一株鹽單胞菌tf-1及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于微生物生物技術(shù)和環(huán)境生物技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及一株鹽單胞菌TF-I 及其在微生物采油中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 微生物采油依靠微生物代謝產(chǎn)生酸、二氧化碳或生物氣擴(kuò)大含油層的孔隙，增加 原油的流動(dòng)性；或是把重質(zhì)的控類分解成更易流動(dòng)的短鏈化合物，W及產(chǎn)生生物表面活性 劑、生物聚合物等來提高原油采收率。但是油藏環(huán)境往往具有高溫、高礦化度的特點(diǎn)，要在 運(yùn)些油藏中進(jìn)行微生物采油，必須具有耐溫、耐鹽的高效菌種。在環(huán)境中耐高溫、高鹽的菌 種不少，但在微生物采油上耐高溫耐鹽且能降解原油乳化效果好的菌種較少，而且應(yīng)用于 高溫高鹽油藏中的菌種的報(bào)道也很少，因此針對上述情況，需要篩選出適合高溫高鹽油藏 環(huán)境的嗜鹽菌應(yīng)用于微生物采油技術(shù)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的不足而提供一種鹽單胞菌化IomonasSP.TF-I 及其在微生物采油中的應(yīng)用。
[0004] 本發(fā)明提供的鹽單胞菌化Iomonassp.TF-I菌株，W下簡稱TF-1，于2015年3月 12日保藏于"中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中屯、"（北京市朝陽區(qū)北辰西路1 號(hào)中國科學(xué)院微生物研究所），其保藏編號(hào)為"CGMCCNo.10619"，分類命名中文名稱為"鹽 單胞菌"，拉下文名稱為"化Iomonassp."。 陽00引本發(fā)明提供的鹽單胞菌TF-1CGMCCNo.10619菌株，是從勝利油田油水井樣品中通 過37°C、常壓條件下W化Cl含量為6. 0%的高鹽培養(yǎng)基富集培養(yǎng)篩選得到，并通過耐溫耐 鹽性能考察反復(fù)篩選傳代獲得。
[0006] 鹽單胞菌TF-1CGMCCNo. 10619的形態(tài)學(xué)特性：在好氧高鹽固體培養(yǎng)基下培養(yǎng)1~ 2d出現(xiàn)大小一般為0. 4~0.8mm白色菌落，細(xì)胞形態(tài)為短桿狀，大小4~8ymXO. 2~ 0. 5Jim。
[0007] 鹽單胞菌TF-1CGMCCNo.10619的生理生化特性：好氧，生長溫度30~60°C，最適 生長溫度37°C，生長抑值范圍5~8,最佳生長抑范圍7~7.5,化Cl的耐受性0~26%。 陽00引鹽單胞菌TF-1CGMCCNo.10619的營養(yǎng)培養(yǎng)基：葡萄糖0. 3mg/L、蛋白腺0. 3mg/L、 酵母粉 0. 3mg/l、K2HPO4O.27mg/l、氯化鋼 6mg/l，抑值為 7. 0~7.5。
[0009] 鹽單胞菌TF-1CGMCCNo.10619發(fā)酵條件：接種量2%，接種齡12h，初始抑7. 0， 溫度37°C，攬拌速度180巧m，pH= 7,通氣量：lL/min。
[0010] 鹽單胞菌TF-ICGMCCNo.10619的性能評(píng)價(jià)參數(shù)：W原油為唯一碳源的生長能力、 發(fā)酵液乳化降粘能力和物理模擬實(shí)驗(yàn)提高采收率值。
[0011] 鹽單胞菌TF-1CGMCCNo.10619的性能評(píng)價(jià)方法：
[0012] (1)W原油為唯一碳源的生長能力評(píng)價(jià)
[0013] 鹽單胞菌TF-ICGMCCNo.10619接種于W原油為唯一碳源的控類培養(yǎng)基中，37°C、 ISOrpm下振蕩培養(yǎng)，進(jìn)行細(xì)菌密度測試。
[0014] 似發(fā)酵液乳化降粘能力評(píng)價(jià)
[0015] 脫水原油在60°C用旋轉(zhuǎn)粘度計(jì)測其粘度y。，脫水原油和鹽單胞菌菌液按照7 : 3 的比例在60°C水浴中恒溫30min，迅速攬拌測其60°C的粘度y1，根據(jù)降粘率計(jì)算公式f= [(y廣y1) /y。]X100 %，則其乳化降粘率。
[0016] (3)物理模擬實(shí)驗(yàn)提高采收率值評(píng)價(jià)
[0017] ①巖屯、準(zhǔn)備：裝填巖屯、和滅菌，測定空氣滲透率；
[001引②抽真空、飽和模擬地層水，測定巖屯、PV(孔隙體積）；
[0019] ③飽和原油，巖屯、老化7山計(jì)算束縛水飽和度；
[0020] ④一次水驅(qū)，水驅(qū)至采出水含水98%W上，計(jì)算一次水驅(qū)采收率；
[0021] ⑥注入鹽單胞菌TF-1CGMCCNo.10619發(fā)酵液0. 2~0. 3PV;
[0022] ⑧二次水驅(qū)，水驅(qū)至產(chǎn)出液含水100 %，計(jì)算鹽單胞菌TF-1CGMCCNo.10619發(fā)酵 液提高采收率值。 陽02引鹽單胞菌TF-1CGMCCNo.10619的性能：W原油為唯一碳源生長，細(xì)菌濃度大于 5XIO8個(gè)/mL;發(fā)酵液乳化降粘率大于90%;物理模擬實(shí)驗(yàn)提高采收率值大于15%。
[0024] 鹽單胞菌TF-1CGMCCNo.10619的現(xiàn)場應(yīng)用工藝：一種是微生物單井吞吐，即通 過油井向地層注入發(fā)酵液，利用鹽單胞菌TF-1CGMCCNo.10619繁殖代謝提高單井產(chǎn)能； 另一種是微生物清防蠟，即將發(fā)酵液從油套環(huán)空注入油井井筒，利用鹽單胞菌TF-1CGMCC No.10619與井筒中的原油及井筒表面作用，減緩井筒結(jié)蠟。
[00巧]所述的微生物單井吞吐，其具體步驟為用累車將配制好的TF-I發(fā)酵液50~IOOm3 經(jīng)油井油套環(huán)空注入地層，注入速度為6~8m3/h;油井關(guān)井培養(yǎng)10~20d后開井生產(chǎn)，利 用鹽單胞菌TF-I繁殖代謝提高單井的產(chǎn)能。
[0026] 所述的微生物清防蠟，其具體步驟為用加藥累將TF-I發(fā)酵液100~200kg由油井 的套管加入油套環(huán)空，加入速度為300~60化/min,每20~30d投加一次發(fā)酵液，利用鹽單 胞菌TF-I在井筒中與原油及井筒表面作用，減緩井筒結(jié)蠟。
[0027] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和有益效果在于： 陽02引本發(fā)明提供的鹽單胞菌TF-1CGMCCNo.10619生長溫度30~60°C，生長抑值范圍 5~8,耐鹽0~26%，能夠W原油為唯一碳源生長，發(fā)酵液乳化降粘率大于90%;物理模擬 實(shí)驗(yàn)提高采收率值大于15%，該菌株發(fā)酵液應(yīng)用于現(xiàn)場微生物單井吞吐，平均單井增油量 大于250噸，應(yīng)用于現(xiàn)場微生物清防蠟，平均延長油井熱洗周期120dW上。
【附圖說明】
[0029] 附圖1為TF-I菌株的形態(tài)圖；
[0030]附圖2為TF-I在不同鹽度條件下培養(yǎng)的細(xì)菌濃度；
[00川附圖3為TF-IW原油為碳源的生長曲線。
【具體實(shí)施方式】
[0032] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于 此： 陽〇3引 實(shí)施例I:
[0034] 本發(fā)明提供的鹽單胞菌TF-1CGMCCNo.10619的形態(tài)特征和生理生化特征。
[0035]參照《Bergey'SMannualofSystematicBacteriology》的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行，檢測 其革蘭氏染色，菌體大小和形態(tài)，有無鞭毛和芽抱，生長溫度，W及觸酶、淀粉水解、明膠液 化、半乳糖、木糖、乳糖等生化特征。
[0036] 研究結(jié)果表明，如圖1所示，該菌株為革蘭氏染色陽性、菌體呈短桿狀、無周生鞭 毛、能運(yùn)動(dòng)、好氧，細(xì)胞大小4~SymX0. 2~0. 5ym，生長溫度30~60°C，最適生長溫度 37°C，生長抑范圍5~8,最佳生長抑范圍7~7. 5,化Cl耐受性0~26%，如圖2。
[0037] 實(shí)施例2:
[0038] 本發(fā)明提供的鹽單胞菌TF-1CGMCCNo.10619培養(yǎng)發(fā)酵及發(fā)酵液性能評(píng)價(jià)
[0039]發(fā)酵培養(yǎng)基：葡萄糖 0. 3mg/l、蛋白腺 0. 3mg/l、酵母粉 0