專利名稱:6－芳基－3－取代亞甲基吡喃酮類化合物及其制備方法和用途的制作方法
發(fā)明領域本發(fā)明屬于有機化學、藥物化學和藥理學領域，具體而言，本發(fā)明涉及具有防治老年性癡呆作用的6-芳基-3-取代亞甲基-吡喃酮類衍生物及其制備方法和用途。經(jīng)藥理活性測試，該類化合物具有強效抑制乙酰膽堿酯酶的活性，且對丁酰膽堿酯酶抑制作用極弱，體內試驗該類化合物對ICR小鼠灌胃給藥2.0g/kg及腹腔注射給藥0.5g/kg均未見毒性，可期待作為防治老年性癡呆藥物用途。
背景技術：
隨著世界進入老齡化社會，老年癡呆癥發(fā)病率逐年上升。目前在老年人群中AD已成為僅次于心臟病、惡性腫瘤和中風的第四位死亡的原因。目前我國60歲以上的老人已達12億，大約有500萬老年性癡呆患者。國內外研究提示，隨著年齡的增長，老年性癡呆的發(fā)病率將逐步增高，80歲以上老年人癡呆的發(fā)病率可達80％。因此，研究防治老年癡呆藥物乃是當前醫(yī)藥界的緊迫課題。由于醫(yī)生Alois Alzheimer首次發(fā)現(xiàn)了早老性癡呆患者腦部組織的異常，人們將該疾病的命名為Alzheimer′sdisease，簡稱AD。老年性癡呆的病因與遺傳、增齡、免疫功能異常、感染、中毒、環(huán)境等因素有關。其發(fā)病機制目前還不十分清楚，大量研究表明AD的發(fā)生是各種病因相互作用的結果，存在各種致病假說，近期占主導地位的主要有淀粉樣肽假說與膽堿能假說。
早在二十世紀六十年代，人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)膽堿能在記憶的形成和維護中起十分重要的作用。1976年Davies和Maloney報道AD患者的膽堿能神經(jīng)元選擇性損失，成為最先發(fā)現(xiàn)特異性神經(jīng)化學變化的AD研究者。80年代膽堿能缺損的研究集中于皮層神經(jīng)分布中心基底前腦邁內特(Meynert)核，并發(fā)現(xiàn)其鄰近區(qū)的結構如蒼蛋白沒有受到漸進退化的影響。另外，移植入合成乙酰膽堿(ACh)的修飾細胞可以逆轉上顎基片核損傷引起的記憶和認知功能障礙，表明膽堿能系統(tǒng)與AD臨床癥狀存在密切關系。在1982年Bartus及其合作者提出記憶功能紊亂的膽堿能假說。在膽堿能突觸中，乙酰膽堿轉移酶膽堿和乙酰輔酶A反應生成乙酰膽堿，儲存于神經(jīng)末端的囊體中；當神經(jīng)去極化，乙酰膽堿從囊體中釋放到突觸的間隙中；通過主動擴散到達間隙的另一側，鍵合煙堿或蕈毒堿的受體，活化受體而產(chǎn)生信號傳導；鍵合在神經(jīng)元表面的乙酰膽堿酯酶(AChE)水解乙酰膽堿，再生成膽堿。在AD的膽堿能模型中，主要的缺損為乙酰膽堿合成和分泌的紊亂，加之乙酰膽堿分解神經(jīng)遞質的分解代謝沒受影響，導致膽堿能突觸間隙乙酰膽堿濃度的大大降低，向大腦皮質區(qū)傳導的信號隨之減弱。這個假說得到大量臨床和數(shù)據(jù)的證實。
基于AD發(fā)病機制的“膽堿能假說”，目前臨床應用及處于臨床研究中的抗AD藥物主要是為了提高腦神經(jīng)中的ACh水平，恢復ACh神經(jīng)傳導，改善病人的記憶、認知和行為能力，延緩病情的發(fā)展。其中一類藥物是擬膽堿藥物，主要有AChE抑制劑和M1受體激動劑。另一類藥物是促進腦神經(jīng)中ACh釋放的藥物，主要包括M2受體拮抗劑、N受體激動劑、促甲狀腺激素釋放激素(TRH)類似物、腺苷(Al)受體拮抗劑、5-HT3受體拮抗劑和鉀、鈣離子通道調節(jié)劑等。
乙酰膽堿酯酶又稱為真性或特異性膽堿酯酶，位于神經(jīng)細胞、骨骼肌、平滑肌、各種腺體和血紅細胞。乙酰膽堿在腦中維持一定的水平對人體記憶功能有重要作用。AChE在腦內的生理作用是迅速使乙酰膽堿水解并失活。所以，抑制乙酰膽堿酯酶是治療老年性癡呆的常用并最成功的方法之一。
雖然目前處于研究或臨床評價的各類藥物較多，老年性癡呆疫苗也在研制中并有希望取得突破，但目前最成功的藥物仍是乙酰膽堿酯酶抑制劑，如美國食品與藥物管理局(FDA)先后通過的治療AD的四個藥物均為AChE抑制劑。他克林(Tacrine，化學名9-氨基-1，2，3，4-四氫-丫啶)是1993年由FDA專門批準的用于治療早老性癡呆癥的第一個藥物。多奈哌齊(donepezil，商品名Acriept，化學名2，3-二氫-5，6-二甲氧基-2-(1-苯基亞甲基哌啶-4-基)亞甲基-1H-1-酮)是美國FDA于1996年11月批準的用于治療阿爾采末病的第二個藥物。1997年1月在美國上市，1999年10月在中國上市，目前已經(jīng)在50多個國家使用。多奈哌齊是一種高效，高選擇性，長效的AChE抑制劑。多奈哌齊臨床療效與他克林相似，但它具有劑量小、毒性低、服用方便、價格低廉等優(yōu)點。
卡巴拉汀(rivestigmine，利斯的明)是FDA批準的第三個用于抗老年癡呆癥的AChE抑制劑。它是一種新型假性不可逆腦內乙酰膽堿選擇性抑制劑。對肝臟的不良反應要低于前兩者，且耐受性好，無外周抗膽堿酯酶活性。加蘭他敏(Galanthamine)是2001年被FDA批準的又一個治療AD的AChE抑制劑，它作用時間長、可逆、中樞選擇性強，用于治療輕、中度AD。
丁酰膽堿酯酶Butylcholinesterase(簡稱BuChE)屬于假性膽堿酯酶，主要在肝臟合成，存在于各類神經(jīng)膠質細胞或衛(wèi)星細胞。在中樞與外周神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元成分內僅存在微量，主要存在血漿和肝臟。有報道，AChE抑制劑引起的肝臟毒性可能跟抑制BuChE有關。如他可林就是因為其對BuChE抑制活性太強，所以臨床上使用時其肝毒性就非常明顯，病人毒副反應大的問題無可避免，影響了其使用劑量和使用范圍及銷售額。臨床上優(yōu)秀的治療老年性癡呆的藥物要求對AChE有強效的抑制作用而對丁酰膽堿酯酶BuChE無抑制作用或抑制活性相對AChE的作用弱的多。
本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明制備得到的6-芳基-3-取代亞甲基-吡喃酮類衍生物具有選擇性強效抑制乙酰膽堿酯酶而對丁酰膽堿酯酶BuChE無明顯抑制作用的活性，且小鼠體內試驗并未發(fā)現(xiàn)急性毒性和異常反應現(xiàn)象出現(xiàn)，從而可期待作為防治老年性癡呆藥物用途；由此完成了本發(fā)明。

發(fā)明內容本發(fā)明的目的在于提供一種具有選擇性強效抑制乙酰膽堿酯酶AChE而對丁酰膽堿酯酶BuChE無明顯抑制作用的活性的化合物。具體而言，本發(fā)明提供了一種具有式(1)所示的6-芳基-3-取代-吡喃酮類衍生物及其可藥用鹽或其溶劑化物 式(1)其中X可以是氧或氮(亞胺)原子；取代基R1可以相同或不同，可以分別是鹵素，氫原子，或含1～5個碳的烷氧基，或兩個或多個R1基也可與苯環(huán)駢合形成取代或未取代的環(huán)狀化合物；取代基R2可以是氫原子，羰基，硫羰基，羥基；n為0～10的整數(shù)；取代基R3可以是氫原子，或者取代或未取代的飽和五～八元環(huán)，或者取代或未取代的飽和五～八元脂雜環(huán)，或者取代或未取代的五～八元芳香環(huán)，或取代或者未取代的五～八元芳香雜環(huán)，或多個環(huán)之間由亞甲基或羰基或氮原子或氧原子連接形成的基團。
R3基團優(yōu)選的有取代或未取代的飽和五元或六元環(huán)，有取代或未取代的飽和五元或六元脂雜環(huán)，或者取代或未取代的五元或六元芳香環(huán)，或取代或者未取代的五元或六元芳香雜環(huán)，或2～5個取代或未取代的脂環(huán)或脂雜環(huán)和取代或未取代的芳環(huán)或芳雜環(huán)之間由亞甲基或羰基連接形成的基團。
R3基團更優(yōu)選取代或未取代的六元環(huán)烷烴基，有取代或未取代的飽和五元或六元脂雜環(huán)，取代或未取代的苯環(huán)，取代或未取代的芳香環(huán)，2～3個取代或未取代的脂環(huán)或脂雜環(huán)和取代或未取代的芳環(huán)或芳雜環(huán)之間由亞甲基或羰基連接形成的基團。
其中，用作取代的取代基選自鹵素，氨基，硝基，巰基，含1-8個碳的烷基，1-8個碳的烷氧基，1-8個碳的?；?，苯基，或芳基。
本發(fā)明的另一目的是提供了制備式(1)化合物的制備方法。
本發(fā)明的另一目的是提供了式(1)化合物用于制備防治老年性癡呆以及防治腫瘤疾病藥物的用途。
本發(fā)明提供了一種具有式(1)所示的6-芳基-3-取代亞甲基-吡喃酮類衍生物及其可藥用鹽或其溶劑化物 式(1)其中X可以是氧或氮(亞胺)或鹵素原子；取代基R1可以相同或不同，可以分別是鹵素，氫原子，或含1～5個碳的烷氧基，或兩個或多個R1基也可與苯環(huán)駢合形成取代或未取代的環(huán)狀化合物；取代基R2可以是氫原子，羰基，硫羰基；n為0～10的整數(shù)；取代基R3可以是氫原子，或者取代或未取代的飽和五～八元環(huán)，或者取代或未取代的飽和五～八元脂雜環(huán)，或者取代或未取代的五～八元芳香環(huán)，或取代或者未取代的五～八元芳香雜環(huán)，或多個環(huán)之間由亞甲基或羰基或氮原子或氧原子連接形成的基團；R3基團優(yōu)選的有取代或未取代的飽和五元或六元環(huán)，有取代或未取代的飽和五元或六元脂雜環(huán)，或者取代或未取代的五元或六元芳香環(huán)，或取代或者未取代的五元或六元芳香雜環(huán)，或2～5個取代或未取代的脂環(huán)或脂雜環(huán)和取代或未取代的芳環(huán)或芳雜環(huán)之間由亞甲基或羰基連接形成的基團；R3基團更優(yōu)選取代或未取代的六元環(huán)烷烴基，有取代或未取代的飽和五元或六元脂雜環(huán)，取代或未取代的苯環(huán)，取代或未取代的芳香雜環(huán)，2～3個取代或未取代的脂環(huán)或脂雜環(huán)和取代或未取代的芳環(huán)或芳雜環(huán)之間由亞甲基或羰基連接形成的基團；其中，用作取代的取代基選自鹵素，氨基，硝基，巰基，含1-8個碳的烷基，1-8個碳的烷氧基，1-8個碳的酰基，苯基，或芳基。
本發(fā)明進一步的實施方案是當式(1)中X是氧原子，虛線不存在，R2是氫原子，n＝0時，稱為式(Ia～Ig)所示的化合物I-a.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-(3-氧代-環(huán)己烯-1-烯基氧基甲基)-2H-吡喃酮；I-b.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-(2-甲基-5-氧代-環(huán)戊烯-1-烯醇基甲基)-2H-吡喃酮；I-c.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-((2-甲基吡喃-4-酮)-3-基氧基)甲基-2H-吡喃酮；I-d.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-((6-甲基-2-氧代-2H-吡喃)-4-基-氧基甲基)-2H-吡喃酮；I-e.5-(6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-2-氧代-2H-吡喃-3-基甲氧基)-6-羥基-5-環(huán)己烯-1，2，3，4-四酮；I-f.6-(2-溴-3，4，5-三甲氧基苯基)-3-((6-甲基-2-氧代-2H-吡喃)-4-基-氧基甲基)-2H-吡喃酮；I-g.6-(苯并[1，3]二氧戊環(huán)-5-基)-3-((6-甲基-2-氧代-2H-吡喃)-4-基-氧基甲基)-2H-吡喃酮。
當式(1)中的X為氮原子，虛線不存在時，稱為式(II)所示的化合物 式(II)其中取代基R1，R2，R3和n的定義與或(1)中的相同。
本發(fā)明優(yōu)選的式(II)化合物包括II-a.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-((2-嗎啉-4-基-乙基氨基)-甲基)-2H-吡喃酮；II-b.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-((2-(5-硝基-吡啶-2-基氨基)-乙基氨基)-甲基)-2H-吡喃酮；II-c.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-((四氫呋喃-2-基-甲基氨基)甲基)-2H-吡喃酮；II-d.4-((6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-2-氧代-2H-吡喃-3-基甲基)-氨基)-哌啶-1-甲酸乙酯；II-e.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-((2-哌嗪-1-基-乙基氨基)-甲基)-2H-吡喃酮；
II-f.N-2-((6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-2-氧代-2H-吡喃-3-基甲基氨基)-乙基)-苯甲酰胺；II-g.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-((4-氟-芐基氨基)-甲基)-2H-吡喃酮；II-h.3-((1-芐基-哌啶-4-基氨基)-甲基)-6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-2H-吡喃酮；II-i.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-(2-(4-(4-氟-芐基)-哌啶-1-基)-乙基氨基)-甲基-2H-吡喃酮；II-j.3-(芐基氨基-甲基)-6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-2H-吡喃酮；II-k.3-(4-(2-((6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-2-氧代-2H-吡喃-3-基甲基)-氨基)-乙基)-哌嗪-1-基甲基)-苯乙腈；II-l.6-(苯并[1，3]二氧戊環(huán)-5-基)-3-((2-(5-硝基-吡啶-2-基氨基)-乙基氨基)-甲基)-2H-吡喃酮；II-m.3-((1-芐基-哌啶-4-基氨基)-甲基)-6-(苯并[1，3]二氧戊環(huán)-5-基)-2H-吡喃酮；II-n.6-(3，4-二甲氧基苯基)-2-氧代-2H-吡喃-3-甲酸(2-嗎啉-4-基-乙基)胺；II-o.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-2-氧代-2H-吡喃-3-甲酸(1-芐基-哌啶-4-基)胺。
當式(1)中X為氮原子，R2為H，虛線存在成雙鍵時，稱為式(III)所示的化合物 式(III)式(III)化合物的取代基R1和n的定義與式(1)中的相同；R2的定義與式(1)中的R3相同。
本發(fā)明優(yōu)選的式(III)化合物包括III-a.順-3-((1-芐基-哌啶-4-基-亞氨基)-甲基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-2H-吡喃酮；III-b.反-3-((1-芐基-哌啶-4-基-亞氨基)-甲基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-2H-吡喃酮；III-c.順-3-((1-芐基-哌啶-4-基-亞氨基)-甲基)-6-(苯并[1，3]二氧戊環(huán)-5-基)-2H-吡喃酮；III-d.反-3-((1-芐基-哌啶-4-基-亞氨基)-甲基)-6-(苯并[1，3]二氧戊環(huán)-5-基)-2H-吡喃酮。
本發(fā)明還提供一種式(I)，式(II)和式(III)化合物的制備方法，該合成路線的工藝路線特征是以乙酰乙酸乙酯為起始原料，在堿性條件下與碘甲烷反應生成2-甲基乙酰乙酸乙酯，再與相同或不同R1取代的芳基醛在堿性條件下縮合成醇I-1，經(jīng)硼氫化鈉還原I-1成二醇I-2；在堿性條件下失水關環(huán)得四氫吡喃酮類化合物I-3；再經(jīng)脫水反應得二氫吡咯酮類化合物I-4；化合物I-4經(jīng)溴代丁二酰亞胺(NBS)一步在苯環(huán)上、甲基上及四氫吡喃酮的6位溴化及6、5位脫溴化氫制得相應的溴化物I-5，I-6和無溴的醛I-7；溴化物I-5和不同取代的羥基進行取代反應后生成相應的式(I)化合物，而被不同取代的有機胺取代反應后生成相應的式(IIa～IIk)化合物；溴化物I-5經(jīng)過氧化銀氧化后成為苯環(huán)上溴取代的醛I-7，溴化物I-6經(jīng)過在堿性條件下被二甲亞砜(DMSO)氧化也可以生成苯環(huán)上溴取代醛I-7，苯環(huán)上溴取代醛I-7先經(jīng)NBS溴化然后和不同的有機胺反應生成相應的式(IIn～IIo)化合物；苯環(huán)上未被溴取代的醛I-7直接和不同的伯胺進行縮合反應生成相應的式(IIIa～IIIb)化合物。
式(1)化合物和式(2)化合物及其制備中間體具有重要的生物活性，體外試驗表明此類具有6-芳基-3-取代亞甲基-吡喃酮類結構的新化合物對乙酰膽堿酯酶(AChE)有抑制作用，但是對丁酰膽堿酯酶(BuChE)抑制作用較弱，且對ICR小鼠急性毒性試驗中，顯示出良好的安全性，有可能發(fā)展成為新的抗老年癡呆癥用藥。
本發(fā)明的式(1)化合物其制備中間體或其可藥用鹽或其溶劑化物可以與藥學上常用的輔料或載體結合，制備得到具有乙酰膽堿酯酶抑制活性從而可以用于防治老年性癡呆的藥物組合物。上述各類藥物組合物可以采用注射劑、片劑或膠囊等不同給藥途徑的藥物劑型。也可以采用公知理論和技術將式(1)化合物其制備中間體或其可藥用鹽或其溶劑化物制備成控釋、緩釋劑型以及納米制劑等。
下面通過制備例和實施例進一步說明本發(fā)明，其中OMe代表甲氧基，OEt代表乙氧基。實施例給出了代表性新化合物的合成及相關結構鑒定數(shù)據(jù)以及部分活性數(shù)據(jù)。必須說明，下述制備例和實施例是用于說明本發(fā)明而不是對本發(fā)明的限制。根據(jù)本發(fā)明的實質對本發(fā)明進行的簡單改進都屬于本明要求保護的范圍。
制備例1化合物I-0(2-甲基乙酰乙酸乙酯)的制備 在300毫升乙醇中，加入13.8克金屬鈉(600mmol)，完全溶解后，滴加乙酰乙酸乙酯80ml(600mmol)，升溫并回流1小時，滴加碘甲烷50ml(660mmol)，回流兩小時，冷卻至室溫，旋轉蒸發(fā)除去乙醇，加入水用乙醚萃取(5×50ml)，合并有機相，無水硫酸鈉干燥，抽濾，旋轉蒸發(fā)除去乙醚，減壓蒸餾，收集78-80℃(13mmHg)餾分，得到無色透明液體87.63克，分離收率Y＝50.71％。
制備例2化合物I-1的制備
以(2-甲基-3-氧-5-羥基-5-(3′，4′，5′-三甲氧基苯基)-戊酸乙酯)為例于冰鹽浴冷卻條件下，向2.3克氫化鈉(95.8mmol)的四氫呋喃懸濁液(140ml)中，滴加2-甲基乙酰乙酸乙酯5.78克(37.5mmol)，然后滴加2.5M正丁基鋰的正己烷溶液28ml(70.2mmol)，十分鐘后滴加3，4，5-三甲氧基苯甲醛5.88克(30mmol)的四氫呋喃溶液(10ml)，繼續(xù)反應15分鐘，向反應體系中加入飽和氯化銨水溶液(30ml)，用乙醚(3×50ml)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水洗滌(3×20ml)，無水硫酸鈉干燥，抽濾，硅膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯2/1)得到黃色油狀液體7.572克，分離收率Y＝72.11％。
Rf(乙酸乙酯/石油醚1/1)0.59。
制備例3化合物I-2的制備
以(2-甲基-3-羥基-5-羥基-5-(3′，4′，5′-三甲氧基)-戊酸乙酯)為例在冰水浴中，將3.06克(9mmol)中間物I-1溶解在四氫呋喃(67.5ml)和甲醇(27ml)中，緩慢加入硼氫化鈉1.04克(27mmol)，反應30分鐘。加入飽和氯化銨水溶液30ml，乙醚萃取(3×40ml)，合并有機相，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，旋轉蒸發(fā)除去乙醚，得粗品3.22克，直接進行下一步反應。
Rf(乙酸乙酯/石油醚1/1)0.35。
制備例4化合物I-3的制備
以(3-甲基-4-羥基-6-(3′，4′，5′-三甲氧基苯基)-四氫吡喃-2-酮)為例3.08克(9mmol)I-2溶于95％乙醇(72ml)中，分批加入1M氫氧化理(10ml)，反應一小時。旋轉蒸發(fā)除去乙醇，加水，乙酸乙酯洗滌。水層滴加1N鹽酸15ml，用乙酸乙酯(7×30ml)萃取，合并有機相，無水硫酸鈉干燥，抽濾，旋轉蒸發(fā)除去乙酸乙酯，加入四氫呋喃(45ml)，加入對甲苯磺酸0.31克(1.8mmol)，反應過夜。加入乙醚稀釋，飽和碳酸氫鈉(2×5ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。硅膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯2/1)得黃色膠狀物0.837克。實施例3、4二步反應總收率31.42％。
Rf(乙酸乙酯/石油醚1/1)0.34。
制備例5化合物I-4(3-甲基-6-(3′，4′，5′-三甲氧基苯基)-5，6-二氫吡喃-2-酮)的制備 0.837克(2.8mmol)I-3溶于二氯甲烷(43.5ml)，在冰水浴條件下滴入三乙胺1.67ml(11.9mmol)，繼而緩緩滴加甲磺酰氯0.872ml(11.2mmol)。反應30分鐘。加入水洗滌(2×5ml)，飽和食鹽水洗滌(2×5ml)，無水硫酸鈉干燥。旋轉蒸發(fā)除去溶劑繼續(xù)下步反應；3-甲基-4-甲磺酰氧基-6-(3′，4′，5′-三甲氧基苯基)-吡喃-2-酮1.047克(2.8mmol)溶于甲苯(45ml)，室溫下攪拌，緩緩加入DBU 2.24克(14.7mmol)，反應過夜。
用水洗滌(2×10ml)，飽和食鹽水洗滌(2×5ml)，無水硫酸鈉干燥。硅膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯2/1)得0.326克白色針狀晶體，分離收率Y＝42％。m.p.115-116℃(乙酸乙酯重結晶)。
Rf(乙酸乙酯/石油醚1/1)0.51。
制備例6化合物I-5的制備
以(3-溴甲基-6-(2′-溴-3′，4′，5′-三甲氧基苯基)-吡喃-2-酮)為例將500mg化合物I-4(2mmol)、1.3克N-溴代丁二酰亞胺(6.4mmol)、330mg偶氮二異丁腈(2mmol)、100ml四氯化碳的混合物攪拌，升溫反應1.5小時后降溫至室溫，加入30ml水，分液取下層，水層用50ml氯仿洗兩次，合并有機相用飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉干燥，抽濾，旋轉蒸發(fā)除去溶劑，硅膠柱層析(氯仿/石油醚1/1)得黃色固體，m.p.93～95℃(氯仿重結晶)。分離收率Y＝43.8％。
Rf(乙酸乙酯/石油醚1/3)0.331H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)3.90(s，3H，4′-OMe)，3.91(s，3H，5′-OMe)，3.92(s，3H，3′-OMe)，4.40(s，2H，H-7)，6.70(d，J＝6.8Hz，H-5)，6.96(s，1H，H-6′)，7.57(d，J＝6.8Hz，1H，H-4)。
MS(ESI)，m/e(相對豐度)427(M+23)+(100)。
實施例1化合物I-6的制備
以(3-二溴甲基-6-(2′-溴-3′，4′，5′-三甲氧基苯基)-吡喃-2-酮)為例將500mg化合物I-4(2mmol)、1.3克N-溴代丁二酰亞胺(12mmol)、330mg偶氮二異丁腈(2mmol)、100ml四氯化碳的混合物攪拌，升溫反應1.5小時后降溫至室溫，加入30ml水，分液取下層，水層用50ml氯仿洗兩次，合并有機相用飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉干燥，抽濾，旋轉蒸發(fā)除去溶劑，硅膠柱層析(氯仿/石油醚1/1)得黃色固體，m.p.83～84℃(氯仿重結晶)。分離收率Y＝50.2％。
Rf(乙酸乙酯/石油醚1/3)0.421H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)3.90(s，3H，4′-OMe)，3.91(s，3H，5′-OMe)，3.92(s，3H，3′-OMe)，6.76(s，1H，H-7)，6.83(d，J＝6.0Hz，H-5)，6.96(s，1H，H-6′)，8.02(d，J＝6.0Hz，1H，H-4)。
MS(ESI)，m/e(相對豐度)513(M)+(6)。
實施例2結構通式為I-7的無溴的醛的制備
以(3-甲酰基-6-(3′，4′，5′-三甲氧基苯基)-吡喃-2-酮)為例將500mg化合物I-4(2mmol)、1.3克N-溴代丁二酰亞胺(12mmol)、330mg偶氮二異丁腈(2mmol)、100ml四氯化碳的混合物攪拌，升溫反應1.5小時后降溫至室溫，加入30ml水，分液取下層，水層用50ml氯仿洗兩次，合并有機相用飽和食鹽水洗一次，無水硫酸鈉干燥，抽濾，旋轉蒸發(fā)除去溶劑，硅膠柱層析(氯仿/石油醚1/1)得黃色膠狀物。分離收率Y＝11.3％。
Rf(乙酸乙酯/石油醚1/3)0.151H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)3.93(s，3H，4′-OMe)，3.95(s，6H，3′-OMe，5′-OMe)，6.84(d，J＝7.2Hz，H-5)，7.13(s，2H，H-2′，H-6′)，8.16(d，J＝7.2Hz，1H，H-4)，10.15(s，1H，H-7)。
MS(ESI)，m/e(相對豐度)290(M)+(100)。
實施例3結構通式為I-7的苯環(huán)上含溴的醛的制備
以(3-甲?；?6-(2′-溴-3′，4′，5′-三甲氧基苯基)-吡喃-2-酮)為例
方法一將430mg化合物I-5(1mmol)、碳酸氫鈉(15mmol)、50ml二甲亞砜的混合物攪拌，室溫，2小時后減壓除去二甲亞砜，加入10ml水，水層用20ml乙酸乙酯洗兩次，合并有機相，用無水硫酸鈉干燥，抽濾，減壓除去溶劑，硅膠柱層析(氯仿/石油醚1/1)得黃色膠狀物。分離收率Y＝42.5％。
方法二將500mg化合物I-6(1mmol)、17mg硝酸銀(0.1mmol)、100ml乙醇的混合物攪拌，升溫反應1.5小時后降溫至室溫，過濾除去沉淀，濾渣用乙醇洗兩次，得到濾液，旋轉蒸發(fā)除去溶劑，硅膠柱層析(氯仿/石油醚1/1)得黃色膠狀物。分離收率Y＝48.6％。
Rf(乙酸乙酯/石油醚1/3)0.211H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)3.91(s，3H，4′-OMe)，3.92(s，3H，5′-OMe)，3.97(s，3H，3′-OMe)，6.96(d，J＝7.2Hz，H-5)，7.01(s，1H，H-6′)，8.17(d，J＝6.8Hz，1H，H-4)，10.18(s，1H，H-7)。MS(ESI)，m/e(相對豐度)369(M)+(60)。
實施例4化合物I-c，6-(2-溴-3，4-二甲氧基苯基)-3-((2-甲基吡喃-4-酮)-3-基-氧基)亞甲基-2H-吡喃酮的制備 將10mg化合物I-5(0.025mmol)溶于2ml乙腈中，加入碳酸鉀52mg(0.38mmol)，室溫攪拌12小時，旋轉蒸發(fā)除去溶劑，加入水，用乙酸乙酯洗兩次，無水硫酸鈉干燥，抽濾，減壓除去溶劑，硅膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚1/4)得淺黃色膠狀物6mg，m.p.129-131℃(乙酸乙酯重結晶)。分離收率Y＝52.0％。
Rf(乙酸乙酯/石油醚1/1)0.33。
1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)2.38(s，2H，2″-Me)，3.94(s，3H，4′-OMe)，3.95(s，3H，5′-OMe)，4.99(d，2H，J＝0.8Hz，H-7)，6.40(d，1H，J＝5.6Hz，H-5″)，6.95(d，1H，J＝8.8Hz，H-5)，7.37(d，1H，J＝2.4Hz，H-6′)，7.54(dd，1H，J＝8.8，2.4Hz，H-4)，7.66(d，1H，J＝5.6Hz，H-6″)，7.55(s，1H，H-3′)。
MS(ESI)，m/e(相對豐度)471(M+Na)+(95％)
根據(jù)與以上制備例1-6及實施例4之一的類似方法制備得到以下表一所示實施例5-10化合物表一 下面列出的是表一中各化合物的理化數(shù)據(jù)I-a無色膠狀物，Rf(乙酸乙酯/石油醚1/3)0.25；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)2.04(m，2H，H-5″)，2.39(m，2H，H-6″)，2.52(m，2H，H-4″)，3.94(m，2H，4′-OMe)，3.96(s，3H，5′-OMe)，4.78(s，2H，H-7)，5.47(s，1H，H-2″)，6.95(d，1H，J＝8.0Hz，H-5)，7.36(m，1H，H-6′)，7.54(m，2H，H-4)，7.58(s，1H，H-3′)；ESI-MS(m/z)435(M)+(15％)。I-b無色膠狀物，Rf(乙酸乙酯/石油醚1/2)0.20；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)2.01(s，2H，2″-Me)，2.39(m，2H，H-4″)，2.49(m，2H，H-3″)，3.93(s，3H，4′-OMe)，3.94(s，3H，5′-OMe)，5.05(d，2H，J＝1.2Hz，H-7)，6.94(d，1H，J＝8.8Hz，H-5)，7.36(d，1H，J＝2.0Hz，H-6′)，7.53(dd，1H，J＝8.8，2.0Hz，H-4)，7.69(s，1H，H-3′)；ESI-MS(m/z)457(M+Na)+(100％)。
I-d無色膠狀物，Rf(乙酸乙酯/石油醚1/1)0.53；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)2.19(s，2H，6″-Me)，3.56(s，2H，H-7)，3.91(s，3H，4′-OMe)，3.94(s，3H，5′-OMe)，5.89(s，1H，H-5″)，6.93(d，1H，J＝8.8Hz，H-5)，7.32(d，1H，J＝2.0Hz，H-6′)，7.48(dd，1H，J＝8.8，2.0Hz，H-4)，7.90(s，1H，H-3′)，9.94(s，1H，H-3″)；ESI-MS(m/z)449(M)+(98％)。I-e無色膠狀物，Rf(乙酸乙酯/石油醚1/2)0.13；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)3.93(s，3H，4′-OMe)，3.95(s，3H，5′-OMe)，4.57(d，2H，J＝0.8Hz，H-7)，6.93(d，1H，J＝8.4Hz，H-5)，7.35(d，1H，J＝2.0Hz，H-6′)，7.50(dd，1H，J＝8.4，2.0Hz，H-4)，7.56(s，1H，H-3′)；ESI-MS(m/z)515(M+Na)+(37％)。
I-f無色膠狀物，Rf(乙酸乙酯/石油醚1/1)0.32；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)2.12(s，2H，6″-Me)，3.46(s，2H，H-7)，3.91(s，3H，4′-OMe)，3.92(s，3H，3′-OMe)，3.94(s，3H，5′-OMe)，5.89(s，1H，H-5″)，6.70(d，1H，J＝6.8Hz，H-5)，6.96(s，1H，H-6′)，7.57(d，1H，J＝6.8Hz，H-4)，9.90(s，1H，H-3″)；ESI-MS(m/z)479(M)+(100％)。
I-g無色膠狀物，Rf(乙酸乙酯/石油醚1/3)0.33；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)2.15(s，2H，6″-Me)，3.52(s，2H，H-7)，5.89(s，1H，H-5″)，6.05(s，2H，H-2′)，6.54(d，1H，J＝7.2Hz，H-5)，6.88(d，1H，J＝8.4Hz，H-7′)，7.27(s，1H，H-4′)，7.41(d，1H，J＝8.4Hz，H-6′)，7.53(dd，1H，J＝7.2Hz，H-4)，9.94(s，1H，H-3″)；ESI-MS(m/z)354(M)+(100％)。
實施例11化合物II-a，6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-((2-嗎啉-4-基-乙基氨基)-甲基)-2H-吡喃酮的制備 將20mg化合物I-5(0.05mmol)溶于2ml乙腈中，加入氨基乙基嗎啉20mg(0.15mmol)，室溫攪拌24小時，減壓除去溶劑，硅膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚1/4)得無色膠狀物20mg，分離收率Y＝88.3％。
Rf(甲醇/氯仿10/1)0.61；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)2.53(brs，4H，H-3″，H-5″)，2.63(brs，2H，H-10)，2.84(brs，2H，H-9)，3.75(brs，6H，H-2″，6″，7)， 3.94(s，3H，4′-OMe)，3.95(s，3H，5′-OMe)，6.95(d，1H，J＝8.4Hz，H-5)，7.36(d，1H，J＝2.0Hz，H-6′)，7.51(dd，1H，J＝8.4，2.0Hz，H-4)，7.63(s，1H，H-3′)。
MS(ESI)，m/e(相對豐度)453(M)+，(100％)；455(M+2)+，(98％)根據(jù)與以上制備例1-6、實施例11類似的方法制備以下表二所示實施例12-23化合物表二
下面列出的是表二中各化合物的理化數(shù)據(jù)II-b無色膠狀物，Rf(乙酸乙酯/石油醚1/3)0.20；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)2.87(brs，2H，H-9)，3.57(brs，2H，H-10)，3.75(s，2H，H-7)，3.89(s，3H，4′-OMe)，3.94(s，3H，5′-OMe)，6.57(d，1H，J＝9.2Hz，H-3″)，6.88(d，1H，J＝8.4Hz，H-5)，7.30(d，1H，J＝2.0Hz，H-6′)，7.45(dd，1H，J＝804，2.0Hz，H-4)，7.52(s，1H，H-4，H-3′)，8.05(d，1H，J＝9.2Hz，H-4″)，9.00(s，1H，H-6″)。
II-c無色膠狀物，Rf(乙酸乙酯/石油醚1/1)0.22；1HNMR(400MHz，CDCl3，δppm)1.59(m，2H，H-4″)，1.91(m，2H，H-3″)，2.74(m，2H，H-9)，3.74(s，2H，H-7)，3.77(m，1H，H-5″b)，3.89(m，1H，H-5″a)，3.93(s，3H，4′-OMe)，3.94(s，3H，5，-OMe)，4.08(m，1H，H-2″)，6.92(d，1H，J＝8.4Hz，H-5)，7.35(d，J＝2.0Hz，1H，H-6′)，7.50(dd，1H，J＝8.0，2.0Hz，H-4)，7.60(s，1H，H-3′)。
II-d無色膠狀物，Rf(乙酸乙酯/石油醚1/1)0.15；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)1.26(t，3H，J＝7.2Hz，OCH2CH3)，1.41(brs，4H，H-2″，H-6″)，1.93(m，2H，H-3″a，5″a)，2.76(m，2H，H-4″)，2.88(m，2H，H-3″b，5″b)，3.75(s，2H，H-7)，3.94(s，3H，4′-OMe)，3.95(s，3H，5′-OMe)，4.19(q，2H，J＝7.2Hz，OCH2CH3)，6.92(d，1H，J＝8.8Hz，H-5)，7.35(d，1H，J＝2.0Hz，H-6′)，7.51(dd，1H，J＝8.8，2.0Hz，H-4)，7.62(s，1H，H-3′)。
II-e無色膠狀物，Rf(氯仿/甲醇2/1)0.45；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)2.60(m，8H，H-2″，H-3″，H-5″，H-6″)，3.46(m，4H，H-8，H-9)，3.69(s，2H，H-7)，3.93(s，3H，4′-OMe)，3.95(s，3H，5′-OMe)，6.93(d，1H，J＝8.8Hz，H-5)，7.35(d，1H，J＝2.0Hz，H-6′)，7.52(dd，1H，J＝8.8，2.0Hz，H-4)，7.55(s，1H，H-3′)。
II-f無色膠狀物，Rf(乙酸乙酯/石油醚1/3)0.22；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)3.49(dd，2H，J＝4.8，12.6Hz，H-9)，3.75(dd，2H，J＝2.0，12.0Hz，H-10)，3.94(s，3H，4′-OMe)，3.96(s，3H，5′-OMe)，4.57(s，1H，H-8)，4.92(s，2H，H-7)，5.28(s，1H，H-11)，6.92(d，1H，J＝8.0Hz，H-5)，6.98(d，2H，J＝10.8Hz，H-3″，H-5″)，7.35(m，1H，H-6′)，7.54(m，2H，H-2″，H-6″)，7.62(s，1H，H-3′)，7.77(d，1H，J＝8.0Hz，H-4)。
II-g無色膠狀物，Rf(乙酸乙酯/石油醚1/1)0.15；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)2.62(brs，4H，H-2″，H-6″)，2.68(brs，2H，H-10)，3.62(m，2H，H-9)，3.74(brs，4H，H-3″，5″)，3.96(s，3H，4′-OMe)，3.97(s，3H，5′-OMe)，6.84(d，1H，J＝7.6Hz，H-5)，6.97(d，1H，J＝8.8Hz，H-5′)，7.38(d，1H，J＝2.4Hz，H-2′)，7.54(dd，1H，J＝8.8，2.0Hz，H-6′)，7.57(d，1H，J＝7.6Hz，H-4)，9.03(s，1H，H-8)。
II-h無色膠狀物，Rf(氯仿/甲醇5/1)0.35；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)1.46(m，2H，H-3″b，5″b)，1.92(m，2H，H-3″a，5″a)，2.08(m，2H，H-2″b，6″b)，2.52(m，1H，H-4″)，2.89(m，2H，H-2″a，6″a)，3.53(brs，2H，H-7)，3.67(d，1H，J＝0.8Hz，H-7′)，3.92(s，3H，4′-OMe)，3.93(s，3H，5′-OMe)，6.93(d，1H，J＝8.4Hz，H-5)，7.31(m，5H，Ph-H)，7.34(s，1H，H-6′)，7.48(dd，1H，J＝8.4，2.0Hz，H-4)，7.54(brs，1H，H-3′)。
II-i無色膠狀物，Rf(氯仿/甲醇5/1)0.30；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm2.40(brs，2H，H-9)，2.47(brs，4H，H-2″，H-6″)，2.69(brs，2H，H-8)，2.83(brs，4H，H-3″，H-5″)，3.52(s，2H，H-7″)，3.74(s，2H，H-7)，3.87(s，3H，4′-OMe)，3.89(s，3H，5′-OMe)，7.07(m，3H，H-5，H-2_，H-6_)，7.45(m，4H，H-4，H-6′，H-3_，H-5_)，7.81(s，1H，H-3′)。
II-j無色膠狀物，Rf(乙酸乙酯/石油醚1/3)0.25；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)1.77(brs，2H，H-2″b，6″b)，2.02(brs，2H，H-3″b，5″b)，2.36(brs，2H，H-2″a，6″a)，2.94(brs，2H，H-3″a，5″a)，3.67(s，1H，H-7″)，3.95(s，3H，4′-OMe)，3.96(s，3H，5′-OMe)，4.01(m，1H，H-1″)，6.96(d，1H，J＝8.4Hz，H-5)，7.32(m，5H，Ph-H)，7.44(d，1H，J＝2.0Hz，H-6′)，7.64(dd，1H，J＝8.4，2.0Hz，H-4)，8.63(s，1H，H-3′)。
II-k無色膠狀物，Rf(乙酸乙酯/石油醚1/1)0.15；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)2.46(brs，6H，H-2″，H-6″，H-9)，2.55(brs，4H，H-3″，H-5″)，2.66(brs，2H，H-8)，3.50(s，2H，H-7″)，3.72(s，2H，H-7)，3.89(s，3H，4′-OMe)，3.91(s，3H，5′-OMe)，6.91(d，1H，J＝8.4Hz，H-5)，7.30(brs，1H，H-6′)，7.39(d，1H，J＝7.6Hz，H-6_)，7.45(dd，1H，J＝8.4，2.0Hz，H-4)，7.51(m，2H，H-3′，H-5_)，7.62(d，1H，J＝7.6Hz，H-4_)，7.67(s，1H，H-2_)。
II-l無色膠狀物，Rf(乙酸乙酯/石油醚1/1)0.31；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)2.87(brs，2H，H-9)，3.57(brs，2H，H-10)，3.75(s，2H，H-7)，6.05(s，2H，H-2′)，6.54(d，1H，J＝7.2Hz，H-5)，6.57(d，1H，J＝9.2Hz，H-3″)，6.81(d，1H，J＝8.4Hz，H-7′)，6.88(d，1H，J＝8.4Hz，H-5)，7.27(s，1H，H-4′)，7.30(d，1H，J＝2.0Hz，H-6′)，7.45(dd，1H，J＝8.4，2.0Hz，H-4)，7.52(s，1H，H-4，H-3′)，8.05(d，1H，J＝9.2Hz，H-4″)，9.00(s，1H，H-6″)。
II-m無色膠狀物，Rf(氯仿/甲醇5/1)0.35；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)1.46(m，2H，H-3″b，5″b)，1.92(m，2H，H-3″a，5″a)，2.08(m，2H，H-2″b，6″b)，2.52(m，1H，H-4″)，2.89(m，2H，H-2″a，6″a)，3.53(brs，2H，H-7)，3.67(d，1H，J＝0.8Hz，H-7″)，6.05(s，2H，H-2′)，6.54(d，1H，J＝7.2Hz，H-5)，6.88(d，1H，J＝8.4Hz，H-7′)，7.27(s，1H，H-4′)，7.31(m，5H，Ph-H)，7.41(d，1H，J＝8.4Hz，H-6′)，7.53(dd，1H，J＝7.2Hz，H-4)，9.94(s，1H，H-2″)。
實施例24化合物II-n，6-(3，4-二甲氧基苯基)-2-氧代-2H-吡喃-3-甲酸(2-嗎啉-4-基-乙基)氨的制備 將26mg由I-5制備來的化合物I-7(0.05mmol)溶于2ml四氯化碳和二氯甲烷的混合溶劑中，加入27mg NBS(0.075mmol)，光照3小時，冷卻至室溫，冰水浴，加入氨基乙基嗎啉20mg(0.075mmol)，室溫攪拌24小時，減壓除去溶劑，硅膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚1/4)得無色膠狀物4mg，分離收率Y＝17.3％。
Rf(乙酸乙酯/石油醚1/1)0.15；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)2.62(brs，4H，H-3″，H-5″)，2.68(brs，2H，H-10)，3.62(m，2H，H-9)，3.74(brs，4H，H-2″，6″)，3.96(s，3H，4′-OMe)，3.97(s，3H，5′-OMe)，6.84(d，1H，J＝7.6Hz，H-5)，6.97(d，1H，J＝8.8Hz，H-5′)，7.38(d，1H，J＝2.4Hz，H-2′)，7.54(dd，1H，J＝8.8，2.0Hz，H-6′)，7.57(d，1H，J＝7.6Hz，H-4)，9.03(s，1H，H-8)。
MS(ESI)，m/e(相對豐度)490(M+Na)+，(100％)實施例25化合物II-o，6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-2-氧代-2H-吡喃-3-甲酸(1-芐基-哌啶-4-基)氨的制備將18mg化合物I-4得來的化合物I-7(0.05mmol)溶于3ml四氯化碳和二氯甲烷的混合溶劑中，加入15mg NBS(0.075mmol)，光照3小時，冷卻至室溫，冰水浴，加入4-氨基-1-芐基哌啶20mg(0.11mmol)，室溫攪拌24小時，減壓除去溶劑，硅膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚1/4)得無色膠狀物6mg，分離收率Y＝23.1％。
Rf(乙酸乙酯/石油醚1/3)0.25；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)1.77(brs，2H，H-3″b，5″b)，2.02(brs，2H，H-2″b，6″b)，2.36(brs，2H，H-3″a，5″a)，2.94(brs，2H，H-2″a，6″a)，3.67(s，1H，H-7′)，3.95(s，3H，4′-OMe)，3.96(s，3H，5′-OMe)，4.01(m，1H，H-1″)，6.96(d，1H，J＝8.4Hz，H-5)，7.32(m，5H，Ph-H)，7.44(d，1H，J＝2.0Hz，H-6′)，7.64(dd，1H，J＝8.4，2.0Hz，H-4)，8.63(s，1H，H-3′)。MS(ESI)，m/e(相對豐底)527(M+1)+，(100％)。
實施例26，27化合物III-a及III-b，順-3-((1-芐基-哌啶-4-基-亞氨基)-甲基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-2H-吡喃酮及反3-((1-芐基-哌啶-4-基-亞氨基)-甲基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-2H-吡喃酮的制備 15mg(0.06mmol)中間物I-7溶于3ml甲醇中，室溫攪拌，加入16mg4-氨基-1-芐基哌啶(0.09mmol)，反應三小時，減壓除去溶劑，柱層析(石油醚/乙酸乙酯2/1)得無色膠狀物III-a及無色膠狀物III-b，分別為9mg和5mg分離收率分別為Ya＝34.7％，Yb＝19.3％。
III-a.無色膠狀物，Rf(乙酸乙酯/氯仿1/1)0.35；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)1.78(brs，2H，H-3″b，5″b)，1.98(brs，2H，H-2″b，6″b)，2.23(brs，2H，H-3″a，5″a)，2.93(brs，2H，H-2″a，6″a)，3.29(m，1H，H-4″)，3.60(s，1H，H-7″)，3.95(s，3H，3′-OMe)，3.96(s，3H，4′-OMe)，6.90(d，1H，J＝8.4Hz，H-5′)，7.28(m，5H，Ph-H)，7.33(s，1H，H-2′)，7.41(d，1H，J＝14.0Hz，H-5)，7.56(d，1H，J＝16.4Hz，H-4)，7.62(d，1H，J＝8.4Hz，H-6′)，9.06(brs，1H，H-7)。
MS(ESI)，m/e(相對豐度)432(M)+，(100％)。
III-b.無色膠狀物，Rf(乙酸乙酯/氯仿1/1)0.30；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)1.93(m，2H，H-3″b，5″b)，1.96(m，2H，H-2″b，6″b)，2.87(m，2H，H-3″a，5″a)，2.91(m，2H，H-2″a，6″a)，3.23(m，1H，H-4″)，3.49(s，1H，H-7″)，3.95(s，3H，3′-OMe)，3.96(s，3H，4′-OMe)，6.83(d，1H，J＝15.2Hz，H-5)，6.91(d，1H，J＝8.4Hz，H-5′)，7.28(m，5H，Ph-H)，7.33(s，1H，H-2′)，7.53(d，1H，J＝8.4Hz，H-6′)，7.59(d，1H，J＝15.2Hz，H-4)，9.48(brs，1H，H-7)。
MS(ESI)，m/e(相對豐度)432(M)+，(100％)。
實施例28，29根據(jù)與以上制備例1-6、實施例26和27類似的方法制備化合物III-c，III-d，分別為順-3-((1-芐基-哌啶-4-基-亞氨基)-甲基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-2H-吡喃酮及反-3-((1-芐基-哌啶-4-基-亞氨基)-甲基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-2H-吡喃酮，物化數(shù)據(jù)如下III-c.無色膠狀物，Rf(乙酸乙酯/氯仿1/1)0.43；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)1.78(brs，2H，H-3″b，5″b)，1.98(brs，2H，H-2″b，6″b)，2.23(brs，2H，H-3″a ，5″a)，2.93(brs，2H，H-2″a，6″a)，3.29(m，1H，H-4″)，3.60(s，1H，H-7″)，6.05(s，2H，H-2′)，6.88(d，1H，J＝8.4Hz，H-7′)，7.28(m，6H，Ph-H，H-4′)，7.33(s，1H，H-2′)，7.41(d，1H，J＝14.0Hz，H-5)，7.56(d，1H，J＝16.4Hz，H-4)，7.61(d，1H，J＝8.4Hz，H-6′)，9.06(brs，1H，H-7)。MS(ESI)，m/e(相對豐度)416(M)+，(100％)。
III-d.無色膠狀物，Rf(乙酸乙酯/氯仿1/1)0.28；1H-NMR(400MHz，CDCl3，δppm)1.93(m，2H，H-3″b，5″b)，1.96(m，2H，H-2″b，6″b)，2.87(m，2H，H-3″a，5″a)，2.91(m，2H，H-2″a，6″a)，3.23(m，1H，H-4″)，3.49(s，1H，H-7″)，6.05(s，2H，H-2′)，6.83(d，1H，J＝15.2Hz，H-5)，6.88(d，1H，J＝8.4Hz，H-7′)，6.91(d，1H，J＝8.4Hz，H-5′)，7.28(m，5H，Ph-H)，7.33(s，1H，H-4′)，7.53(d，1H，J＝8.4Hz，H-6′)，7.59(d，1H，J＝15.2Hz，H-4)，9.48(brs，1H，H-7)。
MS(ESI)，m/e(相對豐度)416(M)+，(100％)。
為了更好地理解本發(fā)明的實質，下面分別用藥理實施例的形式對化合物II-d，化合物II-h，化合物II-l和化合物II-m的藥理實驗結果為例，說明其在制藥領域中的新用途。實施例給出了代表性化合物的部分活性數(shù)據(jù)。同樣必須說明，本發(fā)明此處所列的藥理相關的的實施例是用于說明本發(fā)明而不是對本發(fā)明的限制。根據(jù)本發(fā)明的實質對本發(fā)明進行的簡單改進都屬于本發(fā)明要求保護的范圍。
實施例30化合物II-d對乙酰膽堿酯酶(acetylcholinesterase，簡稱AChE)和丁酰膽堿酯酶(BuChE)活性的抑制實驗及結果。
1Ellman等發(fā)明了測定乙酰膽堿酯酶活性的靈敏的測試方法將雄性Wistar大鼠斷頭處死，迅速分出大腦，分離紋狀體并稱重，加19倍體積的0.05mol/L磷酸緩沖液(pH7.2，大約7mg蛋白/mL)用勻漿器勻漿。取混懸液25μL加1mL溶劑或0.4mg/mL的試驗藥物II-d，在37℃水浴中預孵10分鐘。加入10mM二硫—雙硝基苯甲酸(DTNB)10μL，405nm波長處比色。(以等濃度的石杉堿甲溶液為陽性對照)。
2對丁酰膽堿酯酶(BuChE)的抑制作用測定采用ELISA法。用二甲亞砜溶解化合物II-d，用磷酸緩沖液稀釋，使其終濃度為0.04mg/mL，加入底物硫代丁酰膽堿(S-BCh，4.4mg/mL)在37℃中水浴反應30min，加入顯色劑二硫代二硝基甲酸(DTNB，4mg/mL，10μL)，于405nm波長下比色測定。空白孔中用相同體積的磷酸緩沖液代替底物。溶劑對照孔中加入與化合物等濃度的二甲亞砜?；衔镆种坡视蓸悠稯D值對于空白和對照OD值計算。
由此測出的化合物II-d以及陽性對照石杉堿甲對AChE和BuChE的抑制作用如表三所示。
表三 化合物II-d和石杉堿甲在0.4mg/mL時對AChE和BuChE的抑制作用
根據(jù)表三所示，化合物II-d對乙酰膽堿酯酶有較高的抑制活性，對丁酰膽堿酯酶抑制活性極低。因此有希望發(fā)展成為乙酰膽堿酯酶選擇性抑制劑。
根據(jù)實施例30的方法，我們對合成出的化合物和中間體進行了上述AChE和BuChE的抑制試驗。代表性的活性化合物II-h，II-l，和II-m的百分抑制率之比列表比較，見表四。
表四 代表性式1化合物和石杉堿甲在0.4mg/mL時對AChE和BuChE的抑制作用
根據(jù)表四所示，所合成出的一些化合物對乙酰膽堿酯酶有很高的抑制活性，抑制強度甚至超過了石杉堿甲，同時這些化合物對丁酰膽堿酯酶抑制活性極低。因此有希望發(fā)展成為乙酰膽堿酯酶選擇性抑制劑。
實施例34化合物II-d對ICR小鼠的急性毒性作用實驗1、目的對化合物II-d進行急性毒性實驗，初步了解化合物的急性毒性情況。
2、試驗動物及樣品動物ICR小鼠四十只，購于浙江省藥檢所，全雄。(實驗動物許可證號SCXK(浙)2004-0012，0013號)；溶劑10％阿拉伯膠溶液(自制)；樣品II-d為本實驗室制備純度為99％以上者。
3、分組和劑量將實驗動物按不同的給藥途徑和劑量分為以下四組，II-dA組II-d1.0g/kg灌胃給藥；3.2II-dB組II-d2.0g/kg灌胃給藥；II-dC組II-d0.5g/kg腹腔注射給藥；3.3II-dD組II-d0.2g/kg腹腔注射給藥；4、試驗方法和步驟 小鼠禁食12小時，按照試驗設計劑量配制10％的樣品阿拉伯膠溶液按照兩種給藥方式給藥。給藥后立即觀察小鼠反應情況，包括動物外觀行為活動、精神狀態(tài)、食欲、大小便顏色、被毛、膚色、鼻、眼、口腔有無異常分泌物及死亡情況，連續(xù)觀察14天，詳細記錄逐日動物毒性反應情況及死亡分布(詳見表五)。試驗結束后解剖未死亡小鼠觀察體內臟器變化。
表五、樣品II-d小鼠灌胃和腹腔注射后急性毒性實驗觀察到的情況
實驗中，四十只小鼠生長良好，活動正常。14天后解剖未見異?，F(xiàn)象，這說明樣品II-d毒性較小，口服最大耐受劑量大于2.0g/kg。
權利要求
1.一種具有式(1)所示的6-芳基-3-取代-吡喃酮類衍生物及其可藥用鹽或其溶劑化物 式(1)其中X是氧或氮(亞胺)原子；取代基R1可以相同或不同，分別是鹵素，氫原子，或含1～5個碳的烷氧基，或兩個或多個R1基也可與苯環(huán)駢合形成取代或未取代的環(huán)狀化合物；取代基R2是氫原子，羰基，硫羰基，羥基；n為0～10的整數(shù)；取代基R3是氫原子，或者取代或未取代的飽和五～八元環(huán)，或者取代或未取代的飽和五～八元脂雜環(huán)，或者取代或未取代的五～八元芳香環(huán)，或取代或者未取代的五～八元芳香雜環(huán)，或多個環(huán)之間由亞甲基或羰基或氮原子或氧原子連接形成的基團；R3基團優(yōu)選的有取代或未取代的飽和五元或六元環(huán)，有取代或未取代的飽和五元或六元脂雜環(huán)，或者取代或未取代的五元或六元芳香環(huán)，或取代或者未取代的五元或六元芳香雜環(huán)，或2～5個取代或未取代的脂環(huán)或脂雜環(huán)和取代或未取代的芳環(huán)或芳雜環(huán)之間由亞甲基或羰基連接形成的基團；R3基團更優(yōu)選取代或未取代的六元環(huán)烷烴基，有取代或未取代的飽和五元或六元脂雜環(huán)，取代或未取代的苯環(huán)，取代或未取代的芳香雜環(huán)，2～3個取代或未取代的脂環(huán)或脂雜環(huán)和取代或未取代的芳環(huán)或芳雜環(huán)之間由亞甲基或羰基連接形成的基團；其中，用作取代的取代基選自鹵素，氨基，硝基，巰基，含1-8個碳的烷基，1-8個碳的烷氧基，1-8個碳的?；交?，或芳基。
2.根據(jù)權利要求
1的式(1)化合物其中取代基X是氧原子，虛線不存在，R2為氫原子，n＝0時，為式(Ia～Ig)所示結構化合物I-a.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-(3-氧代-環(huán)己烯-1-烯基氧基甲基)-2H-吡喃酮；I-b.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-(2-甲基-5-氧代-環(huán)戊烯-1-烯醇基甲基)-2H-吡喃酮；I-c.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-((2-甲基吡喃-4-酮)-3-基氧基)甲基-2H-吡喃酮；I-d.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-((6-甲基-2-氧代-2H-吡喃)-4-基-氧基甲基)-2H-吡喃酮；I-e.5-(6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-2-氧代-2H-吡喃-3-基甲氧基)-6-羥基-5-環(huán)己烯-1，2，3，4-四酮；I-f.6-(2-溴-3，4，5-三甲氧基苯基)-3-((6-甲基-2-氧代-2H-吡喃)-4-基-氧基甲基)-2H-吡喃酮；I-g.6-(苯并[1，3]二氧戊環(huán)-5-基)-3-((6-甲基-2-氧代-2H-吡喃)-4-基-氧基甲基)-2H-吡喃酮。
3.根據(jù)權利要求
1的式(1)化合物其中X為氮原子，虛線不存在時，為式(II)所示結構 式(II)其中取代基R1，R2，R3，n的定義與式(1)中的相同。
4.根據(jù)權利要求
3的式(II)化合物，它們是II-a.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-((2-嗎啉-4-基-乙基氨基)-甲基)-2H-吡喃酮；II-b.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-((2-(5-硝基-吡啶-2-基氨基)-乙基氨基)-甲基)-2H-吡喃酮；II-c.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-((四氫呋喃-2-基-甲基氨基)甲基)-2H-吡喃酮；II-d.4-((6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-2-氧代-2H-吡喃-3-基甲基)-氨基)-哌啶-1-甲酸乙酯；II-e.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-((2-哌嗪-1-基-乙基氨基)-甲基)-2H-吡喃酮；II-f.N-2-((6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-2-氧代-2H-吡喃-3-基甲基氨基)-乙基)-苯甲酰胺；II-g.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-((4-氟-芐基氨基)-甲基)-2H-吡喃酮；II-h.3-((1-芐基-哌啶-4-基氨基)-甲基)-6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-2H-吡喃酮；II-i.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-3-(2-(4-(4-氟-芐基)-哌啶-1-基)-乙基氨基)-甲基-2H-吡喃酮；II-j.3-(芐基氨基-甲基)-6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-2H-吡喃酮；II-k.3-(4-(2-((6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-2-氧代-2H-吡喃-3-基甲基)-氨基)-乙基)-哌嗪-1-基甲基)-苯乙腈；II-l.6-(苯并[1，3]二氧戊環(huán)-5-基)-3-((2-(5-硝基-吡啶-2-基氨基)-乙基氨基)-甲基)-2H-吡喃酮；II-m.3-((1-芐基-哌啶-4-基氨基)-甲基)-6-(苯并[1，3]二氧戊環(huán)-5-基)-2H-吡喃酮；II-n.6-(3，4-二甲氧基苯基)-2-氧代-2H-吡喃-3-甲酸(2-嗎啉-4-基-乙基)胺；II-o.6-(2-溴-4，5-二甲氧基苯基)-2-氧代-2H-吡喃-3-甲酸(1-芐基-哌啶-4-基)胺。
5.根據(jù)權利要求
1的式(1)化合物中X為氮原子，R2為H，虛線存在成雙鍵時，為式(III)所示的化合物 式(III)式(III)化合物的取代基R1和n的定義與式(1)中的相同；R2的定義與式(1)中的R3相同。
6.根據(jù)權利要求
5的式(III)化合物，它們是III-a.順-3-((1-芐基-哌啶-4-基-亞氨基)-甲基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-2H-吡喃酮；III-b.反3-((1-芐基-哌啶-4-基-亞氨基)-甲基)-6-(3，4-二甲氧基苯基)-2H-吡喃酮；II-c.順-3-((1-芐基-哌啶-4-基-亞氨基)-甲基)-6-(苯并[1，3]二氧戊環(huán)-5-基)-2H-吡喃酮；III-d.反-3-((1-芐基-哌啶-4-基-亞氨基)-甲基)-6-(苯并[1，3]二氧戊環(huán)-5-基)-2H-吡喃酮。
7.根據(jù)權利要求
2和權利要求
3中式(I)和式(II)化合物的制備方法，包括在堿性條件下將關鍵中間體式(I-5)化合物與不同的醇(或酚)以及有機胺反應分別制備得到式(I)及式(II)化合物，其中堿優(yōu)選無機堿，更優(yōu)選碳酸堿金屬鹽，最優(yōu)選碳酸鉀 式(I-5)化合物取代基R1的定義與式(1)中的相同。
8.根據(jù)權利要求
3中式(II)化合物的制備方法，包括將式(I-7)或式(I-8)化合物與溴化試劑發(fā)生溴化反應，再與有機胺反應制備得到式(IIn)或式(IIo)化合物；其中溴化試劑優(yōu)選溴化環(huán)二酰亞胺，更優(yōu)選溴化丁二酰亞胺 式(I-7或I-8)化合物取代基R1的定義與式(1)中的相同。
9.根據(jù)權利要求
8中式(I-7或I-8)化合物的制備方法，包括將式(I-5)化合物在堿性條件下與氧化劑發(fā)生氧化反應制備得到式(I-7或I-8)化合物，其中堿優(yōu)選無機堿特別是碳酸堿金屬鹽，更優(yōu)選碳酸鈉和碳酸鉀；或者碳酸氫堿金屬鹽，更優(yōu)選碳酸氫鈉或碳酸氫鉀；氧化劑優(yōu)選二甲亞砜(DMSO)或銀鹽，更優(yōu)選硝酸銀 式(I-7或I-8)化合物取代基R1的定義與式(1)中的相同。
10.根據(jù)權利要求
5中式(III)化合物的制備方法，包括將式(I-7)化合物與氧化劑發(fā)生反應制備得到式(III)化合物，氧化劑首選銀鹽，更優(yōu)選硝酸銀
11.根據(jù)權利要求
1-6之一的化合物或者它們的混合物用于制備防治老年性癡呆、血管性癡呆和缺氧性腦病、防治腦中風后遺癥的用途。
12.一種用于制備防治老年性癡呆、血管性癡呆和缺氧性腦病、防治腦中風后遺癥藥物組合物，其含有治療有效量的作為活性成分的根據(jù)權利要求
1-6之一的化合物或者它們的混合物和可藥用輔料。
專利摘要
本發(fā)明涉及6－芳基3－取代亞甲基吡喃酮類的化合物及其制備方法和用途。經(jīng)藥理活性測試，該類化合物具有強效抑制乙酰膽堿酯酶(AChE)的活性，且對丁酰膽堿酯酶(BuChE)的抑制作用極弱，具有較好的選擇性乙酰膽堿酯酶抑制作用。且本發(fā)明中的化合物經(jīng)小鼠體內試驗并未發(fā)現(xiàn)急性毒性和異常反應現(xiàn)象出現(xiàn)，從而可期待作為防治老年性癡呆藥物用途。
文檔編號A61K31/351GK1990478SQ200510132507
公開日2007年7月4日 申請日期2005年12月26日
發(fā)明者趙昱, 白驊, 蔣翔銳, 李水盛 申請人:浙江海正天華新藥研發(fā)有限公司導出引文BiBTeX, EndNote, RefMan