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基于核因子κB易位預(yù)測化合物的毒性的方法與流程

文檔序號:12287023閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種篩選化合物的毒性的體外方法,所述方法包括:

使測試化合物與測試細(xì)胞群接觸,在所述測試細(xì)胞群中核因子(NF)-κB在所述接觸之前未被激活;

在所述接觸之后確定測試群中NF-κB的核定位水平;和

將測試群中NF-κB的核定位水平與未與測試化合物接觸的對照細(xì)胞群中的NF-κB的核定位水平進(jìn)行相比較;

其中相對于對照群,測試群中NF-κB的核定位水平的增加表明測試化合物損傷細(xì)胞和/或誘導(dǎo)促炎反應(yīng)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其中所述NF-κB是NF-κB的p65亞基。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,其中所述NF-κB的p65亞基包含SEQ ID NO:1至4中任一個所示的序列。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,其中所述NF-κB的p65亞基包含SEQ ID NO:5或6所示的序列。

5.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的方法,其中所述測試群和對照群的細(xì)胞是人細(xì)胞。

6.根據(jù)權(quán)利要求1、2和4中任一項(xiàng)所述的方法,其中所述測試群和對照群的細(xì)胞是非人動物細(xì)胞。

7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述的方法,其中所述測試群和對照群的細(xì)胞包含干細(xì)胞。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法,其中所述干細(xì)胞包含胚胎干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞、造血干細(xì)胞、誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞、組織特異性干細(xì)胞或器官特異性干細(xì)胞。

9.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述的方法,其中所述測試群和對照群的細(xì)胞包含體細(xì)胞或衍生自干細(xì)胞的細(xì)胞。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法,其中所述細(xì)胞包含腫瘤細(xì)胞。

11.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法,其中所述細(xì)胞包含原代細(xì)胞。

12.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法,其中所述細(xì)胞包含肝細(xì)胞、腎細(xì)胞、心血管細(xì)胞、中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞、皮膚細(xì)胞、肺細(xì)胞、胰細(xì)胞、消化道細(xì)胞、眼細(xì)胞、耳細(xì)胞、骨髓細(xì)胞或血細(xì)胞。

13.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法,其中所述細(xì)胞包含腎近端小管細(xì)胞。

14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法,其中所述腎近端小管細(xì)胞是人原代腎近端小管細(xì)胞。

15.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法,其中所述細(xì)胞包含來自建立的細(xì)胞系的細(xì)胞。

16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法,其中所述細(xì)胞是HK-2細(xì)胞或LLC-PK1細(xì)胞。

17.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法,其中所述細(xì)胞包含衍生自干細(xì)胞的細(xì)胞,所述干細(xì)胞分化自胚胎干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞、誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞或器官/組織特異性干細(xì)胞。

18.根據(jù)權(quán)利要求17的方法,其中所述細(xì)胞至少部分分化為類肝細(xì)胞、腎細(xì)胞、心血管細(xì)胞、中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞、皮膚細(xì)胞、肺細(xì)胞、胰細(xì)胞、消化道細(xì)胞、生殖細(xì)胞或其前體、眼細(xì)胞、耳細(xì)胞、骨髓細(xì)胞或血細(xì)胞。

19.根據(jù)權(quán)利要求18的方法,其中所述細(xì)胞是腎近端小管樣細(xì)胞。

20.根據(jù)權(quán)利要求1至19中任一項(xiàng)所述的方法,其中所述接觸在約1小時至約16小時、約12小時至約16小時或約30至約36小時或約3天的時間段進(jìn)行。

21.根據(jù)權(quán)利要求1至20中任一項(xiàng)所述的方法,其還包括在所述確定之前,在至多4周的總時間段內(nèi)以規(guī)律的間隔,重復(fù)一次或多次所述接觸,包括其中對于所述接觸的每次發(fā)生,所述接觸進(jìn)行相同時間段。

22.根據(jù)權(quán)利要求1至20中任一項(xiàng)所述的方法,其還包括在至多4周的總時間段內(nèi)以規(guī)律的間隔重復(fù)所述接觸,隨后進(jìn)行一次或多次所述確定,包括其中對于所述接觸的每次發(fā)生,所述接觸進(jìn)行相同時間段。

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