專利名稱：食品中水溶性偶氮染料快速檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及食品安全檢測(cè)領(lǐng)域，尤其涉及一種食品中水溶性偶氮染料快速檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
國(guó)內(nèi)批準(zhǔn)使用的色素主要有天然色素和合成色素兩類，其中允許使用的合成色素包括胭脂紅、日落黃和莧菜紅等低毒偶氮染料。合理地使用食用色素能使食品色澤鮮艷誘人，令人食欲大振，然而在利益的驅(qū)使下，不法商販超范圍濫用合成色素甚至違法使用工業(yè)染料，不斷爆發(fā)“蘇丹紅”、“染色饅頭”等食品安全事件。目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)食品中禁用、限用偶氮染料及工業(yè)色素的快速檢測(cè)方法較少，很多色素使用不符合標(biāo)準(zhǔn)的食品無法被扼殺在生產(chǎn)領(lǐng)域，因此建立相關(guān)快速檢測(cè)方法至關(guān)必要?，F(xiàn)有技術(shù)中，關(guān)于食品中偶氮染料快速測(cè)定的研究大部分是基于著色能力定性、層析分離、光譜吸收等理論基礎(chǔ)建立的，針對(duì)的是脂溶性偶氮染料，檢測(cè)方法主要包括:
1)用環(huán)已烷等有機(jī)溶劑萃取樣品中脂溶性色素，酸性條件下高錳酸鉀氧化天然色素，還原劑鹽酸羥胺除去過量氧化劑，然后再根據(jù)處理前后有機(jī)層顏色能否保持作為陽(yáng)性判定依據(jù)；
2)純凈水萃取樣品色素，聚酰胺或羊毛制成的吸附薄片酸性條件下進(jìn)行吸附，純凈水凈化后用氨水乙醇溶出，與木纖維制成的顯色薄片對(duì)折，根據(jù)顯色與否作為陽(yáng)性判定的依據(jù)；
3)將紡織樣品參照GB/T17592-2006進(jìn)行還原處理后，甲基叔丁醚提取脫色，再在室溫下用亞硝酸重氮化-偶聯(lián)顯色，根據(jù)有無顏色進(jìn)行陽(yáng)性判定。對(duì)于檢測(cè)方法I)，在現(xiàn)有的技術(shù)(專利申請(qǐng)?zhí)?00710027591.1)中，由于酸性高錳酸鉀具有強(qiáng)氧化性，對(duì)從樣品中提取的有機(jī)物會(huì)發(fā)生反應(yīng)，可能生成有色物質(zhì)從而造成干擾；表2顯不加標(biāo)的實(shí)際樣品反應(yīng)處理后有機(jī)層顏色存在明顯變化，有別于表I空白加標(biāo)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能是三種原因造成的，一是氧化過程中可能會(huì)存在氧化不徹底的副反應(yīng)生成有色物質(zhì)，改變有機(jī)層的顏色，二是樣品中不能被氧化的有色物質(zhì)進(jìn)入有機(jī)層顯色，三是有機(jī)層中有機(jī)物被徹底氧化導(dǎo)致加標(biāo)樣品處理前后顏色變淺。該方法既未對(duì)脂溶性天然色素進(jìn)行干擾驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，亦未進(jìn)行與儀器方法的假陽(yáng)性率對(duì)照驗(yàn)證，更未對(duì)表2的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象闡明其原因。因而該方法在應(yīng)用過程中，單憑有機(jī)層在處理前后有無顏色作為判定依據(jù)可能存在假陽(yáng)性誤判的情況，不利于準(zhǔn)確定性樣品是否違法使用脂溶性色素。對(duì)于檢測(cè)方法2)，在現(xiàn)有的技術(shù)(專利申請(qǐng)?zhí)?0081002995.9)中，吸附薄片所用的聚酰胺或羊毛量較少，對(duì)色素的板載量有限，當(dāng)樣品合成色素含量低時(shí)不利于富集和顯色，易發(fā)生漏判。色素經(jīng)吸附薄片富集后，部分吸附能力強(qiáng)的天然色素(如姜黃素、紅曲紅等)單憑純凈水不能達(dá)到完全除去的目的，最終會(huì)影響陽(yáng)性判定的結(jié)果。對(duì)于檢測(cè)方法3)，在現(xiàn)有的技術(shù)(專利申請(qǐng)?zhí)?01110350255.7)中，紡織品的快速顯色測(cè)試操作過程復(fù)雜，且由于重氮化-偶聯(lián)反應(yīng)一般要在1_5°C下進(jìn)行，室溫下亞硝酸及重氮化中間體易分解，不利于后續(xù)的顯色反應(yīng)，可能會(huì)存在漏判的情況。因此，現(xiàn)有的檢測(cè)方法存在容易受干擾物的干擾，準(zhǔn)確性差，操作復(fù)雜，檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)、需要復(fù)雜分析儀器等缺點(diǎn)，且無法針對(duì)水溶性偶氮染料進(jìn)行快速檢測(cè)。

發(fā)明內(nèi)容
為解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，發(fā)明人預(yù)料不到地發(fā)現(xiàn)，通過氨水溶液提取樣品中的色素，經(jīng)聚酰胺柱富集并用甲醇和乙酸的混合液凈化，乙醇和氨水的混合液洗脫分離水溶性偶氮染料后，再通過鋅粉及醋酸銨體系還原脫色、可以進(jìn)行水溶性偶氮染料的快速定性檢測(cè)。本發(fā)明提供的食品中水溶性偶氮染料快速檢測(cè)方法通過現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，即可及時(shí)有效地進(jìn)行可疑樣品的快速篩查，不依賴于大型儀器設(shè)備，可在最短時(shí)間內(nèi)給不法分子嚴(yán)厲的打擊；此外，本發(fā)明還具有檢測(cè)時(shí)間短，適用范圍廣，檢測(cè)準(zhǔn)確性高，檢出限低，本底干擾小，抗干擾能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。一種食品中水溶性偶氮染料快速檢測(cè)方法，包括如下步驟:
A)樣品提取:取待測(cè)樣品，加入稀氨水溶液，水浴中搖勻，靜置后取上清液，往該上清液中加入檸檬酸調(diào)PH至5 7，得到樣品提取液；
B)聚酰胺柱富集和凈化:將所述樣品提取液轉(zhuǎn)移至聚酰胺柱中，分離濾液，使色素富集在聚酰胺柱上，取甲醇和乙酸的混合液洗滌該聚酰胺柱；
C)色素的洗脫:取乙醇和氨水的混合液洗脫所述聚酰胺柱，收集洗脫液，將洗脫液的顏色與標(biāo)準(zhǔn)比對(duì)液的顏色進(jìn)行比較；
D)定性檢測(cè):若洗脫液的顏色比標(biāo)準(zhǔn)比對(duì)液的顏色更深，將所述洗脫液等量分成對(duì)照組和檢測(cè)組，往該檢測(cè)組中加入0.5^3 mL的醋酸銨溶液及0.09、.1lg鋅粉，搖勻、過濾后，與對(duì)照組比較，觀察該檢測(cè)組顏色是否褪去，若顏色褪去，則判定檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。采用上述技術(shù)方案，本發(fā)明可及時(shí)有效地進(jìn)行可疑樣品的快速篩查，不依賴于大型儀器設(shè)備，可在最短時(shí)間內(nèi)給不法分子嚴(yán)厲的打擊；此外，還具有檢測(cè)時(shí)間短，適用范圍廣，檢測(cè)準(zhǔn)確性高，檢出限低，本底干擾小，抗干擾能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明的檢測(cè)原理為:水溶性偶氮染料在酸性條件下保留并富集在聚酰胺柱中，堿性條件下從聚酰胺柱中洗脫分離，通過鋅粉及醋酸銨的協(xié)同作用，所得洗脫液在室溫條件下迅速發(fā)生還原反應(yīng)，若顏色褪去，則判定檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。通過聚酰胺柱的富集和凈化，可有效排除天然色素等干擾物的干擾，可廣泛用于現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)食品中的檸檬黃、日落黃、胭脂紅、亮藍(lán)、莧菜紅、誘惑紅、酸性橙I1、酸性大紅、酸性金黃G等水溶性偶氮染料。鋅粉及醋酸銨發(fā)生協(xié)同作用，還原檸檬黃色素的反應(yīng)式如下:
權(quán)利要求
1.一種食品中水溶性偶氮染料快速檢測(cè)方法，其特征在于:包括如下步驟: A)樣品提取:取待測(cè)樣品，加入稀氨水溶液，水浴中搖勻，靜置后取上清液，往該上清液中加入檸檬酸調(diào)PH至5 7，得到樣品提取液； B)聚酰胺柱富集和凈化:將所述樣品提取液轉(zhuǎn)移至聚酰胺柱中，分離濾液，使色素富集在聚酰胺柱上，取甲醇和乙酸的混合液洗滌該聚酰胺柱； C)色素的洗脫:取乙 醇和氨水的混合液洗脫所述聚酰胺柱，收集洗脫液，將洗脫液的顏色與標(biāo)準(zhǔn)比對(duì)液的顏色進(jìn)行比較； D)定性檢測(cè):若洗脫液的顏色比標(biāo)準(zhǔn)比對(duì)液的顏色更深，將所述洗脫液等量分成對(duì)照組和檢測(cè)組，往該檢測(cè)組中加入0.5^3 mL的醋酸銨溶液及0.09、.1lg鋅粉，搖勻、過濾后，與對(duì)照組比較，觀察該檢測(cè)組顏色是否褪去，若顏色褪去，則判定檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的食品中水溶性偶氮染料快速檢測(cè)方法，其特征在于:所述稀氨水的pH為9 10。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的食品中水溶性偶氮染料快速檢測(cè)方法，其特征在于:所述水溶性偶氮染料包括檸檬黃、日落黃、胭脂紅、亮藍(lán)、莧菜紅、誘惑紅、酸性橙I1、酸性大紅和酸性金黃G。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的食品中水溶性偶氮染料快速檢測(cè)方法，其特征在于:所述醋酸銨溶液為飽和醋酸銨溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的食品中水溶性偶氮染料快速檢測(cè)方法，其特征在于:所述聚酰胺柱采用裝填有0.2^0.3g聚酰胺粉的色譜柱，所述聚酰胺粉的粒徑為20(Γ300目。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的食品中水溶性偶氮染料快速檢測(cè)方法，其特征在于:所述甲醇和乙酸的混合液中，甲醇和乙酸的體積比為6:4。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的食品中水溶性偶氮染料快速檢測(cè)方法，其特征在于:所述乙醇和氨水的混合液中，乙醇和氨水的體積比為7:3，其中氨水由濃氨水與水以2:1的體積比混勻而得。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)所述的食品中水溶性偶氮染料快速檢測(cè)方法，其特征在于:所述鋅粉的加入量為0.lg。
全文摘要
本發(fā)明提供一種食品中水溶性偶氮染料快速檢測(cè)方法，包括如下步驟A)樣品提??；B)聚酰胺柱富集和凈化；C)色素的洗脫；D)定性檢測(cè)。本發(fā)明可及時(shí)有效地進(jìn)行可疑樣品的快速篩查，不依賴于大型儀器設(shè)備，可在最短時(shí)間內(nèi)給不法分子嚴(yán)厲的打擊；此外，本發(fā)明還具有檢測(cè)時(shí)間短，適用范圍廣，檢測(cè)準(zhǔn)確性高，檢出限低，抗干擾能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)G01N21/78GK103091314SQ20131001550
公開日2013年5月8日 申請(qǐng)日期2013年1月16日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月16日
發(fā)明者黎紹學(xué), 鄭彥婕, 黃小龍, 黎永樂, 曾泳艇, 陳素娟, 胡書玉 申請(qǐng)人:深圳市計(jì)量質(zhì)量檢測(cè)研究院