本發(fā)明涉及一種肝素鈉脫色方法，能有效去除肝素鈉的顏色，屬于肝素鈉純化方法技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
肝素鈉是臨床上使用最多、最廣泛的抗凝劑，在生物體內(nèi)與蛋白的復(fù)合物形式出現(xiàn)。常見的肝素鈉分離方式有酶解或鹽解、醇沉、氧化等，由于肝素的來源以及提取方式，粗品肝素中必然含有大量的核酸及蛋白雜質(zhì)，較深的顏色。
目前國內(nèi)肝素鈉的生產(chǎn)原料主要為豬小腸，肝素鈉的顏色產(chǎn)生與蛋白雜質(zhì)以及血液中的鐵元素有直接關(guān)系，這些雜質(zhì)會與肝素鈉形成金屬橋，使用普通的除蛋白方式或者直接加入金屬絡(luò)合劑除去效果效果均不明顯，導(dǎo)致在精制過程中直接脫色的步驟，如普遍采用的高錳酸鉀氧化、雙氧水氧化或是兩者聯(lián)用的方式，氧化劑的使用量較大，對肝素鈉的結(jié)構(gòu)形成了破壞，降低了產(chǎn)品的品質(zhì)與收率。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種不會影響肝素鈉活性、質(zhì)量穩(wěn)定，收率高的肝素鈉脫色方法。
本發(fā)明采用的一種肝素鈉脫色方法，包括：用水將肝素鈉溶解，最終得到的肝素鈉溶液濃度為8000iu/ml；使用鹽酸將所得到的肝素鈉溶液的ph調(diào)至2.5；將所得溶液邊攪拌邊加入亞硫酸鈉，攪拌反應(yīng)0.6h；向得到的溶液中加入質(zhì)量濃度為1.5%硅藻土，過濾并收集濾液；使用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)所得的濾液，邊攪拌邊調(diào)節(jié)，使ph=4.5；得到的溶液中加入質(zhì)量濃度為0.8%edta，反應(yīng)2h；得到的溶液中加入%氯化鈉固體，攪拌使氯化鈉固體溶解；將得到的溶液的溫度保持65℃，加入0.9倍乙醇，攪拌0.6h后通入冷卻水，使所得溶液溫度降溫至30℃；將得到的混合物靜置沉淀，沉淀后的上層清液為廢乙醇、下層沉淀物為含肝素鈉的混合物，抽去上層廢乙醇，對下層沉淀物脫水、干燥得到肝素鈉產(chǎn)品；加入的亞硫酸鈉的質(zhì)量濃度為1.5%；過濾收集濾液后，用水沖洗硅藻土中的殘留效價，將殘留效價收集并混合到所收集的濾液中；在加入0.6%edta的同時，將溶液加熱至60℃，使溶液保持70℃反應(yīng)2h。
本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明使用鹽酸將肝素鈉溶液的ph調(diào)節(jié)至酸性，既能夠使部分雜質(zhì)變性，起到去除蛋白的效果，又能夠為后續(xù)去除鐵元素創(chuàng)造環(huán)境條件。經(jīng)過前處理的肝素溶液，在亞硫酸鈉和金屬絡(luò)合劑edta的聯(lián)用效果下能夠很好的去除鐵元素，起到了單一加入絡(luò)合劑無法達(dá)到的效果。本發(fā)明通過調(diào)節(jié)反應(yīng)環(huán)境，促進(jìn)金屬絡(luò)合劑發(fā)揮作用，有效破壞肝素鈉與蛋白雜質(zhì)以及鐵元素之間的金屬橋，又不破壞肝素鈉結(jié)構(gòu)，然后在去除蛋白雜質(zhì)與去除鐵元素的同時，有效降低后續(xù)精制過程中氧化劑的用量，減少肝素鈉活性的破壞，穩(wěn)定質(zhì)量，提高收率。
具體實施方式
下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。本實施例的肝素鈉脫色方法，包括以下步驟：用水將肝素鈉溶解，最終得到的肝素鈉溶液濃度為8000iu/ml；使用鹽酸將所得到的肝素鈉溶液的ph調(diào)至2.5；將所得溶液邊攪拌邊加入亞硫酸鈉，攪拌反應(yīng)0.6h；向得到的溶液中加入質(zhì)量濃度為1.5%硅藻土，過濾并收集濾液；使用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)所得的濾液，邊攪拌邊調(diào)節(jié)，使ph=4.5；得到的溶液中加入質(zhì)量濃度為0.8%edta，反應(yīng)2h；得到的溶液中加入%氯化鈉固體，攪拌使氯化鈉固體溶解；將得到的溶液的溫度保持65℃，加入0.9倍乙醇，攪拌0.6h后通入冷卻水，使所得溶液溫度降溫至30℃；將得到的混合物靜置沉淀，沉淀后的上層清液為廢乙醇、下層沉淀物為含肝素鈉的混合物，抽去上層廢乙醇，對下層沉淀物脫水、干燥得到肝素鈉產(chǎn)品；加入的亞硫酸鈉的質(zhì)量濃度為1.5%；過濾收集濾液后，用水沖洗硅藻土中的殘留效價，將殘留效價收集并混合到所收集的濾液中；在加入0.6%edta的同時，將溶液加熱至60℃，使溶液保持70℃反應(yīng)2h。
對本實施例得到肝素鈉產(chǎn)品的結(jié)果進(jìn)行分析：對肝素鈉顏色降低的百分比以及靜置過程中高錳酸鉀使用量的減少比例進(jìn)行測試。經(jīng)過檢測得本次實施例的方法顏色去除率為35%。將使用本發(fā)明處理過的產(chǎn)品，使用高錳酸鉀氧化脫色，使用紫外分光光度計檢測od400nm的數(shù)值，通過此項指標(biāo)顯示顏色指標(biāo)，結(jié)果顯示在使顏色達(dá)標(biāo)的基礎(chǔ)上，高錳酸鉀用量降低了60%。
以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實施例而已，并非是對本發(fā)明作其它形式的限制，任何熟悉本專業(yè)的技術(shù)人員可能利用上述揭示的技術(shù)內(nèi)容加以變更或改型為等同變化的等效實施例。但是凡是未脫離本發(fā)明技術(shù)方案內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實質(zhì)對以上實施例所作的任何簡單修改、等同變化與改型，仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的保護(hù)范圍。