本發(fā)明涉及臨床體外檢測(cè)試劑技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種血清白蛋白檢測(cè)試劑盒。

背景技術(shù)：

血清白蛋白由肝臟實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成，在血漿中它的半衰期約為15-19天，是血漿中含量最多、分子最小、溶解度大、功能較多的一種蛋白質(zhì)，占血漿總蛋白的40%-60%。白蛋白的分子結(jié)構(gòu)已于1975年闡明，它是由585個(gè)氨基酸組成的單鏈蛋白質(zhì)，其分子量約為67kd，成熟的白蛋白是一個(gè)心形分子，由3個(gè)結(jié)構(gòu)相似的α-螺旋結(jié)構(gòu)域組成。

食物中蛋白質(zhì)的含量會(huì)影響白蛋白的合成，此外，其合成還受血漿中水平的調(diào)節(jié)，白蛋白在肝細(xì)胞中幾乎沒有儲(chǔ)存，在所有的細(xì)胞外液中都含有微量的白蛋白。體液ph7.4的環(huán)境中，白蛋白為負(fù)離子，每分子帶有200個(gè)以上負(fù)電荷。白蛋白是血漿中的主要載體，能與體內(nèi)許多水溶性差的小分子有機(jī)物和無機(jī)離子可逆地結(jié)合形成易溶性的復(fù)合物，成為這些物質(zhì)在血液循環(huán)中的運(yùn)輸形式，其中包括膽汁酸鹽、膽紅素、長(zhǎng)鏈脂肪酸、類固醇激素、前列腺素、金屬離子及某些藥物。白蛋白是一種具有黏性、膠質(zhì)性的物質(zhì)，在人體內(nèi)重金屬離子存在時(shí)，會(huì)自動(dòng)與重金屬離子結(jié)合，從而由排泄系統(tǒng)排出體外，起到解毒的作用。因此，食用白蛋白含量豐富的食物，可避免重金屬離子的吸收而中毒。

白蛋白含量升高主要有兩個(gè)原因，一是由于血液濃縮使得白蛋白相對(duì)含量升高，常見于嚴(yán)重脫水和休克、嚴(yán)重?zé)齻?、大出血、腎臟疾病等；二是受飲食中蛋白質(zhì)攝入量的影響，因此在一定程度上白蛋白可以作為營(yíng)養(yǎng)狀況的指標(biāo)。白蛋白含量降低常見于營(yíng)養(yǎng)不良、急慢性肝病、慢性胃腸道疾病、糖尿病、高燒、外傷等。

本發(fā)明提供一種溴甲酚綠法檢測(cè)血清白蛋白的試劑盒，優(yōu)化其反應(yīng)體系，使其重復(fù)性好、穩(wěn)定性好、可進(jìn)行批量樣本全自動(dòng)化檢測(cè)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種穩(wěn)定性好的用于檢測(cè)血清白蛋白的試劑盒，本試劑盒采用溴甲酚綠法。本試劑盒與同類試劑盒相比，穩(wěn)定性和線性相關(guān)性比同類檢測(cè)試劑盒好，有利于試劑在臨床上的推廣應(yīng)用。

基本原理：

在ph為4.2的緩沖溶液中，白蛋白作為一種陽離子，能夠與陰離子染料溴甲酚氯結(jié)合形成藍(lán)綠色復(fù)合物，在波長(zhǎng)600nm處有吸收峰，其吸光度與白蛋白含量成正比，與同樣處理的白蛋白標(biāo)準(zhǔn)作比較，可以求得血清中白蛋白的含量。

本發(fā)明是通過以下步驟得到的：

一種血清白蛋白檢測(cè)試劑盒，其特征在于包含試劑r。

試劑r組成為：80mmol/lph為4.2的琥珀酸緩沖液、0.05mmol/l溴甲酚綠、1%tritonx-100、0.5g/l聚氧乙烯月桂醚、50mmol/l氯化鈉、20mmol/l疊氮鈉。

所述的血清白蛋白檢測(cè)試劑盒，其特征在于所述1%tritonx-100為表面活性劑。

所述的血清白蛋白檢測(cè)試劑盒，其特征在于所述的50mmol/l氯化鈉為穩(wěn)定劑。

所述的血清白蛋白檢測(cè)試劑盒，其特征在于，使用全自動(dòng)生化分析儀采用速率法進(jìn)行測(cè)定，檢測(cè)主波長(zhǎng)為600nm。

本發(fā)明的試劑盒在具有雙試劑功能的全自動(dòng)生化分析儀上進(jìn)行，其具體使用方法如圖1：

加入生理鹽水、樣本或校準(zhǔn)品3μl，再加入300μl的試劑r，讀取吸光度a1，孵育3min后讀取吸光度a2，計(jì)算δa。

本發(fā)明的有益效果：

1）本試劑添加了氯化鈉和1%tritonx-100，增強(qiáng)了試劑的穩(wěn)定性，且對(duì)試劑的準(zhǔn)確度沒有產(chǎn)生影響；

2）試劑的準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性良好，價(jià)格便宜，使用方便，有利于該試劑在市場(chǎng)中進(jìn)一步的推廣。

附圖說明

圖1為試劑盒的試用方法；

圖2為兩種試劑的相關(guān)性曲線圖；

圖3為實(shí)施例1試劑與市場(chǎng)認(rèn)可的血清白蛋白檢測(cè)試劑對(duì)比檢測(cè)結(jié)果；

圖4為實(shí)施例1試劑線性相關(guān)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果；

圖5為實(shí)施例1試劑穩(wěn)定性驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步說明：

實(shí)施例1

一種常規(guī)的血清白蛋白檢測(cè)試劑盒，試劑組成為：

80mmol/l琥珀酸緩沖液ph4.2

溴甲酚綠0.05mmol/l

聚氧乙烯月桂醚0.5g/l

氯化鈉50mmol/l

tritonx-1001%

疊氮鈉20mmol/l

本實(shí)施例所述試劑r，配置時(shí)需先配制琥珀酸緩沖液，用naoh調(diào)到適當(dāng)ph值后，再添加其它物質(zhì)。本實(shí)施例所述試劑盒在使用時(shí)，其測(cè)定方法是采用具有雙試劑功能的邁瑞800全自動(dòng)生化分析儀，利用終點(diǎn)法進(jìn)行測(cè)定，操作如下：

加入生理鹽水、樣本或校準(zhǔn)品3μl，再加入300μl的試劑r，讀取吸光度a1，孵育3min后讀取吸光度a2，計(jì)算δa；

δa＝a2-a1

血清白蛋白含量（g/l）=（?a測(cè)定÷?a標(biāo)準(zhǔn)）×標(biāo)準(zhǔn)品濃度

?a測(cè)定：測(cè)定樣本吸光度變化?a標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)準(zhǔn)品吸光度變化。

實(shí)施例2

準(zhǔn)確度驗(yàn)證試驗(yàn)：將實(shí)施例1的血清白蛋白檢測(cè)試劑作為實(shí)驗(yàn)組，市場(chǎng)上獲得認(rèn)可的一種準(zhǔn)確度好、穩(wěn)定性好的血清白蛋白檢測(cè)試劑作為對(duì)照組進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)20個(gè)臨床血清樣本進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果如圖3所示。獲得了兩種試劑的相關(guān)性曲線（如圖2所示），結(jié)果表明，兩組試劑盒的相關(guān)系數(shù)為0.9945，說明兩者相關(guān)性比較好。證明本發(fā)明試劑盒添加的組分對(duì)其準(zhǔn)確性不會(huì)造成影響，試劑盒依然保持較好的準(zhǔn)確度。

實(shí)施例3

線性相關(guān)性驗(yàn)證試驗(yàn)：選取一個(gè)血清白蛋白含量為60g/l的高值樣本，用生理鹽水進(jìn)行系列稀釋，配制6個(gè)不同濃度的樣本，濃度依次為60g/l、48g/l、36g/l、24g/l、12g/l、0g/l。分別利用實(shí)施例1試劑及對(duì)照組試劑進(jìn)行檢測(cè)，每個(gè)濃度的樣本分別測(cè)定三次，分別取平均值，檢測(cè)結(jié)果如圖4所示：

如圖4所示，實(shí)施例1與對(duì)照組試劑檢測(cè)結(jié)果相關(guān)系數(shù)均大于0.990，且實(shí)施例1試劑檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)系數(shù)略大于對(duì)照組試劑檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)系數(shù)，這表明本發(fā)明試劑具有更好的線性相關(guān)性。

實(shí)施例4

穩(wěn)定性驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)：在2℃～8℃、無腐蝕性氣體的避光環(huán)境中貯存試劑，檢測(cè)實(shí)施例1及對(duì)照組試劑的穩(wěn)定性。每月1號(hào)分別用兩組試劑測(cè)定質(zhì)控樣本（靶值為42.4g/l），測(cè)定三次取平均值，檢測(cè)數(shù)據(jù)如圖5所示：

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，實(shí)施例1試劑在2℃～8℃、無腐蝕性氣體的避光環(huán)境中貯存15個(gè)月穩(wěn)定，而對(duì)照組試劑在2℃～8℃、無腐蝕性氣體的避光環(huán)境中貯存12個(gè)月開始不穩(wěn)定，說明本發(fā)明試劑添加氯化鈉和tritonx-100穩(wěn)定性增強(qiáng)。

綜上所述，本發(fā)明提供的血清白蛋白檢測(cè)試劑盒，試劑r中添加氯化鈉和tritonx-100，提高了試劑盒的穩(wěn)定性，線性范圍較好，試劑的準(zhǔn)確度也較好。因此，本發(fā)明提供的血清白蛋白檢測(cè)試劑盒有利于在市場(chǎng)中進(jìn)一步的推廣使用。

技術(shù)特征：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種血清白蛋白檢測(cè)試劑盒，本試劑盒采用溴甲酚綠法檢測(cè)血液中的血清白蛋白，屬于臨床體外檢測(cè)試劑技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明試劑盒僅包括試劑R。通過在試劑R中添加氯化鈉和TritonX?100，提高了試劑盒的穩(wěn)定性，線性范圍較好，試劑的準(zhǔn)確度也較好，有利于在市場(chǎng)中進(jìn)一步的推廣使用。

技術(shù)研發(fā)人員：宋慧玲;羅維曉;王慧娟
受保護(hù)的技術(shù)使用者：濟(jì)南協(xié)謙醫(yī)療器械有限公司
技術(shù)研發(fā)日：2017.04.12
技術(shù)公布日：2017.08.18