一種果汁中26種有機酸和無機陰離子同時檢測的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種果汁中26種有機酸和無機陰離子同時檢測的方法其制作方法，通過對果汁進(jìn)行樣品前處理，利用多級梯度?抑制電導(dǎo)離子色譜法實現(xiàn)了果汁中18種有機酸(奎尼酸、乳酸、丙酸、甲酸、丁酸、丙酮酸、戊酸、乙酸、丙二酸、蘋果酸、檸檬酸、戊二酸、馬來酸、富馬酸、苯甲酸、順烏頭酸、反烏頭酸、草酸)和8種無機陰離子(F?、Cl?、NO3?、NO2?、ClO2?、BrO3?、PO43?、CrO42?)共計26種組分同時檢測分析的目標(biāo)，具有樣品前處理簡單、快速、準(zhǔn)確的技術(shù)優(yōu)點，解決了對果汁中多類項目多種組分準(zhǔn)確分析的技術(shù)難題，準(zhǔn)確測定果汁中的有機酸和無機陰離子，為果汁營養(yǎng)價值、保鮮狀態(tài)、是否摻假提供強有力的技術(shù)支持，對果汁成份檢測做出重要的貢獻(xiàn)。
【專利說明】
一種果汁中26種有機酸和無機陰離子同時檢測的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種化學(xué)領(lǐng)域的檢測方法，具體涉及一種果汁中26種有機酸和無機陰 離子同時檢測的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 有機酸，是具有酸性特征的一類有機化合物，廣泛存在于植物的果實、莖葉中。在 我們?nèi)粘Ｊ秤玫乃?、蔬菜、果汁等多種食品中有機酸含量的大小，會直接影響到食品口感 和風(fēng)味，有機酸可以表征產(chǎn)品的質(zhì)量好壞，辨別食品的新鮮程度。無機陰離子，是水果、蔬菜 及其制品中不可或缺的部分，某些陰離子含量過高會危害人體健康，甚至?xí)隗w內(nèi)累積轉(zhuǎn) 化為致癌物，可見無機陰離子測定的重要性同樣毋庸置疑。
[0003] 果汁、飲料中常見的有機酸和無機陰離子是其重要組成部分，無機陰離子均有限 量范圍，超標(biāo)時會損害身體，某些有機酸含量較少時，直接影響到液體食品的營養(yǎng)、口感。準(zhǔn) 確測定果汁中的有機酸和無機陰離子，可為果汁營養(yǎng)價值、保鮮狀態(tài)、是否摻假的判定提供 強有力的技術(shù)支持。
[0004] 目前，對于果汁中多種有機酸和無機陰離子含量同時測定的研究較少，也缺乏檢 測標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)。當(dāng)前，一種果汁中的監(jiān)測項目中就含有10多種有機酸和無機陰離子，需要分別 采用4-5種不同檢測標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行前處理和上機檢測分析，如有機酸(GB 5009.157-2003蘋果 酸、檸檬酸、丁二酸）、防腐劑(GB/T 23495-2009苯甲酸）、添加劑(GB 5009.33-2010硝酸鹽、 亞硝酸鹽）、無機陰離子(GB/T 5750.5-2006F-、Cl-、N〇3-)。采用不同的檢測標(biāo)準(zhǔn)、不同的前 處理方法、不同的檢測儀器(HPLC、1C)，會耗費大量人力物力，檢測工作效率低，不能滿足日 益增長的檢測需求，且目前資料庫中所能檢索到的僅僅是對某一類組分(單純有機酸或者 單純無機陰離子)進(jìn)行同時檢測，或者同時檢測的組分?jǐn)?shù)量較少(如僅對10多種組分同時分 析），無法滿足果汁基質(zhì)中多類組分多種離子的同時檢測的要求。因此，研究并建立一種適 用性強、選擇性好、靈敏度高的多種有機酸和無機陰離子同時檢測的方法，具有重要的現(xiàn)實 意義和應(yīng)用價值。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種靈敏準(zhǔn)確且快速簡便的檢測方 法，一次進(jìn)樣就可以實現(xiàn)對果汁中18種有機酸(奎尼酸、乳酸、丙酸、甲酸、丁酸、丙酮酸、戊 酸、乙酸、丙二酸、蘋果酸、檸檬酸、戊二酸、馬來酸、富馬酸、苯甲酸、順烏頭酸、反烏頭酸、草 酸)和8種無機陰離子(F-、Cl-、N〇3-、N〇2-、Cl〇2-、Br0 3-、P〇43-、Cr〇42-)共計26種組分進(jìn)行同時 檢測分析。
[0006] 為達(dá)到上述目的，本發(fā)明公開了一種果汁中26種有機酸和無機陰離子同時檢測的 方法，采用多級梯度淋洗-抑制電導(dǎo)離子色譜法同時測定果汁中26種有機酸和無機陰離子。 其具體步驟如下：
[0007] 步驟一、標(biāo)準(zhǔn)儲備液的配置:無機陰離子均為購自國家標(biāo)物中心的F'Cl'NOf、 NO：T、ClOf、Br03' P〇43_、Cr〇42_的標(biāo)準(zhǔn)溶液，離子濃度均為lOOOmg/L，有機酸均為購買的優(yōu)級 純的奎尼酸、乳酸、丙酸、甲酸、丁酸、丙酮酸、戊酸、乙酸、丙二酸、蘋果酸、檸檬酸、戊二酸、 馬來酸、富馬酸、苯甲酸、順烏頭酸、反烏頭酸、草酸的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用時根據(jù)需稱取標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 用超純水配成標(biāo)準(zhǔn)儲備液和標(biāo)準(zhǔn)工作液；
[0008] 步驟二、待測樣品前處理:檢測前采用濃度為4. Omol/L的K0H溶液，調(diào)節(jié)pH值至中 性，取10mL樣品放入50mL離心管中，在10000r/min條件下高速離心15min，稱取上清液樣品 1. 〇〇g，用超純水定容至l〇〇mL容量瓶中，搖勻、靜置lOmin，取10.0 mL溶液，過0.22mi水相濾 膜，棄去前面3mL，收集后面清液，等待檢測；
[0009] 步驟三、離子色譜條件：
[0010] 離子色譜儀:DI0NEX ICS-2100;
[0011]色譜柱：I〇nPac AS11-HC型分離柱（250mmX4mm)，IonPac AG11-HC型保護(hù)柱（50mm X4mm)；
[0012] 超純水儀:美國Millipore;
[0013 ]流動相:K0H梯度淋洗液；
[0014] 實驗用水:超純水（電阻率18.2MQ .cm);
[0015] 流速：1 .OOmL/min;
[0016] 抑制器再生模式:外加水電導(dǎo)抑制，電導(dǎo)檢測器檢測；
[0017] 柱溫：30 r;
[0018] 進(jìn)樣量:50yL;
[0019] 優(yōu)選的所述流速為1 .OmL/min，所述柱溫為30°C。
[0020]步驟四、多級梯度淋洗程序為:經(jīng)大量實驗研究發(fā)現(xiàn)，理想多級梯度淋洗條件為： 0-8min時，淋洗液K0H濃度為 1.25mmol; 8-18min，淋洗液K0H濃度為 1.25-15 . Ommol; 18-29min，淋洗液K0H濃度為15 ? 0-28 ? Ommol; 29-40min，淋洗液K0H濃度為28 ? 0-70 ? Ommol;40-41min，淋洗液K0H濃度為70.0-1.25mmol; 41_48min，淋洗液K0H濃度為 1.25mmol;詳見表 1。 [0021 ]表1離子色譜多級梯度淋洗條件
[0023]步驟五、將步驟一中所得標(biāo)準(zhǔn)儲備液和標(biāo)準(zhǔn)工作液液按照步驟三中離子色譜條件 和步驟四中多級梯度淋洗程序進(jìn)行上機檢測，并計算結(jié)果，根據(jù)保留時間定性，峰面積外標(biāo) 法定量；
[0024]步驟六、將步驟二中所得后面清液按照步驟三中離子色譜條件和步驟四中多級梯 度淋洗程序進(jìn)行上機檢測，并計算結(jié)果；
[0025] 步驟七、結(jié)果對比：通過步驟五標(biāo)準(zhǔn)溶液所測得的結(jié)果來校正步驟六所得計算結(jié) 果，從而得出所測果汁中各組分含量。
[0026] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：
[0027] A.對于果汁中有機酸和無機陰離子兩類組分多種物質(zhì)同時檢測，一直是本技術(shù)領(lǐng) 域的技術(shù)難題，本發(fā)明對果汁中26種成份同時分析，提高了檢測效率，顯著降低了檢測成 本。
[0028] B.本發(fā)明同時分析果汁中26種成份技術(shù)難點主要在于，如何通過實驗確定最佳的 梯度淋洗程序等分析條件，單就剃度淋洗程序來講，待分析待檢測的成分越多，則對梯度淋 洗程序的要求越高，需要在一個合理的分析時間內(nèi)將某些保留特性非常相近的組分準(zhǔn)確分 離(比如一些弱保留的有機酸），不同的梯度淋洗程序的優(yōu)化選擇決定了 26種成分是否能夠 不受干擾的達(dá)到基線分離，這樣才能進(jìn)行準(zhǔn)確地定量。本發(fā)明通過30多次的實驗分析和改 進(jìn)，探索出了一種多級梯度淋洗條件，可以實現(xiàn)26種有機酸和無機陰離子有效分離和同時 測定;實驗證實，梯度條件的小改動，就可能造成組分之間重疊或出峰順序改變，而本梯度 淋洗實驗條件的選取有效提高了檢測靈敏度和準(zhǔn)確性。
[0029] C.實際操作中前處理操作步驟簡單，經(jīng)過高速離心和濾膜過濾，可有效去除果粒 及其他雜質(zhì)，基質(zhì)干擾組分少，檢測靈敏度高。
[0030] D.探索出了 pH值對26種有機酸和無機陰離子同時檢測的影響，通過調(diào)節(jié)檢測溶液 的pH值，大大提高了檢測準(zhǔn)確性。經(jīng)過對標(biāo)準(zhǔn)溶液和添加樣品的pH值考察發(fā)現(xiàn)，在檢測之前 調(diào)節(jié)pH值，有機酸和無機陰離子能夠保持穩(wěn)定，線性相關(guān)性大大提高，在0.02mg/L-10mg/L 線性范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)由調(diào)節(jié)pH值前的均大于0.98提高到了均大于0.995。通過調(diào)節(jié)pH值來 提高無機陰離子和有機酸同時檢測的靈敏度，是本發(fā)明方法的又一重要創(chuàng)新。
[0031] E.檢測靈敏度高，其中25種組分檢出限在0.00017-0.0144mg/L之間；添加回收率 檢測濃度水平更低，以前的研究報道僅是對l-l〇mg/L水平上做添加回收，而本實驗對0.1-2.Omg/L范圍內(nèi)五個更低濃度水平上做了添加回收，而且采用的是不同果汁基質(zhì)，使用"三 基質(zhì)五濃度六平行"方式充分驗證了方法的適應(yīng)性和準(zhǔn)確性，回收率檢測結(jié)果符合食品理 化檢測的要求。
[0032]綜上所述，本發(fā)明提供了優(yōu)化的梯度淋洗程序和離子色譜測試條件，確定了利用 離子色譜同時檢測果汁中26種無機陰離子和有機酸的方法，一次進(jìn)樣對果汁中的無機陰離 子F-、Cl-、N〇3-、N02-、C10 2-、Br03-、P〇43-、Cr〇42-以及有機酸如奎尼酸、乳酸、丙酸、甲酸、丁酸、 丙酮酸、戊酸、乙酸、丙二酸、蘋果酸、檸檬酸、戊二酸、馬來酸、富馬酸、苯甲酸、順烏頭酸、反 烏頭酸、草酸等進(jìn)行同時測定，具有樣品前處理簡單、快速、準(zhǔn)確，并能在50分鐘內(nèi)同時測定 果汁中26種無機陰離子和有機酸等的優(yōu)點，解決了對果汁中多類項目多種組分準(zhǔn)確分析的 技術(shù)難題，準(zhǔn)確測定果汁中的有機酸和無機陰離子，為果汁營養(yǎng)價值、保鮮狀態(tài)、是否摻假 提供強有力的技術(shù)支持，對果汁成份檢測做出重要的貢獻(xiàn)。
【附圖說明】
[0033]圖1為26種組分標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜分離圖。
[0034]圖2為蘋果汁、葡萄汁、橙汁添加色譜疊加圖。
[0035]圖3為C102-在調(diào)節(jié)pH值前線性圖譜。
[0036] 圖4為C102-在調(diào)節(jié)pH值后線性圖譜。
[0037] 圖5為六種果汁中有機酸和無機陰離子檢測色譜圖。
【具體實施方式】
[0038]下面結(jié)合附圖和具體實施例進(jìn)一步詳細(xì)說明本發(fā)明。
[0039] 實施例一
[0040] 色譜條件的確定
[0041] 1、色譜柱的選擇:先后考察了 4311^311-11(：^319三種色譜柱的實驗分離效果，發(fā) 現(xiàn)同等條件下，采用AS11-HC色譜柱時峰型最尖銳，綜合分離效果最好。這是因為AS11-HC是 高柱容量色譜柱，對有機酸和無機陰離子具有很好的保留作用，非常適合多組分同時檢測。 因此，選擇AS11-HC色譜柱進(jìn)行實驗測定。
[0042] 2、流速的選擇：先后考察了0 ? 5mL/min、1 .OmL/min、1 ? 5mL/min、2 .OmL/min 的流速 條件下的實驗分離情況，〇 . 5mL/min時色譜分離效果較1. OmL/min時降低，雖然分離度較 1. OmL/min時稍大，但是總出峰時間變長，而且流速降低，保留時間增大，峰高也會隨之變 矮，峰靈敏度就會下降。而在1.5mL/min和2. OmL/min流速條件下，總出峰時間減小，但是很 多組分色譜峰的分離度降低，無法有效分離。因此，經(jīng)過數(shù)次反復(fù)實驗探索，綜合考慮提高 分離效果和縮短檢測時間的因素，選擇在1.OmL/min條件下，進(jìn)行色譜分離實驗。
[0043] 3、初始淋洗濃度的選擇:26種組分同時檢測時，整個色譜梯度分離過程被分成了4 段(〇-8111；[11、8-18111；[11、18-28111；[11、28-40111；[11)，通過多次改進(jìn)梯度實驗發(fā)現(xiàn)，初始濃度對整體 分離效果影響最大，它是整個多級梯度淋洗條件中的基石。先后考察了 1. OmL/min、1.25mL/ min、1.5mL/min、2. OmL/min初始濃度條件下的實驗分離情況，發(fā)現(xiàn)初始濃度為1.25mL/min 時，前10種出峰組分的分離效果最佳，在此實驗條件下，再優(yōu)化改進(jìn)后面3段梯度淋洗條件， 可有效地提高17min后出峰的16種組分的整體分離效果和檢測靈敏度。因此，選擇1.25mL/ min濃度為初始淋洗濃度。
[0044] 4、溶液pH值對檢測的影響：當(dāng)酸性較大時，特別是當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)儲備液和標(biāo)準(zhǔn)工作液濃 度大于5. Omg/L時，溶液中弱酸離子(ClOf和NO：T)容易與高濃度的H+結(jié)合生成分子狀態(tài)或析 出氣體分子。另外，P〇43lPCr〇4 2_也易受pH值影響，轉(zhuǎn)化為其他離子態(tài)物質(zhì)。實驗測定分析發(fā) 現(xiàn)，以上4種無機離子在中性或者弱堿性溶液中穩(wěn)定性比酸性溶液中明顯提高，例如5. Omg/ L的標(biāo)準(zhǔn)工作液中ClOf和NOf，未調(diào)節(jié)pH值時的檢測含量僅為調(diào)節(jié)pH值后檢測含量的80 % 左右，說明書附圖中圖3和圖4分別是CKV在調(diào)節(jié)pH值前和調(diào)節(jié)pH值后線性圖譜，顯然調(diào)節(jié) pH值后線性得到實質(zhì)的改進(jìn)，同樣其他有機酸和無機陰離子在調(diào)節(jié)pH值后，線性也得到了 不同程度的改進(jìn)。
[0045] 經(jīng)過實驗分析得出，在配置標(biāo)準(zhǔn)工作液，首先加入有機酸，然后加入一定體積的 K0H溶液來調(diào)節(jié)pH值(中性或弱堿性），最后再加入無機陰離子溶液，這樣可避免有機酸中大 量H+對無機陰離子的影響。樣品檢測前，同樣將pH值調(diào)至中性或弱堿性。通過調(diào)節(jié)pH值來提 高無機陰離子和有機酸同時檢測的靈敏度，是本發(fā)明方法的又一重要創(chuàng)新。
[0046] 實施例二
[0047]測定方法的準(zhǔn)確性 [0048] 1、檢出限及校準(zhǔn)曲線
[0049] 分別配制不同濃度的18種有機酸和8種無機陰離子標(biāo)準(zhǔn)工作液，上機檢測，得出26 種組分標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜分離圖，詳見說明書附圖中圖1。通過色譜峰信噪比來計算待測組分的 檢出限（S/N=3)。在0.02mg/L到10.0mg/L濃度范圍內(nèi)，進(jìn)行了 9個不同濃度點（0.02、0.04、 0.10、0.20、0.50、1.0、2.0、5.0、10.0 mg/L)標(biāo)準(zhǔn)工作液的檢測及線性擬合，相關(guān)系數(shù)均大于 0.995,說明在該實驗條件下，多組分同時檢測時線性良好。具體見表2,其中Y為峰面積(y S.min)，X為組分質(zhì)量濃度(mg/L)。
[0050] 表2線性方程、相關(guān)系數(shù)及檢出限
[0051]
[0052]
[0053] 從表2中，可以看出25種組分檢出限在0.00017-0.0144mg/L之間，只有苯甲酸檢出 限為〇.〇52mg/L。與有機酸相比，8種無機陰離子比較穩(wěn)定，檢出濃度較低，Cr檢出限最低達(dá) 到了 1.7Xl(T4mg/L。從相關(guān)系數(shù)來看，僅有F、丁酸、丙二酸三種組分線性系數(shù)低于0.999， 其他23種組分相關(guān)系數(shù)均大于0.999。
[0054] 2、分析方法驗證
[0055]采用檢測回收率的方法對本發(fā)明所述的一種果汁中26種有機酸和無機陰離子同 時檢測的方法進(jìn)行適應(yīng)性和準(zhǔn)確性的驗證。
[0056]分別選取三種果汁飲料(蘋果汁、葡萄汁、橙汁），依次在進(jìn)行5個添加濃度水平實 驗0 ? lmg/L (蘋果汁）、0 ? 2mg/L (葡萄汁 1)、0 ? 5mg/L (橙汁 1)、1 ? Omg/L(葡萄汁2)、2 ? Omg/L (橙 汁2)，每個濃度水平進(jìn)行6次平行測定實驗，來充分驗證方法的回收率和適應(yīng)性，根據(jù)添加 前樣品濃度、添加濃度和添加后測定濃度計算回收率。
[0057]回收率計算式為：回收率=(添加后測定濃度-樣品濃度)/添加濃度*100%。
[0058]具體回收實驗數(shù)據(jù)(如0.2mg/L)細(xì)分表見表3,三種基質(zhì)、五個濃度水平、六次平行 檢測回收率統(tǒng)計總表見表4,檢測色譜圖詳見說明書附圖中圖2。
[0059] 表3回收率測定數(shù)據(jù)細(xì)分表(添加濃度0.2mg/L，基質(zhì)葡萄汁1)
[0060]

[0062] 表4回收率測定數(shù)據(jù)統(tǒng)計總表(三種果汁添加濃度0. lmg/L-2.0mg/L)
[0065] 通過表4可以看出，在O.lmg/L添加濃度水平時，雖然苯甲酸和順烏頭酸回收率為 62.23 %和64.27 %，但是依然滿足食品理化檢驗要求(測定含量小于0. lmg/L，回收率應(yīng)在 60 % -120 % )。其他組分回收率均高于80 %，這說明在低于0. lmg/L添加濃度水平時，這兩種 組分不夠穩(wěn)定，為了提高檢測準(zhǔn)確性，苯甲酸和順烏頭酸測定時應(yīng)該通過改變稀釋倍數(shù)等 方法，使定量濃度高于〇.2mg/L(回收率大于80%)。總體來說，三種基質(zhì)、五個濃度水平、六 次平行檢測回收率數(shù)據(jù)準(zhǔn)確、可靠，符合食品理化檢測要求。
[0066] 3、重復(fù)性
[0067] 配置0.2mg/L濃度水平標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)行6次平行進(jìn)樣檢測，根據(jù)計算6次平行實驗結(jié) 果(檢測含量和保留時間）的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD，另外，對添加了0.2mg/L的果汁溶液進(jìn)行6次 重復(fù)前處理實驗，并上機檢測，所得出實驗數(shù)據(jù)符合GB/T 27404-2008附錄F中對精密度的 要求。
[0068] 表5重復(fù)性實驗數(shù)據(jù)分析表(檢測含量單位為:mg/L)
[0071 ]從表5中可以看出，在0.2mg/L濃度時，6次平行測定，檢測含量相對標(biāo)準(zhǔn)偏差最大 為3.57 %，最小僅為0.48 % ;保留時間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差僅為0.01 % -0.11 %，這充分說明該實 驗梯度條件下，檢測方法非常穩(wěn)定可靠。
[0072]另外對添加0.2mg/L濃度的果汁進(jìn)行6次平行檢測，具體數(shù)據(jù)見表3,通過分析發(fā)現(xiàn) 26種組分檢測含量相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.30%-7.65 %之間，重復(fù)性實驗數(shù)據(jù)同樣符合食品理 化檢驗的要求。
[0073] 實施例三 [0074]實際樣品測定
[0075]選取了 6種常見果汁飲料(蘋果汁、葡萄汁、橙汁、桃汁、梨汁、混合果汁），進(jìn)行了實 際樣品中有機酸和無機陰離子含量的檢測。
[0076] 檢測前采用濃度為4. Omol/L的K0H溶液，調(diào)節(jié)pH值至中性(6.5-8.0)，取10mL樣品 放入50mL離心管中，在10000r/min條件下高速離心15min，稱取上清液樣品1.00g，用超純水 定容至100mL容量瓶中。搖勻、靜置10min，取10.0 mL溶液，過0.22wii水相濾膜，棄去前面3mL， 收集后面清液，等待檢測。
[0077] 將所得后面清液按照離子色譜條件和多級梯度淋洗程序進(jìn)行上機檢測，并計算結(jié) 果。
[0078] 具體檢測數(shù)據(jù)詳見表6和說明書附圖中圖5。
[0079]表6六種果汁樣品中有機酸和無機陰離子測定含量 [0080]

[0082]從表6和說明書附圖圖5中，可以看出果汁中主要的有機酸是檸檬酸、草酸、蘋果 酸、乳酸、乙酸、甲酸等；主要的無機離子是P〇43'N03'Cr。從果汁種類看，橙汁中有機酸種 類和含量最豐富，其次是蘋果汁。其中有毒有害離子均未檢出，這說明這 6種果汁在生產(chǎn)加工過程中，對水果原料和使用水質(zhì)控制較好。從實際樣品測定結(jié)果來看， 該檢測方法簡單、快速、準(zhǔn)確、實用。
【主權(quán)項】
1. 一種果汁中26種有機酸和無機陰離子同時檢測的方法，其特征在于包括以下步驟： 步驟一、標(biāo)準(zhǔn)儲備液的配置：無機陰離子均為購自國家標(biāo)物中心的F'Cl'NOs'NOr、 CKV、Br03'P〇43_、Cr〇42_的標(biāo)準(zhǔn)溶液，離子濃度均為1000mg/L，有機酸均為購買的優(yōu)級純級 別的奎尼酸、乳酸、丙酸、甲酸、丁酸、丙酮酸、戊酸、乙酸、丙二酸、蘋果酸、檸檬酸、戊二酸、 馬來酸、富馬酸、苯甲酸、順烏頭酸、反烏頭酸、草酸的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用時根據(jù)需要稱取標(biāo)準(zhǔn)物 質(zhì)用超純水配成標(biāo)準(zhǔn)儲備液和標(biāo)準(zhǔn)工作液； 步驟二、待測樣品前處理:檢測前采用濃度為4. Omol/L的K0H溶液，調(diào)節(jié)pH值至中性，取 10mL樣品放入50mL離心管中，在10000r/min條件下高速離心15min，稱取上清液樣品1.00g， 用超純水定容至l〇〇mL容量瓶中，搖勻、靜置lOmin，取10.0 mL溶液，過0.22μπι水相濾膜，棄去 前面3mL，收集后面清液，等待檢測； 步驟三、離子色譜條件： 離子色譜儀:DIONEX ICS-2100; 色譜柱：1〇11?&〇八311-!1(]型分離柱（25〇1]1111\41]1111)，1〇11?&〇八611-!1(]型保護(hù)柱（5〇1]1111\ 4mm)； 超純水儀:美國Millipore; 流動相:K0H梯度淋洗液； 實驗用水:超純水（電阻率18.2ΜΩ .cm); 流速：1. OOmL/min； 抑制器再生模式:外加水電導(dǎo)抑制，電導(dǎo)檢測器檢測； 柱溫：30°C; 進(jìn)樣量:50yL; 步驟四、多級梯度淋洗程序為:〇_8min時，淋洗液K0H濃度為1.25mmol; 8-18min，淋洗液 K0H濃度為1 · 25-15 · Ommol; 18-29min，淋洗液K0H濃度為 15 · 0-28 · Ommol; 29-40min，淋洗液 K0H濃度為28 · 0-70 · Ommol; 40-41min，淋洗液K0H濃度為70 · 0-1 · 25mmol; 41-48min，淋洗液 K0H 濃度為 1.25mmol; 步驟五、標(biāo)準(zhǔn)溶液檢測：將步驟一中所得標(biāo)準(zhǔn)儲備液和標(biāo)準(zhǔn)工作液按照步驟三中離子 色譜條件和步驟四中多級梯度淋洗程序進(jìn)行上機檢測，并計算結(jié)果； 步驟六、樣品檢測：將步驟二中所得后面清液按照步驟三中離子色譜條件和步驟四中 多級梯度淋洗程序進(jìn)行上機檢測，并計算結(jié)果； 步驟七、結(jié)果對比:通過步驟五標(biāo)準(zhǔn)溶液所測得的結(jié)果來校正步驟六所得計算結(jié)果，從 而得出所測果汁中各組分含量。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的果汁中26種有機酸和無機陰離子同時檢測的方法，其特征在 于，所述步驟二中調(diào)節(jié)pH值至6.5-8.0。
【文檔編號】G01N30/02GK106053627SQ201610320941
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年5月12日
【發(fā)明人】宋衛(wèi)得, 袁曉鷹, 高堯華, 蘇征, 惠希東, 呂寧, 劉冰, 王霞
【申請人】中華人民共和國日照出入境檢驗檢疫局