本發(fā)明涉及(r)-7-(3-氨基-4-(2,4,5-三氟苯基)丁酰)-3-三氟甲基-5,6,7,8-四氫-咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-羧酸甲酯磷酸鹽的無定型及其制備方法。

背景技術(shù)：

糖尿病通常分為i型糖尿病和ii型糖尿病兩種，但迄今為止，還沒有哪種藥物能夠憑一己之力將ii型糖尿病患者的hba1c水平長期保持在目標(biāo)范圍之內(nèi)。即使是聯(lián)合用藥，其療效也會(huì)在3-4年后逐漸降低。不良反應(yīng)是許多降糖藥面臨的一道難題，其中致命性的低血糖反應(yīng)是令臨床醫(yī)生最為擔(dān)憂的問題，其次，許多口服降糖藥會(huì)誘發(fā)患者體重增加，一些藥物還可能引發(fā)心血管疾病。因此，開發(fā)具有全新作用機(jī)制以及更加安全有效的新型降糖藥已經(jīng)成為科學(xué)家們亟待解決的一項(xiàng)重要任務(wù)。

在不斷尋找新方法過程中發(fā)現(xiàn)內(nèi)分泌激素在ii型糖尿病的病理生理學(xué)方面起著重要作用。二肽基肽酶-iv(dipeptidylpeptidaseiv,dpp-iv)是與糖尿病有關(guān)的一種重要的酶，抑制其作用是治療ii型糖尿病非常有前景的新方法。在研究中發(fā)現(xiàn)，dpp-iv抑制劑能完全保護(hù)內(nèi)源性甚至外源性的glp-1不被dpp-iv滅活，提高活性glp-1水平，減少glp-1代謝物地拮抗作用。此外，dpp-iv抑制劑還能刺激胰島素β細(xì)胞再生，改善糖耐量及胰島素敏感性，從而延遲糖尿病的發(fā)生。

專利申請(qǐng)wo2010135944a1中公開了一種新型dpp-iv抑制劑，包括式(i)所示的(r)-7-(3-氨基-4-(2,4,5-三氟苯基)丁酰)-3-三氟甲基-5,6,7,8-四氫-咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-羧酸甲酯磷酸鹽，

但專利申請(qǐng)wo2010135944a1沒有公開其結(jié)晶形態(tài)，本發(fā)明提供了式(i)所示化合物的無定型及其制備方法，該無定型具備良好的溶解性，可更好地用于臨床。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種(r)-7-(3-氨基-4-(2,4,5-三氟苯基)丁酰)-3-三氟甲基-5,6,7,8-四氫-咪唑并[1,5-a]吡嗪-1-羧酸甲酯磷酸鹽(如式(i)所示)的無定型，該無定型具備良好的溶解性。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

本發(fā)明提供一種二肽基肽酶iv抑制劑化合物，其結(jié)構(gòu)如式(i)所示，其特征在于，所述式(i)所示化合物為無定型結(jié)晶形式，

優(yōu)選的，所述無定型結(jié)晶形式的x-射線粉末衍射圖的衍射角2θ在2-40°范圍內(nèi)沒有明顯特征峰。

進(jìn)一步優(yōu)選的，所述無定型結(jié)晶形式的x-射線粉末衍射圖的dsc圖譜在0-350℃間沒有明顯的吸熱峰。

本發(fā)明還提供一種溶解性為易溶的式(i)所示化合物，其特征在于，所述式(i)所示化合物在水中的溶解度為200-500mg/ml。

優(yōu)選的，所述式(i)所示化合物在醇類溶劑中易溶，優(yōu)選在甲醇中的溶解度為160-500mg/ml，在乙醇中的溶解度為110-145mg/ml；在鹽酸中易溶，優(yōu)選在稀鹽酸中的溶解度為160-500mg/ml。

本發(fā)明還提供一種式(i)所示化合物無定型結(jié)晶形式的制備方法，其特征在于，所述方法為：

將式(i)所示化合物溶解于溶劑中，析晶；

過濾、干燥后即得目標(biāo)無定型；

優(yōu)選地，所述溶劑選自水、醇類、酯類、酮類、醚類、醇類與醚類的混合溶劑、醇類與酯類的混合溶劑或醇類與酮類的混合溶劑；更優(yōu)選地，所述溶劑選自水、無水甲醇、無水乙醇、異丙醇、無水甲醇/異丙醚、無水甲醇/甲基叔丁醚、無水甲醇/無水乙醚、無水甲醇/乙酸乙酯或無水甲醇/丙酮；

所述析晶的方法優(yōu)選室溫析晶、冷卻析晶、加入晶種誘導(dǎo)析晶或揮發(fā)析晶。

本發(fā)明還涉及二肽基肽酶iv抑制劑化合物的藥物組合物，其特征在于包含一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑，所述二肽基肽酶iv抑制劑化合物為無定型結(jié)晶形式。

本發(fā)明還提供所述式(i)所示化合物無定型、無定型的藥物組合物在制備抑制二肽基肽酶iv活性的藥物中的用途。

本發(fā)明還提供所述式(i)所示化合物無定型、無定型的藥物組合物在制備治療ii型糖尿病、高血糖癥、肥胖癥或胰島素抵抗癥的藥物中的用途。

通過x-射線粉末衍射圖譜(xrpd)、差示掃描量熱分析(dsc)對(duì)所得到式(i)所示化合物的無定型進(jìn)行結(jié)構(gòu)測定、晶型研究。

無定型的重結(jié)晶的方法沒有特別限定，可以用通常的重結(jié)晶操作方法進(jìn)行。例如，可以用原料式(i)所示化合物在有機(jī)溶劑中溶解后加入反溶劑析晶，結(jié)晶完成后，經(jīng)過濾干燥，即可得到所需要的結(jié)晶。

本發(fā)明析晶的方法有揮發(fā)析晶、室溫析晶、冷卻析晶、加入晶種誘導(dǎo)析晶等。

本發(fā)明晶型制備方法中所用的起始原料可以是任意形式的式(i)所示化合物，具體形式包括但不限于：無定形、任意晶型等。

發(fā)明詳述

在本申請(qǐng)的說明書和權(quán)利要求書中，除非另有說明，否則本文中使用的科學(xué)和技術(shù)名詞具有本領(lǐng)域技術(shù)人員所通常理解的含義。然而，為了更好地理解本發(fā)明，下面提供了部分相關(guān)術(shù)語的定義和解釋。另外，當(dāng)本申請(qǐng)所提供的術(shù)語的定義和解釋與本領(lǐng)域技術(shù)人員所通常理解的含義不一致時(shí)，以本申請(qǐng)所提供的術(shù)語的定義和解釋為準(zhǔn)。

本發(fā)明所述“c1-6烷基”表示直鏈或支鏈的含有1-6個(gè)碳原子的烷基，具體實(shí)例包括但不限于：甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、異戊基、2-甲基丁基、新戊基、1-乙基丙基、正己基、異己基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、1,2-二甲基丙基等。

本發(fā)明所述“羥基”是指-oh等基團(tuán)。

本發(fā)明所述的“酮類溶劑”是指羰基(-c(o)-)與兩個(gè)烴基相連的化合物，根據(jù)分子中烴基的不同，酮可分為脂肪酮、脂環(huán)酮、芳香酮、飽和酮和不飽和酮，具體實(shí)例包括但不限于：丙酮、甲基丁酮或甲基異丁酮。

本發(fā)明所述的“酯類溶劑”是指含碳原子數(shù)為1至4個(gè)的低級(jí)有機(jī)酸與含碳原子數(shù)為1至6個(gè)的低級(jí)醇的結(jié)合物，具體實(shí)例包括但不限于：乙酸乙酯、乙酸異丙酯或乙酸丁酯。

本發(fā)明所述的“醚類溶劑”是指含有醚鍵-o-且碳原子數(shù)為1至10個(gè)的鏈狀化合物或環(huán)狀化合物，具體實(shí)例包括但不限于：丙二醇甲醚、四氫呋喃或1,4-二氧六環(huán)。

本發(fā)明所述的“醇類溶劑”是指一個(gè)或多個(gè)“羥基”取代“c1-6烷基”上的一個(gè)或多個(gè)氫原子所衍生的基團(tuán)，所述“羥基”和“c1-6烷基”如前文所定義，具體實(shí)例包括但不限于：甲醇、乙醇、丙醇或2-丙醇。

本發(fā)明所述的“x-射線粉末衍射圖譜或xrpd”是指根據(jù)布拉格公式2dsinθ＝nλ(式中，λ為x射線的波長，衍射的級(jí)數(shù)n為任何正整數(shù)，一般取一級(jí)衍射峰，n＝1)，當(dāng)x射線以掠角θ(入射角的余角，又稱為布拉格角)入射到晶體或部分晶體樣品的某一具有d點(diǎn)陣平面間距的原子面上時(shí)，就能滿足布拉格方程，從而測得了這組x射線粉末衍射圖。

本發(fā)明所述的“差示掃描量熱分析或dsc”是指在樣品升溫或恒溫過程中，測量樣品與參考物之間的溫度差、熱流差，以表征所有與熱效應(yīng)有關(guān)的物理變化和化學(xué)變化，得到樣品的相變信息。

本發(fā)明所述的“2θ或2θ角度”是指衍射角，θ為布拉格角，單位為°或度，2θ的誤差范圍為±0.1～±0.5，優(yōu)選±0.1～±0.3，更優(yōu)選±0.2。

本發(fā)明所述的“晶面間距或晶面間距(d值)”是指空間點(diǎn)陣選擇3個(gè)不相平行的連結(jié)相鄰兩個(gè)點(diǎn)陣點(diǎn)的單位矢量a，b，c，它們將點(diǎn)陣劃分成并置的平行六面體單位，稱為晶面間距?？臻g點(diǎn)陣按照確定的平行六面體單位連線劃分，獲得一套直線網(wǎng)格，稱為空間格子或晶格。點(diǎn)陣和晶格是分別用幾何的點(diǎn)和線反映晶體結(jié)構(gòu)的周期性，不同的晶面，其面間距(即相鄰的兩個(gè)平行晶面之間的距離)各不相同；單位為或埃。

本發(fā)明還涉及，包括式(i)所示的化合物的無定型，以及任選的一種或多種藥用載體和/或稀釋劑的藥物組合物。所述藥物組合物可以制成藥學(xué)上可接受的任一劑型。例如，本發(fā)明的無定型或藥物制劑可以配制為片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、溶液劑、混懸劑、糖漿劑、注射劑(包括注射液、注射用無菌粉末與注射用濃溶液)、栓劑、吸入劑或噴霧劑。

此外，本發(fā)明的所述藥物組合物還可以以任何合適的給藥方式，例如口服、腸胃外、直腸、經(jīng)肺或局部給藥等方式施用于需要這種治療的患者或受試者。當(dāng)用于口服給藥時(shí)，所述藥物組合物可制成口服制劑，例如口服固體制劑，如片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑等；或，口服液體制劑，如口服溶液劑、口服混懸劑、糖漿劑等。當(dāng)制成口服制劑時(shí)，所述藥物制劑還可包含適宜的填充劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑等。當(dāng)用于腸胃外給藥時(shí)，所述藥物制劑可制成注射劑，包括注射液、注射用無菌粉末與注射用濃溶液。當(dāng)制成注射劑時(shí)，所述藥物組合物可采用現(xiàn)有制藥領(lǐng)域中的常規(guī)方法來進(jìn)行生產(chǎn)。當(dāng)配制注射劑時(shí)，所述藥物制劑中可以不加入附加劑，也可根據(jù)藥物的性質(zhì)加入適宜的附加劑。當(dāng)用于直腸給藥時(shí)，所述藥物制劑可制成栓劑等。用于經(jīng)肺給藥時(shí)，所述藥物制劑可制成吸入劑或噴霧劑等。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的無定型以治療和/或預(yù)防有效量存在于藥物組合物或藥物中。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的無定型以單位劑量的形式存在于藥物組合物或藥物中。

本發(fā)明式(i)化合物的無定型可用于制備抑制二肽基肽酶iv催化活性的藥物中的用途。因此，本申請(qǐng)還涉及，本發(fā)明式(i)化合物的無定型用于制備藥物的用途，所述藥物用于治療抑制二肽基肽酶iv催化活性的藥物中的用途。此外，本申請(qǐng)還涉及，一種抑制二肽基肽酶iv催化活性有關(guān)的疾病的方法，其包括給有此需要的受試者施用治療和/或預(yù)防有效量的本發(fā)明式(i)化合物的無定型，或者本發(fā)明的藥物組合物。

在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，式(i)所示化合物的無定型或無定型的藥物組合物在制備治療ii型糖尿病、高血糖癥、肥胖癥或胰島素抵抗癥的藥物中的用途。

附圖說明

圖1為式(i)所示化合物無定型的xrpd圖譜；

圖2為式(i)所示化合物無定型的dsc圖譜；

圖3為式(i)所示化合物無定型的tga圖譜。

具體實(shí)施方式

以下將結(jié)合實(shí)施例更詳細(xì)地解釋本發(fā)明，本發(fā)明的實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明的技術(shù)方案，并非限定本發(fā)明的實(shí)質(zhì)和范圍。

實(shí)驗(yàn)所用儀器的測試條件：

1、x-射線粉末衍射譜(x-raypowderdiffraction,xrpd)

儀器型號(hào)：brukerd8focusx-射線粉末衍射儀

射線：單色cu-kα射線(λ＝1.5406)

掃描方式：θ/2θ，掃描范圍：2-40°

電壓：40kv，電流：40ma

2、差示掃描量熱儀(differentialscanningcalorimeter,dsc)

儀器型號(hào)：mettlertoledodsc1stare^esystem

吹掃氣：氮?dú)?50ml/min)

升溫速率：10.0℃/min

溫度范圍：40-350℃

3、熱重分析儀(thermogravimetricanalysis,tga)

儀器型號(hào)：mettlertoledotga1star^esystem

吹掃氣：氮?dú)?/p>

升溫速率：20.0℃/min

溫度范圍：40-700℃

實(shí)施例1

將式(i)化合物樣品(1.0g)加入反應(yīng)瓶中，加入純化水(1.0ml)，加熱至55～65℃，過濾，減壓濃縮至干，得產(chǎn)品959mg，收率95.9％。該樣品的x-射線衍射譜圖見圖1，顯示無晶型特征吸收峰；dsc譜圖見圖2，在300℃以下未見熔融特征吸收峰，據(jù)此確定產(chǎn)物為無定型固體；tga譜圖見圖3，樣品自升溫至100℃左右保持恒重，到330℃左右失重約22％，到500℃還沒有失重完全(失重量約80％)。

實(shí)施例2

將式(i)化合物(按實(shí)施例1的方法制備)樣品(1.0g)加入離子水(10.0ml)溶解，過濾，減壓濃縮至干，得產(chǎn)品960mg，收率96.0％。該結(jié)晶樣品的xrpd圖譜和dsc圖譜經(jīng)研究比對(duì)，確定產(chǎn)物為無定型。

實(shí)施例3

將式(i)化合物(按實(shí)施例1的方法制備)樣品(1.0g)加入反應(yīng)瓶中，加入異丙醇(6.0ml)，懸浮攪拌，過濾，干燥得產(chǎn)品960mg，收率96.0％。該結(jié)晶樣品的xrpd圖譜和dsc圖譜經(jīng)研究比對(duì)，確定產(chǎn)物為無定型。

實(shí)施例4

將式(i)化合物(按實(shí)施例1的方法制備)樣品(0.5g)加入反應(yīng)瓶中，加入無水乙醇(5.0ml)，加熱至回流，冷卻、過濾、干燥得產(chǎn)品912mg，收率91.2％。該結(jié)晶樣品的xrpd圖譜和dsc圖譜經(jīng)研究比對(duì)，確定產(chǎn)物為無定型。

實(shí)施例5

將式(i)化合物(按實(shí)施例1的方法制備)樣品(0.5g)加入反應(yīng)瓶中，加入異丙醇(15.0ml)，加熱至回流，冷卻、過濾、干燥得產(chǎn)品870mg，收率87.0％。該結(jié)晶樣品的xrpd圖譜和dsc圖譜經(jīng)研究比對(duì)，確定產(chǎn)物為無定型。

實(shí)施例6

將式(i)化合物(按實(shí)施例1的方法制備)樣品(0.5g)加入反應(yīng)瓶中，加入無水甲醇(1.0ml)，加熱至回流，加入無水乙醚(1.0ml)，冷卻、過濾、干燥得產(chǎn)品412mg，收率82.4％。該結(jié)晶樣品的xrpd圖譜和dsc圖譜經(jīng)研究比對(duì)，確定產(chǎn)物為無定型。

實(shí)施例7

將式(i)化合物(按實(shí)施例1的方法制備)樣品(0.5g)加入反應(yīng)瓶中，加入無水甲醇(1.0ml)，加熱至回流，加入異丙醚(2.0ml)，冷卻、過濾、干燥得產(chǎn)品423mg，收率84.6％。該結(jié)晶樣品的xrpd圖譜和dsc圖譜經(jīng)研究比對(duì)，確定產(chǎn)物為無定型。

實(shí)施例8

將式(i)化合物(按實(shí)施例1的方法制備)樣品(0.5g)加入反應(yīng)瓶中，加入無水甲醇(1.0ml)，加熱至回流，加入甲基叔丁基醚(2.0ml)，冷卻、過濾、干燥得產(chǎn)品425mg，收率85.0％。該結(jié)晶樣品的xrpd圖譜和dsc圖譜經(jīng)研究比對(duì)，確定產(chǎn)物為無定型。

實(shí)施例9

將式(i)化合物(按實(shí)施例1的方法制備)樣品(0.5g)加入反應(yīng)瓶中，加入無水甲醇(1.0ml)，加熱至回流，冷卻至室溫，未析晶，減壓濃縮至干得產(chǎn)品。該結(jié)晶樣品的xrpd圖譜和dsc圖譜經(jīng)研究比對(duì)，確定產(chǎn)物為無定型。

實(shí)施例10

將式(i)化合物(按實(shí)施例1的方法制備)樣品(0.5g)加入反應(yīng)瓶中，加入無水甲醇(1.0ml)，加熱至回流，加入乙酸乙酯(2.0ml)，冷卻至室溫，未析晶，減壓濃縮至干得產(chǎn)品。該結(jié)晶樣品的xrpd圖譜和dsc圖譜經(jīng)研究比對(duì)，確定產(chǎn)物為無定型。

實(shí)施例11

將式(i)化合物(按實(shí)施例1的方法制備)樣品(0.5g)加入反應(yīng)瓶中，加入無水甲醇(1.0ml)，加熱至回流，加入丙酮(2.0ml)，冷卻至室溫，未析晶，減壓濃縮至干得產(chǎn)品。該結(jié)晶樣品的xrpd圖譜和dsc圖譜經(jīng)研究比對(duì)，確定產(chǎn)物為無定型。

實(shí)施例12

將實(shí)施例1所得的無定型產(chǎn)物樣品敞口平攤放置，考察在光照(4500lux)、加熱(40℃、60℃)、高濕(rh75％、rh90％)條件下樣品的穩(wěn)定性，考察取樣時(shí)間為5天和10天，hplc檢測純度結(jié)果見表1。

試驗(yàn)結(jié)果：

表1、本發(fā)明式(i)所示化合物的無定型穩(wěn)定性研究

試驗(yàn)結(jié)論

由表1的穩(wěn)定性考察結(jié)果顯示：

在光照、高濕、高溫敞口放置條件下，本發(fā)明的無定型在光照、高溫條件下比較穩(wěn)定。

實(shí)施例13

將按實(shí)施例1方法制得的式(i)所示化合物的無定型在25℃±2℃下考察在甲醇、0.1mol/lhcl、水中的溶解度。

試驗(yàn)結(jié)果：

表2、式(i)所示化合物無定型的飽和溶解度

試驗(yàn)結(jié)論

由表2的結(jié)果、結(jié)合《中國藥典》中關(guān)于溶解度的規(guī)定，可判斷本發(fā)明的無定型在甲醇、0.1mol/l鹽酸、水、乙醇中是易溶。