用于研究生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的方法和酶標(biāo)儀相關(guān)專(zhuān)利申請(qǐng)本專(zhuān)利申請(qǐng)要求2012年3月14日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)枮?1/610,647和同樣在2012年3月14日提交的瑞士專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)枮?0365/12的優(yōu)先權(quán)。這兩個(gè)建立優(yōu)先權(quán)的申請(qǐng)的全部?jī)?nèi)容通過(guò)明確的參考全文納入本申請(qǐng)。技術(shù)領(lǐng)域本發(fā)明涉及一種用于在酶標(biāo)儀中研究生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的方法。這種方法典型地包括：通過(guò)酶標(biāo)儀的接收裝置來(lái)接收孔內(nèi)含有生物細(xì)胞的至少一個(gè)微孔板；使所述接收裝置和含有生物細(xì)胞的所述微孔板的孔相對(duì)于所述酶標(biāo)儀的測(cè)量裝置定位；通過(guò)至少一個(gè)所述測(cè)量裝置來(lái)檢測(cè)至少一個(gè)積分信號(hào)(例如微孔板的一個(gè)孔中所有樣品的發(fā)光)。另外，所述方法還包括：使所述接收裝置和含有生物細(xì)胞的所述微孔板的孔相對(duì)于所述酶標(biāo)儀的動(dòng)作源定位；利用至少一個(gè)所述動(dòng)作源在至少一個(gè)所述動(dòng)作源和微孔板的特定孔內(nèi)的生物細(xì)胞之間引起相互作用從而引起或產(chǎn)生可測(cè)信號(hào)；檢測(cè)在所述微孔板的特定孔內(nèi)的生物細(xì)胞內(nèi)或其上由所述動(dòng)作源引起或產(chǎn)生的至少一個(gè)積分信號(hào)(例如微孔板的一個(gè)孔中所有樣品的熒光或吸光度)。

背景技術(shù)：
細(xì)胞或它們的代謝產(chǎn)物的熒光的測(cè)量可以從現(xiàn)有技術(shù)中知道。因此，EP2253983A2公開(kāi)了一種用于樣品的激發(fā)熒光的光譜檢測(cè)的掃描顯微鏡，所述樣品被激光激發(fā)，然后被供給到被分成不同波長(zhǎng)范圍的散射光柵和多陽(yáng)極光電倍增管。文件ITMI912510A1公開(kāi)了一種所謂的酶標(biāo)儀，其中微孔板的孔內(nèi)的樣品被偏振光照射，由此引發(fā)的同樣的偏振熒光由光電倍增管來(lái)檢測(cè)。利用非偏振激發(fā)光來(lái)操作的酶標(biāo)儀也長(zhǎng)時(shí)間已知。一些文件也是已知的(例如，JP58062542A或JP11037923A)，其公開(kāi)了通過(guò)數(shù)碼相機(jī)來(lái)獲取微孔板的孔的底部上的顆?；蛏锛?xì)胞的結(jié)合圖案的圖像，所述數(shù)碼相機(jī)包括成像CCD(電荷耦合器件)或CMOS(互補(bǔ)金屬氧化物半導(dǎo)體)傳感器。微孔板孔內(nèi)細(xì)胞發(fā)光的測(cè)量可以從，例如，DE10236029A1中了解。公開(kāi)了一種分配器和CCD相機(jī)，其中利用所述分配器通過(guò)在微孔板孔內(nèi)的樣品上添加液體來(lái)引發(fā)發(fā)光，利用所述CCD相機(jī)通過(guò)光學(xué)系統(tǒng)來(lái)給穿過(guò)微孔板孔的透明底部的發(fā)光拍照。從WO2006/031537A2可以知道一種用于研究微孔板內(nèi)的生物細(xì)胞的方法和裝置。所述微孔板在目標(biāo)區(qū)域內(nèi)被照射，來(lái)自所述目標(biāo)區(qū)域的光被引導(dǎo)至陣列檢測(cè)器，所述陣列檢測(cè)器將所述目標(biāo)區(qū)域內(nèi)微孔板孔內(nèi)的分散目標(biāo)檢測(cè)為部分圖像，并將所述部分圖像合并形成微孔板孔的整個(gè)圖像。在這種情況下，可以檢測(cè)細(xì)胞微陣列或無(wú)序的生物細(xì)胞。設(shè)置為計(jì)數(shù)室的特殊載玻片內(nèi)的生物細(xì)胞的計(jì)數(shù)已經(jīng)從利用光學(xué)顯微鏡計(jì)數(shù)血細(xì)胞的領(lǐng)域知道很長(zhǎng)時(shí)間了。不同制造商的自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)系統(tǒng)或“細(xì)胞計(jì)數(shù)器”也是已知的。這些細(xì)胞計(jì)數(shù)器的特點(diǎn)尤其在于具有生物細(xì)胞的計(jì)數(shù)室可以被插入到計(jì)數(shù)系統(tǒng)，所述計(jì)數(shù)系統(tǒng)自動(dòng)聚焦計(jì)數(shù)光學(xué)器件，計(jì)數(shù)所述生物細(xì)胞并顯示計(jì)數(shù)結(jié)果。典型地，在研究微孔板內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的實(shí)驗(yàn)室中，產(chǎn)生了由光或電引起的發(fā)光，所述發(fā)光利用光電倍增管或半導(dǎo)體光電倍增管來(lái)測(cè)量或利用成像相機(jī)來(lái)成像。為了解釋測(cè)量結(jié)果或圖像，通過(guò)光學(xué)顯微鏡來(lái)研究所述微孔板，并確定所述生物細(xì)胞是否還在正常生理狀態(tài)，或者它們是否具有異常形態(tài)或者甚至已經(jīng)死亡。在市場(chǎng)上還可以得到一種細(xì)胞測(cè)量裝置(IsoCyte激光掃描細(xì)胞儀，分子裝置(MolecularDevices)公司，森尼韋爾，加利福尼亞州，美國(guó))，其利用激光束掃描微孔板孔內(nèi)的生物細(xì)胞，同時(shí)利用一個(gè)或多個(gè)光電倍增管來(lái)檢測(cè)由所述激光束產(chǎn)生的熒光或散射信號(hào)，確認(rèn)并計(jì)數(shù)孔內(nèi)出現(xiàn)的生物細(xì)胞并產(chǎn)生掃描的孔的圖像。通過(guò)圖像處理，每個(gè)圖像內(nèi)的單個(gè)細(xì)胞得以確認(rèn)，并列出它們的活性?？變?nèi)所有細(xì)胞的結(jié)果可以合并在一起。發(fā)明目的和概述本發(fā)明的目的是提出一種用于研究微孔板內(nèi)生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的替代方法和一種用于進(jìn)行所述方法的合適裝置。根據(jù)這里公開(kāi)的特征的第一方面，該目的通過(guò)一種用于研究酶標(biāo)儀內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的方法來(lái)解決。所述方法包括以下步驟：a)通過(guò)酶標(biāo)儀的接收裝置來(lái)接收孔內(nèi)含有生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的至少一個(gè)微孔板；b)使所述接收裝置和含有生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的所述微孔板的孔相對(duì)于所述酶標(biāo)儀的測(cè)量裝置定位；和c)通過(guò)至少一個(gè)所述測(cè)量裝置來(lái)檢測(cè)所述微孔板的特定孔內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)或其上的至少一個(gè)積分信號(hào)。根據(jù)本發(fā)明，所述方法的特征在于：利用所述酶標(biāo)儀的照明光源來(lái)透照微孔板的特定孔內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物，利用所述酶標(biāo)儀的成像相機(jī)來(lái)生成微孔板的這些特定孔內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的透射圖像，利用處理器來(lái)將檢測(cè)到的每個(gè)積分信號(hào)與微孔板的對(duì)應(yīng)孔內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的圖像比較，并與這些生物細(xì)胞的成像數(shù)目、附著、融合或形態(tài)進(jìn)行關(guān)聯(lián)。根據(jù)本文公開(kāi)的特征的第二方面，該目的通過(guò)一種用于根據(jù)本發(fā)明用來(lái)研究生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的方法的酶標(biāo)儀來(lái)解決。在這里，所述酶標(biāo)儀包括：a)接收裝置，用于接收孔內(nèi)含有生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的至少一個(gè)微孔板，并使孔內(nèi)含有生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的所述微孔板相對(duì)于所述酶標(biāo)儀的測(cè)量裝置定位；和b)至少一個(gè)檢測(cè)裝置，用于檢測(cè)，在微孔板的特定孔內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)或其上存在或者引起或者產(chǎn)生的至少一個(gè)積分信號(hào)。根據(jù)本發(fā)明，所述酶標(biāo)儀的特征在于：還包括用于照明的照明光源，用于獲取微孔板的這些特定孔內(nèi)的細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的圖像的成像相機(jī)，和處理器，所述處理器被設(shè)置用于將檢測(cè)到的每個(gè)積分信號(hào)與微孔板的對(duì)應(yīng)孔內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的圖像進(jìn)行比較并把這些積分信號(hào)與這些生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的成像數(shù)目、附著、融合或形態(tài)相關(guān)聯(lián)。根據(jù)本發(fā)明的所述方法或者根據(jù)本發(fā)明的所述酶標(biāo)儀的進(jìn)一步發(fā)展和根據(jù)本發(fā)明的進(jìn)一步特征也在這里公開(kāi)了。根據(jù)本發(fā)明的方法或者根據(jù)本發(fā)明的裝置的優(yōu)點(diǎn)包括：-迄今為止，需要兩個(gè)不同裝置，酶標(biāo)儀和成像顯微鏡，來(lái)將在酶標(biāo)儀中細(xì)胞參數(shù)的定量測(cè)量和用于這些細(xì)胞培養(yǎng)物的狀態(tài)的定性檢查的顯微圖像相結(jié)合?，F(xiàn)在本發(fā)明使得在相同的裝置內(nèi)能夠完成這兩個(gè)互補(bǔ)研究。-迄今為止，具有細(xì)胞培養(yǎng)物的微孔板必須從酶標(biāo)儀中取出并轉(zhuǎn)移到顯微鏡上。這個(gè)麻煩的步驟必需由操作者來(lái)完成，并且在這些研究方法之間額外地需要一定的時(shí)間延遲。現(xiàn)在本發(fā)明的研究能夠在單個(gè)裝置內(nèi)自動(dòng)結(jié)合這兩個(gè)互補(bǔ)研究，并且是在特定微孔板孔內(nèi)的積分信號(hào)的檢測(cè)和微孔板孔的成像之間最短的可能時(shí)間差內(nèi)。-迄今為止，為了將微孔板從酶標(biāo)儀轉(zhuǎn)移到顯微鏡，敏感的細(xì)胞培養(yǎng)物頻繁地暴露于當(dāng)時(shí)的環(huán)境條件，或必須麻煩地與這些條件隔離。本發(fā)明可以更好地在含有細(xì)胞培養(yǎng)物的微孔板孔內(nèi)維持受控氣氛，而同時(shí)進(jìn)行這些生物細(xì)胞的所有定量和定性研究。-根據(jù)本發(fā)明，在適合進(jìn)行根據(jù)本發(fā)明的所述方法的所述酶標(biāo)儀中，集成了具有成像性能的模塊，從而位于例如微孔板孔的底部上的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物可以利用顯微分辨率來(lái)可視化。-在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，根據(jù)本發(fā)明的所述酶標(biāo)儀被設(shè)置為多模式讀數(shù)計(jì)，允許將所選擇的微孔板孔內(nèi)的例如熒光、發(fā)光、吸光度、阻抗或阻抗變化等積分信號(hào)的檢測(cè)與這些微孔板孔的顯微成像幾乎任意的和優(yōu)選地自動(dòng)的結(jié)合。-通過(guò)測(cè)定微孔板孔內(nèi)的細(xì)胞數(shù)目，可以測(cè)定平均細(xì)胞活性，從而測(cè)定所述微孔板孔內(nèi)變化的細(xì)胞活性和變化的細(xì)胞數(shù)目的差別。-通過(guò)測(cè)定微孔板孔的底部上的細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的附著或者固定以及形態(tài)，可以得到關(guān)于細(xì)胞的生理狀態(tài)的結(jié)論。-積分信號(hào)，例如熒光、發(fā)光、吸光度、阻抗或阻抗變化，用于細(xì)胞活性的測(cè)量。這些信號(hào)的強(qiáng)度變化取決于細(xì)胞活性的變化和細(xì)胞數(shù)目的變化(例如取決于細(xì)胞繁殖)。細(xì)胞數(shù)目的測(cè)定利用細(xì)胞數(shù)目提供積分信號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)化，從而公正地、自動(dòng)地得到細(xì)胞活性。測(cè)定微孔板孔的底部上的細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的融合可以得到被細(xì)胞培養(yǎng)物覆蓋的底部表面與微孔板孔的仍無(wú)覆蓋底部表面的比例。該比例再次允許利用細(xì)胞生長(zhǎng)將積分信號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)化與具有粘附細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)物相關(guān)聯(lián)，從而公正地、自動(dòng)地得到細(xì)胞活性。附圖說(shuō)明根據(jù)本發(fā)明，用于研究酶標(biāo)儀中的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的方法和對(duì)應(yīng)的酶標(biāo)儀通過(guò)示意圖來(lái)詳細(xì)的解釋?zhuān)@些示意圖表示所選擇的實(shí)施例，而并不試圖限定本發(fā)明的范圍。在附圖中：圖1表示根據(jù)第一實(shí)施例將微孔板插入樣品室時(shí)酶標(biāo)儀的垂直剖面，所述樣品室優(yōu)選設(shè)置為可以以避光方式封閉的腔；圖2表示根據(jù)第二實(shí)施例檢測(cè)所選擇的微孔板孔內(nèi)的積分信號(hào)時(shí)或樣品室內(nèi)的微孔板孔的顯微成像時(shí)酶標(biāo)儀的垂直剖面，所述樣品室優(yōu)選設(shè)置為可以以避光和氣密方式封閉的隔離室；圖3表示根據(jù)第三實(shí)施例檢測(cè)樣品室中所選擇的微孔板孔內(nèi)的積分信號(hào)時(shí)酶標(biāo)儀的垂直剖面，所述樣品室優(yōu)選設(shè)置為可以以避光和氣密方式封閉的隔離室；圖4表示具有附著到孔底部的典型電極和附著到孔壁的典型電極接頭的微孔板孔的平面圖；圖5表示通過(guò)微孔板的孔的透照的光程的圖示，其中：圖5A表示具有透射光線(xiàn)束的路徑的常規(guī)透照；圖5B表示具有透射光線(xiàn)束的路徑的本發(fā)明的透照；圖5C表示具有透射光線(xiàn)的路徑的常規(guī)透照?qǐng)D5D表示具有透射光線(xiàn)的路徑的本發(fā)明的透照；圖6表示透照時(shí)孔的圖片，其中：圖6A表示常規(guī)照射的結(jié)果；和圖6B表示本發(fā)明的照射的結(jié)果；和圖7表示圖6的圖片中貫穿所述孔的整個(gè)直徑的強(qiáng)度的分布；其中圖7A表示常規(guī)照射時(shí)的強(qiáng)度分布；圖7B表示本發(fā)明照射時(shí)的強(qiáng)度分布；圖8表示圖7A和圖7B的兩幅圖在各自情況下照射的標(biāo)準(zhǔn)化后的比較；本發(fā)明的詳細(xì)說(shuō)明圖1表示根據(jù)第一實(shí)施例將微孔板2插入樣品室12時(shí)酶標(biāo)儀1的垂直剖面，所述樣品室12優(yōu)選設(shè)置為可以以避光方式封閉的腔。所述酶標(biāo)儀1，其尤其適用于根據(jù)本發(fā)明的所述方法，包括接收裝置4，用于接收孔3內(nèi)含有生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的至少一個(gè)微孔板2。所述接收裝置4優(yōu)選設(shè)置為可以從所述酶標(biāo)儀的樣品室12縮回到一定程度從而至少一個(gè)微孔板2可以用手或微孔板處理機(jī)器人(都沒(méi)有畫(huà)出)插入所述接收裝置4或從那里取出。所述接收裝置4已經(jīng)部分插入這里，因?yàn)樘貏e地一個(gè)微孔板2正在插入到所述酶標(biāo)儀1中。在插入或取出微孔板時(shí)，翼片18優(yōu)選打開(kāi)，其在關(guān)閉狀態(tài)優(yōu)選以避光方式封閉所述樣品室12，從而沒(méi)有影響所述研究的光可以從周?chē)ㄟ^(guò)所述樣品室12。除了接收至少一個(gè)微孔板2，所述接收裝置4還用于將孔3內(nèi)含有生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的微孔板2相對(duì)于所述酶標(biāo)儀1的動(dòng)作源5’，5”，5”’和測(cè)量裝置6，7，8定位。這里所描述的酶標(biāo)儀1進(jìn)一步包括至少一個(gè)動(dòng)作源5’，5”，5”’，用于在至少一個(gè)所述動(dòng)作源5’，5”，5”’和微孔板2的特定孔3內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物之間引起相互作用，并引起或產(chǎn)生可測(cè)信號(hào)。這些動(dòng)作源對(duì)于每個(gè)本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)都是已知的，并且優(yōu)選地選自包含用于在這些微孔板2的孔3內(nèi)的生物細(xì)胞內(nèi)或其上激發(fā)熒光的光源5’的組。其它本身已知的動(dòng)作源優(yōu)選地選自包含用于透照所述微孔板(2)的孔(3)內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的光源5’的組中。這些光源選自，例如，包含弧光燈、閃光燈、白熾燈(例如鹵素?zé)?、激光器、激光二極管和發(fā)光二極管(LEDs)的組。用于激發(fā)熒光的相應(yīng)波長(zhǎng)和相應(yīng)熒光體和它們的發(fā)射特性對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)也是已知的，并根據(jù)應(yīng)用來(lái)選擇。用于檢測(cè)吸光度的細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的非侵入性透照和所用的光源對(duì)于每個(gè)本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)也是熟知的。其它的本身已知的動(dòng)作源優(yōu)選地選自包含電源5”和阻抗測(cè)量裝置的組，所述阻抗測(cè)量裝置用于測(cè)量阻抗或阻抗變化，所述阻抗或阻抗變化是所述微孔板2的孔3內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的附著或重排的函數(shù)。這些動(dòng)作源，優(yōu)選是電通量按照正弦函數(shù)在20到100,000Hz范圍內(nèi)變化的交流電源，所述交流電源包含初始電阻，對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是已知的，例如，從Giaever和Keese的著作中(Micromotionofmammaliancellsmeasuredelectrically(“電測(cè)量哺乳動(dòng)物細(xì)胞微動(dòng)”)，PNAS1991第88卷:7896-7900)，其全文納入本發(fā)明。優(yōu)選使用的是具有特定孔3的微孔板2，孔的底部16至少部分地設(shè)置有電極17’，17”，其中所述電極17’，17”優(yōu)選設(shè)置為可以與所述酶標(biāo)儀1的對(duì)應(yīng)電源5”接觸。為了所述接觸，電極接頭23’，23”可以附著到孔壁的內(nèi)側(cè)，電極17’，17”被設(shè)置為以這種方式與所述交流電源的接觸傳感器27，即所述阻抗測(cè)量裝置5”，相接觸。本身已知的類(lèi)似動(dòng)作源優(yōu)選地選自包含用于在所述微孔板2的孔3內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)或其上引起發(fā)光的液體源5”’的組。所述液體源5”’優(yōu)選自包含用于例如向所述微孔板2的特定孔3內(nèi)的細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物注射引發(fā)劑的單注射器或多注射器。使用引起發(fā)光的試劑的這種液體源5”’或注射器和由例如細(xì)胞或它們的代謝產(chǎn)物所引起的發(fā)光的波長(zhǎng)對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是已知的。另外，例如終止劑或營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)通過(guò)這些注射器可以加入到微孔板2的孔3內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物上，從而影響細(xì)胞生長(zhǎng)或細(xì)胞增殖。根據(jù)本發(fā)明，所述微孔板1還包括至少一個(gè)測(cè)量裝置5”,6,7,8，用于檢測(cè)由所述動(dòng)作源5’，5”，5”’在所述微孔板2的特定孔3內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)或其上引起或產(chǎn)生的至少一個(gè)積分信號(hào)。所述測(cè)量裝置優(yōu)選地選自下組：光電倍增管、光電二極管、光電二極管陣列、雪崩二極管(avalanchediode)和相敏鎖相放大器(phase-sensitivelock-inamplifier)。所述測(cè)量裝置6,8和光源5’或者其光學(xué)輸入和/或輸出優(yōu)選地通過(guò)光導(dǎo)28例如光纖或光纖束耦合。圖1中所示的樣品室12設(shè)置為避光。根據(jù)本發(fā)明，所述酶標(biāo)儀1的特征尤其在于還包括用于照明的照明光源9和用于獲取所述微孔板2的特定孔3內(nèi)的細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的圖像的成像相機(jī)10。尤其優(yōu)選為，所述酶標(biāo)儀1包括光學(xué)顯微鏡19和與其光學(xué)偶合、用于生成所述微孔板2的特定孔3內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的顯微圖像的成像相機(jī)10。根據(jù)本發(fā)明，尤其優(yōu)選的是酶標(biāo)儀1，其中集成了具有成像性能的模塊，從而位于例如微孔板孔的底部的生物細(xì)胞和細(xì)胞培養(yǎng)物可以利用顯微分辨率來(lái)可視化。所述成像模塊包括照明單元，其允許使用不同照明和成像模式，例如亮場(chǎng)照明、暗場(chǎng)照明和斜射照明。允許記錄相差或熒光圖像的其它模式也是可行的。所述圖像優(yōu)選地由具有數(shù)碼相機(jī)的光學(xué)顯微鏡19來(lái)記錄，數(shù)碼相機(jī)安裝有CMOS或CCD傳感器。優(yōu)選地成像系統(tǒng)還包括自動(dòng)聚焦裝置，其中在使用中等孔徑來(lái)達(dá)到中等分辨率時(shí)，所述接收裝置4可以在所述成像相機(jī)10的光軸20的方向上移動(dòng)。單個(gè)細(xì)胞和細(xì)胞培養(yǎng)物的表示是優(yōu)選的，即使更小的顆?；蚣?xì)胞結(jié)構(gòu)也可以成像。尤其優(yōu)選的是這些生物細(xì)胞的數(shù)目的成像，特別注意的是單個(gè)細(xì)胞的附著，即細(xì)胞附著到孔3的內(nèi)表面，和這些細(xì)胞的形態(tài)。特別優(yōu)選的是微孔板2的孔3內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)物的附著、融合或形態(tài)的成像，其中在微孔板孔3的內(nèi)表面上的細(xì)胞培養(yǎng)物的融合這一術(shù)語(yǔ)產(chǎn)生了被細(xì)胞培養(yǎng)物覆蓋的表面與可以被細(xì)胞占據(jù)的這些微孔板孔的內(nèi)表面的仍無(wú)覆蓋表面的比例。根據(jù)本發(fā)明，所述酶標(biāo)儀1的特征還在于包括內(nèi)部的或集成的處理器11’(參見(jiàn)圖2和圖3)，或者被設(shè)置為可以連接到外部處理器11”(參見(jiàn)圖1)。因此，這樣一種處理器11’可以是集成到所述酶標(biāo)儀1的電子控制器內(nèi)部的微處理器?？蛇x的，還可以使用個(gè)人電腦提供的處理器11”。重要的是所述處理器11’,11”被設(shè)置用于將檢測(cè)到的每個(gè)積分信號(hào)與微孔板2的相應(yīng)孔3內(nèi)的生物細(xì)胞的圖像進(jìn)行比較，并把這些積分信號(hào)與這些生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的成像數(shù)目、附著、融合或者形態(tài)進(jìn)行關(guān)聯(lián)。優(yōu)選地，這種處理器11’,11”制成可以通過(guò)運(yùn)行合適的圖像處理軟件和運(yùn)行合適的信號(hào)處理軟件來(lái)進(jìn)行這項(xiàng)工作。在所述酶標(biāo)儀的幫助下進(jìn)行的用于研究生物細(xì)胞的方法包括以下步驟：利用所述酶標(biāo)儀1的接收裝置來(lái)接收孔3內(nèi)含有生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的至少一個(gè)微孔板2。通常只在所述接收裝置4中插入具有由生物分子科學(xué)學(xué)會(huì)(SBS)和美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)(ANSI)指定的標(biāo)準(zhǔn)微孔板的尺寸的微孔板。然而，與附圖中的圖示不一樣的是，可以利用所述酶標(biāo)儀1的相同或不同的接收裝置4來(lái)接收和傳送或定位兩個(gè)或更多的微孔板。在這種情況下，所述接收裝置4優(yōu)選設(shè)置為框，所述框包括通過(guò)安裝了彈簧的加壓裝置來(lái)把接收的微孔板2保持在限定位置的止動(dòng)部件。這里尤其優(yōu)選的是可以由手或微孔板處理機(jī)器人的機(jī)械手帶到用于插入或取出微孔板的開(kāi)口位置的加壓裝置。優(yōu)選地，所述接收裝置4通過(guò)馬達(dá)可以在X方向移動(dòng)，即優(yōu)選地水平且與所述翼片18呈直角。使所述接收裝置4和含有生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的所述微孔板2的孔3相對(duì)于酶標(biāo)儀1的動(dòng)作源5’,5”,5”’定位。由于所述微孔板2在所述接收裝置4上的優(yōu)選限定位置，每個(gè)孔3都可以特別地和單獨(dú)地與所述動(dòng)作源5’,5”,5”’的動(dòng)作軸21對(duì)齊。優(yōu)選地，所述接收裝置4通過(guò)馬達(dá)可以在X方向，即優(yōu)選地水平且與所述翼片18呈直角(參見(jiàn)圖1，其對(duì)于圖1-3都是代表性的)，和Y方向，即優(yōu)選地水平且與所述翼片18平行，移動(dòng)，從而微孔板的每個(gè)孔3在每次定位時(shí)都可以在這兩個(gè)方向預(yù)先確定的區(qū)域內(nèi)定位。優(yōu)選地，這些在X和Y方向上的移動(dòng)由所述酶標(biāo)儀1的中央控制單元22來(lái)監(jiān)測(cè)和控制。在至少一個(gè)所述動(dòng)作源5’,5”,5”’和所述微孔板2的特定孔3內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物之間引起相互作用來(lái)引起或產(chǎn)生可測(cè)信號(hào)。根據(jù)優(yōu)選的預(yù)先指定的協(xié)議，當(dāng)定位所述微孔板2的特定孔3時(shí)，所述酶標(biāo)儀1的所述中央控制單元22啟動(dòng)相應(yīng)的動(dòng)作源5’,5”,5”’，這樣相應(yīng)動(dòng)作源5’,5”,5”’的動(dòng)作軸21遇到所述微孔板2的特定孔3。優(yōu)選地，當(dāng)執(zhí)行根據(jù)本發(fā)明的所述方法時(shí)，至少一個(gè)動(dòng)作源5’,5”,5”’選自下組：-用于在這些微孔板2的孔3內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)或其上激發(fā)熒光的光源5’；-用于透照這些微孔板2的孔3內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的光源5’；-用于測(cè)量阻抗或阻抗變化的電源5”，所述阻抗或阻抗變化是這些微孔板2的孔3內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的附著或重排的函數(shù)；和-用于在這些微孔板2的孔3內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)或其上引起發(fā)光的液體源5”’。這種情況下，光源5’優(yōu)選地選自包含弧光燈、閃光燈、白熾燈(例如鹵素?zé)?、激光器、激光二極管和發(fā)光二極管(LED)的組，所述電源5”優(yōu)選為電通量按照正弦函數(shù)在20到100,000Hz范圍內(nèi)變化的交流電源，其中所述交流電源包括輸出電阻。所述液體源5”’優(yōu)選地選自包括單注射器和多注射器以及相關(guān)的試劑池和輸送泵的組。在引起相互作用期間或者直接在其后，使所述接收裝置4和含有生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的所述微孔板2的孔3相對(duì)于酶標(biāo)儀1的測(cè)量裝置6,7,8定位，在所述微孔板2的特定孔3內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)或其上由所述動(dòng)作源5’,5”,5”’引起或產(chǎn)生的至少一個(gè)積分信號(hào)由至少一個(gè)所述測(cè)量裝置5”,6,7,8來(lái)檢測(cè)：-在插進(jìn)所述酶標(biāo)儀1的至少一個(gè)微孔板2的特定孔3內(nèi)測(cè)量熒光的情況下，優(yōu)選用于檢測(cè)熒光和記錄積分信號(hào)的相應(yīng)測(cè)量裝置8選自包括光電倍增管，光電二極管，光電二極管陣列和雪崩二極管的組。優(yōu)選地，所述測(cè)量裝置8具有與用于激發(fā)熒光的所述光源5’的動(dòng)作軸21相同的光軸21’；所述光源5’和所述測(cè)量裝置8或者其光學(xué)輸入和光學(xué)輸出(參見(jiàn)圖1)優(yōu)選設(shè)置在插入的微孔板2的上方(頂部激發(fā)/頂部讀出)或者所述光源5’和所述測(cè)量裝置8設(shè)置在插入的微孔板2的下方(底部激發(fā)/底部讀出)。動(dòng)作軸21和光軸21’的微小偏差是允許的。-在插進(jìn)所述酶標(biāo)儀1的至少一個(gè)微孔板2的特定孔3內(nèi)測(cè)量發(fā)光的情況下，優(yōu)選用于檢測(cè)發(fā)光和記錄積分信號(hào)的相應(yīng)測(cè)量裝置7選自包括光電倍增管，光電二極管，光電二極管陣列和雪崩二極管的組。優(yōu)選地，所述測(cè)量裝置7具有與用于引起發(fā)光的所述液體源5”’的動(dòng)作軸21不同的光軸21”；所述液體源5”’優(yōu)選設(shè)置在插入的微孔板2的上方，測(cè)量裝置7也優(yōu)選設(shè)置在插入的微孔板2的上方。-在插進(jìn)所述酶標(biāo)儀1的至少一個(gè)微孔板2的特定孔3內(nèi)測(cè)量吸光度的情況下，優(yōu)選用于檢測(cè)吸光度和記錄積分信號(hào)的相應(yīng)測(cè)量裝置6選自包括光電倍增管，光電二極管，光電二極管陣列和雪崩二極管的組。優(yōu)選地，所述測(cè)量裝置6具有與用于激發(fā)熒光的所述光源5’的動(dòng)作軸21相同的光軸21”’；所述光源5’優(yōu)選設(shè)置在插入的微孔板2的上方，而所述測(cè)量裝置6或其光學(xué)輸入(參見(jiàn)圖1)優(yōu)選設(shè)置在插入的微孔板2的下方。-在插進(jìn)所述酶標(biāo)儀1的至少一個(gè)微孔板2的特定孔內(nèi)測(cè)量由生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的附著或重排引起的阻抗或阻抗變化和檢測(cè)相應(yīng)的積分信號(hào)的情況下，測(cè)量裝置優(yōu)選地集成在所述酶標(biāo)儀1的電源5”內(nèi)，并包括相敏鎖相放大器。電源5”和阻抗測(cè)量裝置5”優(yōu)選設(shè)置在插入的微孔板2的上方。用于研究酶標(biāo)儀1中生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的本發(fā)明方法的特征一方面在于所述微孔板2的特定孔3內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物利用所述酶標(biāo)儀1的所述照明光源9來(lái)照明，其中這些特定孔3內(nèi)的積分信號(hào)事先或此后由測(cè)量裝置6,7,8來(lái)測(cè)量。用于研究酶標(biāo)儀1中生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的根據(jù)本發(fā)明的方法的特征另一方面在于所述微孔板2的這些特定孔3內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的圖像由所述酶標(biāo)儀1的成像相機(jī)10來(lái)生成。然而，特別地，用于研究酶標(biāo)儀1中生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的根據(jù)本發(fā)明的方法的特征在于通過(guò)處理器11’、11”來(lái)把每個(gè)檢測(cè)到的積分信號(hào)與事先或隨后記錄的所述微孔板2的相應(yīng)孔3內(nèi)的生物細(xì)胞的圖像進(jìn)行比較，并與這些生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的成像數(shù)目、附著、融合或形態(tài)進(jìn)行關(guān)聯(lián)。圖2表示根據(jù)第二實(shí)施例檢測(cè)微孔板2的所選孔3內(nèi)的積分信號(hào)時(shí)或樣品室12內(nèi)的微孔板孔3的顯微成像時(shí)酶標(biāo)儀1的垂直剖面，所述樣品室優(yōu)選設(shè)置為可以以避光和氣密方式封閉的隔離室。然而在圖1的第一實(shí)施例中，只有避免干擾的環(huán)境光具有優(yōu)先級(jí)，第二實(shí)施例除了避免干擾的環(huán)境光外，還特別為微孔板2的孔3內(nèi)的細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物提供一種特別合適的氣氛。所述酶標(biāo)儀1優(yōu)選包括控制器13，通過(guò)所述控制器可以在所述酶標(biāo)儀1的設(shè)置為隔離室的樣品室12中產(chǎn)生一種受控氣氛，其中選自包括氧氣、氮?dú)?、二氧化碳和一氧化碳的組的氣體的濃度可以調(diào)節(jié)或維持在特定范圍值內(nèi)。所述控制器13可以集成在所述酶標(biāo)儀1中，或提供有控制器，或者設(shè)置在酶標(biāo)儀上。例如，在所述樣品室12中設(shè)置用于檢測(cè)和控制在插入所述酶標(biāo)儀1的微孔板2上含有細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的孔3周?chē)臍怏w氛圍的氧含量的O2傳感器和用于檢測(cè)和控制該氣體氛圍的二氧化碳含量的CO2傳感器。優(yōu)選地，提供有氣體入口24和氣體出口25，其穿過(guò)樣品室12的熱絕緣壁或底部，并連接到或者可以連接到所述控制器13。可以在所述樣品室12中設(shè)置風(fēng)扇(未示出)或其它混合裝置從而移動(dòng)和混合和分布樣品室中的氣體。在使用分開(kāi)的控制器13時(shí)，其優(yōu)選直接連接到所使用氣體的所需壓力缸。用于所需的氣體連接的相應(yīng)的閥門(mén)和節(jié)流閥安裝在所述分開(kāi)的控制器13中(未示出)?？蛇x地，可以在氣壓缸上使用閥門(mén)和節(jié)流閥，其中這些閥門(mén)優(yōu)選設(shè)置為電控磁閥(無(wú)電流的封閉式)。未在圖2中示出的其它東西為控制器13的控制元件、顯示元件和電源，所述控制器是分開(kāi)的或設(shè)置在酶標(biāo)儀1內(nèi)或者是酶標(biāo)儀1本身。所述控制單元優(yōu)選包括具有相應(yīng)軟件的計(jì)算機(jī)28；這種情況下，所述計(jì)算機(jī)28可以連接到所述酶標(biāo)儀1的中央計(jì)算機(jī)29(參見(jiàn)圖1)，是可以連接的(例如容納在分開(kāi)的外殼17’中)或者可以集成到所述酶標(biāo)儀1的所述中央計(jì)算機(jī)29中(未示出)?？梢蕴峁┑?dú)?N2)和/或二氧化碳(CO2)用于置換所述樣品室12中的環(huán)境空氣，其中提供有合適的壓力缸。這些壓力缸通常安裝有本身已知的控制閥和節(jié)流閥來(lái)為這些氣體調(diào)節(jié)需要的輸送壓力?？蛇x的，這些處理氣體也可從其它來(lái)源獲得(例如從服務(wù)線(xiàn)路)。除了氮?dú)夂投趸?結(jié)合所述樣品室12中對(duì)應(yīng)的氣體傳感器)，其它氣體也可以用于產(chǎn)生在所述樣品室中通常普遍的氣氛的限定組分。注意到可能適用的防范措施的話(huà)，其它氣體，例如稀有氣體或惰性氣體(例如氬氣)或者活性氣體或有毒氣體(例如氧氣，一氧化碳，硫化氫或二氧化硫)，也可以通過(guò)至少一個(gè)進(jìn)氣口24引入到所述酶標(biāo)儀1的所述樣品室12中，從而在插入所述酶標(biāo)儀1的微孔板2的孔3上或周?chē)a(chǎn)生一種已知組分的氣體氛圍。優(yōu)選地，所述控制器配置有足夠的氣體線(xiàn)路和控制閥從而可能產(chǎn)生具有多種氣體成分的多種復(fù)雜氣體組合物。作為合適的CO2傳感器的代表，需要提到來(lái)自位于瑞典代爾斯布SE-82060的SenseAirAB公司的CO2傳感器CO2ICB,產(chǎn)品型號(hào):033-9-0001。作為合適的O2傳感器的代表，需要提到來(lái)自位于瑞士蘇黎世CH-8052的PewatronAG公司的O2傳感器PewatronFCX-MEP2-F-CH氧氣模塊。優(yōu)選地，所述樣品室12設(shè)置成配置有空氣冷卻系統(tǒng)的隔離室，所述空氣冷卻系統(tǒng)通過(guò)供給和排出線(xiàn)路連接到所述樣品室12。額外的，所述控制器13也可以設(shè)置為這樣一種空氣冷卻系統(tǒng)，包括冷卻元件，例如以珀?duì)柼男问?。在尤其?yōu)選的酶標(biāo)儀1中，可以在設(shè)置成隔離室的所述樣品室12中產(chǎn)生一種受控氣氛，其由包括溫度，相對(duì)濕度和總壓力的組中選擇的每個(gè)參數(shù)可以調(diào)節(jié)或維持在特定范圍值。優(yōu)選地，相對(duì)濕度在末端濕區(qū)內(nèi)維持或調(diào)節(jié)，這樣在所述樣品室的表面沒(méi)有水蒸汽冷凝的風(fēng)險(xiǎn)，也沒(méi)有細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物變干的風(fēng)險(xiǎn)。在本發(fā)明中，細(xì)胞培養(yǎng)物，生物細(xì)胞聚集物或從中分離或以其它方式得到的單個(gè)細(xì)胞都稱(chēng)為細(xì)胞，這些細(xì)胞包括微生物和真菌以及動(dòng)物和植物真核細(xì)胞。在圖2中，一個(gè)孔3特定地位于用于發(fā)光測(cè)量的第二測(cè)量裝置7的光軸21”的區(qū)域中。另一個(gè)孔3特定地位于所述成像相機(jī)10和照明光源9的光軸20的區(qū)域中。同一個(gè)微孔板2的另一個(gè)孔3特定地位于用于吸光度測(cè)量的第一測(cè)量裝置6的光軸21”’的區(qū)域中。然而在圖1中示出了具有附屬光學(xué)顯微鏡19的兩個(gè)成像相機(jī)10和照明光源9，第二實(shí)施例僅有一個(gè)合適安裝的成像相機(jī)10。圖3表示根據(jù)第三實(shí)施例檢測(cè)樣品室12中所選擇的微孔板孔3內(nèi)的積分信號(hào)時(shí)酶標(biāo)儀1的垂直剖面，所述樣品室優(yōu)選設(shè)置為可以以避光和氣密方式封閉的隔離室。根據(jù)本發(fā)明的所述酶標(biāo)儀1的第三實(shí)施例具有外殼14，整個(gè)酶標(biāo)儀1和所有的動(dòng)作源5’，5”，5”’和測(cè)量裝置5”，6，7，8都安裝在其中。另外，和設(shè)置為隔離室的所述樣品室12一起，中央控制單元22也安裝在外殼14內(nèi)，前兩個(gè)實(shí)施例也是如此。在圖3中，一個(gè)孔3特定地位于安裝有雙管注射器的液體源5”’(在圖1和圖2中也有)的動(dòng)作軸21的區(qū)域中。另一個(gè)孔3特定地位于用于發(fā)光測(cè)量的第二測(cè)量裝置7的光軸21”的區(qū)域中。液體源5”’的至少一個(gè)注射器的局部設(shè)置優(yōu)選盡可能地接近所述第二測(cè)量裝置7的光軸21”，這樣以在注射(引起發(fā)光)和發(fā)光檢測(cè)之間盡可能最小的時(shí)間差來(lái)測(cè)量發(fā)光。具有光學(xué)顯微鏡19的所述成像相機(jī)10和所述照明光源9的光軸20位于接近所述第二測(cè)量裝置7的光軸21”。所述酶標(biāo)儀1優(yōu)選地包括屏幕15，用于顯示操作狀態(tài)、測(cè)量結(jié)果、顯微圖像，并用于顯示檢測(cè)到的積分信號(hào)與所述微孔板(2)的各個(gè)孔3中的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的相應(yīng)圖像相比較的結(jié)果以及這些生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的成像數(shù)目、附著、融合或者形態(tài)的比例。所述屏幕15優(yōu)選設(shè)置為觸敏屏幕或觸屏，這樣它還可以作為界面用于調(diào)整或改變所述酶標(biāo)儀1的操作參數(shù)和處理和儲(chǔ)存產(chǎn)生的結(jié)果。圖4表示具有附著到孔底部16的典型電極17’,17”和附著到孔壁的典型電極接頭23’,23”的微孔板孔3的平面圖。這些電極17’,17”和電極接頭23’,23”優(yōu)選地由金或金合金制成，可以通過(guò)濺射或其它合適的涂層方法施加到孔底部16或內(nèi)表面和優(yōu)選為孔邊緣26。特別地，盡可能遠(yuǎn)地延伸到孔邊緣26的電極接頭23’,23”可以通過(guò)利用所述接收裝置4向所述電源5”移動(dòng)所述微孔板2來(lái)相對(duì)簡(jiǎn)單地連接到所述電源5”的所述接觸傳感器27，優(yōu)選在垂直的Z方向(參見(jiàn)圖1中的箭頭，其代表了圖1-3)使用相應(yīng)的馬達(dá)驅(qū)動(dòng)，直到所述電源5”的所述接觸傳感器27與所述電極接頭23’,23”接觸。因此優(yōu)選地，帶有包含生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的微孔板2的接收裝置4在至少一個(gè)移動(dòng)方向上定位時(shí)移動(dòng)，其中所述移動(dòng)方向選自包括三維坐標(biāo)系統(tǒng)中的X，Y和Z方向的組。為了在至少一個(gè)所述動(dòng)作源5’,5”,5”’和微孔板2的孔3內(nèi)的生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物之間引起相互作用，同時(shí)也為了利用至少一個(gè)所述測(cè)量裝置6,7,8或者所述電源5”來(lái)檢測(cè)相應(yīng)的積分信號(hào)，帶有包含生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的微孔板2的接收裝置4可優(yōu)選在至少一個(gè)移動(dòng)方向上移動(dòng)，其中該移動(dòng)方向選自包括三維坐標(biāo)系統(tǒng)中的X，Y和Z方向的組。圖4表示典型電極17’,17”的選擇，電極的材料對(duì)生物細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物的附著，融合或形態(tài)的影響盡可能小，最好沒(méi)有。例如，如圖所示，電極17’,17”可以設(shè)置成相同的或不同的，完全覆蓋表面或者僅覆蓋區(qū)域或陣列。相同的參考數(shù)字和標(biāo)記表示類(lèi)似的特征，即使沒(méi)有對(duì)所有附圖和所有參考數(shù)字進(jìn)行描述。對(duì)已經(jīng)描述和/或表示的特征的任何組合屬于本發(fā)明的范圍。在本發(fā)明中，尤其優(yōu)選的熒光測(cè)量是熒光強(qiáng)度的測(cè)量；時(shí)間分辨熒光測(cè)量；熒光偏振的測(cè)量和熒光壽命的測(cè)量。除了測(cè)量發(fā)光強(qiáng)度，本發(fā)明尤其感興趣的是通過(guò)發(fā)光對(duì)細(xì)胞和細(xì)胞培養(yǎng)物進(jìn)行動(dòng)力學(xué)測(cè)量和發(fā)光動(dòng)力學(xué)的檢測(cè)。圖5表示通過(guò)微孔板2的孔3的透照的光程的圖示。圖5A表示具有透射光線(xiàn)束29的路徑的常規(guī)透照。這種用于亮視野顯微術(shù)的典型照明被稱(chēng)為科勒照明。LED作為光源5’使用，它的光29被集光透鏡31收集并在聚光透鏡32的焦面上成像。所述聚光透鏡聚焦樣品平面中的光29并用高亮度照射小的樣品區(qū)域，樣品區(qū)域在所述相機(jī)10的CCD或CMOS芯片35上成像，通過(guò)使用物鏡34來(lái)提高放大率。光場(chǎng)光圈(luminousfiledaperture)33限定所述孔3的所述樣品平面內(nèi)的照明區(qū)域，并實(shí)現(xiàn)將光和熱輻射對(duì)樣品的負(fù)荷減到最小以及將雜散光減到最小的功能。放置在所述光源5’之后的孔徑光闌30限定所述聚光透鏡32和所述孔3的所述樣品平面之間的照明光錐29的數(shù)值孔徑。由于孔徑光闌30的小開(kāi)口，所述照明光錐29顯示出小的張角。然而，由于孔徑光闌30的大開(kāi)口，所述照明光錐29顯示出大的張角。通常，所述孔徑光闌30設(shè)置在聚光透鏡32的焦面內(nèi)。而在所示的實(shí)施例中，所述孔徑光闌30設(shè)置在所述光源的平面內(nèi)，這相對(duì)于光學(xué)圖像來(lái)說(shuō)被認(rèn)為是等效的。所述孔徑光闌30的所示設(shè)置使得采用機(jī)動(dòng)光圈輪(未示出)成為可能，所述機(jī)動(dòng)光圈輪包括具有不同尺寸和形狀的多個(gè)孔徑光闌30。傳統(tǒng)的顯微樣品薄且是二維的，并且位于兩個(gè)玻璃板(顯微載玻片和蓋玻片)之間，與此相反，照明光29在到達(dá)位于孔3的底部的樣品平面之前需要穿透整個(gè)液體體積。由于粘附效應(yīng)，液體表面非常彎曲，即形成半月板，其作用像發(fā)散透鏡。圖5C表示具有透射光線(xiàn)29的路徑的常規(guī)透照。當(dāng)使用小開(kāi)口的孔徑光闌30時(shí)(參見(jiàn)圖5A)，通常照射由所述物鏡34成像的樣品區(qū)域的遠(yuǎn)離中心的區(qū)域的邊界光束向外彎曲，不會(huì)照射到孔底部的遠(yuǎn)離中心的區(qū)域或者如圖所示，不能被所述物鏡34捕獲并被所述成像芯片35記錄。因此，在得到的圖像中，產(chǎn)生了向外側(cè)的較大強(qiáng)度的降低。這種強(qiáng)度降低只能部分地通過(guò)連續(xù)圖像處理來(lái)在數(shù)學(xué)上補(bǔ)償。造成的強(qiáng)度降低導(dǎo)致對(duì)在所述孔的遠(yuǎn)離中心的區(qū)域的細(xì)胞的融合的測(cè)定或計(jì)數(shù)不太可靠。圖5B表示具有透射光線(xiàn)束29的路徑的本發(fā)明的透照。這種具有高數(shù)值孔徑的透照的設(shè)置與用于常規(guī)照射的設(shè)置相同(參見(jiàn)圖5A)，除了所述孔徑光闌30的開(kāi)口尺寸以外。這里，所述孔徑光闌30的開(kāi)口尺寸顯著地增大從而增大所述照明光錐29的張角。圖5D表示具有透射光線(xiàn)的路徑29的本發(fā)明的透照。所述照明光錐29的邊界光束以較大角度照射在液體的彎曲表面上，它們經(jīng)過(guò)向外側(cè)的微弱偏差，因此它們也能稍稍照射孔底部的邊界區(qū)域，這樣光29可能進(jìn)入所述相機(jī)10的物鏡34并被所述成像芯片35檢測(cè)。這導(dǎo)致相當(dāng)弱的強(qiáng)度梯度。這種對(duì)照甚至在孔3的遠(yuǎn)離中心的區(qū)域中更好，現(xiàn)在，在所述孔的遠(yuǎn)離中心的區(qū)域中的細(xì)胞的融合的可靠測(cè)定或計(jì)數(shù)也成為可能。圖6表示透照時(shí)孔3的圖片。這里，含有細(xì)胞培養(yǎng)物的一個(gè)孔的合在一起的圖像顯示為馬賽克。其中，圖像的亮度取決于曝光時(shí)間。每個(gè)圖像的亮度通過(guò)使用圖像軟件在其對(duì)比度上進(jìn)行了優(yōu)化。在所述孔3的底部上的整體亮度分布導(dǎo)致在單個(gè)圖像的接觸位置有亮度梯度。圖6A表示常規(guī)照射的結(jié)果。單個(gè)圖像利用小孔徑光闌30記錄(參見(jiàn)圖5A和圖5C)，朝向邊界的亮度降低是明顯的。圖6B表示本發(fā)明的照射的結(jié)果。相同的孔3利用大孔徑光闌30照射(參見(jiàn)圖5B和圖5D)。明顯的，直到孔邊界仍有可評(píng)價(jià)的亮度值。圖7表示圖6的圖片中貫穿所述孔(參見(jiàn)亮線(xiàn))的整個(gè)直徑的強(qiáng)度的分布。其表示了貫穿兩個(gè)馬賽克的強(qiáng)度橫截面。這些梯度是由于單個(gè)圖像的曝光時(shí)間的差異造成的。圖7A表示利用小孔徑光闌30(參見(jiàn)圖5A和圖5C)的常規(guī)照射時(shí)的強(qiáng)度分布。可以發(fā)現(xiàn)，在遠(yuǎn)離中心的區(qū)域的常規(guī)照射中，只能達(dá)到非常低的強(qiáng)度值，這位于相機(jī)噪聲的范圍內(nèi)。圖7B表示具有大數(shù)值孔徑30(參見(jiàn)圖5B和圖5D)的本發(fā)明照射時(shí)的強(qiáng)度分布。很明顯看出，形成的梯度非常弱。一個(gè)圖像與另一個(gè)圖像的強(qiáng)度梯度非常小，這是因?yàn)橥ㄟ^(guò)補(bǔ)償曝光時(shí)間，整體亮度差異比較弱。圖8表示圖7A和圖7B的兩幅圖在各自情況下照射的標(biāo)準(zhǔn)化后的比較。為了直接比較常規(guī)成像和本發(fā)明的成像的結(jié)果，曝光時(shí)間的差異已被標(biāo)準(zhǔn)化。在此圖中，橫坐標(biāo)表示孔底部的位置，間隔為1mm，縱坐標(biāo)為以對(duì)數(shù)刻度表示的強(qiáng)度值(灰度值)。虛線(xiàn)表示常規(guī)照射，粗線(xiàn)表示利用大孔徑光闌的本發(fā)明的照射。在利用大孔徑光闌的本發(fā)明的照射中，朝向孔邊界的強(qiáng)度的下降接近約20倍。相反的，在正常的、常規(guī)的照射中，朝向孔邊界的強(qiáng)度的下降接近約500倍。在利用大孔徑光闌的照射中，這導(dǎo)致在邊界區(qū)域也有可用的信號(hào)，而在正常照射時(shí)是不可能的，如圖所示。具有1-3mm的開(kāi)口的孔徑光闌30被視為小數(shù)值孔徑，而具有5-9mm的開(kāi)口的孔徑光闌30被視為大數(shù)值孔徑。在大數(shù)值孔徑中，尤其優(yōu)選具有9mm的開(kāi)口直徑的孔徑光闌30。參考列表1酶標(biāo)儀2微孔板3孔4接收裝置5’,5”,5”’動(dòng)作源5’光源5”電源；阻抗測(cè)量裝置5”’液體源6用于吸光度測(cè)量的第一測(cè)量裝置7用于發(fā)光測(cè)量的第二測(cè)量裝置8用于熒光測(cè)量的第二測(cè)量裝置9照明光源10成像相機(jī)11’內(nèi)部處理器11”外部處理器12樣品室13控制器14外殼15屏幕16孔底部17’,17”電極18翼片19光學(xué)顯微鏡2010的光軸21動(dòng)作軸21’8的光軸21’7的光軸21”6的光軸22中央處理單元23’,23”電極接頭24氣體入口25氣體出口26孔邊緣27接觸傳感器28光導(dǎo)29光，光線(xiàn)，光線(xiàn)束30孔徑光闌31集光透鏡32聚光透鏡33光場(chǎng)光圈34相機(jī)物鏡35CCD，CMOS芯片