技術(shù)特征:
技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種NK細(xì)胞體外擴(kuò)增方法,包括:(1)配制主要成分為50ng/ml抗CD3單克隆抗體+50ng/ml抗CD16單克隆抗體的試劑A、主要成分為300IU/ml?IL?2的試劑B和主要成分為20ng/ml?IL?12+20ng/ml?IL?15的試劑C,準(zhǔn)備淋巴細(xì)胞分離液40ml作為試劑D;(2)取試劑A于T?175培養(yǎng)瓶包被,4℃過(guò)夜;(3)處理外周血,得到細(xì)胞和血清;(4)重懸細(xì)胞,添加試劑D后離心收集PBMC;(5)將PBMC重懸于X?VIVO15培養(yǎng)基中,添加試劑B、試劑C和自體血清,孵育;(6)分別在第3、6、9、12天補(bǔ)加培養(yǎng)基、試劑B、試劑C和自體血清,第14天收集細(xì)胞。本發(fā)明的有益之處在于:通過(guò)提前接種抗CD3單克隆抗體和抗CD16單克隆抗體,先對(duì)細(xì)胞進(jìn)行篩選,所以在體外培養(yǎng)時(shí)提高了NK細(xì)胞的擴(kuò)增倍數(shù)和純度。
技術(shù)研發(fā)人員:姚玲玲;楊苗;楊敏;孟得龍;宋丹;劉得娟
受保護(hù)的技術(shù)使用者:北京煥生匯生物技術(shù)研究院
技術(shù)研發(fā)日:2017.05.25
技術(shù)公布日:2017.07.21