專利名稱：一種解痙、鎮(zhèn)痛藥及制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種組合藥物，具體地說是一種治療腹部平滑肌痙攣痛、頭痛的組合藥物及制備方法。
背景技術：
芍藥甘草湯為國內中醫(yī)領域眾所周知的名方，中醫(yī)臨床主要用于治療月經痛、子宮痙攣和胃痛等腹部平滑肌痙攣痛。
芍藥甘草湯雖然具有獨特的療效，但其劑型仍為傳統(tǒng)的湯劑。顯然不能工業(yè)化生產，而是服用者自家煎煮。又因為是全材入藥，藥物活性成份不清，無療效甚至有害的雜質混在其中。因此，對中草藥進行藥理分析，分離出藥用活性物質，并通過規(guī)?；a制成無雜質、劑量小、易流通、服用方便的現(xiàn)代藥物，是中藥發(fā)展的趨勢。
為探討芍藥甘草湯的藥物活性，我們在給大鼠灌服芍藥甘草湯后，取服藥大鼠血清，用HPLC和HPLC-MS等儀器檢測服藥動物血清，得出主要吸收入血的有效成份為甘草次酸(glycyrrhetinic acid，或glycyrrhetic acid)、甘草酸(glycyrrhizic acid，或glycyrrhizin)、芍藥苷(paeoniflorin)和芍藥苷代謝物(paeonimetaboline1，PM-1)經進一步實驗證明，上述化合物中的甘草酸和甘草次酸為解痙抗炎的有效成份，而其中的甘草次酸又為口服化合物甘草酸的吸入血代謝產物，其解痙作用明顯強于甘草酸，且甘草次酸血藥濃度明顯高于甘草酸。為此可以用甘草次酸作為組合藥中解痙成份，上述實驗還證明芍藥苷和芍藥苷代謝物是鎮(zhèn)痛和鎮(zhèn)靜有效成份，雖然芍藥苷代謝物鎮(zhèn)痛作用強于芍藥苷，但難于大量制備。而且芍藥苷代謝物為芍藥苷經腸內菌代謝后的吸入血的產物，因而可以用芍藥苷作為藥物中的鎮(zhèn)痛成份。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是用分析芍藥甘草湯發(fā)現(xiàn)的具有解痙、鎮(zhèn)痛的藥物活性物質組合一種用于解痙、鎮(zhèn)痛的藥物。
本發(fā)明的另一個目的是給出一種以甘草和芍藥為原料，制備上述藥物的方法。
本發(fā)明藥物的技術方案是由含有腹部平滑肌解痙有效量的甘草次酸和鎮(zhèn)痛有效量的芍藥苷及可藥用的載體/或賦形劑組成。
按照本發(fā)明，該藥物組合物可以制成通常的片劑(甘芍片)、膠囊(甘芍膠囊)及其他的固體劑型或針劑。制備固體劑型可加入淀粉等賦型材料。可加常規(guī)溶劑制成針劑。
本發(fā)明藥物的制備方法是1、甘草次酸的制備甘草粗粉加水煮沸，濾取藥液，加濃硫酸至不再析出沉淀，放置，濾取，棕色沉淀，水洗干燥，得甘草酸粗品。用丙酮回流提取，得丙酮提取液、放冷，攪拌下加入KOH乙醇液至弱堿性，放置，析出結晶，過濾的結晶(甘草酸三鉀鹽)，干燥，加冰醋酸熱溶，放冷，析出結晶，過濾，得甘草酸單鉀鹽，加稀硫酸，加熱，抽濾，水洗至中性，干燥，得白色甘草次酸粗品，再將其溶于熱氯仿中，趁熱過濾，將氯仿溶液放冷，過氧化鋁層析柱，用氯仿洗脫，得甘草次酸，乙醇熱溶，趁熱倒入沸水中，放置，得結晶，過濾，即得藥用甘草次酸結晶。
2、芍藥苷提取取白芍藥材加入乙醇溶液熱回流或冷浸提取，將乙醇提取液濃縮，再加乙醇放至、過濾，再往乙醇濾液中加活性碳，攪拌，過濾，乙醇濾液濃縮至無醇味為止，所得上述提取物在大孔樹脂上純化，先用水洗至Mollious反應呈陰性，再用乙醇洗脫，分段收集乙醇洗脫液，減壓濃縮、干燥得淺黃色芍藥苷。
3、制劑制備將甘草次酸和芍藥苷按重量1∶1至1∶2混合，再加入藥用載體和/或賦形劑制成片、膠囊或針劑。
本發(fā)明的積極效果體現(xiàn)在首先是得到一種體積小、療效好，無毒副作用，服用方便，平滑肌解痙鎮(zhèn)痛藥物，其次完成了一種從甘草芍藥中提取治療腹部平滑肌解痙鎮(zhèn)痛的活性物質。本發(fā)明療效的實驗過程和結果如下1.對小鼠自發(fā)活動的影響將90只小鼠勻分9組，每組雌雄各半，按表1所示劑量和給藥途徑給藥1次，第一組為罐胃對照組，罐胃0.2％CMC水混懸液10ml/kg。第6組為注射給藥對照組，皮下注射生理鹽水10ml/kg。1-5組小鼠于給藥后1小時，6-9組于給藥后30分鐘，將小鼠置于自發(fā)活動觀察儀內，記錄5分鐘內每只小鼠的自發(fā)活動次數(shù)。結果如表1所示，由表1可見，甘芍膠囊和甘芍注射液均有明顯的抑制小鼠自發(fā)活動的作用。表1.甘芍膠囊和甘芍注射液對小鼠自發(fā)活動的影響(X±S)n＝10組別 劑量(mg/kg)小鼠活動次數(shù)(5min) 抑制率(％)1.對照 0.2％CMC po 144.8±22.52.安定 5po 56.8±23.1***60.73.甘芍膠囊 300 po 45.2±9.9***68.84. 150 po 53.5±20.8**63.15. 75 po 73.5±22.5*49.26.生理鹽水 10ml/kg im 132.7±36.77甘芍注射液 60 sc 50.4±12.9***62.08. 30 sc 64.3±16.5**51.59. 15 sc 71.4±13.6*注與陰性對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01，***p＜0.0012.對腹腔注射醋酸所致小鼠扭體反應和腹腔滲出性炎癥反應的影響本實驗小鼠分組和給藥同于實驗1。1-5組小鼠于給藥后1小時，6-9組于給藥30分鐘，給小鼠尾靜脈注射依文氏藍(2％，5ml/kg)，于注射依文氏藍2分鐘后，向小鼠腹腔注射1％醋酸10ml/kg。記錄每只小鼠于注射醋酸后10分鐘內扭體次數(shù)，然后立即將小鼠拉斷頸椎處死，剖腹用生理鹽水4ml/鼠沖洗腹腔滲出染料。用光電比色計(620nm)測定測定染料滲出量。結果見表2。表2.苷芍膠囊和甘芍注射液對醋酸所致小鼠扭體反應和腹腔滲出性炎癥的影響。(X±S)，n＝10。組別 劑量 腹腔內透入的染 扭體次數(shù) 抑制率(mg/kg) 料量μg/ml 10min ％1.對照 0.2％CMC po 56±815.6±2.92.阿司匹林400 po 33±11**4.7±2.2***69.93.甘芍膠囊300 po 26±8***3.1±0.9**80.14.150 po 28±8***5.3±1.9*66.05.75 po 33±3**6.1±1.6*60.96.對照 生理鹽水10(ml，kg)im 57±11 14.1±2.47.甘芍注射液 60 im 27±5***3.7±1.6***70.88 30 im 32±3**5.0±1.2**64.59 15 im 35±4*6.0±1.5*57.5注與各自對照組比較，*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001。
3.甘芍膠囊解痙試驗—對離體大鼠小腸平滑肌活動的影響材料與方法動物 Wistar大鼠，體重250±20g，雌、雄兼用。
藥品 不同濃度的芍藥甙、甘草次酸，甘芍注射劑由吉林天然藥物研究所植化室提；氯化乙酰膽堿(1g/支，北京市東環(huán)聯(lián)合化工廠)；硫酸阿托品注射液(規(guī)格0.5mg/mL，河南省開封制藥廠)。
儀器 Powerlab/8s數(shù)據記錄分析儀及相關附件(澳大利亞埃德公司產品)；YSD-4G型藥理生理實驗多用儀及其恒溫水浴裝置(安徽蚌埠無線電二廠產品)。
方法 大鼠禁食48小時后處死，打開腹腔，在小腸上部剪取一段腸管置于盛有臺氏液的培養(yǎng)皿中，沿腸壁輕輕分離掉腸系膜，用臺氏液將腸管內沖洗干凈后，剪成數(shù)條2cm左右的小段備用。通過與YSD-4G型藥理生理實驗多用儀相連的水銀接點溫度計調解、控制恒溫水浴槽的溫度，使其恒定在37±0.5℃，麥氏浴管內臺氏液體積約為50mL，臺氏液液面高度與水浴槽的液面高度基本相同，空氣通入量控制在50個氣泡左右/分鐘，選取一段小腸，一端用線扎緊固定在通氣管的彎鉤上，另一端與裝滿水的毛細玻璃管相連接。當離體腸管收縮時，毛細玻璃管內水柱上升.液面上升的幅度與離體腸管收縮強度相關。穩(wěn)定20分鐘，將毛細管內液面調至“0”位，隨后向麥氏浴管內加入0.001％的氯化乙酰膽堿0.1ml，使腸管發(fā)生痙攣并處于緊張收縮狀態(tài)，在腸管收縮最明顯處，分三種方法給藥①加入臺氏液1mL；②加入阿扎品1mL；③隨后加入不同濃度的甘草次酸，芍藥甙，甘芍注射劑.觀察藥物的解痙作用。每完成一步，更換新的腸管和營養(yǎng)液，穩(wěn)定20分鐘后再進行下一步驟。
實驗結果甘草次酸和甘芍注射劑對氯化乙酰膽堿所致大鼠腸管痙攣性活動均有不同程度的抑制作用，甘芍注射劑的解痙作用更為明顯。但芍藥苷解痙作用不明顯(表3).
表3.甘草次酸，芍藥苷和甘芍注射劑對大鼠離體腸管收縮運動的影響。(X±S)，n＝3。組別 腸管收縮幅度 抑制率浴槽內藥物濃度(g/ml) mm ％氯化乙酰膽堿 4 25±3.0阿托品 106±1.0 76甘草次酸 408±2.0 682012±2.0521016±1.736
524±2.0 4氯化乙酰膽堿 420±1.0阿托品 10 7±1.0 65芍藥苷 40 19±3.0 520 20±2.0 010 20±2.0 0氯化乙酰膽堿 424±2阿托品 10 6±275甘芍注射劑劑 40 6±27520 8±26710 12±2 58520±1 172.5 23±1 4實施例1、甘草次酸制備甘草粗粉加水煮沸3次，濾取藥液，加濃硫酸至不再析出沉淀，放置，濾取，棕色沉淀，水洗干燥，得甘草酸粗品。用丙酮回流提取3次，得丙酮提取液、放冷，攪拌下加入20％的KOH乙醇液至弱堿性，放置，析出結晶，過濾的結晶(甘草酸三鉀鹽)，干燥，加冰醋酸熱溶，放冷，析出結晶，過濾，得甘草酸單鉀鹽，加5％硫酸，加熱10小時，抽濾，水洗至中性，干燥，得白色甘草次酸粗品，再將其溶于熱氯仿中，趁熱過濾，將氯仿溶液放冷，過氧化鋁層析柱，用氯仿洗脫，得甘草次酸，乙醇熱溶，趁熱倒入1/2體積沸水中，放置，得結晶，過濾，即得藥用甘草次酸結晶。
2、芍藥苷提取取白芍藥材用3-8倍量30％-60％乙醇熱回流或冷浸提取2次，將乙醇提取液濃縮至相對密度1.1(50℃)，再用95％乙醇加至醇濃度為70％-90％，放置過夜，過濾，再往乙醇濾液中加入1％-2％的(M/V)活性碳，攪拌，過濾，乙醇濾液濃縮至無醇味為止，所得上述提取物在D101、D201兩種大孔樹脂上純化，先用水洗至Mollious反應呈陰性，再用10％-30％乙醇洗脫，收集10％-30％乙醇洗脫液，減壓濃縮、干燥得淺黃色芍藥苷。3、制劑及其制備(1)甘芍膠囊(片劑)處方芍藥苷(純度90％) 153g甘草次酸(純度95％)97g淀粉 適量制成 1000粒(片)制法將芍藥苷和甘草次酸與適量淀粉充分混勻，裝入膠囊或制粒壓片。每1粒膠囊或每1片劑中含藥0.25g。
適應癥腹部平滑機痙攣痛(月經痛，子宮痙攣痛，胃潰瘍所致胃腸痙攣痛)及頭痛。
用法和用量疼痛時1次口服1-2粒(片)。(2.)甘芍注射液芍藥苷(純度90％) 30g甘草次酸(純度95％)20g1，2-丙二醇 適量制成2ml安瓶注射劑 1000支制法將芍藥苷和甘草次酸溶入溶解于適量丙二醇內，過濾，分裝，滅菌即得.每1支含藥物50mg。
適應癥腹部平滑機痙攣痛(月經痛，子宮痙攣痛，胃潰瘍所致胃腸痙攣痛及頭痛。
用法和用量用時將1支甘芍注射劑藥液稀釋于500ml生理鹽水中，靜脈滴注。每次1-2支。
權利要求
1.一種解痙、鎮(zhèn)痛的藥物，其特征是由含有腹部平滑肌解痙有效量的甘草次酸和鎮(zhèn)痛有效量的芍藥苷及可藥用的載體/或賦形劑組成。
2.根據權利要求1的一種解痙、鎮(zhèn)痛的藥物，其特征是用從植物甘草中提出的甘草次酸和從芍藥中提取的芍藥苷加載體和/或賦形劑制成的片、膠囊或針劑。
3.一種解痙、鎮(zhèn)痛藥物的制備方法，其特征是(1)、甘草次酸的制備甘草粗粉加水煮沸，濾取藥液，加濃硫酸至不再析出沉淀，放置，濾取，棕色沉淀，水洗干燥，得甘草酸粗品。用丙酮回流提取，得丙酮提取液、放冷，攪拌下加入KOH乙醇液至弱堿性，放置，析出結晶，過濾的結晶(甘草酸三鉀鹽)，干燥，加冰醋酸熱溶，放冷，析出結晶，過濾，得甘草酸單鉀鹽，加稀硫酸，加熱，抽濾，水洗至中性，干燥，得白色甘草次酸粗品，再將其溶于熱氯仿中，趁熱過濾，將氯仿溶液放冷，過氧化鋁層析柱，用氯仿洗脫，得甘草次酸，乙醇熱溶，趁熱倒入沸水中，放置，得結晶，過濾，即得藥用甘草次酸結晶。(2)、芍藥苷提取取白芍藥材加入乙醇溶液熱回流或冷浸提取，將乙醇提取液濃縮，再加乙醇放至、過濾，再往乙醇濾液中加活性碳，攪拌，過濾，乙醇濾液濃縮至無醇味為止，所得上述提取物在大孔樹脂上純化，先用水洗至Mollious反應呈陰性，再用乙醇洗脫，分段收集乙醇洗脫液，減壓濃縮、干燥得淺黃色芍藥苷。(3)、制劑制備將甘草次酸和芍藥苷按重量1∶1至1∶2混合，再加入藥用載體和/或賦形劑，制成片、膠囊或針劑。
全文摘要
一種解痙、鎮(zhèn)痛藥及制備方法，是根據芍藥甘草湯的治病機理，從甘草中提取藥物活性物質甘草次酸和從芍藥中提取活性物質芍藥苷，并取各自的有效量與可藥用的載體和/或賦型劑組合成體積小、易貯存、服用方便、無毒副作用，具有和芍藥甘草湯相同療效的現(xiàn)代藥物。
文檔編號G01N30/90GK1449761SQ0210946
公開日2003年10月22日 申請日期2002年4月10日 優(yōu)先權日2002年4月10日
發(fā)明者王本祥, 張連珠, 陳聲武, 李海日 申請人:吉林天藥科技股份有限公司