(yán)重，流行年份發(fā)病率10-50%，產(chǎn)量損失5-20%，含油量降低1.0-3.29%。目前采用藥劑防治主要為滅菌靈可濕性粉劑、福美雙可濕性粉劑、噁霜靈可濕性粉劑、代森鋅等化學(xué)試劑，加重環(huán)境代謝，對植物及人體都產(chǎn)生一定的危害，不能可持續(xù)發(fā)展，易產(chǎn)生抗藥性。
[0004]我國油菜種植面積廣闊，但是由于分散種植以及配套栽培技術(shù)不到位，油菜籽單產(chǎn)量水平與國外差距很大，在油菜栽培管理技術(shù)中，合理的施肥是其中的一個(gè)重要技術(shù)環(huán)節(jié)。目前我國在油菜肥料管理上主要存在施肥盲目性、隨意性大，投入肥料肥效持久性差，利用率低，肥料養(yǎng)分比例不協(xié)調(diào)，加重了土壤養(yǎng)分的不平衡，油菜抗病性差等問題。而且現(xiàn)在的光合微生物肥料比較單一，菌種活力比較低，作物與微生物之間知識松散的聯(lián)合，沒有形成共生組織，所以固氮活動易受限制。


【發(fā)明內(nèi)容】

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[0005]本發(fā)明的目的是為油菜提供一種用于防治油菜白銹病的復(fù)合微生物制劑及其制備方法，可以有效改善作物根系及葉面的微生態(tài)環(huán)境，促進(jìn)有益微生物的繁殖，抑制白銹病菌，從而減少白銹病害，并且可以促進(jìn)油菜生長，減少農(nóng)藥及化肥的使用，達(dá)到一種安全、綠色的種植效果。
[0006]為達(dá)到上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是:
[0007]一種用于防治油菜白銹病的復(fù)合微生物制劑，由22-30重量份數(shù)的菌種培養(yǎng)物和70-78重量份數(shù)的微生物載體組成。
[0008]優(yōu)選的，所述菌種培養(yǎng)物的組分及重量份數(shù)為:苦草芽孢桿菌1-2份、巨大芽孢桿菌3-4份、糞鏈球菌1-4份、根瘤菌5-6份、酵母菌12-18份。
[0009]優(yōu)選的，所述微生物載體為草木灰、膨潤土或者兩者的混合物。
[0010]一種用于防治油菜白銹病的復(fù)合微生物制劑的制備方法，其制備步驟為:
[0011]第一步:將第一液體培養(yǎng)基120°C滅菌20分鐘后與吐溫以重量比96-106:1混合，將枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和糞鏈球菌混合物按照重量比1:100-150的比例接種于上述培養(yǎng)基中，充分?jǐn)嚢?0分鐘后密閉靜置發(fā)酵4-7天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定pH值、平板計(jì)數(shù)，當(dāng)活菌總濃度超過109/ML并且pH值在3.0-4.0便停止發(fā)酵；
[0012]第二步:將第二液體培養(yǎng)基120°C滅菌20分鐘后通氣，將根瘤菌按照重量比1:100-150比例接種于第二液體培養(yǎng)基中，充分?jǐn)嚢?0分鐘后密閉靜置發(fā)酵1-4天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定PH值、平板計(jì)數(shù)，當(dāng)活菌總濃度超過109/ML即停止發(fā)酵；
[0013]第三步:將第一步跟第二步所得培養(yǎng)物相對離心力3000-4000 Xg下離心10-30分鐘后35-40°C熱風(fēng)干燥10-20小時(shí)，使含水量降低到25%以下；
[0014]第四步:將第三步得到的菌種培養(yǎng)物及酵母菌與微生物載體按照比例混合，室溫破碎后過150-300微米孔徑篩后即得成品。
[0015]優(yōu)選的，所述第一液體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量份數(shù)為:豆柏粉3-5份、大豆粉2-4份、碳酸氫銨0.05-0.4份、葡糖糖1-10份、磷酸二氫鉀1.5-3份、硫酸鎂0.1-1份、硫酸錳0.1-0.8份、丙酸鈉0.1-0.5份、硝酸銨0.1-0.4份、四水八硼酸鈉3-10份，無菌水80-90份。
[0016]優(yōu)選的，所述第二液體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量份數(shù)為:甘露醇8-10份、豆柏粉5-10份、葡糖糖1-5份、玉米粉3-5份、磷酸二氫鉀1-5份、磷酸二氫鈉0.2-0.9份、硫酸鎂1_2份、無菌水50-80份。
[0017]本發(fā)明所用的四種菌種為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium)、類鏈球菌(Streptococcus faecalis)、根瘤菌(Root nodulebacteria)、酵母菌。
[0018]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)為:
[0019]1.本發(fā)明采用可以抑制土壤及葉面環(huán)境中白銹病菌的有益細(xì)菌及真菌，合理配伍，具有增強(qiáng)有益菌群優(yōu)勢、增強(qiáng)植物抗逆性及抵抗力、預(yù)防及治療油菜白銹病的發(fā)生、減少化學(xué)農(nóng)藥的使用的作用，經(jīng)濟(jì)環(huán)保。
[0020]2.本發(fā)明肥料可以促進(jìn)腐殖質(zhì)形成、降解有毒物質(zhì)、促進(jìn)氮磷鉀等營養(yǎng)元素的吸收，進(jìn)而促進(jìn)生長，減少化肥的使用。
[0021]3.本發(fā)明肥料含有具有特殊吸附功能的載體，提高在土壤及葉面的存活率，有效的改善作物根系及葉面的微生態(tài)環(huán)境，達(dá)到一種安全、綠色的種植效果。
[0022]4.本發(fā)明產(chǎn)品中有益菌群高達(dá)109/g，并含有多種活性代謝物質(zhì)，可以改善土壤結(jié)構(gòu)，分解土壤及作物中殘存農(nóng)藥，提高作物對養(yǎng)分的吸收轉(zhuǎn)換，提高經(jīng)濟(jì)及生態(tài)效益。
[0023]5.本發(fā)明的培養(yǎng)基主要采用糧食作物及其副產(chǎn)品，成本低，來源廣，產(chǎn)品安全可
A+-.與巨O

【具體實(shí)施方式】
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[0024]下面將結(jié)合具體實(shí)施例來詳細(xì)說明本發(fā)明，在此發(fā)明的示意性實(shí)施例以及說明用來解釋本發(fā)明，但并不作為對本發(fā)明的限定。
[0025]實(shí)施例一
[0026]—種用于防治油菜白銹病的復(fù)合微生物制劑，由30重量份數(shù)的菌種培養(yǎng)物和80重量份數(shù)的微生物載體組成，其中:苦草芽孢桿菌2份、巨大芽孢桿菌4份、糞鏈球菌3份、根瘤菌6份、酵母菌15份，以上菌種均可以在中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心購買；微生物載體為草木灰。
[0027]制備步驟為:
[0028]第一步:將第一液體培養(yǎng)基120°C滅菌20分鐘后與吐溫以重量比100:1混合，將枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和糞鏈球菌混合物按照重量比1:100的比例接種于上述培養(yǎng)基中，充分?jǐn)嚢?0分鐘后密閉靜置發(fā)酵7天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定pH值、平板計(jì)數(shù)，當(dāng)活菌總濃度超過109/ML并且pH值在4.0便停止發(fā)酵；
[0029]第二步:將第二液體培養(yǎng)基120 °C滅菌20分鐘后通氣，將根瘤菌按照重量比1::100比例接種于第二液體培養(yǎng)基中，充分充分?jǐn)嚢?0分鐘后密閉靜置發(fā)酵1-4天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定PH值、平板計(jì)數(shù)，當(dāng)活菌總濃度超過109/ML即停止發(fā)酵；
[0030]第三步:將第一步跟第二步所得培養(yǎng)物相對離心力4000Xg下離心20分鐘后在35°C熱風(fēng)干燥15小時(shí)，含水量降低到25%以下；
[0031]第四步:將第三步得到的菌種培養(yǎng)物及酵母菌與微生物載體按照比例混合，室溫破碎后過200微米孔徑篩后即得成品。
[0032]其中第一液體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量份數(shù)為:豆柏粉4份、大豆粉4份、碳酸氫銨0.05份、葡糖糖3份、磷酸二氫鉀3份、硫酸鎂I份、硫酸錳0.1份、丙酸鈉0.5份、硝酸銨0.4份、四水八硼酸鈉10份，無菌水80份。第二液體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量份數(shù)為:甘露醇8份、豆柏粉5份、葡糖糖3份、玉米粉3份、磷酸二氫鉀I份、磷酸二氫鈉0.9份、硫酸鎂I份、無菌水80份。
[0033]實(shí)施例二
[0034]一種用于防治油菜白銹病的復(fù)合微生物制劑，由22重量份數(shù)的菌種培養(yǎng)物和78重量份數(shù)的微生物載體組成，其中菌種培養(yǎng)物的組分及重量份數(shù)為:枯草芽孢桿菌I份、巨大芽孢桿菌3份、糞鏈球菌I份、根瘤菌5份、酵母菌12份，以上菌種均可以在中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心購買，微生物載體為膨潤土。
[0035]制備步驟為:
[0036]第一步:將第一液體培養(yǎng)基120°C滅菌20分鐘后與吐溫以重量比96:1混合，將枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和糞鏈球菌混合物按照重量比1:100的比例接種于上述培養(yǎng)基中，充分?jǐn)嚢?0分鐘后密閉靜置發(fā)酵6天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定pH值、平板計(jì)數(shù)，當(dāng)活菌總濃度超過109/ML并且pH值在3.0便停止發(fā)酵；
[0037]第二步:將第二液體培養(yǎng)基120 °C滅菌20分鐘后通氣，將根瘤菌按照重量比1::100比例接種于第二液體培養(yǎng)基中，充分充分?jǐn)嚢?0分鐘后密閉靜置發(fā)酵1-4天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定PH值、平板計(jì)數(shù)，當(dāng)活菌總濃度超過109/ML即停止發(fā)酵；
[0038]第三步:將第一步跟第二步所得培養(yǎng)物相對離心力3000Xg下離心10分鐘后在35°C熱風(fēng)干燥10小時(shí)，含水量降低到25%以下；
[0039]第四步:將第三步得到的菌種培養(yǎng)物與微生物載體按照比例混合，室溫破碎后過150微米孔徑篩后即得成品。
[0040]其中，第一液體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量份數(shù)為:豆柏粉3份、大豆粉4份、碳酸氫銨0.05份、葡糖糖I份、磷酸二氫鉀1.5份、硫酸鎂0.1份、硫酸錳0.1份、丙酸鈉0.1份、硝酸銨0.1份、四水八硼酸鈉3份，無菌水80份，第二液體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量份數(shù)為:甘露醇8份、豆柏粉5份、葡糖糖I份、玉米粉3份、磷酸二氫鉀I份、磷酸二氫鈉0.2份、硫酸鎂I份、無菌水50份。
[0041]實(shí)施例三
[0042]一種用于防治油菜白銹病的復(fù)合微生物制劑，由26重量份數(shù)的菌種培養(yǎng)物和74重量份數(shù)的微生物載體組成。菌種培養(yǎng)物的組分及重量份數(shù)為:枯草芽孢桿菌2份、巨大芽孢桿菌3份、糞鏈球菌2份、根瘤菌5份、酵母菌14份，以上菌種均可以在中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心購買，微生物載體為草木灰。
[0043]制備步驟為:
[0044]第一步:將第一液體培養(yǎng)基120°C滅菌20分鐘后與吐溫以重量比106:1混合，將枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和糞鏈球菌混合物按照重量比1:150的比例接種于上述培養(yǎng)基中，充分?jǐn)嚢?0分鐘后密閉靜置發(fā)酵7天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定pH值、平板計(jì)數(shù)，當(dāng)活菌總濃度超過109/ML并且pH值在3.0便停止發(fā)酵；
[0045]第二步:將第二液體培養(yǎng)基120°C滅菌20分鐘后通氣，將根瘤菌按照重量比1:150比例接種于第二液體培養(yǎng)基中，充分充分?jǐn)嚢?0分鐘后密閉靜置發(fā)酵4天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定PH值、平板計(jì)數(shù)，當(dāng)活菌總濃度超過109/ML即停止發(fā)酵；
[0046]第三步:將第一步跟第二步所得培養(yǎng)物相對離心力4000Xg下離心30分鐘后在40°C熱風(fēng)干燥10小時(shí)，含水量降低到25%以下；
[0047]第四步:將第三步得到的菌種培養(yǎng)物及酵母菌與微生物載體按照比例混合，室溫破碎后過300微米孔徑篩后即得成品。
[0048]其中，第一液體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量份數(shù)為:豆柏粉5份、大豆粉4份、碳酸氫銨0.4份、葡糖糖2份、磷酸二氫鉀3份、硫酸鎂I份、硫酸錳0.8份、丙酸鈉0.5份、硝酸銨0.4份、四水八硼酸鈉10份，無菌水80份，第二液體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量份數(shù)為:甘露醇9份、豆柏粉5份、葡糖糖5份、玉米粉3份、磷酸二氫鉀5份、磷酸二氫鈉0.9份、硫酸鎂I份、無菌水80份。
[0049]實(shí)施例四
[0050]一種用于防治油菜白銹病的復(fù)合微生物制劑，由28重量份數(shù)的菌種培養(yǎng)物和72重量份數(shù)的微生物載體組成，所述菌種培養(yǎng)物的組分及重量份數(shù)為:苦草芽孢桿菌，2份、巨大芽孢桿菌4份、糞鏈球菌2份、根瘤菌6份、酵母菌14份，
[0051]微生物載體為草木灰與膨潤土重量比1:1的混合物。
[0052]制備步驟為:
[0053]第一步:將第一液體培養(yǎng)基120°C滅菌20分鐘后與吐溫以重量比100:1混合，將枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和糞鏈球菌混合物按照重量比1:100的比例接種于上述培養(yǎng)基中，充分?jǐn)嚢?0分鐘后密閉靜置發(fā)酵5天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定pH值、平板計(jì)數(shù)，當(dāng)活菌總濃度超過109/ML并且pH值在4.0便停止發(fā)酵；
[0054]第二步:將第二液體培養(yǎng)基120°C滅菌20分鐘后通氣，將根瘤菌按照重量比1:100比例接種于第二液體培養(yǎng)基中，充分充分?jǐn)嚢?0分鐘后密閉靜置發(fā)酵4天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定PH值、平板計(jì)數(shù)，當(dāng)活菌總濃度超過109/ML即停止發(fā)酵；
[0055]第三步:將第一步跟第二步所得培養(yǎng)物相對離心力3500Xg下離心10分鐘后40°C熱風(fēng)干燥15小時(shí)，使含水量降低到25%以下；
[0056]第四步:將第三步得到的菌種培養(yǎng)物及酵母菌與微生物載體按照比例混合，室溫破碎后過300微米孔徑篩后即得成品。
[0057]其中，第一液體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量份數(shù)為:豆柏粉5份、大豆粉3份、碳酸氫銨0.4份、葡糖糖8份、磷酸二氫鉀3份、硫酸鎂I份、硫酸錳0.8份、丙酸鈉0.5份、硝酸銨0.4份、四水八硼酸鈉3份，無菌水80份。第二液體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量份數(shù)為:甘露醇8份、豆柏粉9份、葡糖糖5份、玉米粉5份、磷酸二氫鉀5份、磷酸二氫鈉0.9份、硫酸鎂2份、無菌水70份。
[0058]本產(chǎn)品在研發(fā)完成后進(jìn)行對比試驗(yàn)，一次性添加量為200克/畝，本微生物制劑肥料使用后油菜白銹病降低80-95%，油菜產(chǎn)量提高15-35%，根系長度平均增長2_5厘米，油菜成熟提前10-15天。
[0059]上述實(shí)施例僅例示性說明本發(fā)明的原理及其功效，而非用于限制本發(fā)明。任何熟悉此技術(shù)的人士皆可在不違背本發(fā)明的精神及范疇下，對上述實(shí)施例進(jìn)行修飾或改變。因此，舉凡所屬【技術(shù)領(lǐng)域】中具有通常知識者在未脫離本發(fā)明所揭示的精神與技術(shù)思想下所完成的一切等效修飾或改變，仍應(yīng)由本發(fā)明的權(quán)利要求所涵蓋。
【權(quán)利要求】
1.一種用于防治油菜白銹病的復(fù)合微生物制劑，其特征在于:所述的微生物制劑，由22-30重量份數(shù)的菌種培養(yǎng)物和70-78重量份數(shù)的微生物載體組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于防治油菜白銹病的復(fù)合微生物制劑，其特征在于:所述菌種培養(yǎng)物的組分及重量份數(shù)為:苦草芽孢桿菌1-2份、巨大芽孢桿菌3-4份、糞鏈球菌1-4份、根瘤菌5-6份、酵母菌12-18份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于防治油菜白銹病的復(fù)合微生物制劑，其特征在于:所述微生物載體為草木灰、膨潤土或者兩者的混合物。
4.一種用于防治油菜白銹病的復(fù)合微生物制劑的制備方法，其特征在于:其制備步驟為: 第一步:將第一液體培養(yǎng)基120°C滅菌20分鐘后與吐溫以重量比96-106:1混合，將枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和糞鏈球菌混合物按照重量比1:100-150的比例接種于上述培養(yǎng)基中，充分?jǐn)嚢?0分鐘后密閉靜置發(fā)酵4-7天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定pH值、平板計(jì)數(shù)，當(dāng)活菌總濃度超過109/ML并且pH值在3.0-4.0便停止發(fā)酵； 第二步:將第二液體培養(yǎng)基120 °C滅菌20分鐘后通氣，將根瘤菌按照重量比1:100-150比例接種于第二液體培養(yǎng)基中，充分?jǐn)嚢?0分鐘后密閉靜置發(fā)酵1-4天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定PH值、平板計(jì)數(shù)，當(dāng)活菌總濃度超過109/ML即停止發(fā)酵； 第三步:將第一步跟第二步所得培養(yǎng)物相對離心力3000-4000 Xg下離心10-30分鐘后35-40°C熱風(fēng)干燥10-20小時(shí)，使含水量降低到25%以下； 第四步:將第三步得到的菌種培養(yǎng)物及酵母菌與微生物載體按照比例混合，室溫破碎后過150-300微米孔徑篩后即得成品。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種用于防治油菜白銹病的復(fù)合微生物制劑的制備方法，其特征在于:所述第一液體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量份數(shù)為:豆柏粉3-5份、大豆粉2-4份、碳酸氫銨0.05-0.4份、葡糖糖1-10份、磷酸二氫鉀1.5-3份、硫酸鎂0.1-1份、硫酸錳0.1-0.8份、丙酸鈉0.1-0.5份、硝酸銨0.1-0.4份、四水八硼酸鈉3-10份，無菌水80-90份。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種用于防治油菜白銹病的復(fù)合微生物制劑的制備方法，其特征在于:所述第二液體培養(yǎng)基的組分及質(zhì)量份數(shù)為:甘露醇8-10份、豆柏粉5-10份、葡糖糖1-5份、玉米粉3-5份、磷酸二氫鉀1-5份、磷酸二氫鈉0.2-0.9份、硫酸鎂1_2份、無菌水50-80份。
【文檔編號】A01P3/00GK104472554SQ201410852398
【公開日】2015年4月1日 申請日期:2014年12月31日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月31日
【發(fā)明者】周美華 申請人:吳中區(qū)金庭小美華家庭農(nóng)場