專利名稱：益母草堿的合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種天然生物堿的人工制備方法，確切地說(shuō)是益母草堿的合成方法。
研究表明益母草堿在植物中含量很低，在0.1％以下，提取分離難度大，成本高，臨床上主要以益母草的粗提物制成的益母草膏、益母草沖劑等劑型應(yīng)用，患者服用劑量大，難以接受。
采用合成的方式制備益母草堿，并將其制成患者容易接受的劑型，有利于益母草堿深入研究和發(fā)展。
《藥學(xué)學(xué)報(bào)》(19(6)419～424，1984)公開(kāi)了一種用益母草胺同甲基異硫脲在DMF中合成益母草堿的方法，但未公開(kāi)如何得到益母草胺。
《Tetrahedron》(255155，1969)公開(kāi)了益母草堿的三種合成方法(1)以4-氯-1-丁醇為原料得到4-鄰苯二甲酰亞胺基-1-丁醇，再與4-乙氧羰基-氧基-3，5-二甲氧基-苯甲酸反應(yīng)制成益母草胺，最后接上胍基生成益母草堿；(2)以4-乙氧羰基-氧基-3，5-二甲氧基-苯甲酰氯為起始原料經(jīng)脂化，再接胍基生成益母草堿；(3)以4氨基-丁醇為起始原料合成益母草堿。以上的各種制備方法起始原料不容易得到，反應(yīng)條件要求高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明以丁香酸為起始原料，依次經(jīng)羰基化、酰氯化、酯化和氨化反應(yīng)后制備得到中間體益母草胺，最后益母草胺同甲基異硫脲合成益母草堿。
具體工藝過(guò)程如下丁香酸首先羰基化，將其異?；顫姷牧u基保護(hù)起來(lái)(下稱羰基化的丁香酸為A)，后將A酰氯化，蒸去酰氯化劑后即同四氫呋喃反應(yīng)制備羰基化產(chǎn)物4-乙氧羰基-氧基-丁香酸(4-氯)丁酯(以下稱B)，B再依次同鄰苯二甲酰亞胺鹽和水合肼反應(yīng)得到中間體益母草胺(丁香酸(4-氨基)丁酯，以下稱C)，最后C同甲基異硫脲反應(yīng)得到產(chǎn)品益母草堿(以下稱D)。
本方法分離過(guò)程少，操作簡(jiǎn)便，反應(yīng)溫和，易于控制，原料易得，產(chǎn)品純度高，經(jīng)液相色譜分析測(cè)定純度為99.81％，產(chǎn)品收率高，四步化學(xué)反應(yīng)，收率達(dá)20％。
本方法所得的益母草堿經(jīng)結(jié)果確證同天然益母草堿完全一致。1.益母草堿溶解性實(shí)驗(yàn)取益母草堿5g，加水50ml，攪拌成混懸溶液，滴加5％鹽酸溶液適量，溶解，緩慢加入5％的氫氧化鈉溶液適量，至出現(xiàn)白色，繼續(xù)滴加5％的氫氧化鈉溶液使白色沉淀完全析出，過(guò)濾，用水洗滌，80℃減壓干燥3小時(shí)，得白色固體物，將該白色固體物進(jìn)行紅外吸收光譜測(cè)定，所得數(shù)據(jù)與益母草堿相比較，結(jié)果兩者完全一致。
以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明益母草堿易與酸成鹽，其鹽在水中易溶解。2.藥效和毒理實(shí)驗(yàn)對(duì)子宮的作用本品對(duì)家兔子宮均呈興奮作用，對(duì)未孕、早孕、晚期妊娠或產(chǎn)后的子宮均有效，由于益母草堿在水中不易溶解，所以在試驗(yàn)時(shí)是將益母草堿用適量的酸溶解，如鹽酸，再進(jìn)行試驗(yàn)，那么益母草堿的藥效試驗(yàn)就是采用益母草堿鹽酸鹽進(jìn)行的，結(jié)果表明其對(duì)子宮的作用，按益母草堿計(jì)算在0.1～0.2mcg/ml的劑量范圍內(nèi)呈劑量依賴性關(guān)系，劑量超過(guò)0.2mcg/ml時(shí)達(dá)到最大效應(yīng)，呈持續(xù)興奮作用。
急性毒性作用灌胃給予小鼠益母草堿鹽(按照益母草堿計(jì)算)的LD50為2452.8±135.2mg/kg；靜脈給予小鼠益母草堿鹽(按照益母草堿計(jì)算)的LD50為601.2±45.1mg/kg。
具體實(shí)施例方式
1.由丁香酸經(jīng)羰基化反應(yīng)制備A(4-乙氧羰基-氧基-丁香酸)在1000ml的反應(yīng)器中，加入800ml的1mol/L的氫氧化鈉溶液，攪拌狀態(tài)下加入丁香酸66g(0.33mol)，溶解后，待溶液溫度降至10℃以下，滴加氯甲酸乙酯36.17g(0.33mol)，控制反應(yīng)溶液溫度在0～10℃，攪拌反應(yīng)6小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，用鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至6.0左右，放置析出白色結(jié)晶，過(guò)慮，得白色固體，用丙酮重結(jié)晶，將產(chǎn)品減壓干燥得到64g的白色結(jié)晶性標(biāo)題產(chǎn)物，收率72％，熔點(diǎn)180～184℃，1HNMRδH1.33 CH3-(CH3CH2-)，δH3.39(CH3O-)，δH4.29-CH2-(CH3CH2-)，δH7.38(Ar-H)。
化學(xué)反應(yīng)式 2.由A依次經(jīng)酰氯化和酯化制備B(4-乙氧羰基-氧基-丁香酸(4-氯)丁酯)
在干燥的反應(yīng)瓶中加入4-乙氧羰基-氧基-丁香酸135.1g(0.5mol)和109.4ml(1.5mol)氯化亞砜，60～70℃回流1小時(shí)后，60℃減壓蒸餾過(guò)量的氯化亞砜，加入四氫呋喃60ml，無(wú)水氯化鋅10.8g，充分?jǐn)嚢?，加熱?0～90℃，使氯化鋅溶解，反應(yīng)30～60分鐘，在溶液中加入100ml苯，5％的氯化鈉溶液，充分?jǐn)嚢?，分離苯溶液，加入無(wú)水硫酸鈉脫水，過(guò)濾，減壓蒸餾除去溶劑苯，得油狀物質(zhì)為標(biāo)題產(chǎn)物。
化學(xué)反應(yīng)式 3.由B經(jīng)氨基化制備中間體益母草胺C(丁香酸(4-氨基)丁酯)取4-乙氧羰基-氧基-丁香酸(4-氯)丁酯79g(0.22mol)于燒瓶中，加入DMF 400ml，鄰苯二甲酰亞胺鉀鹽45.5g(0.25mol)，90～110℃攪拌反應(yīng)2小時(shí)，加入水合肼，醋酸鈉20g，95％乙醇800ml，回流3小時(shí)，濃縮，冷卻析出結(jié)晶，過(guò)濾，晶體用水洗滌，并將其溶解在5％的氫氧化鈉溶液中，加2mol/L的鹽酸酸化，過(guò)濾，濾液用10％的碳酸氫鈉水溶液調(diào)pH至8～10之間，析出結(jié)晶，得固體物45.5g，收率53.7％，熔點(diǎn)209～211℃。
化學(xué)反應(yīng)式 4.產(chǎn)品益母草堿的合成將丁香酸(4-氨基)丁脂27g(0.1mol)溶于熱的DMF溶液中，再加入200ml 20％的鹽酸甲基異硫脲水溶液，回流4小時(shí)，冷卻，4℃放置3小時(shí)，析出結(jié)晶，過(guò)濾，得固體物即為益母草堿的鹽酸鹽，將益母草堿鹽酸鹽，溶解于10％氫氧化鈉溶液中，室溫放置，析出結(jié)晶，過(guò)濾，得益母草堿，乙醇重結(jié)晶，干燥，得晶體14.3g，收率為43.7％，熔點(diǎn)為167～169℃。
化學(xué)反應(yīng)式 三、益母草堿純度測(cè)定高效液相檢測(cè)實(shí)驗(yàn)色譜條件色譜儀Shimadzu LC-10AT檢測(cè)器Shimadzu SPD-10AVP色譜柱VP-ODS 150L×4.6測(cè)定波長(zhǎng)254nm流動(dòng)相0.025mol/L磷酸溶液(pH3.5)∶乙腈＝85∶15，流速1.0ml/min進(jìn)樣量20μg/ml精密稱取本品適量，加流動(dòng)相溶解制成每1ml中含益母草堿0.2mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液，取對(duì)照溶液20ul，注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分的峰高為滿量程的10-20％；取供試品溶液20ul，注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的2倍，與對(duì)照溶液相比，各雜質(zhì)峰的面積總和不得大于對(duì)照溶液的主峰面積(1.0％)。測(cè)定本品純度為99.81％。
權(quán)利要求
1.一種益母草堿的合成方法，包括原料丁香酸依次經(jīng)羰基化，酰氯化，酯化和氨化反應(yīng)得到益母草胺，再與甲基異硫脲合成得到益母草堿，特征在于(1)所述的羰基化反應(yīng)是丁香酸和氯甲酸乙酯在氫氧化鈉溶液中于0～10℃條件下反應(yīng)3～8小時(shí)，最后的pH值至3～7，分離得到4-乙氧羰基丁香酸；(2)所述的酰氯化和酯化反應(yīng)是4-乙氧羰基-丁香酸在過(guò)量的氯化亞砜中回流0.5～1.5小時(shí)，然后在50～80℃減壓蒸餾脫去過(guò)量的氯化亞砜，再加入四氫呋喃和無(wú)水氯化鋅，攪拌均勻后，于70～90℃條件下反應(yīng)0.5～1小時(shí)，冷卻，分離得到4-乙氧羰基-丁香酸(4氯)丁酯；(3)所述的氨化反應(yīng)是4-乙氧羰基-丁香酸(4氯)丁酯和鄰苯二甲酰亞胺鉀鹽溶于DMF溶液中，于90～110℃條件下反應(yīng)1～3小時(shí)，然后加入水合肼、醋酸鈉和乙醇回流3小時(shí)，冷卻分離得到中間體益母草胺。
全文摘要
一種益母草堿的合成方法，以丁香酸為起始原料，依次經(jīng)羰基化反應(yīng)，酰氯化反應(yīng)，酯化反應(yīng)和氨化反應(yīng)后制備得到中間體益母草胺，最后由中間體益母草胺同甲基異硫脲合成得到益母草堿。本方法分離過(guò)程少，所以操作簡(jiǎn)便，反應(yīng)溫和，易于控制，原料易得，產(chǎn)品收率高，純度高，經(jīng)液相色譜分析測(cè)定純度為99.81％，經(jīng)驗(yàn)證，具有同天然益母草堿完全一致的化學(xué)結(jié)構(gòu)和藥理作用。
文檔編號(hào)C07C277/00GK1415602SQ0213836
公開(kāi)日2003年5月7日 申請(qǐng)日期2002年9月26日 優(yōu)先權(quán)日2002年9月26日
發(fā)明者李曉祥, 徐自?shī)W 申請(qǐng)人:李曉祥