本發(fā)明主要涉及一種肺高血壓病的檢查方法。另外，本發(fā)明還涉及一種用于檢出肺高血壓病的生物標(biāo)記、肺高血壓病的檢查試劑盒。
背景技術(shù)：
：：肺高血壓病是因各種原因而肺動脈的血壓升高的疾病。在WHO等的分類中，被分類為：肺動脈性肺高血壓病(Pulmonaryarterialhypertension(PAH))、左心疾病所致肺高血壓病(Pulmonaryhypertensionowingtoleftheartdisease)、肺疾病和/或低氧導(dǎo)致的肺高血壓病(Pulmonaryhypertensionowingtolungdiseaseand/orhypoxia)、慢性血栓栓塞性肺高血壓病(Chronicthromboembolicpulmonaryhypertension(CTEPH))、及其它的原因不明的復(fù)合因素引起的肺高血壓病(非專利文獻(xiàn)1～5)。在日本，被指定為疑難病(特定疾病)的疾病包括多種，在末期癥狀中，也有時需要肺移植。例如，在肺動脈性肺高血壓病中，產(chǎn)生微小肺動脈的狹窄，由此，肺動脈的血壓異常地升高。微小肺動脈的狹窄認(rèn)為是血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞的異常的增殖或變性引起的。肺動脈性肺高血壓病為未治療時的5年存活率為20％的致死性疾病。早期診斷對循環(huán)器專科醫(yī)生而言也困難，大多在被診斷的時刻已經(jīng)處于晚期。救治重癥患者的手段依然除肺移植以外沒有其它辦法，但受臟器移植提供者數(shù)量限制，等不到移植之時的病例多。許多年青病例迅速地發(fā)展，通過內(nèi)科的多劑并用療法也因右心心力衰竭而喪命的病例連續(xù)不斷。近年來，在日本，患者數(shù)存在增加傾向，但疾病的原因還不能充分地得知。近年來，由于治療方法的進(jìn)步，如果可以對肺高血壓病準(zhǔn)確地進(jìn)行診斷，則可以期待充分的治療效果。特別是如果發(fā)現(xiàn)為初期，則可以期待治療的效果，可以期待預(yù)后的改善。例如，可以在初期的階段發(fā)現(xiàn)肺動脈性肺高血壓病的情況下，通過進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶幚恚?年存活率達(dá)到50％左右。但是，肺高血壓病的患者在初期訴說的自覺癥狀停留在辛勤勞動時的氣喘、倦怠感等非特異的癥狀。因此，醫(yī)師需要主要通過問診來判斷患者具有肺高血壓病的可能性。進(jìn)而，為了準(zhǔn)確地檢查肺高血壓病，需要進(jìn)行右心導(dǎo)管檢查、肺換氣/血流閃爍圖、胸部造影CT等檢查。即，肺高血壓病的檢查需要住院，對患者及醫(yī)療從業(yè)者這兩者而言負(fù)擔(dān)大，現(xiàn)狀即如此。在這種現(xiàn)狀下，期望在門診中主要以篩選目的、可以通過采血等而實(shí)施的、能夠簡便且準(zhǔn)確地檢查肺高血壓病的方法。另外，硒蛋白P(SelenoproteinP)蛋白質(zhì)為含Se的蛋白質(zhì)(selenoproteinfamily)之一，為具有多個硒代半胱氨酸殘基的蛋白質(zhì)。也查明：硒蛋白P蛋白質(zhì)成為2型糖尿病中的胰島素抵抗性的原因之一；在肝細(xì)胞中，來自細(xì)胞外的硒蛋白P蛋白質(zhì)引起的刺激抑制細(xì)胞內(nèi)的AMPK活性(非專利文獻(xiàn)6)。但是，硒蛋白P蛋白質(zhì)、包含其信號路徑在內(nèi)，尚不清楚的方面較多?，F(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)非專利文獻(xiàn)非專利文獻(xiàn)1:日本循環(huán)器學(xué)會：肺高血圧癥治療ガイドライン(肺高血壓病治療指導(dǎo)方針)(2012年改訂版)非專利文獻(xiàn)2:JAmColCardiol2009；54(suppl):S78-84.非專利文獻(xiàn)3:Circulation2009；119:2250-2294.非專利文獻(xiàn)4:EurHeartJ2009；30:2493-2537.非專利文獻(xiàn)5:EuroRespirJ2009；34:1219-1263.非專利文獻(xiàn)6:CellMetabolism2010；12:483-495.非專利文獻(xiàn)7:JAmColCardiol2013；62(25suppl):D34-41.技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：發(fā)明所要解決的課題本發(fā)明的主要課題在于，主要提供一種肺高血壓病的檢查方法；特別是提供一種能夠簡便且準(zhǔn)確地檢查肺高血壓病的方法。另外，本發(fā)明的課題還在于，提供一種用于檢測肺高血壓病的生物標(biāo)記、肺高血壓病的檢查試劑盒。本發(fā)明人為了解決上述課題而進(jìn)行了深入研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：將源自被檢對象的試樣中的硒蛋白P蛋白質(zhì)的濃度作為指標(biāo)，能夠檢查肺高血壓病。本發(fā)明是通過基于所述的見解進(jìn)一步重復(fù)進(jìn)行研究而完成的。即，本發(fā)明包含下述中揭示的方式的發(fā)明。項(xiàng)1、一種肺高血壓病的檢查方法，其以源自被檢對象的試樣中的硒蛋白P蛋白質(zhì)的濃度為指標(biāo)。項(xiàng)2、如第一發(fā)明所述的方法，其包括：[1]測定源自被檢對象的試樣中的硒蛋白P蛋白質(zhì)的濃度的工序；及[2]基于上述[1]的結(jié)果，評價肺高血壓病的有無和/或風(fēng)險的工序。項(xiàng)3、如第二發(fā)明所述的方法，其中，在硒蛋白P蛋白質(zhì)的濃度大于預(yù)先設(shè)定的截?cái)嘀档那闆r下，評價為肺高血壓病和/或存在發(fā)病的風(fēng)險。項(xiàng)4、如第一發(fā)明～第三發(fā)明中任一項(xiàng)所述的方法，其中，源自被檢對象的試樣為血漿。項(xiàng)5、一種用于檢測肺高血壓病的生物標(biāo)記，其包含硒蛋白P蛋白質(zhì)。項(xiàng)6、一種肺高血壓病的檢查試劑盒，其包含用于測定源自被檢對象的試樣中的硒蛋白P蛋白質(zhì)的濃度的單元。項(xiàng)7、一種肺高血壓病的治療方法，其包括下述的工序：(i)將源自被檢對象的試樣中的硒蛋白P蛋白質(zhì)的濃度作為指標(biāo)，進(jìn)行肺高血壓病的檢查的工序；及(ii)對被檢出肺高血壓病的被檢對象進(jìn)行處置的工序，所述處置為用于對肺高血壓病進(jìn)行治療和/或進(jìn)行肺高血壓病的發(fā)展的預(yù)防的處置。發(fā)明效果根據(jù)本發(fā)明，提供一種能夠簡便且準(zhǔn)確地檢查肺高血壓病的方法。本發(fā)明的檢查方法能夠通過檢查患者的血液而進(jìn)行，由于可以通過門診而實(shí)施等理由，對患者及醫(yī)療從業(yè)者這兩者的負(fù)擔(dān)小。根據(jù)本發(fā)明的檢查方法，對肺高血壓病的患者積極地進(jìn)行檢查，其結(jié)果，期待患者可以早期接受有效的治療。附圖說明圖1：利用箱線圖表示肺高血壓病患者(PH、N＝146)及對照患者(Control、N＝19)的血漿中硒蛋白P蛋白質(zhì)的濃度的測定結(jié)果。在肺高血壓病患者的血漿中，硒蛋白P蛋白質(zhì)的濃度(ng/ml)上升。P<0.001圖2：表示源自特發(fā)性肺動脈性肺高血壓病患者的肺血管平滑肌細(xì)胞中的硒蛋白P蛋白質(zhì)的檢測結(jié)果。表示在正常氧壓(normoxia)、低氧壓(hypoxia)及法舒地爾(fasudil)存在下的低氧壓(hypoxia+fasudil)的各自的條件下的、獨(dú)立試行4例的結(jié)果。上段表示全細(xì)胞溶解液(wholecelllysates)中的基于免疫印跡分析的硒蛋白P蛋白質(zhì)的檢測，下段表示條件培養(yǎng)基(conditionedmedium)中的基于免疫印跡分析的硒蛋白P蛋白質(zhì)的檢測。圖3：利用箱線圖表示肺高血壓病患者(PH、n＝203)及對照患者(Control、n＝20)的血漿中硒蛋白P蛋白質(zhì)的濃度的測定結(jié)果。圖4：利用箱線圖表示按照病型分類的肺高血壓病患者的血漿中硒蛋白P蛋白質(zhì)的濃度的測定結(jié)果。圖中的星標(biāo)及圓標(biāo)表示離群值。具體實(shí)施方式1.肺高血壓病的檢查方法肺高血壓病本發(fā)明的檢查方法以肺高血壓病為對象。肺高血壓病包含作為臨床所見可看到上升的肺動脈壓(mPAP、例如25mmHg以上)的疾病。肺高血壓病包含肺動脈性肺高血壓病(Pulmonaryarterialhypertension(PAH))、左心疾病所致肺高血壓病(Pulmonaryhypertensionowingtoleftheartdisease)、肺疾病和/或低氧導(dǎo)致的肺高血壓病(Pulmonaryhypertensionowingtolungdiseaseand/orhypoxia)、慢性血栓栓塞性肺高血壓病(Chronicthromboembolicpulmonaryhypertension(CTEPH))、其它的原因不明的復(fù)合因素引起的肺高血壓病等。作為肺高血壓病的一病態(tài)，可舉出肺動脈性肺高血壓病。作為肺動脈性肺高血壓病的顯著的臨床所見，可舉出：上升的肺動脈壓(mPAP、例如25mmHg以上)和正常的肺動脈楔入壓(右心房壓)(PCWP、例如15mmHg以下)(以上，例如可以通過右心導(dǎo)管檢查進(jìn)行測定。)；沒有看到肺血流分布的異常(例如可以通過肺換氣、血流閃爍圖檢查進(jìn)行測定。)。肺動脈性肺高血壓病是血管內(nèi)皮功能降低、血管平滑肌細(xì)胞增殖、炎癥細(xì)胞浸潤等復(fù)雜地相互作用、肺微小血管的壁肥厚或狹小化(肺血管重塑)進(jìn)展的致死性疾病。早期診斷對循環(huán)器?？漆t(yī)生而言也困難，在被介紹到肺移植實(shí)施設(shè)施的時刻，大多已經(jīng)處于晚期。救治重癥患者的最終手段依然除移植以外沒有其它辦法，但受臟器移植提供者數(shù)量限制，等不到移植之時的病例多。其中，許多特發(fā)性肺動脈性肺高血壓病患者(IdiopathicPAH、IPAH)顯示迅速的發(fā)展，顯示以肺動脈血管平滑肌細(xì)胞的異常增殖為特征的高度的肺動脈重塑，因此，通過內(nèi)科的多劑并用療法也難以控制右心心力衰竭，年輕時喪命的病例連續(xù)不斷。因此，需要在病期進(jìn)展之前早期進(jìn)行診斷及治療。肺動脈性肺高血壓病包含：特發(fā)性肺動脈性肺高血壓病(Idiopathicpulmonaryarterialhypertension(IPAH))、遺傳性肺動脈性肺高血壓病(Heritablepulmonaryarterialhypertension)、藥物/毒物誘發(fā)性肺動脈性肺高血壓病、與其它病態(tài)有關(guān)的肺動脈性肺高血壓病、新生兒持續(xù)性肺高血壓病(persistentpulmonaryhypertensionofnewborn)、結(jié)締組織病(Connectivetissuedisease)、門脈肺高血壓(Portalhypertension、porto-PH)、先天性心臟病(Congenitalheartdiseases、shuntPAH)等病態(tài)。關(guān)于肺動脈性肺高血壓病以外的各肺高血壓病，其病態(tài)是公知的。具體而言，可以參照日本的指導(dǎo)方針(非專利文獻(xiàn)1)及歐美的指導(dǎo)方針(非專利文獻(xiàn)2～5)等的記載。在2013年的尼斯會議中，對肺高血壓病的定義和臨床分類進(jìn)行了修改(本說明書中，稱為“尼斯分類”。)(非專利文獻(xiàn)1、非專利文獻(xiàn)7)。檢查方法本發(fā)明的檢查方法以源自被檢對象的試樣中的硒蛋白P蛋白質(zhì)的濃度為指標(biāo)。本說明書中，“檢查”包含有無肺高血壓病的檢查、及肺高血壓病的風(fēng)險的檢查。優(yōu)選是指有無肺高血壓病的檢查。“風(fēng)險的檢查”包含有無將來罹患肺高血壓病的可能性的檢查、判定?！皺z查”也可以換言為“判定”、“診斷”。試樣、被檢對象在本發(fā)明的檢查方法中，試樣采用從被檢對象中采取的樣本。試樣源自檢查方法的被檢對象。被檢對象沒有特別限定，可例示包含人的哺乳類。作為非人哺乳類，可舉出小鼠、大鼠、犬、貓、牛、綿羊、馬等。本發(fā)明的檢查方法的優(yōu)選的被檢對象為人。在被檢對象為人的情況下，作為被檢對象，可舉出具有辛勤勞動時的氣喘、胸部不適感等肺高血壓病特征性自覺癥狀的患者、優(yōu)選懷疑患有肺高血壓病的患者。在被檢對象為人的情況下，被檢對象的性別、年齡、人種沒有特別限定。在本發(fā)明的優(yōu)選的方式之一中，被檢對象為東洋人(例如日本人、中國人、韓國人等。)，特別是日本人。另外，在本發(fā)明的優(yōu)選的方式之一中，從統(tǒng)計(jì)上患者多的觀點(diǎn)出發(fā)，被檢對象為女性。作為試樣，可以優(yōu)選使用源自被檢對象的血液試樣。在血液試樣的具體例中，例如包含血液(全血)及源自血液的血清、血漿等。血液試樣優(yōu)選為血漿。血漿為從血液中除去了血細(xì)胞成分的部分，例如可以以在使血液不凝固的條件下(例如檸檬酸鈉的存在下。)供于離心分離時的上清液的形式而得到。血液試樣所來源的血管沒有限定?？梢詮捏w循環(huán)的血管(動脈(末梢動脈)、靜脈(末梢靜脈)、毛細(xì)血管。)或肺循環(huán)的血管(肺動脈、肺靜脈、肺毛細(xì)血管。)中進(jìn)行采血。從采血的簡便性的觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選從體循環(huán)的血管、特別是靜脈(末梢靜脈)中進(jìn)行采血。肺循環(huán)的血管可以在右心導(dǎo)管檢查時進(jìn)行采血。本發(fā)明的檢查方法優(yōu)選為一種檢查方法，其包括：[1]測定源自被檢對象的試樣中的硒蛋白P蛋白質(zhì)的濃度的工序；及[2]基于上述[1]的結(jié)果，評價肺高血壓病的有無和/或風(fēng)險的工序。硒蛋白P蛋白質(zhì)的試樣中濃度在本發(fā)明的檢查方法中，以硒蛋白P(SelenoproteinP、SeP)蛋白質(zhì)的試樣中濃度為指標(biāo)。硒蛋白P蛋白質(zhì)為公知的蛋白質(zhì)。人硒蛋白P蛋白質(zhì)為selenoproteinP,plasma,1(SEPP1)基因座所編碼的、含Se的蛋白質(zhì)(selenoproteinfamily)之一，為具有多個硒代半胱氨酸殘基的蛋白質(zhì)。已知主要從肝臟分泌至細(xì)胞外。名稱中的“P”是指“plasma”。已知硒蛋白P蛋白質(zhì)為2型糖尿病中的胰島素抵抗性的原因之一。另一方面，也查明：在肝細(xì)胞中，來自細(xì)胞外的硒蛋白P蛋白質(zhì)引起的刺激抑制細(xì)胞內(nèi)的AMPK活性(非專利文獻(xiàn)6)。但是，硒蛋白P蛋白質(zhì)、包含其信號路徑，尚不清楚的方面較多。特別是不知道與肺高血壓病的關(guān)系。例如，人(Homosapiens)及小鼠(Musmusculus)的硒蛋白P蛋白質(zhì)的氨基酸序列及編碼該氨基酸序列的mRNA的序列在美國生物工學(xué)信息中心(NCBI；NationalCenterforBiotechnologyInformation)提供的基因庫中以下述的檢索號被注冊(注冊多個修訂(revision)的情況下，被理解為是指最新的修訂。)：人硒蛋白P蛋白質(zhì)：NP_005401、NP_001078955、NP_001087195人硒蛋白PmRNA：NM_005410、NM_001085486、NM_001093726小鼠硒蛋白P蛋白質(zhì)：NP_033181、NP_001036078、NP_001036079小鼠硒蛋白PmRNA：NM_009155、NM_001042613、NM_001042614。關(guān)于測定硒蛋白P蛋白質(zhì)的血中濃度的手段，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以適當(dāng)選擇。優(yōu)選例示使用可以特異性地檢測硒蛋白P蛋白質(zhì)的抗體(即與硒蛋白P蛋白質(zhì)特異性地結(jié)合的抗體。)(包含抗體(免疫球蛋白)分子的全長及F(ab)、F(ab')2等片段。)的免疫學(xué)的檢定。作為免疫學(xué)的檢定，可例示ELISA、EIA、免疫印跡等，其中，優(yōu)選進(jìn)行ELISA等可進(jìn)行定量性試驗(yàn)的方法。用于免疫學(xué)的檢定的抗體只要是可以特異性地檢測試樣中的硒蛋白P蛋白質(zhì)的抗體，就沒有特別限定。硒蛋白P蛋白質(zhì)的試樣中濃度的測定也可以使用市售的試劑進(jìn)行。例如，作為利用ELISA測定硒蛋白P蛋白質(zhì)的試樣中濃度的試劑，可以使用市售品。作為市售品的實(shí)例，可舉出HumanSelenoproteinP,SEPP1ELISAKit(Cusabaio公司制、型號CSB-EL021018HU)，但并不限定于此。此外，作為用于檢測硒蛋白P蛋白質(zhì)的抗體，也可以使用與抗硒蛋白P抗體(SANRACRUZ公司制、型號sc-30162)等市售的與硒蛋白P蛋白質(zhì)特異性結(jié)合的抗體。所測定的硒蛋白P蛋白質(zhì)的試樣中濃度可以為絕對值及相對值的任一種。硒蛋白P蛋白質(zhì)的試樣中濃度優(yōu)選測定其絕對值。評價基準(zhǔn)在本發(fā)明的檢查方法中，可以基于試樣中的SelenoproteinP蛋白質(zhì)的濃度測定，評價肺高血壓病的有無和/或風(fēng)險。關(guān)于檢查方法中的評價基準(zhǔn)，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以適當(dāng)選擇。作為評價基準(zhǔn)，可以使用預(yù)先設(shè)定的截?cái)嘀?。例如，在以硒蛋白P蛋白質(zhì)的濃度為指標(biāo)時，在試樣中的硒蛋白P蛋白質(zhì)的濃度大于預(yù)先設(shè)定的截?cái)嘀档那闆r下，可以判定為有肺高血壓病的存在和/或發(fā)病的可能性。上述截?cái)嘀悼梢岳酶鞣N統(tǒng)計(jì)分析方法求出。可例示肺高血壓病中的中央值或平均值、基于ROC曲線分析的值(例如Youden'sindex。)等。也可以設(shè)定多個截?cái)嘀?。在以硒蛋白P蛋白質(zhì)的濃度為指標(biāo)的情況下，例如可以將截?cái)嘀翟O(shè)定為10μg/ml左右的值。予以說明，健康人中的硒蛋白P蛋白質(zhì)的濃度通常在3～8μg/ml左右的范圍內(nèi)。其它的指標(biāo)本發(fā)明的檢查方法可以與其它公知的、或者將來被發(fā)現(xiàn)的肺高血壓病的檢查方法組合。在本發(fā)明的某種方式中，可以設(shè)為包括測定被檢對象的三尖瓣反流壓力階差(TRPG)的工序的檢查方法。TRPG可以通過心臟超聲波檢查進(jìn)行測定。TRGP是指對從心臟中擠出的血液的壓力和對通過瓣膜之后的血液的壓力之差，可以利用心回聲法算出。通常，在TRPG約為50mmHg以上的情況下，可以判定為被檢對象罹患肺高血壓病的可能性高。在本發(fā)明的檢查方法的這種方式中，除TRPG約為50mmHg以上的情況之外，在TRPG約為50mmHg以下、且所測定的檢體中的硒蛋白P蛋白質(zhì)的濃度為預(yù)先設(shè)定的截?cái)嘀狄陨系那闆r下，也可以判定為被檢對象罹患肺高血壓病的可能性高。這樣，對被檢對象的肺高血壓病進(jìn)行檢查。通過本發(fā)明的檢查方法評價為肺高血壓病或存在發(fā)病的風(fēng)險的被檢對象優(yōu)選通過右心導(dǎo)管檢查、肺換氣/血流閃爍圖檢查、胸部CT(計(jì)算機(jī)斷層成像法)檢查、肺動脈造影、光學(xué)相干斷層成像術(shù)(opticalcoherencetomography、OCT)等進(jìn)行肺高血壓病的有無的精密檢查和/或病灶部的確定。進(jìn)而，特別是在通過精密檢查判斷為肺高血壓病的可能性高的情況下，優(yōu)選進(jìn)行以下處置，所述處置為用于治療肺高血壓病和/或預(yù)防疾病的發(fā)展的適當(dāng)?shù)奶幚怼＠?，在肺高血壓病為肺動脈性肺高血壓病的情況下，可舉出內(nèi)皮縮血管肽受體拮抗劑(例如BOZENTAN、安立生坦。)的給藥、前列腺素I2(環(huán)前列腺素)制劑的給藥、磷酸二酯酶5(PDE-5)抑制劑(例如西地那非、他達(dá)那非)的給藥。這些治療法可以單獨(dú)進(jìn)行1種，也可以組合2種以上而進(jìn)行。從治療效果高的觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選并用療法、特別是3種并用的療法。另外，通過本發(fā)明的檢查方法沒有被評價為肺高血壓病或存在發(fā)病的風(fēng)險的被檢對象雖然不需要立刻的對應(yīng)，但是優(yōu)選進(jìn)行充分的追蹤觀察。2.試劑盒本發(fā)明也提供用于檢查肺高血壓病的試劑盒。本發(fā)明的試劑盒包含用于測定源自被檢對象的試樣中的硒蛋白P蛋白質(zhì)的濃度的單元。作為用于測定硒蛋白P蛋白質(zhì)的濃度的單元，可例示用于實(shí)施使用特異性地檢測上述的硒蛋白P蛋白質(zhì)的抗體的免疫學(xué)的檢定等的單元。具體而言，可例示可以特異性地檢測硒蛋白P蛋白質(zhì)的抗體、和/或其它的用于實(shí)施ELISA法、EIA法、免疫印跡法等免疫學(xué)的檢定的試劑。另外，在本發(fā)明的試劑盒中，可以根據(jù)需要含有其它成分。其它成分可舉出例如用于采取試樣的器具(例如注射器。)、陽性對照試樣(例如源自確定為肺高血壓病的患者的試樣。)及陰性對照試樣(例如源自確定不是肺高血壓病的患者(健康人)的試樣。)等，但并不限定于此。也可以包含記錄有用于進(jìn)行上述檢查方法的步驟的文件等。本發(fā)明的試劑盒可以通過按照常規(guī)方法、適當(dāng)具備上述成分而制作。試劑盒的使用方式?jīng)]有特別限定，優(yōu)選用于上述檢查方法。在用于上述檢查方法的情況下，可以容易地進(jìn)行肺高血壓病的檢查。3.治療方法本發(fā)明還提供一種肺高血壓病的治療方法。發(fā)明中所說的“治療”包含肺高血壓病的治療、以及用于癥狀的減輕及防止復(fù)發(fā)的維持療法。本發(fā)明的治療方法包括：(i)將源自被檢對象的試樣中的硒蛋白P蛋白質(zhì)的濃度作為指標(biāo)，進(jìn)行肺高血壓病的檢查的工序；及(ii)對被檢出肺高血壓病的被檢對象進(jìn)行進(jìn)行處置的工序，所述處置為用于對肺高血壓病進(jìn)行治療和/或進(jìn)行肺高血壓病的發(fā)展的預(yù)防的處置。工序(i)進(jìn)行上述“1.”欄中記載的檢查方法。接著，對被檢出肺高血壓病的被檢對象進(jìn)行處置的工序，所述處置為用于對肺高血壓病進(jìn)行治療和/或進(jìn)行肺高血壓病的發(fā)展的預(yù)防的處置(工序(ii))。在工序(i)和工序(ii)之間可以通過心臟導(dǎo)管檢查、血管造影檢查法(血管造影法：包含X射線血管造影檢查法、計(jì)算機(jī)斷層成像(CT)血管造影檢查法、核磁共振(MR)血管造影檢查法等。)等精密檢查進(jìn)行心血管疾病的有無的精密檢查和/或病灶部的確定。用于實(shí)施肺高血壓病的治療和/或心血管疾病的發(fā)展的預(yù)防的處置進(jìn)行公知的適當(dāng)?shù)奶幚怼＠?，在肺高血壓病為肺動脈性肺高血壓病的情況下，可舉出內(nèi)皮縮血管肽受體拮抗劑(例如BOZENTAN、安立生坦。)的給藥、前列腺素I2(環(huán)前列腺素)制劑的給藥、磷酸二酯酶5(PDE-5)抑制劑(例如西地那非、他達(dá)那非)的給藥。這些處置可以單獨(dú)進(jìn)行1種，也可以組合2種以上而進(jìn)行。從治療效果高的觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選并用療法、特別是3種并用的療法。這樣，對肺高血壓病進(jìn)行治療。實(shí)施例以下，基于實(shí)施例等更詳細(xì)地說明本發(fā)明，但本發(fā)明并不受這些實(shí)施例限定。統(tǒng)計(jì)分析及箱線圖的制作使用IBMSPSSStatistics而進(jìn)行。[實(shí)施例1]肺高血壓病的檢查測定肺高血壓病患者及非肺高血壓病患者中的硒蛋白P蛋白質(zhì)的血漿中濃度。設(shè)為測定對象的肺高血壓病患者為被診斷為肺動脈性肺高血壓病的患者。＜患者組＞對從以下的患者組中采取的血液進(jìn)行試驗(yàn)。(i)非肺高血壓病患者(non-PH)組(對照組)：19人(懷疑是心臟疾病而進(jìn)行了包含心臟導(dǎo)管檢查的詳查，但為完全不能發(fā)現(xiàn)病變的健康人組)、及(ii)肺高血壓病患者(PH)組：146人。予以說明，本研究得到東北大學(xué)倫理委員會的認(rèn)可而進(jìn)行，對全部的患者進(jìn)行知情同意，得到承諾而進(jìn)行。＜方法＞從由上述患者組在右心導(dǎo)管檢查時得到的源自末梢靜脈的血液試樣及源自肺動脈的血液試樣中分離血漿，使用HumanSelenoproteinP,SEPP1ELISAKit(Cusabaio公司制、型號CSB-EL021018HU)利用ELISA對硒蛋白P蛋白質(zhì)的血漿中濃度進(jìn)行測定。＜結(jié)果及考察＞將結(jié)果示于圖1。如圖1所示，得知：與非肺高血壓病患者相比，肺高血壓病患者的硒蛋白P蛋白質(zhì)的血漿中濃度顯著地高。[實(shí)施例2]肺高血壓病的檢查與實(shí)施例1同樣地，測定肺高血壓病患者及非肺高血壓病患者中的硒蛋白P蛋白質(zhì)的血漿中濃度。＜患者組＞對從以下的患者組中采取的血液進(jìn)行試驗(yàn)。(i)非肺高血壓病患者(non-PH)組(對照組)：20人、及(ii)肺高血壓病患者(PH)組：183人。肺高血壓病患者的詳情如下所述。結(jié)締組織病(CPAH、尼斯分類第1組4)-1)：25人、慢性血栓栓塞性肺高血壓病(CTEPH、尼斯分類第4組)：51人、特發(fā)性肺動脈性肺高血壓病(IPAH、尼斯分類第1組1))：58人、與肺疾病和/或相伴隨的低氧血癥的肺高血壓病(Lung-PAH、尼斯分類第3組)：10人、與詳細(xì)不明的多因子的機(jī)制相伴隨的肺高血壓病(non-categorized、尼斯分類第5組)：13人、門脈肺高血壓(proto-PH、尼斯分類第1組4)-3)：6人、及先天性心臟病(shuntPAH、尼斯分類第1組4)-4)：20人。予以說明，本研究得到東北大學(xué)倫理委員會的認(rèn)可而進(jìn)行，對全部的患者進(jìn)行知情同意，得到承諾而進(jìn)行。＜方法＞與實(shí)施例1同樣地操作，從由上述患者組取得的血液試樣中分離血漿，測定硒蛋白P蛋白質(zhì)的血漿中濃度。＜結(jié)果及考察＞將結(jié)果示于圖3及圖4。圖3表示經(jīng)測定的肺高血壓病患者的全體的結(jié)果，圖4表示肺高血壓的各病型的結(jié)果。得知：不取決于肺高血壓病的病型，在全部的病型的肺高血壓病患者中，與非肺高血壓病患者相比，硒蛋白P蛋白質(zhì)的血漿中濃度顯著地高。[參考例1]觀察特發(fā)性肺動脈性肺高血壓病(IPAH)患者的肺血管平滑肌(PulmonaryArterySmoothMuscleCells、PASMC)(以下，也稱為IPAH-PASMC。)中的、對低氧壓刺激的反應(yīng)性。＜材料＞由特發(fā)性肺動脈性肺高血壓病患者的肺血管平滑肌、根據(jù)文獻(xiàn)OgawaA,NakamuraK,MatsubaraH,FujioH,IkedaT,KobayashiK,MiyazakiI,AsanumaM,MiyajiK,MiuraD,KusanoKF,DateH,OheT.Circulation.2005；112:1806-1812.建立原代培養(yǎng)細(xì)胞系統(tǒng)。特發(fā)性肺動脈性肺高血壓病患者的肺血管平滑肌從外徑為1.5mm以下的肺動脈中進(jìn)行離析。＜培養(yǎng)條件＞IPAH-PASMC在添加有10％FBS(胎牛血清、終濃度)的D-MEM培養(yǎng)基中，在溫度37℃的恒溫恒濕條件下，在95％的大氣和5％的二氧化碳中，按照常規(guī)方法進(jìn)行培養(yǎng)。試驗(yàn)中使用70～80％匯合的、繼代第4代～第7代(Passage4to7)的細(xì)胞。＜試驗(yàn)方法＞將用于試驗(yàn)的細(xì)胞在正常氧壓(normoxia、氧濃度21％)、低氧壓(hypoxia、氧濃度2％)及法舒地爾(fasudil)存在下的低氧壓(Hydroxyfasudil濃度：10μM)各個條件下培養(yǎng)24小時。培養(yǎng)后，對各試樣制備全細(xì)胞溶解液(wholecelllysates)及條件培養(yǎng)基(conditionedmedium)，通過免疫印跡分析檢測硒蛋白P蛋白質(zhì)。＜結(jié)果及考察＞將結(jié)果示于圖2。得知：源自特發(fā)性肺動脈性肺高血壓病患者的肺血管平滑肌細(xì)胞在低氧壓下與正常氧濃度壓下相比，硒蛋白P蛋白質(zhì)向細(xì)胞外(培養(yǎng)基中)的分泌亢進(jìn)。另外，在Rho激酶(ROCK)抑制劑即法舒地爾(fasudil)的存在下，即使在低氧條件下也沒有觀察到硒蛋白P蛋白質(zhì)的分泌的亢進(jìn)。以上的實(shí)驗(yàn)結(jié)果暗示：在源自肺動脈性肺高血壓病患者的肺動脈血管平滑肌細(xì)胞中，通過低氧刺激，Rho激酶依賴性地分泌硒蛋白P蛋白質(zhì)。當(dāng)前第1頁1 2 3 當(dāng)前第1頁1 2 3