一種急升溫法純化肝素鈉的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種利用急升溫法純化肝素鈉的方法，屬于生化原料藥【技術(shù)領(lǐng)域】。開(kāi)發(fā)研制新工藝如下：將處理過(guò)的粗品肝素鈉溶液用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH，再通過(guò)急升溫以達(dá)到純化肝素鈉粗品的目的。此方法可有效去除蛋白質(zhì)雜質(zhì)及細(xì)菌，并保持肝素鈉活性不變。采用急升溫的方法去除雜質(zhì)，效率高，操作簡(jiǎn)單，極大地降低了成本。
【專利說(shuō)明】一種急升溫法純化肝素鈉的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物【技術(shù)領(lǐng)域】，利用急升溫的方法達(dá)到純化肝素鈉粗品的目的，再利用乙醇與強(qiáng)堿的環(huán)境，使純化更加完全，達(dá)到提高純化率的效果。
【背景技術(shù)】
[0002]肝素是1919年麥克倫在研究凝血時(shí)，從狗的肝臟中發(fā)現(xiàn)的天然生物活性粘多糖物質(zhì)。十多年后，歐美發(fā)達(dá)國(guó)家便從牛肺中發(fā)現(xiàn)和提取，再后來(lái)又發(fā)現(xiàn)豬、羊小腸粘膜中含量極為豐富，并開(kāi)始進(jìn)行醫(yī)藥臨床研究。1940年肝素正式列入美國(guó)藥典，并廣泛應(yīng)用于抗凝血、防止血栓形成，治療心腦血管疾病等。我國(guó)于70年代開(kāi)始引進(jìn)生產(chǎn)，至今已有近40年歷史了。目前市場(chǎng)供應(yīng)的主要是從豬小腸粘膜或動(dòng)物肺臟中提取的粗品肝素鈉。在提取過(guò)程中由于肝素解離不完全，使得粗品肝素中總存在一定數(shù)量的蛋白質(zhì)，不能直接用于制藥或出口，因此需要進(jìn)一步純化精致。精致后的肝素鈉作為抗凝血原料藥物普遍受到世界各國(guó)醫(yī)藥界的重視，同時(shí)也是我國(guó)出口創(chuàng)匯的主要生化產(chǎn)品之一。
[0003]豬小腸粘膜肝素是我國(guó)重要的出口的生化藥物，但目前生產(chǎn)的肝素產(chǎn)品存在著純度低、提取率低、環(huán)境污染大、不符合藥典標(biāo)準(zhǔn)、產(chǎn)品毒副作用大、活性低等缺陷，大多數(shù)是以粗品肝素的形式存在，而在精品肝素鈉制備中，我國(guó)現(xiàn)行的去除蛋白質(zhì)和細(xì)菌的方式主要為向溶液中加酸降低PH值和添加抑菌劑。但是上述方法使溶液pH值變化較大，不僅降低肝素鈉活性，而且后續(xù)仍需調(diào)節(jié)pH值，使生產(chǎn)工序更加繁瑣，增加成本。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明提供的是一種高純度肝素鈉的制備方法，著重強(qiáng)調(diào)了急升溫環(huán)節(jié)對(duì)整個(gè)工藝起到的關(guān)鍵作用，通過(guò)急升溫使雜質(zhì)及細(xì)菌可以得到較好的清除，而且縮短了工序時(shí)間，降低了成本。`
[0005]本發(fā)明提出的急升溫法純化肝素鈉的具體方法，包括以下步驟:
[0006]1、向肝素鈉粗品溶液中加入體積濃度為18-22%的鹽酸調(diào)節(jié)溶液pH至6_8，升溫至45-48°C后，加入10-20g /億單位的胰酶。
[0007]2、保溫2-4小時(shí)后，再用體積濃度30-35%的氫氧化鈉溶液調(diào)pH至10_12，急升溫至83-95°C，靜置約10-15分鐘，開(kāi)攪拌，通入循環(huán)水降溫，降溫至50_55°C。
[0008]3、加入溶液體積的10-20%乙醇，攪拌均勻，待溫度降至45-55 °C時(shí)，用體積濃度30-35%的氫氧化鈉溶液調(diào)pH至10-12，靜止分層過(guò)夜，沉淀過(guò)濾。
【具體實(shí)施方式】
[0009]實(shí)施例1
[0010]1、向肝素鈉粗品溶液中加入體積濃度為18-22%的鹽酸調(diào)節(jié)溶液pH至6_8，升溫至45-48°C后，加入10-20g /億單位的胰酶。
[0011]2、保溫2-4小時(shí)后，再用體積濃度30-35%的氫氧化鈉溶液調(diào)pH至10_12，急升溫至83-95°C，靜置約10-15分鐘，開(kāi)攪拌，通入循環(huán)水降溫，降溫至50_55°C。
[0012]3、加入溶液體積的10-20%乙醇，攪拌均勻，待溫度降至45-55°C時(shí)，用體積濃度30-35%的氫氧化鈉溶液調(diào)pH`至10-12，靜止分層過(guò)夜，沉淀過(guò)濾。
【權(quán)利要求】
1.一種急升溫法純化肝素鈉的方法，包括以下步驟: (1)向粗品肝素鈉溶液中加入鹽酸調(diào)節(jié)溶液PH值，升溫后，加入胰酶 (2)用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值，急升溫，靜置10-15分鐘，開(kāi)攪拌，通入循環(huán)水，降溫。 (3)加入乙醇，攪拌均勻，用氫氧化鈉溶液調(diào)pH值，靜置過(guò)夜，沉淀。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征為:步驟(1)中，加入體積比為18-22%的鹽酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征為:步驟⑴中，調(diào)節(jié)溶液的PH值到6-8。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征為:步驟(2)中，加入體積比為30-35%的氫氧化鈉。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征為:步驟(2)中，調(diào)節(jié)溶液的pH到10-12。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征為:步驟(2)中，急升溫達(dá)到的溫度是83-95°C。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征為:步驟(3)中，加入溶液體積10-20%的乙醇。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征為:步驟(3)中，調(diào)節(jié)溶液pH值達(dá)到10-12。
【文檔編號(hào)】C08B37/10GK103804521SQ201310616542
【公開(kāi)日】2014年5月21日 申請(qǐng)日期:2013年11月22日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月22日
【發(fā)明者】劉乃山, 魏偉, 遲培升, 夏襯來(lái) 申請(qǐng)人:青島九龍生物醫(yī)藥有限公司