技術(shù)特征：

1.一種唾液抗線粒體抗體M2型的酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，其特征在于，該試劑盒中包括下述組分：

AMA-M2標(biāo)準(zhǔn)品；

M2抗原包被的聚苯乙烯ELISA微孔板；

酶標(biāo)二抗：辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗人IgG；

樣本稀釋液：質(zhì)量濃度0.1％的BSA-PBS溶液；

輔助試劑：底物顯色液、反應(yīng)終止液和清洗緩沖液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述樣本稀釋液的配制方法為：取牛血清白蛋白1g，加入pH7.4的0.01M磷酸鹽緩沖溶液1L，充分溶解。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述底物顯色液為TMB/H₂O₂，是通過下述方法配制獲得：

(1)配制底物顯色液A：

取四甲基聯(lián)苯胺20mg、DMSO 2ml、EDTA-Na 20mg、檸檬酸95mg、甘油5ml，以ddH₂O定容至50ml后混勻，避光保存；

(2)配制底物顯色液B：

取醋酸鈉1.36g、檸檬酸0.16g、30％過氧化氫30ul，以ddH₂O定容至50ml后混勻；

(3)使用前，將底物顯色液A、B液等體積混勻，即得底物顯色液TMB/H₂O₂。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述反應(yīng)終止液為：0.5M硫酸。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述清洗緩沖液是質(zhì)量濃度0.05％的Tween20-PBS溶液；其配制方法為：取吐溫20500ul，加入pH7.4的0.01M磷酸鹽緩沖溶液1L，充分溶解。

6.權(quán)利要求1所述試劑盒的使用方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將獲取的唾液樣本離心后吸取上清，用0.1％BSA-PBS溶液按1∶40的體積比稀釋；

(2)用樣本稀釋液稀釋AMA-M2標(biāo)準(zhǔn)品為8個(gè)梯度：AMA-M2含量分別為1RU/ml、0.50RU/ml、0.25RU/ml、0.125RU/ml、0.0625RU/ml、0.03175RU/ml、0.015625RU/ml、0RU/ml；第8個(gè)0RU/ml設(shè)為空白對(duì)照孔，直接采用樣本稀釋液；

(3)在M2抗原包被的聚苯乙烯ELISA微孔板中分別加入100ul稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)品和樣本，室溫孵育30分鐘；棄去孔中液體，每孔加300ul配好洗液，60秒后將微孔板中液體倒出，并在吸水紙上拍打去除殘留液體，重復(fù)清洗3次；

(4)每孔加入100ul酶標(biāo)二抗，室溫孵育30分鐘后，棄去孔中液體，清洗3次；

(5)每孔加入100ul顯色液，室溫孵育15分鐘，再以加顯色液的相同順序加入100ul終止液終止反應(yīng)；

(6)用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)讀取OD值，以450nm平均吸光值為橫坐標(biāo)，各標(biāo)準(zhǔn)品濃度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出樣本中AMA-M2濃度。