專利名稱：加速煙葉陳化和提升煙葉品質(zhì)的復(fù)合微生物制劑及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于微生物及其應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種復(fù)合微生物制劑，及將此制劑用于加速煙葉陳化和提升煙葉吸味品質(zhì)的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
煙葉陳化是煙草加工過程中的一個(gè)重要加工過程，同時(shí)陳化也是煙葉吸食品質(zhì)形成過程中的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。所述煙葉陳化是指在自然溫濕度條件下，使煙葉的化學(xué)成分、物理性質(zhì)發(fā)生變化，從而改善其吸食品質(zhì)的一種處理方法。現(xiàn)有技術(shù)對(duì)烤煙發(fā)酵過程中生物和化學(xué)變化規(guī)律研究結(jié)果以及評(píng)吸結(jié)果綜合表明:烤煙陳化作用主要是在12-18個(gè)月中完成的。在現(xiàn)有技術(shù)條件下，烤煙達(dá)到最佳吸味品質(zhì)的最佳自然陳化時(shí)間為24 30個(gè)月。未陳化煙葉在品質(zhì)上存在不同程度的缺陷，如香氣粗糙，青雜氣、土雜氣較重，刺激性大，吸味辛辣，澀舌，煙氣不夠細(xì)膩的，煙葉色澤及燃燒性也不符合加工要求等缺點(diǎn)，必須經(jīng)過陳化加以改善，才能達(dá)到卷煙工業(yè)要求。現(xiàn)有技術(shù)中，人工陳化速度快，但陳化效果差，目前已經(jīng)很少采用。自然陳化是將煙葉按一定要求堆放在儲(chǔ)備庫內(nèi)，通過控制一定濕度，有時(shí)還控制一定溫度條件下進(jìn)行的陳化，陳化時(shí)間為1-3年。自然陳化效果較好，但也存在不足，不足主要有:一是因煙葉富含營養(yǎng)物質(zhì)以及長(zhǎng)期與外部環(huán)境密切接觸，煙葉很容易生蟲；二是在春夏秋冬四季變化過程中，因?yàn)闇囟?、濕度變化大，煙葉很容易產(chǎn)生霉變；三是因煙葉長(zhǎng)期與過量空氣接觸，煙葉顏色很容易變褐、變深，所以自然陳化時(shí)間不能過長(zhǎng)，一般不能超過3年。自然陳化由于存在長(zhǎng)蟲、霉變等原因一方面給煙葉造成嚴(yán)重的損失，據(jù)了解煙葉陳化后的損失達(dá)0.8%，一個(gè)中型卷煙廠年造成的直接經(jīng)濟(jì)損失達(dá)2000多萬元。另一方面還嚴(yán)重影響煙葉的內(nèi)外在品質(zhì)，影響煙葉深加工產(chǎn)品的質(zhì)量。在煙葉陳化過程中，微生物起著重要的作用。微生物可以降解煙葉中多糖、蛋白質(zhì)、煙堿等，釋放出氨基酸以及香氣物質(zhì)，從而加速煙葉陳化和提升卷煙品質(zhì)，已報(bào)道的微生物有枯草芽抱桿菌、嗜熱性放線菌、小球菌、假單胞菌等，但未見植物乳桿菌和醋酸桿菌方面的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的上述不足，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種加速煙葉陳化和提升煙葉品質(zhì)的復(fù)合微生物制劑，及所述的復(fù)合微生物制劑在煙葉陳化中的應(yīng)用。所述的復(fù)合微生物制劑能加速煙葉陳化，并提高煙葉中有機(jī)酸和香氣物質(zhì)含量，有效提升陳化煙葉的品質(zhì)。本發(fā)明的技術(shù)方案是:一種加速煙葉陳化和提升煙葉品質(zhì)的復(fù)合微生物制劑中含有植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)PJH05 CCTCC NO:M2012002 和熱醋酸桿菌(Clostriolium themoacidophilus)PJH73 CCTCC NO:M2012001。所述復(fù)合微生物制劑由發(fā)酵后的植物乳桿菌CCTCC NO:M2012002的活化液和發(fā)酵后的熱醋酸桿菌CCTCC NO:M2012001的活化液按照質(zhì)量比為1: 0.5-2的比例進(jìn)行配比后，冷凍干燥，制成制劑。所述的發(fā)酵后植物乳桿菌CCTCC NO:M2012002的活化液中含有活菌數(shù)不小于
5.0X 109cfu/ml ;所述發(fā)酵后的熱醋酸桿菌CCTCC NO:M2012001的活化液中含有活菌數(shù)不小于 5.0X109cfu/ml。所述復(fù)合微生物制劑按以下步驟進(jìn)行制備:(I).培養(yǎng)基制備:煙葉和水的質(zhì)量比為1: 8 12混合后進(jìn)行回流提取，提取2 4小時(shí)后，冷卻、過濾，調(diào)節(jié)pH值3-7，加入溶液質(zhì)量10-30%的葡萄糖，所得即為培養(yǎng)基;(2).植物乳桿菌活化:將從堆積的煙梗中篩選的植物乳桿菌CCTCC NO:M2012002加入到上述培養(yǎng)基中，在25-35°C下培養(yǎng)45 52小時(shí)，離心分離，取上清液稀釋至活菌數(shù)不小于5.0X 109cfu/ml，所得為發(fā)酵后的植物乳桿菌活化液；(3).熱醋酸桿菌活化:將從堆積的煙梗中篩選的熱醋酸桿菌CCTCC NO:M2012001加入到上述培養(yǎng)基中，在20-35°C下培養(yǎng)45 52小時(shí)，離心分離，取上清液稀釋至活菌數(shù)不小于5.0X 109cfu/ml，所得為發(fā)酵后的熱醋酸桿菌活化液；(4).復(fù)合微生物菌液配比:將所述發(fā)酵后的植物乳桿菌活化液和所述發(fā)酵后的熱醋酸桿菌活化液按照質(zhì)量比為1: 0.5-2的比例進(jìn)行配比，得到復(fù)合微生物菌液；(5).復(fù)合微生物制劑的制備:將所述的復(fù)合微生物菌液冷凍干燥，制成復(fù)合微生物制劑。如上所述的一種加速煙葉陳化和提升煙葉品質(zhì)的復(fù)合微生物制劑在煙葉陳化中的應(yīng)用。采用本發(fā)明的復(fù)合微生物制劑在煙葉中進(jìn)行陳化，可以采用現(xiàn)有技術(shù)的各種常用的人工陳化的方法進(jìn)行，都能取得加速煙葉陳化，并提高煙葉中有機(jī)酸和香氣物質(zhì)含量，有效提升陳化煙葉的品質(zhì)的效果。所述的一種加速煙葉陳化和提升煙葉品質(zhì)的復(fù)合微生物制劑在煙葉陳化中的應(yīng)用按以下方法進(jìn)行，其人工陳化取得的效果會(huì)更佳:(I)、煙葉預(yù)處理:將煙葉濕度調(diào)節(jié)為30% -60%，放置2-3小時(shí)；(2)、復(fù)合微生物制劑菌懸液配置:按照復(fù)合微生物制劑和無菌水質(zhì)量比為I: 100的比例配成復(fù)合微生物制劑菌懸液；(3)、煙葉陳化處理:將制備好的復(fù)合微生物制劑菌懸液用無菌噴霧器均勻噴淋在煙葉中，噴施量為IOml復(fù)合微生物制劑菌懸液/IOOg煙絲，噴施后煙葉在20-40 °C下恒溫培養(yǎng)5-15天。本發(fā)明的復(fù)合微生物制劑含有醋酸桿菌和乳酸桿菌，它們加速了煙葉的陳化速度，在煙葉陳化中產(chǎn)生小分子的醋酸、乳酸等酸香成分，增加卷煙陳化酸香和柔和細(xì)膩煙氣。同時(shí)，在煙葉的陳化過程中，微生物生長(zhǎng)消耗煙葉中的部分多糖、蛋白質(zhì)、脂肪等大分子物質(zhì)，改善卷煙吸味，降低卷煙刺激性，使卷煙的吸食口感變好。菌種保藏信息本發(fā)明的菌種植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum)PJH05CCTCC NO:M2012002和熱醋酸桿菌(Clostriolium themoacidophilus)PJH73CCTCC NO:M2012001，保藏在中國武漢武漢大學(xué)的中國典型培養(yǎng)物保藏中心。保藏日期是2012年I月5日。菌種植物乳桿菌的保藏號(hào)是CCTCC NO:M2012002，菌種熱醋酸桿菌的保藏號(hào)是CCTCC NO:M2012001。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式
作進(jìn)一步詳細(xì)的描述。實(shí)施例1[I]復(fù)合微生物制劑的制備(I)培養(yǎng)基制備:取煙葉20g，加入160g水，回流提取2小時(shí)后，冷卻、過濾，調(diào)節(jié)pH值為3，加入溶液質(zhì)量10%的葡萄糖，即為培養(yǎng)基；(2)植物乳桿菌活化:將從堆積的煙梗中篩選的植物乳桿菌CCTCC NO:M2012002加入到上述培養(yǎng)基中，在25°C下培養(yǎng)45小時(shí)，菌液以4000r/min離心lOmin，取上清液稀釋成活菌數(shù)不小于5.0X 109cfu/ml ；(3)熱醋酸桿菌活化:將從堆積的煙梗中篩選的熱醋酸桿菌CCTCC NO:M2012001加入到上述培養(yǎng)基中，在30°C下培養(yǎng)48小時(shí)，菌液以4000r/min離心lOmin，取上清液稀釋成活菌數(shù)不小于5.0X 109cfu/ml ；(4)復(fù)合微生物菌液配比:將發(fā)酵后的植物乳桿菌活化液和熱醋酸桿菌活化液按照質(zhì)量比為1: 0.5的比例進(jìn)行配比；(5)復(fù)合微生物制劑的制備:將配比好的復(fù)合微生物菌液冷凍干燥，制成制劑。[2]復(fù)合微生物制劑在煙用中的應(yīng)用(I)煙葉預(yù)處理:煙葉調(diào)節(jié)濕度為30%，并放置2小時(shí)。(2)復(fù)合微生物制劑菌懸液配置:按照制劑和無菌水質(zhì)量比為1: 100配成復(fù)合微生物制劑菌懸液。(3)煙葉陳化處理:將制備好的復(fù)合微生物制劑菌懸液用無菌噴霧器均勻噴淋煙葉，噴施量為IOml復(fù)合微生物制劑菌懸液/IOOg煙絲，在20°C下恒溫培養(yǎng)5天。經(jīng)本發(fā)明的復(fù)合微生物制劑陳化后的煙葉，經(jīng)測(cè)定，與陳化前煙葉相比較，其蛋白質(zhì)含量降低了 5.05%，多糖含量降低了 12.15%，pH值降至5.23 (未陳化煙葉的pH為6.0，以下同)。本實(shí)施例陳化后的卷煙經(jīng)評(píng)析評(píng)價(jià)，與未經(jīng)發(fā)酵處理的煙葉相比較，其煙氣更加柔和細(xì)膩，刺激性降低，口腔殘留降低，雜氣減少，香氣更加豐富，并略增加了卷煙特征陳化酸香。與自然陳化2年的煙葉相比，其煙氣狀態(tài)和口感相當(dāng)，香氣略有不足。實(shí)施例2[I]復(fù)合微生物制劑的制備(I)培養(yǎng)基制備:取煙葉20g，加入200g水，回流提取3小時(shí)后，冷卻、過濾，調(diào)節(jié)pH值為4，加入溶液質(zhì)量20%的葡萄糖。(2)植物乳桿菌活化:將從堆積的煙梗中篩選的植物乳桿菌CCTCC NO:M2012002加入到上述培養(yǎng)基中，在30°C下培養(yǎng)48小時(shí)，菌液以4000r/min離心lOmin，取上清液稀釋成活菌數(shù)不小于5.0X 109cfu/ml。(3)熱醋酸桿菌活化:將從堆積的煙梗中篩選的熱醋酸桿菌CCTCC NO:M2012001加入到上述培養(yǎng)基中，在30°C下培養(yǎng)48小時(shí)，菌液以4000r/min離心lOmin，取上清液稀釋成活菌數(shù)不小于5.0X 109cfu/ml。(4)復(fù)合微生物菌液配比:將發(fā)酵后的植物乳桿菌活化液和熱醋酸桿菌活化液按照質(zhì)量比為1: 2的比例進(jìn)行配比。(5)復(fù)合微生物制劑的制備:將配比好的復(fù)合微生物菌液冷凍干燥，制成制劑。[2]復(fù)合微生物制劑在煙用中的應(yīng)用(I)煙葉預(yù)處理:煙葉調(diào)節(jié)濕度為50%，并放置3小時(shí)。(2)復(fù)合微生物制劑菌懸液配置:按照制劑和無菌水質(zhì)量比為1: 100配成復(fù)合微生物制劑菌懸液。(3)煙葉陳化處理:將制備好的復(fù)合微生物制劑菌懸液用無菌噴霧器均勻噴淋煙葉，噴施量為IOml復(fù)合微生物制劑菌懸液/IOOg煙絲，在30°C下恒溫培養(yǎng)5天。經(jīng)本發(fā)明的復(fù)合微生物制劑陳化后的煙葉，經(jīng)測(cè)定，與陳化前煙葉相比較，其蛋白質(zhì)含量降低了 16.05%，多糖含量降低了 16.01%，pH降至4.53。本實(shí)施例陳化后的卷煙經(jīng)評(píng)析評(píng)價(jià)，與未經(jīng)發(fā)酵處理的煙葉相比較，其煙氣更加柔和細(xì)膩，刺激性降低，口腔殘留降低，雜氣減少，香氣更加豐富，并明顯增加了卷煙特征陳化酸香。與自然陳化2年的煙葉相比，其煙氣狀態(tài)和口感相當(dāng)，香氣更加豐富，并明顯烘托了卷煙特征陳化酸香。實(shí)施例3[I]復(fù)合微生物制劑的制備(I)培養(yǎng)基制備:取煙葉20g，加入240g水，回流提取3小時(shí)后，冷卻、過濾，調(diào)節(jié)pH值5，加入溶液質(zhì)量30%的葡萄糖。(2)植物乳桿菌活化:將從堆積的煙梗中篩選的植物乳桿菌CCTCC NO:M2012002加入到上述培養(yǎng)基中，在35°C下培養(yǎng)52小時(shí)，菌液以4000r/min離心lOmin，取上清液稀釋成活菌數(shù)不小于5.0X 109cfu/ml。(3)熱醋酸桿菌活化:將從堆積的煙梗中篩選的熱醋酸桿菌CCTCC NO:M2012001加入到上述培養(yǎng)基中，在30°C下培養(yǎng)48小時(shí)，菌液以4000r/min離心lOmin，取上清液稀釋成活菌數(shù)不小于5.0X 109cfu/ml。(4)復(fù)合微生物菌液配比:將發(fā)酵后的植物乳桿菌活化液和熱醋酸桿菌活化液按照質(zhì)量比為1: 2的比例進(jìn)行配比。(5)復(fù)合微生物制劑的制備:將配比好的復(fù)合微生物菌液冷凍干燥，制成制劑。[2]復(fù)合微生物制劑在煙用中的應(yīng)用方法(I)煙葉預(yù)處理:煙葉調(diào)節(jié)濕度為50%，并放置3小時(shí)。(2)復(fù)合微生物制劑菌懸液配置:按照制劑和無菌水質(zhì)量比為1: 100配成復(fù)合微生物制劑菌懸液。(3)煙葉陳化處理:將制備好的復(fù)合微生物制劑菌懸液用無菌噴霧器均勻噴淋煙葉，噴施量為IOml復(fù)合微生物制劑菌懸液/IOOg煙絲，在30°C下恒溫培養(yǎng)15天。經(jīng)本發(fā)明的復(fù)合微生物制劑陳化后的煙葉，經(jīng)測(cè)定，與陳化前煙葉相比較，其蛋白質(zhì)含量降低了 18.66%，多糖含量降低了 19.42%，pH值降至4.32。本實(shí)施例陳化后的卷煙經(jīng)評(píng)析評(píng)價(jià)，與未經(jīng)發(fā)酵處理的煙葉相比較，其刺激性降低，口腔殘留降低，雜氣減少，香氣更加豐富，并略增加了卷煙特征陳化酸香，但煙氣較粗。與自然陳化2年的煙葉相比，其香氣和口感相當(dāng)，但煙氣狀態(tài)略差。實(shí)施例4[I]復(fù)合微生物制劑的制備
(I)培養(yǎng)基制備:取煙葉20g，加入240g水，回流提取3小時(shí)后，冷卻、過濾，調(diào)節(jié)pH值6，加入溶液質(zhì)量30%的葡萄糖。(2)植物乳桿菌活化:將從堆積的煙梗中篩選的植物乳桿菌CCTCC NO:M2012002加入到上述培養(yǎng)基中，在30°C下培養(yǎng)52小時(shí)，菌液以4000r/min離心lOmin，取上清液稀釋成活菌數(shù)不小于5.0X 109cfu/ml。(3)熱醋酸桿菌活化:將從堆積的煙梗中篩選的熱醋酸桿菌CCTCC NO:M2012001加入到上述培養(yǎng)基中，在35°C下培養(yǎng)48小時(shí)，菌液以4000r/min離心lOmin，取上清液稀釋成活菌數(shù)不小于5.0X 109cfu/ml。(4)復(fù)合微生物菌液配比:將發(fā)酵后的植物乳桿菌活化液和熱醋酸桿菌活化液按照質(zhì)量比為1: 2的比例進(jìn)行配比。(5)復(fù)合微生物制劑的制備:將配比好的復(fù)合微生物菌液冷凍干燥，制成制劑。[2]復(fù)合微生物制劑在煙用中的應(yīng)用方法(I)煙葉預(yù)處理:煙葉調(diào)節(jié)濕度為60%，并放置3小時(shí)。(2)復(fù)合微生物制劑菌懸液配置:按照制劑和無菌水質(zhì)量比為1: 100配成復(fù)合微生物制劑菌懸液。(3)煙葉陳化處理:將制備好的復(fù)合微生物制劑菌懸液用無菌噴霧器均勻噴淋煙葉，噴施量為IOml復(fù)合微生物制劑菌懸液/IOOg煙絲，在40°C下恒溫培養(yǎng)15天。經(jīng)本發(fā)明的復(fù)合微生物制劑陳化后的煙葉，經(jīng)測(cè)定，與陳化前煙葉相比較，其蛋白質(zhì)含量降低了 18.36%，多糖含量降低了 23.14%，pH值降至4.21。本實(shí)施例陳化后的卷煙經(jīng)評(píng)析評(píng)價(jià)，與未經(jīng)發(fā)酵處理的煙葉相比較，其刺激性降低，香氣更加豐富，并略增加了卷煙特征陳化酸香，但口腔殘留和雜氣增加，煙氣較粗。與自然陳化2年的煙葉相比，其香氣更加豐富，并增加明顯的陳化酸香香韻，但煙氣狀態(tài)和口感稍差。實(shí)施例5[I]復(fù)合微生物制劑的制備(I)培養(yǎng)基制備:取煙葉20g，加入200g水，回流提取3小時(shí)后，冷卻、過濾，調(diào)節(jié)pH值7，加入溶液質(zhì)量20%的葡萄糖。(2)植物乳桿菌活化:將從堆積的煙梗中篩選的植物乳桿菌CCTCC NO:M2012002加入到上述培養(yǎng)基中，在30°C下培養(yǎng)50小時(shí)，菌液以4000r/min離心lOmin，取上清液稀釋成活菌數(shù)不小于5.0X 109cfu/ml。(3)熱醋酸桿菌活化:將從堆積的煙梗中篩選的熱醋酸桿菌CCTCC NO:M2012001加入到上述培養(yǎng)基中，在30°C下培養(yǎng)48小時(shí)，菌液以4000r/min離心lOmin，取上清液稀釋成活菌數(shù)不小于5.0X 109cfu/ml。(4)復(fù)合微生物菌液配比:將發(fā)酵后的植物乳桿菌活化液和熱醋酸桿菌活化液按照質(zhì)量比為1:1的比例進(jìn)行配比。(5)復(fù)合微生物制劑的制備:將配比好的復(fù)合微生物菌液冷凍干燥，制成制劑。[2]復(fù)合微生物制劑在煙用中的應(yīng)用方法(I)煙葉預(yù)處理:煙葉調(diào)節(jié)濕度為45%，并放置3小時(shí)。(2)復(fù)合微生物制劑菌懸液配置:按照制劑和無菌水質(zhì)量比為1: 100配成復(fù)合微生物制劑菌懸液。
(3)煙葉陳化處理:將制備好的復(fù)合微生物制劑菌懸液用無菌噴霧器均勻噴淋煙葉，噴施量為IOml復(fù)合微生物制劑菌懸液/IOOg煙絲，在28°C下恒溫培養(yǎng)15天。經(jīng)本發(fā)明的復(fù)合微生物制劑陳化后的煙葉，經(jīng)測(cè)定，與陳化前煙葉相比較，其蛋白質(zhì)含量降低了 10.10%，多糖含量降低了 19.82%，pH值降至4.31。本實(shí)施例陳化后的卷煙經(jīng)評(píng)析評(píng)價(jià)，與未經(jīng)發(fā)酵處理的煙葉相比較，其煙氣更加柔和細(xì)膩，刺激性降低，雜氣減少，香氣更加豐富，并賦予卷煙明顯特征陳化酸香。與自然陳化2年的煙葉相比，其煙氣更加柔和細(xì)膩，口腔甜潤(rùn)感更加明顯，香氣更加豐富，并且陳化酸香香韻更加明顯。
權(quán)利要求
1.一種加速煙葉陳化和提升煙葉品質(zhì)的復(fù)合微生物制劑，其特征在于:所述的復(fù)合微生物制劑中含有植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)PJH05CCTCCN0:M2012002和熱醋酸桿菌(Clostriolium themoacidophilus)PJH73CCTCC NO:M2012001。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種加速煙葉陳化和提升煙葉品質(zhì)的復(fù)合微生物制劑，其特征在于:所述復(fù)合微生物制劑由發(fā)酵后的植物乳桿菌CCTCC NO:M2012002的活化液和發(fā)酵后的熱醋酸桿菌CCTCC NO:M2012001的活化液按照質(zhì)量比為1: 0.5-2的比例進(jìn)行配比后，冷凍干燥，制成制劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種加速煙葉陳化和提升煙葉品質(zhì)的復(fù)合微生物制劑，其特征在于:所述的發(fā)酵后植物乳桿菌CCTCC NO:M2012002的活化液中含有活菌數(shù)不小于5.0X 109cfu/ml ;所述發(fā)酵后的熱醋酸桿菌CCTCC NO:M2012001的活化液中含有活菌數(shù)不小于 5.0X109cfu/ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種加速煙葉陳化和提升煙葉品質(zhì)的復(fù)合微生物制劑，其特征在于所述復(fù)合微生物制劑按以下步驟進(jìn)行制備: (1)、培養(yǎng)基制備:煙葉和水的質(zhì)量比為1: 8 12混合后進(jìn)行回流提取，提取2 4小時(shí)后，冷卻、過濾，調(diào)節(jié)PH值3-7，加入溶液質(zhì)量10-30%的葡萄糖，所得即為培養(yǎng)基； (2)、植物乳桿菌活化:將從堆積的煙梗中篩選的植物乳桿菌CCTCCNO:M2012002加入到上述培養(yǎng)基中，在25-35°C下培養(yǎng)45 52小時(shí)，離心分離，取上清液稀釋至活菌數(shù)不小于5.0X 109cfu/ml，所得為發(fā)酵后的植物乳桿菌活化液； (3)、熱醋酸桿菌活化:將從堆積的煙梗中篩選的熱醋酸桿菌CCTCCNO:M2012001加入到上述培養(yǎng)基中，在20-35°C下培養(yǎng)45 52小時(shí)，離心分離，取上清液稀釋至活菌數(shù)不小于5.0X 109cfu/ml，所得為發(fā)酵后的熱醋酸桿菌活化液； (4)、復(fù)合微生物菌液配比:將所述發(fā)酵后的植物乳桿菌活化液和所述發(fā)酵后的熱醋酸桿菌活化液按照質(zhì)量比為1: 0.5-2的比例進(jìn)行配比，得到復(fù)合微生物菌液； (5)、復(fù)合微生物制劑的制備:將所述的復(fù)合微生物菌液冷凍干燥，制成復(fù)合微生物制劑。
5.一種如權(quán)利要求1所述的一種加速煙葉陳化和提升煙葉品質(zhì)的復(fù)合微生物制劑在煙葉陳化中的應(yīng)用。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種加速煙葉陳化和提升煙葉品質(zhì)的復(fù)合微生物制劑在煙葉陳化中的應(yīng)用，其特征在于所述應(yīng)用按以下方法進(jìn)行: (1)、煙葉預(yù)處理:將煙葉濕度調(diào)節(jié)為30%-60%，放置2-3小時(shí)； (2)、復(fù)合微生物制劑菌懸液配置:按照復(fù)合微生物制劑和無菌水按質(zhì)量比為1: 100的比例配成復(fù)合微生物制劑菌懸液； (3)、煙葉陳化處理:將制備好的復(fù)合微生物制劑菌懸液用無菌噴霧器均勻噴淋在煙葉中，噴施量為IOml復(fù)合微生物制劑菌懸液/IOOg煙絲，噴施后煙葉在20-40°C下恒溫培養(yǎng)5-15 天。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種加速煙葉陳化和提升煙葉品質(zhì)的復(fù)合微生物制劑及其應(yīng)用，屬于微生物及其應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域。本復(fù)合微生物制劑中含有植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)PJH05CCTCC NOM2012002和熱醋酸桿菌(Clostriolium themoacidophilus)PJH73CCTCC NOM2012001。植物乳桿菌活化液和熱醋酸桿菌活化液質(zhì)量比為1∶0.5-2?；罨褐泻谢罹鷶?shù)不小于5.0×109cfu/ml。本發(fā)明的復(fù)合微生物制劑加速了煙葉的陳化速度，陳化中產(chǎn)生小分子的醋酸、乳酸等酸香成分，增加卷煙陳化酸香和柔和細(xì)膩煙氣。同時(shí)改善卷煙吸味，降低卷煙刺激性，使卷煙的吸食口感變好。
文檔編號(hào)A24B15/20GK103202533SQ20121000797
公開日2013年7月17日 申請(qǐng)日期2012年1月12日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月12日
發(fā)明者潘家華, 黃龍, 龐登紅 申請(qǐng)人:湖北中煙工業(yè)有限責(zé)任公司, 武漢市黃鶴樓科技園有限公司