一種測定化妝品中曲酸含量的檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明方法屬于化妝品檢測領(lǐng)域，涉及一種高效液相色譜法測定化妝品中曲酸含量的檢測方法。樣品經(jīng)水提取，經(jīng)0.45μm有機(jī)濾膜過濾。待測物用C18液相色譜柱分離，二極管陣列檢測器檢測，外標(biāo)法定量。采用本發(fā)明的方法檢測化妝品中曲酸具有定性準(zhǔn)確、定量快速等優(yōu)點(diǎn)。
【專利說明】一種測定化妝品中曲酸含量的檢測方法
[0001] 本發(fā)明屬于化妝品檢測領(lǐng)域，涉及一種高效液相色譜法測定化妝品中曲酸含量的 檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 曲酸（ko jic acid，KA)學(xué)名5-羥基-2-輕甲基-1，4_吡喃酮，是一種生物制劑， 是由醫(yī)藥級原料經(jīng)微生物發(fā)酵制成的具有弱酸性有機(jī)化合物，曲酸添加到化妝品中可有效 治療雀斑、老人斑、色素沉著、粉刺，另外，它還具有較好的紫外線吸收作用，因而作為較理 想的防曬劑，被世界各國廣泛應(yīng)用于化妝品中。然而，近來的研究表明曲酸具有致癌性，日 本官方已禁止進(jìn)口和生產(chǎn)含有曲酸的化妝品。測定防曬劑的方法主要有薄層色譜法（TLC) 和氣相色譜法（GC)、高效液相色譜法（HPLC)。HPLC法的干擾能力較強(qiáng)，檢測靈密度也較高， 是測定防曬劑曲酸的理想方法。另外，在目前國標(biāo)、行標(biāo)中還沒有測定曲酸的具體方法。為 此，建立測定曲酸準(zhǔn)確、可靠、快速、靈敏的HPLC十分必要。
[0003] 本發(fā)明方法檢測化妝品中曲酸含量，采用水萃取后，高效液相色譜檢測中含量，具 有步驟簡單、方法可靠、準(zhǔn)確度高、檢出限低等優(yōu)點(diǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是選擇合適的提取溶劑及色譜分離條件檢測化妝品中 曲酸含量，滿足前處理過程簡單，檢出限低的檢測要求。
[0005] 本發(fā)明公開了一種化妝品中曲酸含量的檢測方法，包括下列步驟：
[0006] (1)前處理：取樣品0. 5g(精確到lmg)，于50mL具塞比色管中，加20mL水，超聲 20min，用水定容至刻度，混勾。取部分放入離心管中，在離心機(jī)上于8000r/min離心10min， 離心后的上清液經(jīng)0. 45 μ m濾膜過濾，待測。
[0007] (2)標(biāo)準(zhǔn)曲線：將200mg/L的曲酸標(biāo)準(zhǔn)儲備液用水逐級稀釋得0· 5,1. 0, 2. 0, 5. 0， 10.0 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作液，按照上述儀器條件進(jìn)行檢測，以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)繪 制標(biāo)準(zhǔn)曲線，用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線對樣品進(jìn)行定量。樣品溶液中待測物的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器測 定的線性范圍內(nèi)。
[0008] (3)檢測：利用高效液相色譜儀對標(biāo)準(zhǔn)溶液和試樣處理液進(jìn)行檢測；
[0009] (4)檢測條件：
[0010] 色譜柱：Agilent Eclipse XDB C18,4. 6 X 250mm，5 μ m ;
[0011] 流動相：甲醇 +0. 02mol/L 磷酸二氫鉀=5+95 ;流速：1. OmL/min ;
[0012] 進(jìn)樣量：5 μ L ;柱溫：30°C ;波長：270nm。
[0013] (5)計(jì)算公式，外標(biāo)法定量，試樣中目標(biāo)物的計(jì)算公式為：
[0014]
[0015] A屮：
[0016] X--試樣中目標(biāo)物質(zhì)的含量，單位為微克每升（mg/L);
[0017] c--從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線得到的試樣溶液中目標(biāo)物的濃度，單位為微克每毫升（μ g/ mL)；
[0018] V--試樣定容體積，單位為毫升（mL)
[0019] V0--稱樣量，單位為克（g);
[0020] 計(jì)算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。
[0021 ] 優(yōu)選地，所述的提取溶液為水。
[0022] 優(yōu)選地，所用的二極管陣列檢測器檢測波長為：270nm。
[0023] (6)方法檢出限為5mg/kg，定量限為15mg/kg。
[0024] 附圖
[0025] 圖1曲酸標(biāo)準(zhǔn)譜圖
[0026] 圖2樣品色譜圖
【具體實(shí)施方式】
[0027] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明，但本發(fā)明并不局限于具體實(shí)施 例。
[0028] 實(shí)施例1某品牌化妝品曲酸含量的測定
[0029] 1、分析步驟
[0030] 取樣品0. 5g(精確到lmg)，于50mL具塞比色管中，加20mL水，超聲20min，用水定 容至刻度，混勻。取部分放入離心管中，在離心機(jī)上于8000r/min離心10min，離心后的上清 液經(jīng)0.45 μ m濾膜過濾，待測。
[0031] 2、高效液相色譜條件
[0032] 儀器：Agilent 1200液相色譜儀配有二極管陣列檢測器；
[0033] 色譜柱：Agilent Eclipse XDB C18,4. 6 X 250mm，5 μ m ;
[0034] 流動相：甲醇 +0· 02mol/L 磷酸二氫鉀=5+95 ;流速：1. OmL/min ;
[0035] 進(jìn)樣量：5 μ L ;柱溫：30°C ;波長：270nm。
[0036] 3、標(biāo)準(zhǔn)工作曲線
[0037] 標(biāo)準(zhǔn)曲線：將200mg/L的曲酸標(biāo)準(zhǔn)儲備液用水逐級稀釋得0· 5，1 · 0，2. 0，5. 0， 10.0 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作液，按照上述儀器條件進(jìn)行檢測，以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫 坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線對樣品進(jìn)行定量。所得各標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：Y = 15. 436X-0. 1102, R2= 0. 9992 ;
[0038] 4、加標(biāo)回收結(jié)果
[0039] 對空白化妝品樣品進(jìn)行6次平行樣加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，加標(biāo)量在25~100 μ g時，回收 率在88. 9-114. 2%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在3. 2-3. 7%之間。
[0040] 5、方法檢出限
[0041] 本方法樣品取樣量為0. 5g，定容體積為50mL的情況下，方法檢出限為5mg/kg，定 量限為15mg/kg。
[0042] 上述實(shí)施例僅供說明本發(fā)明之用，而并非是對本發(fā)明專利的限制；應(yīng)當(dāng)指出的是， 對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思范圍的情況下，還可以作出各種變化和 變型，這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍；因此，凡跟本發(fā)明權(quán)利要求范圍所做的均等變化與修
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種測定化妝品中曲酸的檢測方法，其特征在于該方法包括W下步驟： (1) 提取：取樣品0. 5g(精確到Img)，于50血具塞比色管中，加20血水，超聲20min， 用水定容至刻度，混勻。取部分放入離屯、管中，在離屯、機(jī)上于8000r/min離屯、lOmin，離屯、后 的上清液經(jīng)0. 45 y m濾膜過濾，待測。 (2) 測定：待測溶液經(jīng)高效液相色譜儀，外標(biāo)法定量； 色譜柱：Agilent Eclipse XDB Cis, 4. 6 X 250mm，Sum; 流動相：甲醇+0. 02mol/L憐酸二氨鐘=5+95 ;流速：1. 0血/min ; 進(jìn)樣量：5 y L ;柱溫：30°C ;波長：270nm。 (3) 計(jì)算公式： 式中：X-一試樣中目標(biāo)物質(zhì)的含量，單位為豪克每升（mg/L); C一一從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線得到的試樣溶液中目標(biāo)物的濃度，單位為微克每毫升（yg/ 血）； V--試樣定容體積，單位為毫升（mL); Vo一一稱樣量，單位為克（g)。2. 根據(jù)權(quán)利要求1，所述的提取溶液為水。3. 根據(jù)權(quán)利要求1，檢測波長為270nm。
【文檔編號】G01N30/02GK106033077SQ201510118020
【公開日】2016年10月19日
【申請日】2015年3月12日
【發(fā)明人】宋薇
【申請人】譜尼測試集團(tuán)上海有限公司