本發(fā)明屬于化學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，尤其是一種ase法提取益母草中鹽酸水蘇堿的方法。
背景技術(shù)：
：益母草唇形科植物益母草leonurusjaponicushoutt.的新鮮或干燥地上部分，別名茺蔚、坤草。性微寒，味苦辛，可去瘀生新，活血調(diào)經(jīng)，利尿消腫，是歷代醫(yī)家用來(lái)治療婦科疾病之要藥?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明，益母草含益母草全草含益母草堿，水蘇堿，蘆丁，延胡索酸，益母草堿甲和益母草堿乙，水蘇糖，植物甾醇，樹(shù)脂，脂肪油，月桂酸，亞油酸，β-亞油酸及油酸。據(jù)現(xiàn)代臨床及動(dòng)物實(shí)施證明，益母草浸膏及煎劑對(duì)子宮有強(qiáng)而持久的興奮作用，不但能增強(qiáng)其收縮力，同時(shí)能提高其緊張度和收縮率。水蘇堿是益母草中的指標(biāo)性含量，也是鑒定益母草優(yōu)劣的標(biāo)準(zhǔn)。《藥典2005》對(duì)水蘇堿的提取方法為：取本品粉末(過(guò)三號(hào)篩)約lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70％乙醇25ml，稱定重量，加熱回流2小時(shí)，放冷，再稱定重量，用70％乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。并對(duì)水蘇堿含量有明確規(guī)定不得少于0.5％。水蘇堿分子式：c7h13no2，分子量：179.5。又稱l-水蘇堿。其一水合物，易潮解的結(jié)晶，稍有甜味。旋光度-40.25°(c＝4，水)。其無(wú)水物熔點(diǎn)235℃，在熔點(diǎn)狀態(tài)下異構(gòu)化為古液酸甲酯。溶于水、乙醇、稀酸，不溶于乙醚、氯仿。其鹽酸鹽，大棱柱狀結(jié)晶(無(wú)水乙醇)，分解點(diǎn)235℃，易溶于水；溶于13份乙醇。天然存在于唇形科植物益母草的葉等植物中。有活血調(diào)經(jīng)，利尿消腫，收縮子宮的作用。對(duì)腎上腺素所引起心肌缺血有提高冠狀動(dòng)脈和心肌營(yíng)養(yǎng)性血流量、減少心肌細(xì)胞壞死量、降低血黏度、降低血管阻力、改善微循環(huán)、減慢心率、減少心輸出量及抗血小板凝聚等作用(有望成為良好的心血管系統(tǒng)疾病的治療藥物)；還可改善和增加腎臟的血流量，使腎小球和腎小管得到修良、恢復(fù)腎功能的作用。對(duì)子宮有引起節(jié)律性收縮和興奮子宮的作用，能抑制乳腺癌和子宮肌腺病的發(fā)生；具有祛痰、鎮(zhèn)咳、松弛支氣管平滑肌的作用。現(xiàn)有從益母草中提取水蘇堿工藝，多是水回流提取醇沉、乙醇提取及其超聲微波輔助，再樹(shù)脂吸附。但所得鹽酸水蘇堿含量低，總生物堿收率低，能耗大且耗時(shí)久。因此開(kāi)發(fā)出一種簡(jiǎn)便、快捷、準(zhǔn)確的提取益母草中鹽酸水蘇堿的方法很有必要。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：針對(duì)上述不足，本發(fā)明旨在提供一種簡(jiǎn)便、快捷、準(zhǔn)確的ase法提取益母草中鹽酸水蘇堿的方法。為了實(shí)現(xiàn)上述技術(shù)效果，本發(fā)明提供的技術(shù)方案是這樣的：.一種ase法提取益母草中鹽酸水蘇堿的方法，其特征在于，依次包括下述步驟：步驟1：采用ase萃取法用乙醇萃取益母草粉末，并收集乙醇萃取液；步驟2：取1ml萃取液裝于放有g(shù)cb的離心管中，離心，取上清液；所述的萃取條件為：萃取溫度為120℃，萃取時(shí)間為5min，萃取次數(shù)為1次，壓力為1500psi，沖洗體積為60％，吹掃時(shí)間為60s。進(jìn)一步的，所述的步驟1包括下述子步驟：步驟s1：將益母草樣品粉碎，過(guò)篩，取1g與1g硅藻土混合均勻；步驟s2：將步驟1所得混合物裝于放有濾膜的ase萃取池中，加硅藻土至與池口平行；步驟s3：用25ml乙醇萃取，收集萃取液，用乙醇定容至25ml。進(jìn)一步的，所述的步驟s1具體為：將益母草樣品粉碎，過(guò)三號(hào)篩，取1重量份與1重量份硅藻土混合均勻。進(jìn)一步的，所述的萃取池的體積為10ml。進(jìn)一步的，所述的步驟2具體為：取1ml萃取液裝于放有100mggcb的離心管中，漩渦1min，在15000r/min下離心3min，取上清液。與傳統(tǒng)方法相比，本發(fā)明具有下述優(yōu)勢(shì)：1.本發(fā)明曾對(duì)快速溶劑萃取使用的溶劑進(jìn)行考察。有論文提到及藥典均使用70％乙醇提取，目的是帶水的溶劑穿透性強(qiáng)、能提取完全，而ase采用帶水的溶劑會(huì)使作為填充作用的硅藻土發(fā)生變性而需要采用石英砂作為填充材料，顯得不方便，故對(duì)使用乙醇和70％乙醇進(jìn)行了溶劑考察，結(jié)果顯示乙醇與70％乙醇提取鹽酸水蘇堿含量一致，且雜質(zhì)峰基本相同，為了節(jié)省時(shí)間，故采用乙醇作為提取溶劑；2.由于益母草為葉類植物提取出來(lái)色素較多，故在實(shí)驗(yàn)中考察了加入不同gcb量進(jìn)行除雜，分別考察了20mg、50mg、100mg的gcb使用量對(duì)結(jié)果的影響的考察，結(jié)果顯示添加了gcb與未添加gcb的樣品對(duì)主成分無(wú)影響，而添加100mggcb雜質(zhì)峰最小，故試驗(yàn)過(guò)程中可以加入100mg的gcb進(jìn)行除雜；3.在提取過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)考察了提取1、2、3次對(duì)結(jié)果的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)提取1次即可達(dá)到與藥典含量接近，更多的提取時(shí)間、溫度、次數(shù)對(duì)結(jié)果已經(jīng)無(wú)明顯影響，故采用萃取1次以節(jié)省提取時(shí)間。附圖說(shuō)明圖1為分別使用20mg、50mg、100mg的gcb時(shí)提取的鹽酸水蘇堿結(jié)果的色譜圖。具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)施方式，對(duì)本發(fā)明的權(quán)利要求做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，但不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的任何限制，任何在本發(fā)明權(quán)利要求保護(hù)范圍內(nèi)所做的有限次的修改，仍在本發(fā)明的權(quán)利要求保護(hù)范圍之內(nèi)。實(shí)施例1《中國(guó)藥典》2015年版一部方法：取本品粉末(過(guò)三號(hào)篩)約lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70％乙醇25ml，稱定重量，加熱回流2小時(shí)，放冷，再稱定重量，用70％乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。快速溶劑萃取法(ase)：步驟1：將益母草樣品粉碎，過(guò)三號(hào)篩，取1g與1g硅藻土混合均勻；步驟2：將步驟1所得混合物裝于放有玻璃纖維濾膜的10mlase萃取池中，加硅藻土至與池口平行；步驟3：用25ml乙醇萃取，收集萃取液，用乙醇定容至25ml；參數(shù)如下：萃取溫度為120℃，萃取時(shí)間為5min，萃取次數(shù)為1次，壓力為1500psi，沖洗體積為60％，吹掃時(shí)間為60s；步驟4：取1ml步驟3所得萃取液裝于放有100mggcb的離心管中，漩渦1min，在15000r/min下離心3min，取上清液；步驟5：對(duì)上清液中所含的鹽酸水蘇堿的含量進(jìn)行測(cè)定。不同的快速溶劑萃取儀提取益母草中鹽酸水蘇堿含量的結(jié)果，與藥典方法提取含量的結(jié)果見(jiàn)表1，ase法與藥典方法分別的提取結(jié)果的比較見(jiàn)表2，不同的快速溶劑萃取儀的結(jié)果比較見(jiàn)表3：表1表2藥典％ase1％平均值％rad％d5080700.960.890.933.8201506010.660.600.634.815110661.080.971.035.4ase2％平均值％rad％d5080700.960.910.942.7201506010.660.630.652.315110661.081.041.061.9表3儀器之間的rad％ase1ase2平均值rad％d5080700.890.910.901.1201506010.600.630.622.415110660.971.041.013.4取相同批號(hào)的樣品(批號(hào)：d508070)約0.5g，共3份，精密稱定，按ase提取方法提取供試品溶液，用高效液相色譜對(duì)其進(jìn)行含量測(cè)定，進(jìn)樣量為5μl，重復(fù)3次，測(cè)得樣品中鹽酸水蘇堿的含量見(jiàn)表4，rsd為0.65％，實(shí)驗(yàn)表明ase提取方法重復(fù)性良好。表4取3批樣品(批號(hào)分別為d508070、20150601、1511066)約0.5g，共3份，分別用兩臺(tái)不同的快速溶劑萃取儀以及藥典方法對(duì)樣品中的鹽酸水蘇堿進(jìn)行提取，所提取的含量結(jié)果見(jiàn)表5：表5ase提取溶劑的選擇：試驗(yàn)中，曾對(duì)快速溶劑萃取使用的溶劑進(jìn)行考察。有論文提到及藥典均使用70％乙醇提取，目的是帶水的溶劑穿透性強(qiáng)、能提取完全，而ase采用帶水的溶劑會(huì)使作為填充作用的硅藻土發(fā)生變性而需要采用石英砂作為填充材料，顯得不方便，故對(duì)使用乙醇和70％乙醇進(jìn)行了溶劑考察，結(jié)果顯示乙醇與70％乙醇提取鹽酸水蘇堿含量一致，且雜質(zhì)峰基本相同，為了節(jié)省時(shí)間，故采用乙醇作為提取溶劑。ase凈化劑的考察：由于益母草為葉類植物提取出來(lái)色素較多，故在實(shí)驗(yàn)中考察了加入不同gcb量進(jìn)行除雜，分別考察了20mg、50mg、100mg的gcb使用量對(duì)結(jié)果的影響的考察，結(jié)果顯示添加了gcb與未添加gcb的樣品對(duì)主成分無(wú)影響，而添加100mggcb雜質(zhì)峰最小，故試驗(yàn)過(guò)程中可以加入100mg的gcb進(jìn)行除雜，詳見(jiàn)圖1。ase提取條件的優(yōu)化：在提取過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)考察了提取1、2、3次對(duì)結(jié)果的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)提取1次即可達(dá)到與藥典含量接近，更多的提取時(shí)間、溫度、次數(shù)對(duì)結(jié)果已經(jīng)無(wú)明顯影響，故采用萃取1次以節(jié)省提取時(shí)間。以上所述的僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，凡在本發(fā)明的精神和原則范圍內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁(yè)12