本發(fā)明涉及3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的分析方法
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體而言，涉及一種3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的高效液相色譜分析方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉(zps)，英文名稱：sodium3-(ben-zothiazol-2-ylthio)-1-propanesulfonate，主要在電鍍酸性鍍銅中應(yīng)用，作為酸性鍍銅中的光亮劑，屬于鍍銅添加劑中的主要添加成份，它與聚醚，濕潤劑配合使用，能得到既光亮、延展性又好的鍍層，也可以和其他的含硫光亮劑配合使用，還可以用于貴金屬的化學(xué)鍍中，預(yù)防不規(guī)則沉積。在整個酸銅光亮劑市場上，此產(chǎn)品需求量很大，應(yīng)用效果優(yōu)良，在鍍銅添加劑配方中，zps的加入量涉及到配方的應(yīng)用效果，即所得鍍層的光亮性、整平性和穩(wěn)定性，所以zps含量對產(chǎn)品質(zhì)量控制是一個重要的指標(biāo)，有必要準(zhǔn)確測定其含量。zps的含量檢測方法沒有文章報道，更沒有相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布。碘量法是目前可對含巰基團檢測的方法，但其選擇性差，誤差大，檢測準(zhǔn)確度差。有鑒于此，特提出本發(fā)明。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的之一在于提供一種用高效液相色譜法分析3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的方法，是一種簡單、精準(zhǔn)、易于推廣的方法。本發(fā)明的目的之二在于提供一種所述的3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的高效液相色譜分析方法在3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉生產(chǎn)過程檢測和產(chǎn)品質(zhì)量檢測中的應(yīng)用。為了實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術(shù)方案：一種3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的高效液相色譜分析方法，包括以下步驟：(a)提供3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉對照品溶液和供試樣品溶液；(b)用hplc-uv按外標(biāo)法對步驟(a)供試樣品溶液中的3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉含量進行分析，高效液相色譜的檢測條件為：色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：以有機相和磷酸鹽緩沖液組成，磷酸鹽緩沖液調(diào)節(jié)至ph＝5.5±0.1，有機相和磷酸鹽緩沖液的體積比為10：90～80：20；有機相為乙腈或甲醇；紫外檢測器的檢測波長：190～330nm。優(yōu)選地，在本發(fā)明技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，所述流動相中有機相和磷酸鹽緩沖液的體積比為20：80～80：20。優(yōu)選地，在本發(fā)明技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，所述紫外檢測器的檢測波長為220～300nm。進一步，在本發(fā)明技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，步驟(b)中高效液相色譜的檢測條件還包括：流速：0.2～1.2ml/min；柱溫：10～60℃；進樣量20μl。優(yōu)選地，在本發(fā)明技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，所述流速為0.7～1.1ml/min；所述柱溫為20～45℃。優(yōu)選地，在本發(fā)明技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，所述磷酸鹽緩沖液由0.19mol/l的磷酸溶液、0.142mol/l的三乙胺和0.005mol/l磷酸氫二鉀溶液混合制成。進一步，在本發(fā)明技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，所述3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉對照品溶液采用含量≥90％的3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品進行配制，具體包括將3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品用流動相溶解，配制成濃度為10.0mg/ml的對照品溶液。進一步，在本發(fā)明技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，所述供試樣品溶液的配制具體包括將3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉供試樣品用流動相溶解，配制成濃度為1.0mg/ml的供試樣品溶液。優(yōu)選地，在本發(fā)明技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的高效液相色譜分析方法，包括以下步驟：(a)提供緩沖液及流動相：將0.19mol/l的磷酸溶液、0.142mol/l的三乙胺和0.005mol/l磷酸氫二鉀溶液混合，過濾，制成緩沖液待用；取過濾后的有機相與緩沖液按20：80～80：20的體積比混合，脫氣后制成流動相待用；(b)提供3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉對照品溶液和供試樣品溶液：將含量為90.5％的3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品用流動相溶解，制成濃度為10.0mg/ml的溶液，過濾，制成對照品溶液待用；將3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉供試樣品用流動相溶解，制成濃度為1.0mg/ml的溶液，過濾，制成供試樣品溶液待用；(c)按照下列高效液相色譜條件進行測定：色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：步驟(a)中的流動相；紫外檢測器的檢測波長：220～300nm；流速：0.8～1.1ml/min；柱溫：20～45℃；進樣量20μl；(d)按外標(biāo)法，計算供試樣品溶液中3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的含量。一種上述3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的高效液相色譜分析方法在3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉生產(chǎn)過程檢測和產(chǎn)品質(zhì)量檢測中的應(yīng)用。和現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果如下：本發(fā)明利用高效液相色譜，配合紫外檢測器，以標(biāo)準(zhǔn)曲線法對3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉含量進行分析，緩解了現(xiàn)有技術(shù)對3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉含量的測定方法不完善、碘量法選擇性差、準(zhǔn)確度差的技術(shù)問題。采用本發(fā)明方法能夠準(zhǔn)確檢測3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的含量，結(jié)果精密度好，精密度小于2.65％，準(zhǔn)確度高，靈敏度高，方法中的樣品及流動相配制、整個操作過程簡單易行，方法科學(xué)、可靠、可控，適于實際應(yīng)用和推廣，適用于3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的生產(chǎn)過程檢測和產(chǎn)品質(zhì)量檢測。附圖說明為了更清楚地說明本發(fā)明實施例的技術(shù)方案，下面將對實施例中所需要使用的附圖作簡單地介紹，應(yīng)當(dāng)理解，以下附圖僅示出了本發(fā)明的某些實施例，因此不應(yīng)被看作是對范圍的限定，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他相關(guān)的附圖。圖1為實施例一3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉對照品的高效液相色譜圖；圖2為實施例一3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉對照線性圖；圖3為實施例二3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉對照線性圖。具體實施方式下面將結(jié)合實施例對本發(fā)明的實施方案進行詳細(xì)描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解，下列實施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限制本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。根據(jù)本發(fā)明的一個方面，提供了一種3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的高效液相色譜分析方法，包括以下步驟：一種3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的高效液相色譜分析方法，其特征在于，包括以下步驟：(a)提供3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉對照品溶液和供試樣品溶液；(b)用hplc-uv按外標(biāo)法對步驟(a)供試樣品溶液中的3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉含量進行分析，高效液相色譜的檢測條件為：色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：以有機相和磷酸鹽緩沖液組成，磷酸鹽緩沖液調(diào)節(jié)至ph＝5.5±0.1，乙腈和磷酸鹽緩沖液的體積比為10：90～80：20；有機相為乙腈或甲醇；紫外檢測器的檢測波長：190～330nm。3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉(zps)是一種鍍銅光亮劑。3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉本發(fā)明中，色譜柱采用十八烷基硅烷鍵合硅膠柱，如c18色譜柱、ods色譜柱；優(yōu)選地，色譜柱采用hypersilods2，5μ，250mm×4.6mm，hypersilosd2是硅膠基質(zhì)上鍵和了c18為官能團的色譜柱填料，適用于分析非極性和中性樣品。本發(fā)明中，流動相由有機相和磷酸鹽緩沖液組成，有機相為乙腈或甲醇，使用乙腈或甲醇能更好地分離未反應(yīng)的2-巰基苯駢噻唑，磷酸鹽緩沖液的ph范圍為5.4～5.6，例如5.4、5.5或5.6；有機相和磷酸鹽緩沖液的體積比典型但非限制性的含量例如為10：90、20：80、30：70、40：60、50：50、60：40、70：30或80：20。本發(fā)明中，紫外檢測器的檢測波長典型但非限制性的含量例如為190nm、200nm、210nm、220nm、230nm、240nm、250nm、260nm、270nm、280nm、290nm、300nm、310nm、320nm、或330nm。現(xiàn)有技術(shù)對3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的檢測還沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)方法，碘量法是目前可對含巰基團檢測的方法，進而間接對3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉進行定量，但該方法存在選擇性差，誤差大，檢測準(zhǔn)確度低的問題，無法準(zhǔn)確測定其含量以便對產(chǎn)品質(zhì)量進行控制。本發(fā)明采用的hplc-uv分析法，可分析3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉含量，精密度好、準(zhǔn)確度高，測定結(jié)果較碘量法更準(zhǔn)確，只要操作人員學(xué)會溶(注)樣品即可以準(zhǔn)確分析，適用于3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的生產(chǎn)過程檢測和產(chǎn)品質(zhì)量控制。在一種優(yōu)選的實施方式中，所述流動相中有機相和磷酸鹽緩沖液的體積比為20：80～50：50；進一步優(yōu)選的體積比為30：70～40：60，例如30：70、35：65或40：60。在一種優(yōu)選的實施方式中，紫外檢測器的檢測波長為220～300nm。通過進一步優(yōu)化流動相配比和檢測波長，對色譜條件進行優(yōu)化，實現(xiàn)更好的分離效果，實現(xiàn)分離度的優(yōu)化和峰型的最佳化。作為一種優(yōu)選的實施方式，步驟(b)中高效液相色譜的檢測條件還包括：流速：0.2～1.2ml/min；柱溫：10～60℃；進樣量20μl。流速典型但非限制性的含量例如為0.2ml/min、0.3ml/min、0.4ml/min、0.5ml/min、0.6ml/min、0.7ml/min、0.8ml/min、0.9ml/min、1.0ml/min、1.1ml/min或1.2ml/min。柱溫典型但非限制性的含量例如為10℃、20℃、30℃、40℃、50℃或60℃。高效液相色譜操作的進樣體積采用20μl定量進樣環(huán)，滿環(huán)進樣，進樣體積100μl。流速決定了樣品的出峰時間，柱溫對柱效和產(chǎn)品分離也有一定影響，通過對流速和柱溫的設(shè)定，以獲得良好的分離效果。在一種優(yōu)選的實施方式中，流速為0.7～1.1ml/min，進一步優(yōu)選流速為0.8～1.1ml/min；柱溫為20～45℃。通過進一步優(yōu)化流速和柱溫，以獲得較佳的出峰時間和分離效果。作為一種優(yōu)選的實施方式，磷酸鹽緩沖液由0.19mol/l的磷酸溶液、0.142mol/l的三乙胺和0.005mol/l磷酸氫二鉀溶液混合制成。磷酸鹽緩沖液由特定配比的磷酸溶液、三乙胺和磷酸氫二鉀溶液混合配制而成，方便配制，使體系ph維持在5.5左右，保證測定物的穩(wěn)定，防止測定物電離，優(yōu)化柱子封端的不足。作為一種優(yōu)選的實施方式，3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉對照品溶液采用含量≥90％的3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品進行配制，具體包括將3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品用流動相溶解，配制成濃度為10.0mg/ml的對照品溶液。其中，含量為質(zhì)量百分含量(質(zhì)量分?jǐn)?shù))。采用含量≥90％的已知含量的3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品作為對照品，如進口zps，含量90.5％，將對照品制成10.0mg/ml的對照品溶液，進一步用流動相稀釋為濃度在0.01mg/ml～5.0mg/ml之間不同濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，通過上述色譜條件測定后得到標(biāo)準(zhǔn)曲線，在此濃度范圍內(nèi)直線的相關(guān)系數(shù)可達(dá)到0.9999。作為一種優(yōu)選的實施方式，供試樣品溶液的配制具體包括將3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉供試樣品用流動相溶解，配制成濃度為1.0mg/ml的供試樣品溶液。校準(zhǔn)曲線的線性范圍為0.01mg/ml～5.0mg/ml，將3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉供試樣品用流動相稀釋后通過外標(biāo)法可計算出供試樣品溶液中3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的含量，進而可求得3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉供試樣品的含量。在一種優(yōu)選的實施方式中，作為一種典型的3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的高效液相色譜分析方法，包括以下步驟：(a)緩沖液及流動相配制：精確移取5ml磷酸、10ml三乙胺，精確稱取1.14g磷酸氫二鉀溶于1l水中，過濾，制成緩沖液待用；取過濾后的有機相與緩沖液按20：80～80：20的體積比混合，脫氣后制成流動相待用；(b)配制3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉對照品溶液和供試樣品溶液：將500mg含量為90.5％的3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品溶于50ml流動相中，過濾，制成對照品溶液待用；將50mg的3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉供試樣品溶于50ml流動相中，過濾，制成供試樣品溶液待用；(c)按照下列高效液相色譜條件進行測定：色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：步驟(a)中的流動相；紫外檢測器的檢測波長：220～300nm；流速：0.8～1.1ml/min；柱溫：20～45℃；進樣量20μl；(d)按外標(biāo)法，計算供試樣品溶液中3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的含量。優(yōu)選地，在步驟(a)中，緩沖液的配制方法為：精確移取5ml磷酸、10ml三乙胺，精確稱取1.14g磷酸氫二鉀溶于1l水中，過濾，制成磷酸鹽緩沖液。優(yōu)選地，在步驟(b)中，3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉對照品溶液的配制方法為：將500mg含量為90.5％的3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品溶于50ml流動相中，過濾，制成對照品溶液。優(yōu)選地，在步驟(b)中，3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉供試樣品溶液的配制方法為：將50mg的3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉供試樣品溶于50ml流動相中，過濾，制成供試樣品溶液。流動相在使用前超聲波脫氣30～60min。流動相采用超純水進行配制，可以選用雙重純水蒸餾器或帶有離子交換膜的純水機所出超純水。優(yōu)選地，在對所述供試品溶液進行3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉含量測定之前進行系統(tǒng)適用性測試。作為本發(fā)明的另一個方面，提供了一種上述3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的高效液相色譜分析方法在3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉生產(chǎn)過程檢測和產(chǎn)品質(zhì)量檢測中的應(yīng)用。為了進一步了解本發(fā)明的具體操作過程和分離效果，下面結(jié)合具體實施例及對比例對本發(fā)明做進一步詳細(xì)的說明。實施例所用的儀器與試劑如下：實驗儀器：model500高效液相色譜儀(美國ssi)laballiancehplcworkstation色譜工作站超聲清洗器ds-3120，天津東康科技有限公司ar2140電子天平(1/10000天平)，美國奧豪斯藥品：zps供試樣品：工業(yè)級，湖北吉和昌化工科技有限公司；zps對照品：zps標(biāo)準(zhǔn)品，質(zhì)量百分含量90.5％上海阿拉丁生化科技股份有限公司；乙腈/甲醇：色譜純，國藥集團化學(xué)試劑有限公司；磷酸、三乙胺、磷酸氫二鉀：分析純，天津市北聯(lián)精細(xì)化學(xué)品開發(fā)有限公司；其他試劑均為分析純。實施例采用的色譜柱為hypersil的ods色譜柱。實施例一1、3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的測定1.1高效液相色譜法的色譜條件：色譜柱：hypersilods2，5μ，250mm×4.6mm(配有hypersil保護柱)；流動相組成體積比：乙腈︰磷酸鹽緩沖液＝10︰90；磷酸鹽緩沖液由0.19mol/l的磷酸溶液、0.142mol/l的三乙胺和0.005mol/l磷酸氫二鉀溶液混合配制而成；流速：1ml/min；；柱溫：25℃；檢測器：紫外檢測器；檢測波長：230nm；進樣量20μl。1.2高效液相色譜測定3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的方法，包括以下步驟：緩沖液及流動相配制：精確移取5ml磷酸、10ml三乙胺，精確稱取1.14g磷酸氫二鉀于1l容量瓶中，用水定容后，用0.45μm水系膜過濾，制成緩沖液待用；取0.45μm有機系膜過濾后的乙腈與緩沖液按10：90的體積比配成流動相，混合均勻，用超聲清洗器恒溫脫氣半小時得到流動相；對照品溶液的制備：精確稱取500mg含量為90.5％的3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品粉末于50ml容量瓶中，用上述流動相溶解定容，使用前用0.2μm有機系膜過濾，清液待用，該溶液的濃度為10.0mg/ml；系統(tǒng)適用性測試：精確稱取3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品用上述流動相溶解，配成濃度約為1.0mg/ml的溶液，搖勻，得到系統(tǒng)適用性溶液；將系統(tǒng)適用性溶液以20μl的進樣量進樣進行測定，使3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉峰與雜質(zhì)峰之間的分離度大于1.5，理論板數(shù)以3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉峰計算應(yīng)不低于5000，拖尾因子不得過2.0；供試樣品溶液的制備：精確稱取50mg的3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉供試樣品(工業(yè)級)于50ml容量瓶中，用上述流動相溶解定容，使用前用0.2μm有機系膜過濾，清液待用，該溶液的濃度為1.0mg/ml；測定：按上述高效液相色譜法的色譜條件按外標(biāo)法測定供試品溶液中3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的含量。圖1為實施例一3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉對照品的高效液相色譜圖，3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉保留時間在4.3min。2、3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的測定方法驗證2.1線性關(guān)系精密量取上述對照品溶液，置于容量瓶中，流動相定容，搖勻，分別得質(zhì)量濃度為0.01mg/ml、0.1mg/ml、0.5mg/ml、1.0mg/ml、1.25mg/ml、1.5mg/ml、1.75mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、5mg/ml的線性溶液。照上述色譜條件測定，每份線性溶液測定5次，取峰面積平均值，以濃度(c)為橫坐標(biāo)，峰面積(a)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計算回歸方程，結(jié)果見表1，3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉對照線性圖如圖2所示(線性回歸方程為：a＝710438c-0.5431，r2＝0.9999)。表13-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉對照線性關(guān)系結(jié)果由表1可見，3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉濃度在0.01～5.0mg/ml范圍內(nèi)，有較好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)r2＝0.9999。2.2測定結(jié)果將配制的3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉供試樣品溶液，照上述色譜條件測定，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算得出：3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的質(zhì)量濃度為0.9931mg/ml，即zps質(zhì)量分?jǐn)?shù)＝0.9931×90.5％＝89.88％。2.3精密度試驗精密稱取3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品10mg，加溶劑(流動相)適量使溶解，定容至10ml容量瓶中，制成質(zhì)量濃度為1mg/ml的含3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的標(biāo)準(zhǔn)溶液，搖勻，取該溶液重復(fù)進樣7次，記錄峰面積，計算進樣精密度，結(jié)果見表2。表2進樣精密度試驗結(jié)果由表2可見，進樣精密度的樣品濃度的rsd％為1.43，符合要求。2.4重復(fù)性試驗精密稱取3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉供試樣品10mg，加溶劑(流動相)適量使溶解，定容至10ml的容量瓶中，制成質(zhì)量濃度為1mg/ml的含3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉樣品溶液，搖勻，同法共配制6份樣品溶液，按上述方法測定每份樣品溶液中的3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的含量，計算精密度，結(jié)果見表3。表3重復(fù)性試驗結(jié)果由表3可見，重復(fù)性的rsd％為0.34％，符合要求。2.5供試樣品溶液的放置穩(wěn)定性精密稱取3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉供試樣品10mg，用溶劑(流動相)溶解并定容至10ml的容量瓶中，制成濃度為1mg/ml的溶液，搖勻，置室溫下放置，分別于0h、1h、2h、6h、12h、24h進樣，計算主峰含量的變化程度，結(jié)果見表4。表4供試樣品溶液的放置穩(wěn)定性試驗結(jié)果由表4可見，在水溶液狀態(tài)下3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的峰面積隨時間的推移變化較小，溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定性較好。2.6準(zhǔn)確度——回收率試驗精密稱取5份質(zhì)量濃度為0.5mg/ml的zps供試樣品溶液2ml，每份各加入2ml體積的0mg/ml、0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.5mg/ml、0.7mg/ml的zps標(biāo)準(zhǔn)溶液，各配制3份，照3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉含量測定項下的色譜條件測定3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的含量，取3次測定平均值計算回收率，結(jié)果見表5。表5回收率試驗結(jié)果加標(biāo)前量μg添加量μg加標(biāo)后量μg回收量μg回收率％0.90290.9051.80791.791699.10.90291.8102.71292.683198.90.90294.5255.42795.395399.40.90296.3357.23797.143898.7表中：加標(biāo)前量＝空白加標(biāo)溶液質(zhì)量濃度的測定值×進樣量添加量＝標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度×進樣量÷2加標(biāo)后量＝加標(biāo)前量+添加量回收量＝加標(biāo)溶液質(zhì)量濃度的測定值×進樣量回收率＝回收量÷加標(biāo)后量×100％由表5可見，3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的回收率為98.7～99.4％，準(zhǔn)確度高。實施例二1、3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的測定1.1高效液相色譜法的色譜條件：色譜柱：hypersilods2，5μ，250mm×4.6mm(配有hypersil保護柱)；流動相組成體積比：甲醇︰磷酸鹽緩沖液＝20︰80；磷酸鹽緩沖液由0.19mol/l的磷酸溶液、0.142mol/l的三乙胺和0.005mol/l磷酸氫二鉀溶液混合配制而成；流速：1.1ml/min；；柱溫：40℃；檢測器：紫外檢測器；檢測波長：260nm；進樣量20μl。1.2高效液相色譜測定3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的方法，包括以下步驟：緩沖液及流動相配制：精確移取5ml磷酸、10ml三乙胺，精確稱取1.14g磷酸氫二鉀于1l容量瓶中，用水定容后，用0.45μm水系膜過濾，制成緩沖液待用；取0.45μm有機系膜過濾后的甲醇與緩沖液按20：80的體積比配成流動相，混合均勻，用超聲清洗器恒溫脫氣半小時得到流動相；對照品溶液的制備：同實施例一；系統(tǒng)適用性測試：精確稱取3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品用上述流動相溶解，配成濃度約為1.0mg/ml的溶液，搖勻，得到系統(tǒng)適用性溶液；將系統(tǒng)適用性溶液以20μl的進樣量進樣進行測定，使3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉峰與雜質(zhì)峰之間的分離度大于1.5，理論板數(shù)以3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉峰計算應(yīng)不低于5000，拖尾因子不得過2.0；供試樣品溶液的制備：同實施例一；測定：按上述高效液相色譜法的色譜條件按外標(biāo)法測定供試品溶液中3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的含量。3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉保留時間在4.2min。2、3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的測定方法驗證2.1線性關(guān)系精密量取上述對照品溶液，置于容量瓶中，流動相定容，搖勻，分別得質(zhì)量濃度為0.01mg/ml、0.1mg/ml、0.5mg/ml、1.0mg/ml、1.25mg/ml、1.5mg/ml、1.75mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、5mg/ml的線性溶液。照上述色譜條件測定，每份線性溶液測定5次，取峰面積平均值，以濃度(c)為橫坐標(biāo)，峰面積(a)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計算回歸方程，結(jié)果見表6，3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉對照線性圖如圖3所示(線性回歸方程為：a＝588312c-5622.4，r2＝0.9995)。表63-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉對照線性關(guān)系結(jié)果由表6可見，3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉濃度在0.01～5.0mg/ml范圍內(nèi)，有較好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)r2＝0.9995。2.2測定結(jié)果將配制的3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉供試樣品溶液，照上述色譜條件測定，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算得出：3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的質(zhì)量濃度為0.9918mg/ml，即zps質(zhì)量分?jǐn)?shù)＝0.9918×90.5％＝89.76％。2.3精密度試驗精密稱取3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品10mg，加溶劑(流動相)適量使溶解，定容至10ml容量瓶中，制成質(zhì)量濃度為1mg/ml的含3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的標(biāo)準(zhǔn)溶液，搖勻，取該溶液重復(fù)進樣7次，記錄峰面積，計算進樣精密度，結(jié)果見表7。表7進樣精密度試驗結(jié)果由表7可見，進樣精密度的樣品濃度的rsd％為2.63，符合要求。2.4重復(fù)性試驗精密稱取3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉供試樣品10mg，加溶劑(流動相)適量使溶解，定容至10ml的容量瓶中，制成質(zhì)量濃度為1mg/ml的含3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉樣品溶液，搖勻，同法共配制6份樣品溶液，按上述方法測定每份樣品溶液中的3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的含量，計算精密度，結(jié)果見表8。表8重復(fù)性試驗結(jié)果由表8可見，重復(fù)性的rsd％為1.26，符合要求。2.5供試樣品溶液的放置穩(wěn)定性精密稱取3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉供試樣品10mg，用溶劑(流動相)溶解并定容至10ml的容量瓶中，制成濃度為1mg/ml的溶液，搖勻，置室溫下放置，分別于0h、1h、2h、6h、12h、24h進樣，計算主峰含量的變化程度，結(jié)果見表9。表9供試樣品溶液的放置穩(wěn)定性試驗結(jié)果由表9可見，在水溶液狀態(tài)下3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的峰面積隨時間的推移變化較小，溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定性較好。2.6準(zhǔn)確度——回收率試驗精密稱取5份質(zhì)量濃度為0.5mg/ml的zps供試樣品溶液2ml，每份各加入2ml體積的0mg/ml、0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.5mg/ml、0.7mg/ml的zps標(biāo)準(zhǔn)溶液，各配制3份，照3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉含量測定項下的色譜條件測定3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的含量，取3次測定平均值計算回收率，結(jié)果見表10。表10回收率試驗結(jié)果表中：加標(biāo)前量＝空白加標(biāo)溶液質(zhì)量濃度的測定值×進樣量添加量＝標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度×進樣量÷2加標(biāo)后量＝加標(biāo)前量+添加量回收量＝加標(biāo)溶液質(zhì)量濃度的測定值×進樣量回收率＝回收量÷加標(biāo)后量×100％由表10可見，3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的回收率為98.5～99.1％，準(zhǔn)確度高。2.7耐用性試驗取供試樣品，分別微調(diào)流動相緩沖液ph值、波長、流速及柱溫，照3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉含量測定項下的方法測定，考察3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉含量的變化程度，測定結(jié)果見表11。表11耐用性試驗結(jié)果由表11可見，此色譜系統(tǒng)的耐用性良好，流速、流動相比例、柱溫、波長的變化對3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的分離及含量的測定沒有明顯影響。由于液相色譜的流動相比例、流速、柱溫、檢測波長等操作條件不同，所得標(biāo)準(zhǔn)曲線也會不同。通過上述實施例可以看出，采用高效液相色譜-紫外檢測器可以實現(xiàn)對3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉的分離及含量測定，測定結(jié)果精密度好、準(zhǔn)確度高，可以準(zhǔn)確快速地對3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉進行定量，以便對3-(苯駢噻唑-2-巰基)-丙烷磺酸鈉實行生產(chǎn)過程檢測和產(chǎn)品質(zhì)量檢測。通過調(diào)節(jié)流動相比例、流速、柱溫及檢測波長等條件，可以優(yōu)化出峰時間、改變峰型和拖尾，進一步提高檢測效率和檢測精度。盡管已用具體實施例來說明和描述了本發(fā)明，然而應(yīng)意識到，在不背離本發(fā)明的精神和范圍的情況下可以作出許多其它的更改和修改。因此，這意味著在所附權(quán)利要求中包括屬于本發(fā)明范圍內(nèi)的所有這些變化和修改。當(dāng)前第1頁12