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基于局域表面等離子體共振技術(shù)的核酸適配體篩選方法與流程

文檔序號:12113035閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.基于局域表面等離子體共振技術(shù)的核酸適配體篩選方法,其特征在于,以納米金芯片為介質(zhì),將靶標(biāo)物固定在介質(zhì)上,再以核酸適配體為識別元素,進(jìn)行核酸適配體的可視化篩選。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于局域表面等離子體共振技術(shù)的核酸適配體篩選方法,其特征在于,所述的靶標(biāo)物包括但不限于小分子、蛋白或病毒。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于局域表面等離子體共振技術(shù)的核酸適配體篩選方法,其特征在于,首先,用PBS緩沖液稀釋寡核苷酸文庫,作為樣品,進(jìn)樣;其次,用PBS緩沖液沖洗系統(tǒng),以清洗除去結(jié)合力弱或未結(jié)合的寡核苷酸分子,然后,用水沖洗進(jìn)樣系統(tǒng),并用空氣排空,防止樣品在樣品管內(nèi)壁吸附;最后通入NaOH再生緩沖液,洗脫回收與靶標(biāo)物特異性結(jié)合的核苷酸分子,進(jìn)行PCR擴(kuò)增,制備單鏈,獲得單鏈次級庫,以此進(jìn)行下一輪篩選,重復(fù)篩選和PCR擴(kuò)增,直至篩選出目的核酸適配體。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的基于局域表面等離子體共振技術(shù)的核酸適配體篩選方法,其特征在于,進(jìn)樣之前,運(yùn)行PBS緩沖液,至儀器達(dá)到穩(wěn)定的信號基線。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的基于局域表面等離子體共振技術(shù)的核酸適配體篩選方法,其特征在于,所述的進(jìn)樣流速為20μL/min,時(shí)間為5min。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的基于局域表面等離子體共振技術(shù)的核酸適配體篩選方法,其特征在于,所述的PBS緩沖液沖洗時(shí)的流速為150μL/min,時(shí)間為5min。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的基于局域表面等離子體共振技術(shù)的核酸適配體篩選方法,其特征在于,所述的NaOH再生緩沖液洗脫的流速為20μL/min。

8.根據(jù)權(quán)利要求3-7任一項(xiàng)所述的基于局域表面等離子體共振技術(shù)的核酸適配體篩選方法,其特征在于,所述的NaOH再生緩沖液的濃度為10mM。

9.根據(jù)權(quán)利要求3-7任一項(xiàng)所述的基于局域表面等離子體共振技術(shù)的核酸適配體篩選方法,其特征在于,所述的PBS緩沖液濃度為10mM。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于局域表面等離子體共振技術(shù)的核酸適配體篩選方法,其特征在于,篩選出的核酸適配體可用于靶標(biāo)物的定量和定性檢測。

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