一種用于肝臟保護的二萜類化合物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及從干燥的石見穿中分離得到的一種二萜類化 合物，含其的藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 石見穿系唇形科鼠尾草屬華鼠尾草Salviachinensis benth的干燥地上部分，亦 名紫參、五鳳花、小丹參、月下紅、烏沙草、墨面風(fēng)、大發(fā)汗、石大川、山縫拿、紫丹花、紅根參、 田芹菜、活血草，廣泛分布于江蘇、安徽、江西、湖北、湖南、廣東、廣西、四川、云南等地。其性 涼，味微苦、辛、平，歸胃、肝、肺經(jīng)，有清熱解毒、活血理氣止痛等功能，民間主治噎嗝、痰喘、 肝炎、赤白帶、癰腫、瘰疬等癥。歷代典籍均對其功效有記載，認為其"主骨痛，大風(fēng)癰腫" (《本草綱目》），"治瘰疬"（《江蘇藥材志》），"治噎嗝，痰飲氣喘"（《蘇州本產(chǎn)藥材》），"活血化 瘀、止血、解毒、消腫"（《浙江民間常用草藥》），"活血止血，清熱解毒"（《安徽中醫(yī)藥》），"治 黃疸型肝炎，濕熱帶下，痛經(jīng)，菌痢，外治面神經(jīng)麻痹，乳腺炎，癤腫，跌打損傷等"（《浙江藥 用植物志》）。
[0003] 到目前為止，從石見穿中分離出的化學(xué)成分已達30多種，主要包括多糖類、萜類、 甾醇類、多酚類等。
[0004] 石見穿具有抗炎、抗氧化和抗腫瘤等作用。《中藥大辭典》、《全國中草藥匯編》均記 載了石見穿、糯稻根等合用為方，用于治療急、慢性肝炎均取得了顯著療效。石見穿作為常 用的"抗癌中藥"被廣泛應(yīng)用于臨床。石見穿在婦科疾病治療中也得到了廣泛應(yīng)用，除清熱 利濕外，還具有活血化瘀、軟堅散結(jié)之功效。因其藥性平和，不燥不寒，故被廣泛應(yīng)用于因血 熱、濕熱所致崩漏、月經(jīng)先期盆腔炎、子宮內(nèi)膜異位癥、子宮肌瘤、卵巢囊腫、痛經(jīng)等病，療效 顯著。此外，《浙江民間常見草藥》記載紫參根9~12g，羊乳塊根30g，用于治療淋巴結(jié)結(jié)核， 療效顯著。《浙江藥用植物學(xué)》將本品用于治療面神經(jīng)麻痹、乳腺炎、瘡腫等。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從干燥的石見穿中分離得到的一種二萜類化合物，含其 的藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實現(xiàn)的：
[0007] 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物(I):
[0009]所述的化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：（a)將干燥的石見穿粉碎，用70 ~80%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的 正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中乙酸 乙酯萃取物用大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫6個柱體積，再用70%乙醇洗脫8個柱體積， 收集70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70%乙醇洗脫濃縮物用 正相硅膠分離，依次用體積比為40:1、20:1、10:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個 組分；（d)步驟(c)中組分4用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為8:1、5:1和2:1的二氯甲 烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離， 用體積百分濃度為70 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~12個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃 縮得到純的化合物(I)。
[0010] 進一步地，所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為75%。
[0011] 進一步地，所述大孔樹脂為AB-8型大孔吸附樹脂。
[0012] 藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物(I)和藥學(xué)上可接受的載體。
[0013] 所述的化合物(I)在制備肝臟保護的藥物中的應(yīng)用。
[0014] 所述的藥物組合物在制備肝臟保護的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 本發(fā)明化合物用作藥物時，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。
[0016] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學(xué)上可接受的、對 人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0017] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等;用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
【附圖說明】
[0018] 圖1為化合物(I)結(jié)構(gòu)式；
[0019] 圖2為化合物⑴計算ECD和實驗ECD圖。
【具體實施方式】
[0020] 下面結(jié)合實施例進一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護范 圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當理解，可以對 本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。
[0021] 主要材料、試劑來源及儀器類型：
[0022]乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購自上海凌峰化學(xué)試劑有限 公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[0023]實施例1:化合物(I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0024] (a)干燥的石見穿（10kg)粉碎，用75 %乙醇熱回流提取(25L X 3次），合并提取液， 濃縮至無醇味(6L)，依次用石油醚(6L X 3次）、乙酸乙酯(6L X 3次)和水飽和的正丁醇(6L X 3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(377g)和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中 乙酸乙酯萃取物用AB-8大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫6個柱體積，再用70%乙醇洗脫8 個柱體積，收集70 %洗脫液，減壓濃縮得70 %乙醇洗脫濃縮物（129g); (c)步驟(b)中70 %乙 醇洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為40:1 (8個柱體積）、20:1 (8個柱體積）、10:1 (8個柱體積)和5:1(10個柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個組分；（d)步驟(c)中組 分4(24g)用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為8:1(8個柱體積）、5:1(10個柱體積)和2: 1(8個柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2(15g)用十八烷 基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為70 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~12個 柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物(I) (242mg)。
[0025] 結(jié)構(gòu)確證：白色無定形粉末;冊43頂3顯示[1+似]+為111/2 455.1718，結(jié)合核磁特 征可得分子式為C23H28O8，不飽和度為10。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)δΗ(ρρηι，DMS0_d6，600MHz):H-1 (5.21，s)，H-3(2.40，m)，Η-3(2·17，m)，H-6(2.48，m)，H-6(2.07，m)，H-8(2.94，m)，H-9 (2.56，td，J=12.0，1.8)，H-ll(1.34，m)，H-ll(1.97，m)，H-15(5.86，s)，H-17(5.28，d，J = 1.8)，H-17(5.52，d，J=1.8)，H-18(0.98，s)，H-19(0.99，s)，H-20(1.00，s)，l-0Ac(2.02， s)，12-0CH3 (3 · 21，s);核磁共振碳譜數(shù)據(jù)δ。（ppm，DMS〇-d6，125MHz): 81 · 7 (CH，1 -C)，201 · 2 (C，2-C)，47.4(CH2,3-C)，37.5(C，4-C)，77.4(C，5-C)，34.8(CH2,6-C)，208.1(C，7-C)，52.7 (CH，8-C)，36.4(CH，9-C)，42.4(C，10-C)，34.9(CH2，n-C)，108.5(C，12-C)，165.8(C，13-C)，140.1(C，14-C)，114.8(CH，15-C)，168.3(C，16-C)，113.9(CH2，17-C)，27.2(CH 3，18-C)， 24.0(CH3，19-C)，16.3(CH3,20-C)，168.9(C，1-0Ac)，20.3(CH3，1-0Ac)，51.2(CH3，12-0CH 3); 碳原子標記參見圖UIR譜表明該化合物含有羰基（3508CHT1)和羰基（1761(^1)基團，紫外 光譜在216nm處有最大吸收，表明該化合物含有α，β-不飽和丁烯酸內(nèi)酯結(jié)構(gòu)。在烯烴質(zhì)子信 號 δΗ5.86(Η-15, s)和位于低場的碳信號 SC165.8(C-13)，114.8(015)和 168.3(016)也證 實了存在