含磺?；哙旱南愣顾夭⑦吝蝾惢衔锛捌渲苽渑c在抑制腫瘤細胞中的應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及含磺酰基哌嗪的香豆素并吡唑類化合物及其制備與在抑制腫瘤細胞 中的應用。
【背景技術】
[0002] 天然和合成的香豆素類化合物具有多種生物活性，其作為抗凝劑和抗血栓藥已被 人們所了解。一些衍生物被報道具有光敏化，抗HIV，降脂、抗炎、抗腫瘤和抗氧化的作用，能 夠抑制脂質過氧化，清除自由基，松弛血管，調節(jié)心血管功能。研究發(fā)現(xiàn)，許多香豆素類化合 物對哺乳動物的癌細胞系具有細胞毒性作用。最近一系列芳香基磺酰脲香豆素類化合物被 報道在低濃度能有效抑制各種腫瘤細胞的增殖。而Manojkumar等也報道一些合成的雜環(huán) 香豆素類化合物對DLA和EAC細胞具有細胞毒作用。芳香酶是雄激素轉化為雌激素的關鍵 酶，而雌激素通過雌激素受體刺激乳腺癌細胞的增殖。因此，一些合成的香豆素類芳香酶抑 制劑，如來曲唑、依希美坦等被證明對內分泌激素引起的乳腺癌有效。香豆素的磷肼類衍生 物具有體外抗P388白血病的作用，與氨甲喋呤合用在鼠類白血病細胞系L1210上能夠觀察 到抗腫瘤作用。香豆素和7-羥基香豆素在體內和體外都具有抗腫瘤作用，能夠通過誘導細 胞周期停滯于Gl期而抑制所有的肺癌細胞系細胞生長，和其它抗新生瘤的藥物合用能夠 增強對非小細胞肺癌的治療作用。
[0003] 本發(fā)明基于香豆素的抗癌活性，對其引入不同取代基的磺?；哙哼M行修飾，合 成出一系列含磺酰基哌嗪的香豆素并吡唑類化合物，并對它們進行抗癌活性測試。

【發(fā)明內容】

[0004] 本發(fā)明涉及含磺?；哙旱南愣顾夭⑦吝蝾惢衔锛捌渲苽渑c在抑制腫瘤細胞 中的應用。
[0005] 本發(fā)明的技術方案如下：
[0006] -類含磺?；哙旱南愣顾夭⑦吝蝾惢衔铮涮卣魇撬腥缦峦ㄊ剑?br>[0007]
[0008] 其中R為：
7
[0010] -種制備上述的含磺?；哙旱南愣顾夭⑦吝蝾惢衔锏姆椒?，其特征是它由下 列步驟組成：
[0011] 將4-羥基香豆素0. 06mmol溶解在46. 2ml的無水N，N-二甲基甲酰胺中，將此反 應液冷卻至(TC以下。在(TC以下條件下，邊攪拌邊緩慢滴加POCl3O. ISmmol，待POCl3加畢， 將反應液緩慢升溫至室溫條件下攪拌0. 5h后，然后升溫至65-70°C攪拌反應6h。用TLC跟 蹤監(jiān)測反應，當反應完畢后，將反應液倒入200g的冰水混合物中并劇烈攪拌，有大量淺黃 色固體1析出。將固體抽濾，并用5%的Na 2CO3水溶液洗滌，將所得固體干燥，即得到中間 體。
[0012] 將步驟一中所得固體Immol溶解在IOml乙醇中，加完攪拌使其溶解充分，然后冷 卻至15-20°(：，將配置好的溶液（85%的水合肼2臟〇1+三乙胺4臟〇1+60%乙醇101111)在攪 拌條件下，保持溫度在15_20°C，緩慢滴加至反應液中。滴加畢，保持溫度不超過25°C，攪拌 反應12h。用TLC跟蹤監(jiān)測反應。將所得固體減壓濃縮，所得固體用乙醇重結晶，即得到中 間體2。
[0013] 取無水哌嗪3mmol溶解在30ml無水二氯甲燒中冷卻至0°C以下，然后加入三乙胺 4ml，攪拌一段時間后，加入磺酰氯3mmol，在0°C以下攪拌反應2-4h，反應畢，有機層用水洗 (30ml X 3)后，用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干溶劑，所得固體3減壓干燥后，直接用于下一步 反應。
[0014] 取上述所得固體3mmol，化合物21mmol加熱溶解在2〇-25ml的無水乙醇中，待溶 解充分后，冷卻至室溫下，向反應液中緩慢加入40%的甲醛溶液300 μ 1，室溫下攪拌反應 4_6h，有大量固體析出。過濾，所得固體用冷的乙醇洗滌，然后將固體干燥，用乙醇重結晶， 即得到含磺酰胺氮雜環(huán)的香豆素并吡唑衍生物。
[0015] 本發(fā)明的含磺?；哙旱南愣顾夭⑦吝蝾惢衔飳δ[瘤細胞具有明顯的抑制作 用。因此本發(fā)明的含磺?；哙旱南愣顾夭⑦吝蝾惢衔锟梢詰糜谥苽淇拱┧幬?。
【具體實施方式】
[0016] 通過以下實施例進一步詳細說明本發(fā)明，但本發(fā)明的范圍并不受這些實施例的任 何限制。
[0017] 實施例一 ：2-((4-(苯磺?；┻哙?1-基）甲基）色烯并[4,3_c]吡 唑-4 (2H)-酮（化合物1)的制備
[0018]
[0019] 將4-羥基香豆素0. 06mmol溶解在46. 2ml的無水N，N-二甲基甲酰胺中，將此反 應液冷卻至(TC以下。在(TC以下條件下，邊攪拌邊緩慢滴加POCl3O. ISmmol，待POCl3加畢， 將反應液緩慢升溫至室溫條件下攪拌0. 5h后，然后升溫至65-70°C攪拌反應6h。用TLC跟 蹤監(jiān)測反應，當反應完畢后，將反應液倒入200g的冰水混合物中并劇烈攪拌，有大量淺黃 色固體1析出。將固體抽濾，并用5%的Na 2CO3水溶液洗滌，將所得固體干燥，即得到中間 體。
[0020] 將步驟一中所得固體Immol溶解在IOml乙醇中，加完攪拌使其溶解充分，然后冷 卻至15-20°(：，將配置好的溶液（85%的水合肼2臟〇1+三乙胺4臟〇1+60%乙醇101111)在攪 拌條件下，保持溫度在15_20°C，緩慢滴加至反應液中。滴加畢，保持溫度不超過25°C，攪拌 反應12h。用TLC跟蹤監(jiān)測反應。將所得固體減壓濃縮，所得固體用乙醇重結晶，即得到中 間體2。
[0021] 取無水哌嗪3mmol溶解在30ml無水二氯甲燒中冷卻至0°C以下，然后加入三乙胺 4ml，攪拌一段時間后，加入磺酰氯3mmol，在0°C以下攪拌反應2-4h，反應畢，有機層用水洗 (30ml X 3)后，用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干溶劑，所得固體減壓干燥后，直接用于下一步反 應。
[0022] 取上述所得固體lmmol，化合物21mmol加熱溶解在2〇-25ml的無水乙醇中，待 溶解充分后，冷卻至室溫下，向反應液中緩慢加入40%的甲醛溶液300 μ 1，室溫下攪拌 反應4-6h，有大量固體析出。過濾，所得固體用冷的乙醇洗滌，然后將固體干燥，用乙醇 重結晶，即得到終產物。產物為白色粉末，產率63 %。1^:199-2001:.? NMR(400MHz， CDCl3) :8.20(s，lH，ArH)，8.04(d，J = 7.60Hz，lH，ArH)，7.72(d，J = 7.28Hz，2H，ArH)， 7· 57-7. 47 (m，4H，ArH)，7· 38 (d，J = 8. 24Hz，1H，ArH)，7· 32 (t，J = 7. 48Hz，1H，ArH)， 5. 05 (s，2H，CH2)，3. 07 (s，4H，-CH2CH2)，2. 74 (s，4H，-CH2CH2) · MS (ESI) :425. 33 (C21H21N4O4S, [M+H] +). Anal. Calcd for C21H20N4O4S ：C, 59. 42 ；H, 4. 75 ；N, 13. 20 % . Found ：C, 59. 43 ；H, 4. 74 ；N, 13. 21% .
[0023] 實施例二：2-((4-甲苯磺?；哙?I-基）甲基）色烯并[4,3_c]吡唑-4(2H)_酮 (化合物2)的制備
[0024]
[0025] 制備方法同實施例一。產物為白色粉末狀固體。產率57%。Mp :176_177°C .1H NMR(400MHz，CDC13) :8. 20(s，lH，ArH)，8· 05(d，J = 7. 72Hz，lH，ArH)，7· 61(d，J = 7. 92Hz， 2H，ArH)，7. 49 (t，J = 7. 70Hz，1H，ArH)，7. 38 (d，J = 8. 28Hz，1H，ArH)，7. 31 (t，J = 9. 66Hz， 3H，ArH)，5. 04 (s，2H，-CH2)，3. 05 (s，4H，-CH2CH2)，2. 75 (t，J = 4. 38Hz，4H，-CH2CH2)，2. 40 (s， 3H, CH3). MS(ESI) ：439. 32 (C22H23N4O4S, [M+H]+). Anal. Calcd for C22H22N4O4S ：C, 60. 26 ；H, 5. 06 ；N, 12. 78% . Found ：C,60. 27 ；H,5. 08 ；N, 12. 76% .
[0026] 實施例三：2-((4-((4-甲氧基苯基）磺?；┻哙?I-基）甲基）色烯并[4, 3-c] 吡唑-4 (2H)-酮（化合物3)的制備
[0027]
[0028] 制備方法同實施例一。產物為白色粉末狀固體。產率54%。Mp :182-184°C .1H NMR(400MHz，CDC13) :8. 20(s，lH，ArH)，8· 05(d，J = 7. 64Hz，lH，ArH)，7· 66(d，J = 8. 36Hz， 2H，ArH)，7. 48(t，J = 5. 76Hz，lH，ArH)，7. 38(d，J = 8. 24Hz，lH，ArH)，7. 32(t，J = 7. 52Hz， 1H，ArH)，6. 96(d，J = 8. 52Hz，2H，ArH)，5. 05(s，2H，-CH2)，3. 85(s，3H，OCH3)，3. 05(s， 4H, -CH2CH2) ,2. 74 (d, J = 4. 32Hz,4H, -CH2CH2). MS (ESI) ： 455. 37 (C22H23N4O5S, [M+H]+). Anal. Calcd for C22H22N4O5S ：C, 58. 14 ；H, 4. 88 ；N, 12. 33 % . Found ：C, 58. 15 ；H, 4. 91 ；N, 4. 86% .
[0029] 實施例四：2-((4-((4-(叔丁基）苯基）磺?；┻哙?I-基）甲基）色烯并[4， 3-c]吡唑-4 (2H)-酮（化合物4)的制備
[0030]
[0031] 制備方法同實施例一。產物為白色結晶狀固體。產率58%。Mp :264_266°C .1H NMR(400MHz，CDC13) :8. 22(s，lH，ArH)，8· 05(d，J = 7. 76Hz，lH，ArH)，7· 65(d，J = 8. 44Hz， 2H，ArH)，7. 52 (d，J = 8. 32Hz，2H，ArH)，7. 47 (d，J = 7. 28Hz，1H，ArH)，7. 37 (d，J = 8. 24Hz， 1H，ArH)，7. 32 (t，J = 7. 50Hz，1H，ArH)，5. 05 (s，2H，-CH2)，3. 06 (s，4H，-CH2CH2)，2. 77 (t， J = 4. 66Hz,4H, -CH2CH2), 1.33 (s,9H,3CH3). MS (ESI) ：481. 44 (C25H29N4O4S, [M+H]+). Anal. Calcd for C25H28N4O4S ：C, 62. 48 ；H, 5. 87 ；N, 11. 66 % . Found ：C, 62. 47 ；H, 5. 89 ；N, 11. 65 % .
[0032] 實施例五：2-((4-((4-氟苯基）磺?；┻哙?