一種測定l900洗滌液殘留量的檢測方法
【專利說明】
[0001]
技術(shù)領(lǐng)域
[0002] 本發(fā)明涉及化學(xué)成分檢測技術(shù)領(lǐng)域，特別是用于制藥、醫(yī)學(xué)研宄、學(xué)校、生物技術(shù) 和其他機(jī)構(gòu)的塑料實(shí)驗(yàn)器具和玻璃器具清洗中測定L900洗滌液殘留量的檢測方法。
[0003]
【背景技術(shù)】
[0004] L900液體洗滌劑是Nalgene生產(chǎn)的，專門用于制藥、醫(yī)學(xué)研宄、學(xué)校、生物技術(shù)以 及其它機(jī)構(gòu)的塑料器具清潔的液體洗滌液。該洗滌液適用于所有塑料制品，尤其是聚碳酸 酯制品，不會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)裂紋、應(yīng)力裂紋或污點(diǎn)。Nalgene公司是目前全美國最大的實(shí)驗(yàn)室及 醫(yī)藥容器生產(chǎn)供應(yīng)商之一，該公司生產(chǎn)的醫(yī)用產(chǎn)品因牢固，衛(wèi)生，易用性好而深受美國、中 國等廣大醫(yī)藥企業(yè)的歡迎。鑒于塑料器具在醫(yī)藥企業(yè)中的廣泛應(yīng)用，其清洗的質(zhì)量控制也 成為了醫(yī)藥企業(yè)所關(guān)注的對象。L900液體洗滌液對塑料器具有極好的洗滌效果，但是由于 該洗滌液在洗滌過程中可能作為外源物質(zhì)殘留在塑料器具中，對藥品質(zhì)量及安全性可能產(chǎn) 生一定的影響。因此，有必要對L900洗滌液在塑料器具中的殘留量進(jìn)行檢測，從而降低藥 品生產(chǎn)中外源性物質(zhì)污染的風(fēng)險(xiǎn)，提高藥品質(zhì)量。
[0005]L900液體洗滌液主要由辛烷基硫酸鈉、辛烷基磺酸鈉、檸檬酸鈉、氯化鈉，其中辛 烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉有一定的毒副作用。因此，L900液體洗滌液殘留量的檢測主要 針對辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉殘留量的檢測。辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉作為陰離 子表面活性劑，常用亞甲藍(lán)分光光度法（GB7494-87)進(jìn)行測定，但是現(xiàn)有方法測定靈敏度 較低，且容易受到其他化學(xué)物質(zhì)的干擾，使其無法滿足藥品質(zhì)量控制的要求。因此需建立一 種檢測方法，有利于快速簡便地開展器具清洗驗(yàn)證，以及日常清洗效果的監(jiān)控。
[0006]

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的是在亞甲藍(lán)分光光度法的基礎(chǔ)上結(jié)合陰離子交換柱和反相高效液 相色譜法，提供一種操作簡單、靈敏度高、準(zhǔn)確度和特異性好的L900洗滌液殘留量的檢測 方法，并很好地滿足實(shí)際檢測中的需要。
[0008] 本發(fā)明建立在亞甲藍(lán)分光光度法的基礎(chǔ)上結(jié)合陰離子交換柱和反相高效液相色 譜來定量分析塑料、玻璃器具中L900洗滌液殘留量，通過簡單高效的步驟，實(shí)現(xiàn)塑料、玻璃 器具清洗液中辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉的富集濃縮，提高檢測的靈敏度，并采用反相 高效液相色譜有效分離出與亞甲藍(lán)結(jié)合的辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉，以去除其他物質(zhì) 對檢測的干擾，有效地確保方法的特異性。本方法對辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉的檢出 限為2ng/mL，有效地確保檢測數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確度，有利于在極低濃度下L900洗滌液的樣品檢 測。
[0009] 本發(fā)明一種測定L900洗滌液殘留量的檢測方法，通過下列技術(shù)方案完成， 具體步驟如下： 1、安捷倫PlexaPAX陰離子交換柱富集樣品 樣品預(yù)處理：采集樣品1000毫升，加入15-20毫升氨水混勻；用蠕動(dòng)泵將預(yù)處理的樣 品通過活化的安捷倫PlexaPAX陰離子交換柱；用2-4毫升水清洗交換柱，再用2-4毫升乙 醇清洗交換柱；用〇. 5毫升含有5%甲酸的乙醇溶液洗脫交換柱，得到富集的陰離子樣品，用 氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸堿度到7. 5-8. 0。
[0010] 2、亞甲藍(lán)染色樣品并萃取 取5毫升亞甲藍(lán)溶液，加入富集的陰離子樣品中，充分混勻后，先用1毫升氯仿萃取，用 離心機(jī)離心分層，吸走氯仿層，再次加入1毫升氯仿萃取，用離心機(jī)離心分層，將兩次萃取 所得氯仿層液體合并即為待測樣品。
[0011] 3、反相高效液相色譜法檢測 色譜柱為ZoRBAXSB-C18, 5微米，4. 6X150毫米；流動(dòng)相為含0. 1%三氟乙酸的45%甲 醇水溶液；洗脫程序?yàn)閺末柕?0分鐘；流速〇. 8毫升/分鐘；柱溫35°C，檢測波長為294納 米；進(jìn)樣量為20微升。
[0012] 4、按外標(biāo)法以峰面積法計(jì)算L900洗滌液殘留量的濃度。
[0013] 本發(fā)明的檢測方法，通過辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉來確定塑料、玻璃器具中 L900洗滌液的殘留量。
[0014] 本發(fā)明的檢測方法，用亞甲藍(lán)溶液配方為一水磷酸二氫鈉50克、濃硫酸6. 8毫升、 亞甲藍(lán)100-200毫克，加水定容至1000毫升。
[0015] 本發(fā)明的檢測方法，通過離心機(jī)離心分層條件為4000-5000轉(zhuǎn)/分鐘來實(shí)現(xiàn)氯仿 萃取分層。
[0016] 步驟1中，所述安捷倫PlexaPAX陰離子交換柱為市售。
[0017] 步驟2中，所述離心機(jī)離心分層條件為4000-5000轉(zhuǎn)/分鐘。
[0018] 本發(fā)明檢測方法操作簡單、靈敏度高、準(zhǔn)確度和特異性好，并能很好地滿足實(shí)際檢 測中的需要。本發(fā)明建立在亞甲藍(lán)分光光度法的基礎(chǔ)上結(jié)合陰離子交換柱和反相高效液相 色譜來定量分析塑料制藥器具中L900洗滌液殘留量，通過簡單高效的步驟，實(shí)現(xiàn)塑料制品 清洗液中辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉的富集濃縮，提高了檢測的靈敏度，并采用反相高 效液相色譜有效分離出與亞甲藍(lán)結(jié)合的辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉，以去除其他物質(zhì)對 檢測的干擾，有效地確保方法的特異性。最終對辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉的檢出限為 2ng/mL，有效地確保檢測數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確度，有利于L900洗滌液在極低濃度下的樣品檢測。
[0019]
【附圖說明】
[0020] 圖1為系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液回歸曲線。
[0021] 圖2為辛烷基硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品液相色譜圖。
[0022] 圖3為辛烷基磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品液相色譜圖。
[0023] 圖4為L900洗滌液液相色譜圖。
[0024]
【具體實(shí)施方式】
[0025] 以下實(shí)施例用來解釋說明本發(fā)明，而不是對本發(fā)明進(jìn)行限制，在本發(fā)明的 精神和權(quán)利要求的保護(hù)范圍內(nèi)，對本發(fā)明作出的任何修改和改變，都落入本發(fā)明的保 護(hù)范圍。
[0026] 實(shí)施例1塑料制藥器具中的L900洗滌劑殘留量檢測 1安捷倫PlexaPAX陰離子交換柱富集樣品 (1) 用超純水配制L900洗滌劑的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液，以辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉 含量為單位，配制濃度如下〇、2ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、100ng/ml、1000ng/ml，每個(gè)稀釋濃 度配制1000毫升； (2) 將分別在每個(gè)稀釋濃度標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣品中加入15毫升氨水混勻進(jìn)行預(yù)處理； (3) 取安捷倫PlexaPAX陰離子交換柱先用2毫升乙醇洗脫，再用2毫升超純水洗脫； 然后用蠕動(dòng)泵將預(yù)處理的樣品通過活化的安捷倫PlexaPAX陰離子交換柱，每個(gè)樣品單獨(dú) 用一個(gè)PlexaPAX陰離子交換柱； (4) 用3毫升水清洗交換柱，再用3毫升乙醇清洗交換柱； (5) 用0.5毫升含有5%甲酸的乙醇溶液洗脫交換柱，得到富集的陰離子樣品，用氫氧化 鈉調(diào)節(jié)酸堿度到7. 8。
[0027] 2亞甲藍(lán)染色樣品并萃取 取5毫升亞甲藍(lán)溶液，加入富集的陰離子樣品中，充分混勻后，先用1毫升氯仿萃取，用 離心機(jī)4500轉(zhuǎn)/分鐘離心分層，吸走氯仿層，再次加入1毫升氯仿萃，用離心機(jī)4500轉(zhuǎn)/ 分鐘離心分層，將兩次萃取所得氯仿層液體合并即為待測樣品。
[0028] 3反相高效液相色譜法檢測 (1)打開高效液相色譜儀，設(shè)置色譜條件：色譜柱為ZoRBAXSB-C18, 5um，4. 6X150mm;流動(dòng)相為含〇. 1%三氟乙酸的45%甲醇水溶液；洗脫程序?yàn)閺?到10min;流速0. 8ml/min; 柱溫35°C，檢測波長為294nm;進(jìn)樣量為20ul。
[0029] (2)用流動(dòng)相平衡色譜柱，待基線平穩(wěn)后，進(jìn)樣20ul開始檢測。
[0030] (3)待檢測結(jié)束后，對峰面積進(jìn)行積分。見表1。
[0031] 4按外標(biāo)法以峰面積法計(jì)算L900洗滌液殘留量的濃度 (1)以L900洗滌劑標(biāo)準(zhǔn)品中辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉濃度為縱坐標(biāo)，峰面積為橫 坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，所得線性回歸方程為：y= 〇. 3773x- 0. 1255。見圖1。
[0032] (2)將待測樣品的峰面積代入線性回歸方程，計(jì)算得到待測樣品中辛烷基硫酸鈉 和辛烷基磺酸鈉的濃度。見表2。
[0033] 表1各標(biāo)準(zhǔn)溶液峰信息
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種測定L900洗滌液殘留量的檢測方法，其特征在于具有如下步驟： (1)安捷倫Plexa PAX陰離子交換柱富集樣品 樣品預(yù)處理：采集樣品1000毫升，加入15-20毫升氨水混勻；用蠕動(dòng)泵將預(yù)處理的樣 品通過活化的安捷倫Plexa PAX陰離子交換柱；用2-4毫升水清洗交換柱，再用2-4毫升乙 醇清洗交換柱；用〇. 5毫升含有5%甲酸的乙醇溶液洗脫交換柱，得到富集的陰離子樣品，用 氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸堿度到7. 5-8. 0 ; (2) 亞甲藍(lán)染色樣品并萃取 取5毫升亞甲藍(lán)溶液，加入富集的陰離子樣品中，充分混勻后，先用1毫升氯仿萃取，用 離心機(jī)離心分層，吸走氯仿層，再次加入1毫升氯仿萃取，用離心機(jī)離心分層，將兩次萃取 所得氯仿層液體合并即為待測樣品； (3) 反相高效液相色譜法檢測 色譜柱為ZoRBAX SB-C18, 5微米，4. 6 X 150毫米；流動(dòng)相為含0. 1%三氟乙酸的45%甲 醇水溶液；洗脫程序?yàn)閺末柕?0分鐘；流速〇. 8毫升/分鐘；柱溫35°C，檢測波長為294納 米；進(jìn)樣量為20微升； (4) 按外標(biāo)法以峰面積法計(jì)算L900洗滌液殘留量的濃度。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的L900洗滌液殘留量的檢測方法，其特征在于亞甲藍(lán)溶液配方 為一水磷酸二氫鈉50克、濃硫酸6. 8毫升、亞甲藍(lán)100-200毫克，加水定容至1000毫升。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的L900洗滌液殘留量的檢測方法，其特征在于通過離心機(jī)離心 分層條件為4000-5000轉(zhuǎn)/分鐘來實(shí)現(xiàn)氯仿萃取分層。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的L900洗滌液殘留量的檢測方法，其特征在于通過辛烷基硫酸 鈉和辛烷基磺酸鈉來確定塑料、玻璃器具中L900洗滌液的殘留量。
【專利摘要】本發(fā)明涉及化學(xué)成分檢測技術(shù)領(lǐng)域，特別是用于制藥、醫(yī)學(xué)研究、學(xué)術(shù)、生物技術(shù)和其他機(jī)構(gòu)的塑料實(shí)驗(yàn)器具和玻璃器具清洗中測定L900洗滌液殘留量的檢測方法。本發(fā)明建立在亞甲藍(lán)分光光度法的基礎(chǔ)上結(jié)合陰離子交換柱和反相高效液相色譜來定量分析塑料、玻璃器具中L900洗滌液殘留量，通過簡單高效的步驟，實(shí)現(xiàn)塑料、玻璃器具清洗液中辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉的富集濃縮，提高了檢測的靈敏度，并采用反相高效液相色譜有效分離出與亞甲藍(lán)結(jié)合的辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉，以去除其他物質(zhì)對檢測的干擾，有效地確保方法的特異性。本方法對辛烷基硫酸鈉和辛烷基磺酸鈉的檢出限為2ng/mL，有效地確保檢測數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確度，有利于在極低濃度下L900洗滌液的樣品檢測。
【IPC分類】G01N30-89
【公開號】CN104849396
【申請?zhí)枴緾N201510280551
【發(fā)明人】朱赟, 高孟, 毛岱敏, 方任華, 田寅, 忻亞娟, 莊昉成, 錢汶, 毛子安, 毛江森
【申請人】浙江普康生物技術(shù)股份有限公司
【公開日】2015年8月19日
【申請日】2015年5月28日