技術(shù)特征:
技術(shù)總結(jié)
本申請公開了一種魚類單細胞懸液的制備方法,包括以下步驟:PBS試劑、D?Han氏液和IV型膠原酶液的配制,準備魚的腎臟組織塊,用PBS沖洗腎臟組織3次以上;將組織塊放人冰浴中的平皿里,加入PBS,剪切成細小碎塊,將組織塊放入高通量組織研磨器離心管中;在離心管中加入IV型膠原酶,同時加入PBS定容至4ml,放入氧化鋯球進行研磨,將組織勻漿酶解消化;過濾,離心,PBS沖洗,離心,棄上清液除去細胞碎片,過濾細胞懸液并用PBS定容為3ml,4℃保存待用。本發(fā)明采用酶解研磨法,結(jié)合了研磨法和酶解法兩種方法的優(yōu)點,通過酶解研磨對組織處理更充分,解決了制備魚類單細胞懸液細胞得率低和細胞活力低的問題。
技術(shù)研發(fā)人員:鄭曙明;任勝杰;吳青;陳智翔
受保護的技術(shù)使用者:西南大學
技術(shù)研發(fā)日:2017.03.21
技術(shù)公布日:2017.07.07