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用于研究生物細胞或細胞培養(yǎng)物的方法和酶標儀與流程

文檔序號:12926835閱讀:來源:國知局
用于研究生物細胞或細胞培養(yǎng)物的方法和酶標儀與流程

技術特征:
1.一種用于研究酶標儀(1)中生物細胞或細胞培養(yǎng)物的方法,其中,所述方法包括:a)通過所述酶標儀(1)的接收裝置(4)接收孔(3)內含有粘附生物細胞或細胞培養(yǎng)物的至少一個微孔板(2);b)使所述接收裝置(4)和含有生物細胞或細胞培養(yǎng)物的所述微孔板(2)的所述孔(3)中的特定孔相對于所述酶標儀(1)的測量裝置(5”,6,7,8)的軸(21,21’,21”,21”’)定位;和c)通過至少一個所述測量裝置(5”,6,7,8)檢測所述微孔板(2)的所述特定孔內的生物細胞或細胞培養(yǎng)物中或其上的至少一個積分信號;其中:d)使用所述接收裝置(4)將所述微孔板(2)的所述特定孔相對于所述酶標儀(1)的照明光源(9)的軸(20)定位;e)利用所述酶標儀(1)的照明光源(9)透照所述微孔板(2)的所述特定孔內的所述粘附生物細胞或細胞培養(yǎng)物;f)利用所述酶標儀(1)的成像相機(10)生成由所述照明光源(9)透照的所述微孔板(2)的所述特定孔內的所述生物細胞或細胞培養(yǎng)物的亮場、暗場、或相差圖像;和g)利用處理器(11’,11”)將所檢測到的每個積分信號與所述微孔板(2)的對應特定孔內的所述生物細胞或細胞培養(yǎng)物的圖像進行比較,并與所述粘附生物細胞的成像融合進行關聯(lián)。2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述接收裝置(4)和含有所述生物細胞或細胞培養(yǎng)物的所述微孔板(2)的所述特定孔相對于所述酶標儀(1)的動作源(5’,5”,5”’)的軸(21)定位,并在至少一個所述動作源(5’,5”,5”’)和所述微孔板(2)的所述特定孔內的生物細胞或細胞培養(yǎng)物之間引起相互作用從而引起或生成所述積分信號。3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于,所述至少一個動作源(5’,5”,5”’)選自下組:-用于在所述微孔板(2)的所述特定孔內的生物細胞或細胞培養(yǎng)物內或其上激發(fā)熒光的光源(5’);-用于透照所述微孔板(2)的所述特定孔內的生物細胞或細胞培養(yǎng)物的光源(5’);-用于測量阻抗或阻抗變化的電源(5”),所述阻抗或阻抗變化是所述微孔板(2)的所述特定孔內的生物細胞或細胞培養(yǎng)物的附著或重排的函數;和-用于在所述微孔板(2)的所述特定孔內的生物細胞或細胞培養(yǎng)物內或其上引起發(fā)光的液體源(5”’)。4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述積分信號選自下組:-插進所述酶標儀(1)的所述微孔板(2)的所述特定孔內的生物細胞或細胞培養(yǎng)物內或其上激發(fā)的熒光;-插進所述酶標儀(1)的所述微孔板(2)的所述特定孔內的生物細胞或細胞培養(yǎng)物內或其上引發(fā)或存在的發(fā)光;-由插進所述酶標儀(1)的所述微孔板(2)的所述特定孔內的生物細胞或細胞培養(yǎng)物引起的吸光度;和-由插進所述酶標儀(1)的所述微孔板(2)的所述特定孔內的生物細胞或細胞培養(yǎng)物的附著或重排引起的阻抗或阻抗變化。5.根據權利要求3所述的方法,其特征在于,所述光源(5’)選自包含弧光燈、閃光燈、白熾燈、激光器、激光二極管和發(fā)光二極管(LED)的組。6.根據權利要求3所述的方法,其特征在于,所述電源(5”)為電通量按照正弦函數在20到100,000Hz范圍內變化的交流電源,其中所述交流電源包括輸出電阻。7.根據權利要求3所述的方法,其特征在于,所述液體源(5”’)選自包含單注射器和多注射器的組。8.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,用于檢測所述積分信號的所述測量裝置(6,7,8)選自下組:光電倍增管、光電二極管、光電二極管陣列、雪崩二極管和相敏鎖相放大器。9.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,在定位時所述接收裝置(4)在至少一個移動方向上移動,所述接收裝置帶有包含生物細胞或細胞培養(yǎng)物的所述微孔板(2),其中所述移動方向選自包括三維坐標系統(tǒng)中的X、Y和Z方向的組。10.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,在所述處理器(11’,11”)中運行圖像處理軟件,從而檢測單個生物細胞;和其中,在所述處理器(11’,11”)中運行信號處理軟件,從而用所述特定孔中檢測到的所述積分信號的強度除以檢測到的所述生物細胞的數目。11.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,含有生物細胞或細胞培養(yǎng)物并且被所述接收裝置(4)接收的所述微孔板(2)的所述特定孔在所述酶標儀(1)的避光樣品室(12)中研究。12.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,含有生物細胞或細胞培養(yǎng)物并且被所述接收裝置(4)接收的所述微孔板(2)的所述特定孔暴露于所述酶標儀(1)的樣品室(12)中的受控氣氛中,所述樣品室設置為隔離室。13.根據權利要求11所述的方法,其特征在于,所接收的具有含生物細胞或細胞培養(yǎng)物的所述特定孔的微孔板(2)至少在執(zhí)行步驟b)到f)期間由所述接收裝置(4)保持在所述酶標儀(1)的所述樣品室(12)中。14.根據權利要求12所述的方法,其特征在于,所接收的具有含生物細胞或細胞培養(yǎng)物的所述特定孔的微孔板(2)至少在執(zhí)行步驟b)到f)期間由所述接收裝置(4)保持在所述酶標儀(1)的所述樣品室(12)中。15.根據權利要求13所述的方法,其特征在于,在設置為隔離室的所述樣品室(12)內利用所述酶標儀(1)的所述照明光源(9)透照所述微孔板(2)的所述特定孔內的所述生物細胞或細胞培養(yǎng)物,并且所述微孔板(2)的所述特定孔內的生物細胞或細胞培養(yǎng)物通過光學顯微鏡(19)由所述成像相機(10)來記錄。16.根據權利要求14所述的方法,其特征在于,在設置為隔離室的所述樣品室(12)內利用所述酶標儀(1)的所述照明光源(9)透照所述微孔板(2)的所述特定孔內的所述生物細胞或細胞培養(yǎng)物,并且所述微孔板(2)的所述特定孔內的生物細胞或細胞培養(yǎng)物通過光學顯微鏡(19)由所述成像相機(10)來記錄。17.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,為了對用所述酶標儀(1)的所述照明光源(9)透照的所述生物細胞或細胞培養(yǎng)物成像,使用包含具有大數值孔徑的孔徑光闌(30)的光學顯微鏡(19)。18.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,a)到f)的所有步驟都在單個裝置內自動進行。19.一種酶標儀(1),包括:a)接收裝置(4),用于接收具有含粘附生物細胞或細胞培養(yǎng)物的孔(3)的至少一個微孔板(2),并使所述具有含生物細胞或細胞培養(yǎng)物的所述孔(3)中的特定孔的所述微孔板(2)相對于所述酶標儀(1)的測量裝置(5”,6,7,8)的軸(21,21’,21”,21”’)定位;和b)至少一個測量裝置(5”,6,7,8),用于檢測在所述微孔板(2)的所述特定孔內的生物細胞或細胞培養(yǎng)物內或其上存在或引起或產生的至少一個積分信號;其中,所述酶標儀(1)還包括用于透照的具有軸(20)的照明光源(9)和用于對所述微孔板(2)的所述特定孔內的所述細胞或細胞培養(yǎng)物進行亮場、暗場或相差成像的成像相機(10),和其中,所述酶標儀(1)包括內部處理器(11’)或者設置為可以連接到外部處理器(11”),所述處理器(11’,11”)被設置用于將所檢測到的每個積分信號與所述微孔板(2)的對應特定孔內的生物細胞或細胞培養(yǎng)物的亮場、暗場或相差圖像進行比較,和用于把所述積分信號與所述生物細胞的成像融合相關聯(lián)。20.根據權利要求19所述的酶標儀(1),包括至少一個動作源(5’,5”,5”’),用于在至少一個所述動作源(5’,5”,5”’)和所述微孔板(2)的所述特定孔內的生物細胞或細胞培養(yǎng)物之間引起相互作用,和用于引起或產生可測信號。21.根據權利要求19所述的酶標儀(1),包括設置為避光和氣密,并被設置為隔離室的樣品室(12),和包括控制裝置(13),用于控制被設置為隔離室的所述樣品室(12)內的氣體組分、溫度和相對濕度中的至少一種。22.根據權利要求20所述的酶標儀(1),其特征在于,所述至少一個動作源(5’,5”,5”’)選自下組:-用于在所述微孔板(2)的所述特定孔內的生物細胞或細胞培養(yǎng)物內或其上激發(fā)熒光的光源(5’);-用于透照所述微孔板(2)的所述特定孔內的生物細胞或細胞培養(yǎng)物的光源(5’);-用于測量阻抗或阻抗變化的電源(5”),所述阻抗或阻抗變化是所述微孔板(2)的所述特定孔內的生物細胞或細胞培養(yǎng)物的附著或重排的函數;-用于在所述微孔板(2)的所述特定孔內的生物細胞或細胞培養(yǎng)物內或其上引起發(fā)光的液體源(5”’)。23.根據權利要求19所述的酶標儀(1),其特征在于,所述至少一個測量裝置(6,7,8)選自下組:光電倍增管、光電二極管、光電二極管陣列、雪崩二極管和相敏鎖相放大器。24.根據權利要求23所述的酶標儀(1),包括至少一個具有特定孔的微孔板(2),所述孔的孔底部(16)至少部分地由電極(17’,17”)覆蓋,其中所述電極(17’,17”)被設置為可以與電源(5”)相接觸。25.根據權利要求19所述的酶標儀(1),包括光學顯微鏡(19)和與其光耦合的成像相機(10),用于生成所述微孔板(2)的所述特定孔內的生物細胞或細胞培養(yǎng)物的顯微亮場、暗場或相差圖像。26.根據權利要求25所述的酶標儀(1),其特征在于,所述光學顯微鏡(19)包含具有大數值孔徑的孔徑光闌(30)。
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