技術(shù)特征：

1.人尿中對羥基苯甲酸酯類防腐劑濃度的UPLC-MS/MS檢測方法，其特征在于：包括以下步驟：

1)樣品處理：取待測尿液樣品于試管或離心管中，加樣1/10倍體積的水，然后加入β-葡糖糖苷酸酶，搖勻并密封，放入37℃水浴中加熱至反應(yīng)完全，取一定量的反應(yīng)液，加入3倍量的沉淀劑(甲醇/乙腈＝1：1)沉淀蛋白，渦旋混勻后，15000rpm離心10min，取上清5-10μL進樣分析；

2)HPLC-MS/MS分析：將處理后的樣品用三重四級桿液質(zhì)聯(lián)用儀，在以下條件下進行分析液相條件：流動相：A:0.1％甲酸水溶液，B:乙腈；流速：0.3ml/min；進樣量：5μL；柱溫：45℃；色譜柱：Waters ACQUITYBEH C18,1.7μm,2.1*50mm Column

梯度洗脫程序

Time/minA％B％09552.070305.060407.010908.010908.195510.0955

質(zhì)譜條件

其他質(zhì)譜參數(shù)：

毛細管電壓(kV):3.2kV； 源溫度(℃):120；

脫溶劑氣溫度(℃):350； 脫溶劑氣流量(L/Hr):800；

氣簾氣流量(L/Hr):50； 駐留時間(s)：0.1s

3)根據(jù)樣品的峰面積和標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程中，計算尿液中對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯的濃度。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人尿中對羥基苯甲酸酯類防腐劑濃度的UPLC-MS/MS檢測方法，其特征在于：步驟(1)樣品處理方法為：取500μL尿液，加50μL水，50μL的β葡糖糖苷酸酶(80U/mL)，搖勻并密封，放入37℃水浴中加熱120min，反應(yīng)結(jié)束后，取反應(yīng)液100μL，加入300μL沉淀劑(甲醇/乙腈＝1：1)沉淀蛋白，渦旋混勻后，15000rpm離心10min，取上清5μL進行樣分析。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人尿中對羥基苯甲酸酯類防腐劑濃度的UPLC-MS/MS檢測方法，其特征在于：步驟(3)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作過程：

a.標(biāo)準(zhǔn)品處理：取500μL尿液，加入50μL標(biāo)準(zhǔn)溶液，配置成相當(dāng)于尿液中塑化劑各成分濃度為：5，10，25，50，100，250，500ng/ml的系列溶液，加入50μL的β葡糖糖苷酸酶(80U/mL)，搖勻并密封，放入37℃水浴中加熱120min，反應(yīng)結(jié)束后，取反應(yīng)液100μL，加入300μL沉淀劑(甲醇/乙腈＝1：1)沉淀蛋白，渦旋混勻后，15000rpm離心10min，取上清5μL進樣分析；

b.標(biāo)準(zhǔn)曲線制作：以待測物濃度為橫坐標(biāo)，待測物峰面積與尿液樣品相應(yīng)成分峰面積的差值為縱坐標(biāo)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人尿中對羥基苯甲酸酯類防腐劑濃度的UPLC-MS/MS檢測方法,其特征在于：該方法中對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯的檢出限均為：2ng/ml。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人尿中對羥基苯甲酸酯類防腐劑濃度的UPLC-MS/MS檢測方法,其特征在于：該方法中對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、丁對羥基苯甲酸酯的定量限均為：5ng/ml。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人尿中對羥基苯甲酸酯類防腐劑濃度的UPLC-MS/MS檢測方法,其特征在于：該方法的檢測范圍：該方法中對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、丁對羥基苯甲酸酯的檢測范圍均為5-500ng/ml。