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一種間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基的制作方法

文檔序號(hào):12778838閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種無(wú)血清培養(yǎng)基,包含基礎(chǔ)培養(yǎng)基和添加在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的添加成分,其特征在于,所述添加成分包括L-谷氨酰胺、非必須氨基酸、L-抗壞血酸、亞硒酸鈉、纖連蛋白、乙醇胺、氫化可的松、胰蛋白酶抑制劑、人轉(zhuǎn)鐵蛋白、人胰島素、bFGF、TGF-β1和PDGF-BB。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的無(wú)血清培養(yǎng)基,其特征在于,所述基礎(chǔ)培養(yǎng)基為DMEM/F12培養(yǎng)基。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的無(wú)血清培養(yǎng)基,其特征在于,L-谷氨酰胺的濃度為1-5mM,非必須氨基酸的濃度為1-5mM,L-抗壞血酸的濃度為32-80mg/L,亞硒酸鈉的濃度為7-20ug/L,纖連蛋白的濃度為5-50mg/L,乙醇胺的濃度為1-5mg/L,氫化可的松的濃度為5-20mg/L,胰蛋白酶抑制劑的濃度為1-2mg/L,人轉(zhuǎn)鐵蛋白的濃度為5-20mg/L,人胰島素的濃度為10-30mg/L,bFGF的濃度為10-30ug/L,TGF-β1的濃度為1-10ug/L,PDGF-BB的濃度為1-20ug/L。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的無(wú)血清培養(yǎng)基,其特征在于,L-谷氨酰胺的濃度為1-2mM,非必須氨基酸的濃度為1-2mM,L-抗壞血酸的濃度為40-60mg/L,亞硒酸鈉的濃度為10-18ug/L,纖連蛋白的濃度為15-30mg/L,乙醇胺的濃度為1-4mg/L,氫化可的松的濃度為7-15mg/L,胰蛋白酶抑制劑的濃度為1-1.5mg/L,人轉(zhuǎn)鐵蛋白的濃度為7-15mg/L,人胰島素的濃度為10-15mg/L,bFGF的濃度為20-30ug/L,TGF-β1的濃度為3-7ug/L,PDGF-BB的濃度為7-15ug/L。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的無(wú)血清培養(yǎng)基,其特征在于,L-谷氨酰胺的濃度為1mM,非必須氨基酸的濃度為1mM,L-抗壞血酸的濃度為58mg/L,亞硒酸鈉的濃度為14ug/L,纖連蛋白的濃度為25mg/L,乙醇胺的濃度為3mg/L,氫化可的松的濃度為10mg/L,胰蛋白酶抑制劑的濃度為1mg/L,人轉(zhuǎn)鐵蛋白的濃度為10mg/L,人胰島素的濃度為10mg/L,bFGF的濃度為20ug/L,TGF-β1的濃度為5ug/L,PDGF-BB的濃度為10ug/L。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的無(wú)血清培養(yǎng)基,其特征在于,添加成分還包含輔酶A、丙酮酸鈉和EGF中的至少一種。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的無(wú)血清培養(yǎng)基,其特征在于,輔酶A的濃度為80-120mg/L,丙酮酸鈉的濃度為1-5mM,EGF的濃度為5-20ug/L。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的無(wú)血清培養(yǎng)基,其特征在于,輔酶A的濃度為100mg/L,丙酮酸鈉的濃度為1mM,EGF的濃度為10ug/L。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的無(wú)血清培養(yǎng)基,其特征在于,所述無(wú)血清培養(yǎng)基的pH值為7.2-7.4,滲透壓為260-320mosm,內(nèi)毒素為0-0.5EU/mL。

10.權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的無(wú)血清培養(yǎng)基在間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用。

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