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一種U6、miR92a及miR21的三重RT?qPCR檢測方法及試劑盒與流程

文檔序號:11613239閱讀:來源:國知局

技術特征:

技術總結
本發(fā)明屬于生物檢測領域,具體涉及U6、miR?92a及miR?21三種miRNA進行單管三重逆轉錄的檢測方法及逆轉錄后分別進行單管雙重定量的檢測方法及試劑盒。本發(fā)明提供的試劑盒包括逆轉錄莖環(huán)引物組、定量檢測引物組和定量檢測探針組、酶系和PCR反應試劑,使得U6、miR?92a及miR?21的逆轉錄可在同一反應管中進行,同時,高靈敏和高特異性的定量檢測引物序列和定量檢測探針及與之相匹配的PCR反應程序和條件,使得miR?21和U6、miR?92a和U6可單管雙重定量,避免了現(xiàn)有技術中單管單重定量時的操作誤差,使定量更簡潔準確。另外,本發(fā)明引入Stoffel片段和Tfl?DNA聚合酶的雙聚合酶擴增方法,提高檢測特異性的同時,可耐受更多的模版,檢測靈敏度及結果穩(wěn)定性提高。

技術研發(fā)人員:張新;彭春梅;張曉瑋;鄧可基;樂小炎;張嘉;李家導;陳觀芝;林敏深;林若琳;石壯壯;羅園香;莫靜嫣;李海茵;王星;王法;吳彩虹
受保護的技術使用者:廣州海力特生物科技有限公司
技術研發(fā)日:2017.05.09
技術公布日:2017.08.04
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