本發(fā)明屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種乳酸片球菌及其用途。

背景技術(shù)：

乳酸菌是動物腸道正常菌群中的優(yōu)勢菌，能夠利用可發(fā)酵糖產(chǎn)生大量乳酸，具有調(diào)節(jié)腸道內(nèi)菌群平衡、提高機(jī)體免疫力并促進(jìn)營養(yǎng)吸收等功能，也有不少關(guān)于乳酸菌促進(jìn)動物增質(zhì)量、提高飼料利用率、分泌抑菌物質(zhì)并減少發(fā)病率等方面的報(bào)道。近年來，已從許多乳酸菌中分離出了產(chǎn)細(xì)菌素的菌株，但其中對乳酸片球菌(pediococcusacidilactici)產(chǎn)生的片球菌素(pediocin)的研究最為突出。片球菌素對大腸桿菌、單核細(xì)胞增多癥李氏桿菌、金黃色葡萄球菌、肉毒梭菌和產(chǎn)氣莢膜梭狀芽胞桿菌等有抑制和殺滅作用。片球菌素具有寬的ph耐受性和對低、高溫的耐受性。乳酸片球菌常用于肉品、乳品和蔬菜的發(fā)酵，可改善食品的質(zhì)地、風(fēng)味、色澤、消化性和營養(yǎng)價(jià)值等，同時(shí)乳酸片球菌是飼料添加劑品種目錄(2013)(中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告第2045號)中允許使用的安全菌株。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

一種乳酸片球菌，為乳酸片球菌(pediococcusacidilactici)zk160135，于2016年02月01日保藏于：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為cgmccno:12126，地址為：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，請求保藏單位為哈爾濱中科生物工程有限公司。

在上述方案的基礎(chǔ)上，所述乳酸片球菌分離于健康牛糞。

在上述方案的基礎(chǔ)上，所述乳酸片球菌的菌落形態(tài)為乳白色、較小、圓形、表面濕潤且光滑，邊緣整齊，成對、成鏈或聚團(tuán)狀排列。

在上述方案的基礎(chǔ)上，所述乳酸片球菌具有如下菌學(xué)特性：

具有鏈霉素、丙氟哌酸、萬古霉素和卡那霉素的抗性；耐胃液和膽鹽；對豬源產(chǎn)腸毒素型大腸桿菌(e.colio139)、金黃色葡萄球菌(sa)和單核細(xì)胞增多癥李氏桿菌具有抑制作用。

在上述方案的基礎(chǔ)上，所述乳酸片球菌最適生長溫度為35℃～45℃、最適初始ph值6.2～6.5。

在上述方案的基礎(chǔ)上，所述乳酸片球菌可用于調(diào)整動物腸道功能、促進(jìn)動物生長、提高動物免疫力。

在上述方案的基礎(chǔ)上，使用時(shí)乳酸片球菌的含量≥1億/ml。

一種調(diào)整動物腸道功能的方法，使用上述乳酸片球菌制成微生態(tài)制劑或中藥發(fā)酵制劑。

一種促進(jìn)動物生長的方法，使用上述乳酸片球菌制成微生態(tài)制劑或中藥發(fā)酵制劑。

一種提高動物免疫力的方法，使用上述乳酸片球菌制成微生態(tài)制劑或中藥發(fā)酵制劑。

本發(fā)明的有益效果

本發(fā)明的乳酸片球菌具有鏈霉素、丙氟哌酸、萬古霉素和卡那霉素的抗性；耐胃液和膽鹽；對豬源產(chǎn)腸毒素型大腸桿菌(e.colio139)、金黃色葡萄球菌(sa)和單核細(xì)胞增多癥李氏桿菌具有抑制作用。此外，本發(fā)明的乳酸片球菌菌株能耐受消化道內(nèi)的環(huán)境，耐受胃酸和膽鹽，生長速度快，抗逆性強(qiáng)，穩(wěn)定性好。用本發(fā)明的乳酸片球菌發(fā)酵中藥制備中藥發(fā)酵制劑，有效的補(bǔ)充或增強(qiáng)了原有藥物的功能；中藥經(jīng)乳酸片球菌轉(zhuǎn)化后產(chǎn)生了新的活性物質(zhì)；該中藥發(fā)酵制劑能夠有效提高動物的免疫力、改善腸道微環(huán)境和促進(jìn)生長，具有優(yōu)異的益生作用。

附圖說明

圖1.菌株p-2在液體培養(yǎng)基37℃靜置培養(yǎng)24h，顯微鏡下放大400倍觀察圖；

圖2.菌株p-2的菌落形態(tài)；

圖3.菌株p-2的16srdna系統(tǒng)發(fā)育樹；

圖4乳酸片球菌zk160135與乳酸片球菌as1.2696產(chǎn)酸性能對比；

圖5乳酸片球菌zk160135與乳酸片球菌as1.2696的生長曲線。

具體實(shí)施方式

在本發(fā)明中所使用的術(shù)語，除非有另外說明，一般具有本領(lǐng)域普通技術(shù)人員通常理解的含義。

下面結(jié)合具體實(shí)施例，并參照數(shù)據(jù)進(jìn)一步詳細(xì)的描述本發(fā)明。以下實(shí)施例只是為了舉例說明本發(fā)明，而非以任何方式限制本發(fā)明的范圍。

本發(fā)明所述的乳酸片球菌(pediococcusacidilactici)于2016年02月01日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為cgmccno:12126，地址為：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，請求保藏單位為哈爾濱中科生物工程有限公司，保藏名稱為乳酸片球菌(pediococcusacidilactici)zk160135。

實(shí)施例1樣品采集、菌株分離及篩選

1.1分離及篩選菌種培養(yǎng)基

mrs液體培養(yǎng)基(g/l)：蛋白胨10.0、肉膏8.0、酵母浸粉4.0、葡萄糖20.0、磷酸氫二鉀2.0、檸檬酸氫二銨2.0、乙酸鈉5.0、硫酸鎂0.2、硫酸錳0.04、吐溫801.0、碳酸鈣20.0，調(diào)ph6.2-6.45。115℃滅菌20min。

固體培養(yǎng)基：在液體培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加1.5％的瓊脂。

1.2模擬胃液：胰蛋白胨8.3g、葡萄糖3.5g、氯化鈉2.05g、氯化鈣0.11g、氯化鉀0.37g、磷酸二氫鉀0.6g、豬膽鹽0.05g、溶菌酶0.1g、胃蛋白酶13.3g、蒸餾水1000ml，鹽酸分別調(diào)ph值至1.5、2.5，115℃滅菌20min。

1.3樣品采集

分離樣品采集于健康牛糞。

采集時(shí)間和地點(diǎn)：于2015年01月采集于哈爾濱巴彥縣豐源養(yǎng)牛場。

1.4菌株的分離和篩選

取樣品10g，放入盛有90ml無菌生理鹽水的三角瓶中，充分振蕩，80℃水浴20min。采用稀釋平板法將上述樣品涂布于mrs培養(yǎng)基中，37℃下靜置培養(yǎng)24h～48h，挑選15株長勢良好菌落，反復(fù)劃線分離至獲得純菌株，以“p”代表乳酸片球菌將菌株編號p-1、p-2、p-3......p-15。以上菌株分別進(jìn)行革蘭氏染色、鏡檢和過氧化氫酶試驗(yàn)，選定菌株p-2為試驗(yàn)菌株。

實(shí)施例2篩選菌株的鑒定

2.1形態(tài)鑒定

圖1為p-2菌株在液體培養(yǎng)基37℃靜置培養(yǎng)24h，顯微鏡下放大400倍觀察圖。

p-2菌株的菌落形態(tài)如圖2所示：菌株在mrs培養(yǎng)基中形成乳白色、較小、圓形、表面濕潤且光滑，邊緣整齊，成對、成鏈或聚團(tuán)狀排列的菌落，溶鈣圈現(xiàn)象明顯。菌株最適生長溫度為35℃～45℃、最適初始ph值6.2～6.5。

2.2生理生化鑒定

參照《伯杰細(xì)菌鑒定手冊》和《常見細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊》進(jìn)行接觸酶檢測、厭氧生長檢測、45℃生長檢測和7％nacl生長檢測，之后再進(jìn)行一系列的驗(yàn)證檢測，包括葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、吲哚試驗(yàn)、淀粉水解試驗(yàn)等。具體見表1。

表1p-2菌株生理生化鑒定結(jié)果

注：“+”表示陽性，“-”表示陰性。

將上述鑒定結(jié)果與《伯杰細(xì)菌鑒定手冊》描述相對照及鏡檢結(jié)果相結(jié)合，初步判斷該菌株為乳酸片球菌。

2.316srdna序列測定

按照細(xì)菌dna抽提試劑盒的說明對所選乳酸菌的dna進(jìn)行提取，利用細(xì)菌16srdna的通用引物：

上游引物：primerf：5’-agagtttgatcctggctcag-3’；

下游引物：primerr：5’-ctacggctaccttgttacga-3’。

對提取的細(xì)菌dna進(jìn)行pcr，pcr擴(kuò)增后的序列，由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司進(jìn)行測序，測得的基因序列在ncbi(http://www.ncbi.nlm.nih.gov)上進(jìn)行blastn比對分析。

結(jié)果顯示：p-2菌株的16srdna序列結(jié)果與乳酸片球菌bcc1的16srdna的序列的覆蓋率為96％，一致性為99％。

利用測得的p-2菌株的16srdna序列構(gòu)建核酸系統(tǒng)發(fā)育樹如圖3所示，所用到的序列名稱及genbank登錄號如表2所示。

本發(fā)明的p-2菌株與乳酸片球菌nbrc3888聚類再與乳酸片球菌nrcc1聚為一支。

表2.系統(tǒng)發(fā)育樹所用序列名稱及genbank登錄號

綜合形態(tài)特點(diǎn)、生理生化鑒定和16srdna測序的結(jié)果，鑒定菌株p-2為乳酸片球菌(pediococcusacidilactici)。命名為乳酸片球菌(pediococcusacidilactici)zk160135，于2016年02月01日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為cgmccno:12126，地址為：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，請求保藏單位為哈爾濱中科生物工程有限公司。

實(shí)施例3急性毒性試驗(yàn)

急性毒性試驗(yàn)參照gb15193.3—2003最大耐受劑量法進(jìn)行。檢測結(jié)果顯示：所有小鼠均未出現(xiàn)中毒和死亡現(xiàn)象。說明乳酸片球菌zk160135急性毒性試驗(yàn)最大耐受劑量mtd>15000mg/kg，根據(jù)分級標(biāo)準(zhǔn)，該菌株為無毒物質(zhì)。

實(shí)施例4耐抗生素試驗(yàn)

取活化好的菌液0.1ml接種于mrs平板上，放入常用抗生素藥敏紙片37℃培養(yǎng)，觀察其生長情況，測量抑菌圈直徑。參照抗菌藥物藥敏紙片及實(shí)驗(yàn)判斷標(biāo)準(zhǔn)，得到乳酸片球菌zk160135對17種抗生素的耐藥性分析如表3所示。

表3zk160135菌株耐常見抗生素結(jié)果

由表3可知，乳酸片球菌zk160135對鏈霉素、丙氟哌酸、萬古霉素和卡那霉素低敏，可相容。

實(shí)施例5耐模擬胃液能力

模擬胃液：胰蛋白胨8.3g、葡萄糖3.5g、氯化鈉2.05g、氯化鈣0.11g、氯化鉀0.37g、磷酸二氫鉀0.6g、豬膽鹽0.05g、溶菌酶0.1g、胃蛋白酶13.3g，蒸餾水1000ml，鹽酸分別調(diào)ph值至1.5、2.5，115℃滅菌20min。

對照菌種：乳酸片球菌as1.2696，來源于中國科學(xué)院微生物研究所。

將乳酸片球菌zk160135和乳酸片球菌as1.2696菌種活化后，按1％接種量轉(zhuǎn)接100ml液體mrs培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)18h，將兩種菌液分別加入制備的無菌模擬胃液，分別于0、2h后用平板計(jì)數(shù)法檢測活菌數(shù)量，結(jié)果如表4所示。

由表4可以看出，乳酸片球菌zk160135加入ph為1.5和2.5的模擬胃液中處理2h，其存活率分別達(dá)到了57.88％和64.95％。

表4菌株在ph1.5和ph2.5中存活情況(cfu·ml^-1)

由表4可知，乳酸片球菌zk160135對胃液的耐受性較乳酸片球菌as1.2696強(qiáng)。

實(shí)施例6耐膽鹽試驗(yàn)

準(zhǔn)備mrs液體培養(yǎng)基，其中分別加有終濃度為0.1％、0.3％、0.5％、1.0％、2.0％膽鹽。各取乳酸片球菌zk160135與乳酸片球菌as1.2696于37℃培養(yǎng)過夜后的菌體發(fā)酵培養(yǎng)液1ml，加入9ml上述膽鹽濃度的培養(yǎng)液中。37℃靜置培養(yǎng)18h后，稀釋10000倍后取0.1ml涂mrs固體瓊脂平板。生長情況表明其能耐該濃度膽鹽的能力，如表5所示。

表5菌株對豬膽鹽的耐受性測試

注:++表示菌落生長數(shù)目超過30個(gè)；+表示菌落生長數(shù)目在5～30個(gè)之間；—表示菌落生長數(shù)目小于5個(gè)。

由表5可知，乳酸片球菌zk160135與乳酸片球菌as1.2696對豬膽鹽的耐受性均較強(qiáng)，均有較多的菌體存活。

實(shí)施例7抑菌試驗(yàn)

豬源產(chǎn)腸毒素型大腸桿菌(e.colio139)、金黃色葡萄球菌(sa)和單核細(xì)胞增多癥李氏桿菌由黑龍江省科學(xué)院微生物研究所提供。

在mrs斜面上活化保存的乳酸片球菌zk160135和乳酸片球菌as1.2696。于營養(yǎng)瓊脂斜面上分別活化豬源產(chǎn)腸毒素型大腸桿菌(e.colio139)、金黃色葡萄球菌(sa)和單核細(xì)胞增多癥李氏桿菌。將菌株zk160135和as1.2696轉(zhuǎn)接至mrs液體培養(yǎng)基中，37℃靜止培養(yǎng)18h。將活化的豬源產(chǎn)腸毒素型大腸桿菌(e.colio139)、金黃色葡萄球菌(sa)和單核細(xì)胞增多癥李氏桿菌接種于肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)24h后，進(jìn)行菌株zk160135和as1.2696的抑菌試驗(yàn)。

分別將三種致病菌均勻涂布于營養(yǎng)瓊脂平板，在牛津杯中分別加入300μl乳酸片球菌zk160135和as1.2696菌懸液，置于涂布了致病菌的營養(yǎng)瓊脂平板上，37℃培養(yǎng)18h后測量抑菌圈直徑。如表6所示。

表6乳酸片球菌對不同菌株的抑制效果

注：抑菌圈直徑(mm)：+++：19–24；++：15–18；+：10–15；–：無抑菌效果。

由表6可以看出，菌株zk160135抑制金黃色葡萄球菌和單核細(xì)胞增多癥李氏桿菌的效果優(yōu)于菌株as1.2696，尤其對單核細(xì)胞增多癥李氏桿菌的抑制效果明顯。

實(shí)施例8中藥發(fā)酵制劑的制備

8.1菌液的制備

將本發(fā)明的乳酸片球zk160135菌種接種于mrs培養(yǎng)基進(jìn)行活化培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為37℃，時(shí)間18h；將活化好的菌種接種于發(fā)酵罐中，控制溫度35℃～40℃，時(shí)間18h～24h，制備發(fā)酵液。

所述活化培養(yǎng)基為：mrs培養(yǎng)基，成分為(g/l)：蛋白胨10.0、肉膏8.0、酵母浸粉4.0、葡萄糖20.0、磷酸氫二鉀2.0、檸檬酸氫二銨2.0、乙酸鈉5.0、硫酸鎂0.2、硫酸錳0.04、吐溫801.0，調(diào)ph6.2-6.45。115℃滅菌20min。

發(fā)酵所用培養(yǎng)基為：mrs培養(yǎng)基，成分同上。

發(fā)酵完成后，菌液中菌含量≥1億/ml。

8.2中藥發(fā)酵制劑的制備

一種中藥發(fā)酵制劑，其中藥成分按照重量份數(shù)組成為：白頭翁提取物1.5份、黃連提取物0.8份、黃柏提取物1.0份、秦皮提取物1.2份、山楂提取物0.7份、木香提取物0.2份、肉豆蔻提取物0.5份、甘草提取物1.5份。

其中所述中藥提取物購自四川恒瑞通達(dá)生物科技有限公司。

具體制備方法，包括以下步驟：

(1)按量取各中藥提取物；

(2)加入重量為中藥提取物10倍的mrs液體培養(yǎng)基，加熱至70℃攪拌15min，調(diào)ph6.8后于100℃蒸汽滅菌30min，冷卻至30℃～35℃；

(3)將8.1制備好的菌液按重量比為5％的量加入步驟(2)所制液體中，混合均勻后，37℃發(fā)酵18h，即得本發(fā)明中藥發(fā)酵制劑。

實(shí)施例9動物試驗(yàn)

9.1試驗(yàn)組方

9.1.1本發(fā)明實(shí)施例9中的中藥發(fā)酵制劑

9.1.2用菌株as1.2696替換實(shí)施例9中的菌株zk160135制備的中藥發(fā)酵制劑

發(fā)酵過程中，每2h對兩種發(fā)酵液進(jìn)行取樣，檢測ph和od600值，分別繪制產(chǎn)酸和菌株生長的曲線。如圖4、圖5所示。

由圖4可知，菌株zk160135發(fā)酵中藥產(chǎn)酸量明顯高于菌株as1.2696。

由圖5可知，菌株zk160135有較好的生長性能。

兩種發(fā)酵制劑分別按重量比2％的比例進(jìn)行拌料添加。

9.1.3對照組飼喂基礎(chǔ)飼料

9.2試驗(yàn)動物：克氏原鰲蝦，取自江蘇盱眙恒旭科技有限公司。試驗(yàn)蝦用基礎(chǔ)飼料飼喂10天后開始試驗(yàn)?；A(chǔ)飼料配方及營養(yǎng)成分見表7。

表7飼料配方及營養(yǎng)成分表

注：1)維生素預(yù)混料(mg/kg)包含維生素a900000iu，維生素d250000iu，維生素e4500，維生素k3220，維生素b1320，維生素b21090，維生素b65000，維生素b12116，生物素50，泛酸鹽1000，葉酸165，膽堿60000，肌醇15000，煙酸2500。

2)礦物質(zhì)預(yù)混料(g/kg)包含cuso4·5h2o2.5，feso4·7h2o28，znso4·7h2o22，mnso4·4h2o9，na2seo30.045，ki0.026，cocl2·6h2o0.1。

9.3試驗(yàn)方法

9.3.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)分為3組，乳酸片球菌zk160135中藥發(fā)酵制劑組、乳酸片球菌as1.2696中藥發(fā)酵制劑組和對照組；對照組飼喂基礎(chǔ)飼料，乳酸片球菌zk160135中藥發(fā)酵制劑組和乳酸片球菌as1.2696中藥發(fā)酵制劑組是在基礎(chǔ)飼料中添加重量比為2％的中藥發(fā)酵制劑；每組設(shè)3個(gè)平行。

取體色正常、大小均勻、附肢完好、健康活潑、體質(zhì)量為(7.50±0.20)g的克氏原螯蝦，隨機(jī)分配到9個(gè)水族箱(100cm×50cm×50cm)中，每箱放蝦15只。水族箱水深15～20cm。實(shí)驗(yàn)前投喂基礎(chǔ)飼料馴化10天，每日8:00、16:00和22:00三次投喂，投喂量為蝦體質(zhì)量的4％～6％，上午和下午投餌量各為日投餌量的30％，晚上為40％，根據(jù)攝食情況加以調(diào)整。試驗(yàn)期間，保持溶解氧≥6.0mg/l，ph為7.5～8.0，水溫為(22±1)℃。飼養(yǎng)期為60d，用增氧泵連續(xù)充氣，每天換充分曝氣的自來水1/3～1/2，用皮管虹吸出殘餌和排泄物。

9.3.2樣品采集與制備

1)生長指標(biāo)的測定與計(jì)算

試驗(yàn)結(jié)束后用電子天平稱量克氏原螯蝦的體質(zhì)量，試驗(yàn)過程中記錄各組蝦的死亡數(shù)和蛻殼死亡數(shù)。生長指標(biāo)的計(jì)算公式如下：

特定生長率(％/d)＝[ln(蝦末體均質(zhì)量)－ln(蝦初體均質(zhì)量)]/飼養(yǎng)天數(shù)×100％

成活率(％)＝(實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)蝦尾數(shù)/實(shí)驗(yàn)開始時(shí)蝦尾數(shù))×100％

增重率(％)＝[(蝦末體均質(zhì)量–蝦初體均質(zhì)量)/蝦初體均質(zhì)量]×100％

餌料系數(shù)＝每尾蝦平均攝食飼料總量/(蝦末體均質(zhì)量–蝦初體均質(zhì)量)

2)血清的制備

試驗(yàn)結(jié)束后，從各組隨機(jī)選取克氏原螯蝦6尾，用濾紙吸干蝦體水分，用1ml的一次性注射器從蝦的頭胸甲后部刺入心臟，抽取血液，放入離心管內(nèi)，置于冷藏(4℃)過夜，用冷凍離心機(jī)以5000r/min離心10min，取上清液放入冰箱(-20℃)中備用，24h內(nèi)測定。用自動生化分析儀(日立7600－020)測定血清中堿性磷酸酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶的活性。

9.3.3酚氧化酶的測定

以0.1mol/l的磷酸鉀鹽緩沖液(將61.9ml0.1mol/lkh2po4溶液和38.1ml0.1mol/lk2hpo4溶液混合，稀釋至1l，調(diào)ph為6.6)為溶劑，配制濃度為3mg/ml的l－do-pa(sigma)溶液。室溫下將40μl血清和1960μll－dopa溶液混勻，置于1cm光徑的比色杯中，準(zhǔn)確計(jì)時(shí)6min時(shí)，于490nm波長下測定吸光值，同時(shí)取2mll－dopa溶液作為空白測定其吸光值。

酚氧化酶活性定義為：每毫升樣品每分鐘吸光度值增加0.001為一個(gè)酶活力單位(u)

9.4數(shù)據(jù)處理

所有采集數(shù)據(jù)采用excel軟件進(jìn)行前期處理，然后用spss19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，lsd進(jìn)行多重比較，結(jié)果采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

表8中藥發(fā)酵制劑對克氏原鰲蝦生長性能的影響

注：同列肩標(biāo)相同字母表示差異不顯著(p>0.05)，肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(p<0.05)。

由表8可知，菌株as1.2696中藥發(fā)酵制劑蝦體增重率和特定生長率高于對照組，但無顯著性差異(p>0.05)；菌株zk160135中藥發(fā)酵制劑蝦體增重率和特定生長率均顯著高于對照組(p<0.05)；蝦體成活率兩組中藥發(fā)酵制劑較對照組提高6.67％。

表9中藥發(fā)酵制劑對克氏原鰲蝦血清中非特異性免疫因子的影響

注：同列肩標(biāo)相同字母表示差異不顯著(p>0.05)，肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(p<0.05)。

由表9可知，添加中藥發(fā)酵制劑的兩個(gè)試驗(yàn)組酚氧化酶(po)和堿性磷酸酶(alp)含量均顯著高于對照組(p<0.05)，且菌株zk160135中藥發(fā)酵制劑組顯著高于菌株as1.2696中藥發(fā)酵制劑組(p<0.05)；添加中藥發(fā)酵制劑的兩個(gè)試驗(yàn)組谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alt)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(ast)含量均顯著低于對照組(p<0.05)，其中谷草轉(zhuǎn)氨酶(ast)含量菌株zk160135中藥發(fā)酵制劑組顯著低于菌株as1.2696中藥發(fā)酵制劑組(p<0.05)，谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alt)含量兩個(gè)中藥發(fā)酵制劑組無顯著性差異(p>0.05)。

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<110>哈爾濱中科生物工程有限公司

<120>一種乳酸片球菌及其用途

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