1.一種呼吸道合胞病毒單克隆抗體制備方法，其特征在于包括以下步驟：
1)從呼吸道合胞病毒感染后又康復(fù)者的血清中提取記憶性B細(xì)胞，活化培養(yǎng)后通過酶聯(lián)免疫方法篩選RSV抗體陽性細(xì)胞；
2)提取RSV抗體陽性細(xì)胞的RNA，分別用一步法RT-PCR方法擴(kuò)增抗體重鏈可變區(qū)基因VH和輕鏈可變區(qū)基因Vκ或Vλ；
3)將VH基因通過酶切法與恒定區(qū)載體質(zhì)粒pIgH連接得到重鏈可變區(qū)基因重組質(zhì)粒，將Vκ基因通過酶切法與恒定區(qū)載體質(zhì)粒pIgκ連接或?qū)λ基因通過酶切法與恒定區(qū)載體質(zhì)粒pIgλ連接得到輕鏈可變區(qū)基因重組質(zhì)粒；
4)擴(kuò)增步驟3)所得的重組質(zhì)粒，而后篩選表達(dá)抗體重鏈和輕鏈的陽性質(zhì)粒；
5)制備減毒鼠傷寒沙門氏菌VNP20009株的感受態(tài)細(xì)胞，取步驟4)所得的陽性質(zhì)粒通過電轉(zhuǎn)法導(dǎo)入其中，篩選陽性克隆，得到重組細(xì)菌；
6)取HEK293-T細(xì)胞與步驟5)所得的重組細(xì)菌，以二者的細(xì)胞量為1:20～1:200的比例在細(xì)胞培養(yǎng)板中混合，培養(yǎng)4～16h，而后將細(xì)胞培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基更換為含有針對鼠傷寒沙門氏菌的抗生素的細(xì)胞培養(yǎng)基，培養(yǎng)40～56h。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種呼吸道合胞病毒單克隆抗體制備方法，其特征在于步驟1)中記憶性B細(xì)胞是通過以下方法提取的：將20ml新鮮EDTA抗凝全血樣本按照5ml/管加入淋巴細(xì)胞分離管中，2200r/min離心15min，吸取白色淋巴細(xì)胞層，即為人外周血單個核細(xì)胞，而后用人記憶性B細(xì)胞磁珠分選試劑盒從中分選出記憶性B細(xì)胞。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種呼吸道合胞病毒單克隆抗體制備方法，其特征在于步驟1)所述活化培養(yǎng)包括以下步驟：將記憶性B細(xì)胞以200細(xì)胞/孔的密度接種96孔U型底培養(yǎng)板，培養(yǎng)液含2.5μg/ml的CpG2006、10ng/ml的IL-2和10ng/ml的IL-10，以25％的B958細(xì)胞培養(yǎng)上清和5000cGy照射滅活的同種異源的外周血單個核細(xì)胞50000/孔為飼養(yǎng)細(xì)胞，于37℃、5％CO2條件培養(yǎng)兩周。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種呼吸道合胞病毒單克隆抗體制備方法，其特征在于步驟4)中對重組質(zhì)粒的擴(kuò)增是將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至DH5α感受態(tài)細(xì)胞中，于37℃，5％CO2條件下培養(yǎng)12-16h，而后取菌落置于5ml含氨芐抗生素100μg/ml的LB液體培養(yǎng)基的試管中，180r/min左右振搖培養(yǎng)過夜，收集菌液小提質(zhì)粒。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種呼吸道合胞病毒單克隆抗體制備方法，其特征在于步驟6)中HEK293-T細(xì)胞的加入量為8000～12000個/孔。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種呼吸道合胞病毒單克隆抗體制備方法，其特征在于步驟6)所述混合后，細(xì)胞培養(yǎng)板的每孔中液體總量為450～550μL。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種呼吸道合胞病毒單克隆抗體制備方法，其特征在于步驟6)所述針對鼠傷寒沙門氏菌的抗生素是青霉素和鏈霉素。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種呼吸道合胞病毒單克隆抗體制備方法，其特征在于步驟5)所述的電轉(zhuǎn)法包括以下步驟：取陽性質(zhì)粒與步驟1)所述感受態(tài)細(xì)胞在電轉(zhuǎn)杯中混合，而后以電壓1.8kv、電阻200Ω、電容25uF的條件電轉(zhuǎn)4.7ms。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種呼吸道合胞病毒單克隆抗體制備方法，其特征在于步驟5)中減毒鼠傷寒沙門氏菌VNP20009株的感受態(tài)細(xì)胞是通過以下方法制備的：
A)取凍存的減毒鼠傷寒沙門氏菌VNP20009株劃線接種于LB固體培養(yǎng)基培養(yǎng)至形成單菌落；
B)挑取單菌落接種于3～7ml LB液體培養(yǎng)基中，35～39℃振蕩培養(yǎng)10～14h；
C)取步驟B)培養(yǎng)所得的菌液，按1:80～1:120的體積比接種于LB液體培養(yǎng)基中，振蕩培養(yǎng)至菌液OD值不小于0.4；
D)冰浴15～25min后，離心取沉淀用1/8～1/12體積預(yù)冷的無菌去離子水洗滌，而后離心取沉淀用1/80～1/120體積預(yù)冷的、8～12％(mL/mL)濃度的甘油洗滌菌體，再離心沉淀重懸于1/80～1/120體積預(yù)冷的、8～12％(mL/mL)的甘油中。
10.據(jù)權(quán)利要求1所述的一種呼吸道合胞病毒單克隆抗體制備方法，其特征在于步驟6)完成后繼續(xù)執(zhí)行以下步驟7)：取步驟6)所得的培養(yǎng)液上清1500r/min離心4min棄沉淀，而后用0.45μm濾器過濾，收集濾液并以1～2滴/秒的速度流過蛋白A純化柱，使IgG結(jié)合至蛋白A上；用PBS以5000g離心1min洗滌純化柱2～3次，棄液，加入400ul IgG洗脫液輕輕混合，將柱子放進(jìn)已加入40μlPH7.5～9的Tris-鹽酸中和液的1.5ml離心管中，5000g離心1min，所得液體即為純化的單克隆抗體。