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一種基于重組S1蛋白檢測豬流行性腹瀉病毒IgA抗體的ELISA方法與流程

文檔序號:11652515閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種基于重組S1蛋白檢測豬流行性腹瀉病毒IgA抗體的ELISA方法,本發(fā)明對PEDV流行毒株(CH/HNQX?3/14)的部分S1基因(包含499?638?aa,748?755?aa和756?771?aa?3個抗原表位區(qū))進(jìn)行克隆,構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒pET30a(+)?pS1,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21后,通過優(yōu)化表達(dá)條件,獲得可溶性表達(dá)的重組pS1蛋白,該蛋白能夠與豬的PEDV陽性血清發(fā)生特異性反應(yīng)。以純化后的重組pS1蛋白作為包被抗原,建立了PEDV?IgA抗體間接ELISA檢測方法,該方法具有較好的特異性、敏感性和重復(fù)性,可應(yīng)用于PEDV?IgA抗體的臨床檢測及免疫評價(jià)。本發(fā)明操作簡單,應(yīng)用范圍廣。

技術(shù)研發(fā)人員:李任峰;田香勤;魯毅;荊煥芳;李曉晗;韓俊偉;王自良;馬金友;柳東陽
受保護(hù)的技術(shù)使用者:河南科技學(xué)院
技術(shù)研發(fā)日:2017.05.24
技術(shù)公布日:2017.07.28
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