本發(fā)明涉及一種富含omega-3多不飽和脂肪酸油脂添加劑的制備方法。
背景技術(shù)：
：omega-3多不飽和脂肪酸主要包括：α-亞麻酸(ALA)、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)。其中，omega-3多不飽和脂肪酸的前體是α-亞麻酸(ALA)，由它可以轉(zhuǎn)化成二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)。α-亞麻酸(ALA)是人體必須脂肪酸，不能自身合成，必須從外源食物中供給，它具有增強智力、提高記憶力、保護視力、改善睡眠、抑制血栓性疾病、預(yù)防心肌梗死和腦梗死、降低血脂、降血壓等生理作用。二十二碳六烯酸(DHA)俗稱腦黃金，是一種對人體非常重要的不飽和脂肪酸，是大腦和視網(wǎng)膜的重要構(gòu)成成分，在人體大腦皮層中含量高達20％，在眼睛視網(wǎng)膜中所占比例最大，約占50％，因此，對胎嬰兒智力和視力發(fā)育至關(guān)重要。裂殖壺藻屬于破囊壺菌科的一類單細胞的海洋藻類，生長速度快，能夠利用有機碳作為唯一碳源進行生長繁殖，并能通過生物反應(yīng)器進行異養(yǎng)培養(yǎng)生產(chǎn)所需油脂，可以在短期內(nèi)達到較高的生物量，并能夠積累二十二碳六烯酸(DHA)，占到總脂含量的30％～40％，脂肪酸組成簡單，容易分離純化，沒有魚腥味。亞麻籽是一種多用途的藥食兩用植物，亞麻籽油中富含多不飽和脂肪酸，其中α-亞麻酸(ALA)含量高達55％～60％，具有免疫調(diào)節(jié)、降血脂、抗炎、抗癌等功效，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、化工、食品等領(lǐng)域。目前，富含omega-3多不飽和脂肪酸油脂添加劑的生產(chǎn)存在著以下幾個問題：1)物料來源困難；2)油脂提取工藝復(fù)雜，成本高；3)生產(chǎn)的不飽和脂肪酸油脂穩(wěn)定性差，具有魚腥味。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明提出一種富含omega-3多不飽和脂肪酸油脂添加劑的制備方法，克服了魚油多不飽和脂肪酸穩(wěn)定性差、有異味、存在重金屬污染等問題。一種富含omega-3多不飽和脂肪酸油脂添加劑的制備方法，具體包括以下步驟：(1)通過發(fā)酵培養(yǎng)罐培養(yǎng)的模式培養(yǎng)裂殖壺藻；(2)培養(yǎng)結(jié)束后收集藻細胞，并通過冷凍干燥的方式獲得裂殖壺藻細胞干粉；(3)將裂殖壺藻細胞干粉和亞麻籽混合后，通過加入到移動榨油機中進行壓榨處理獲得油脂添加劑。優(yōu)選地，步驟(1)中發(fā)酵培養(yǎng)的種子培養(yǎng)基采用如下組分組成：海鹽10～50g/L，葡萄糖1～6g/L，蛋白胨0.5～2g/L，酵母粉0.5～2g/L。優(yōu)選地，種子培養(yǎng)基的培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)溫度26～28℃，160～200rpm，培養(yǎng)時間25～30h。優(yōu)選地，步驟(1)中發(fā)酵培養(yǎng)的發(fā)酵培養(yǎng)基采用如下組分組成：初始葡萄糖30～80g/L，酵母粉10～20g/L，硫酸銨0.5～2g/L，磷酸氫二鉀1～5g/L，無水硫酸鈉10～15g/L，無水硫酸鎂2～6g/L，硫酸鉀2～8g/L，氯化鉀1～5g/L，微量元素0.5～1ml/L。優(yōu)選地，所述微量元素采用如下組分組成：氯化鈣30～60mg/L，氯化亞錳2～6mg/L，硫酸鋅2～6mg/L，硫酸銅0.5～1mg/L，鉬酸鈉0.01～0.05mg/L，硫酸鎳0.5～1mg/L，硫酸亞鐵0.01～0.05mg/L，氯化鈷0.05～0.1mg/L，維生素B10.5～1mg/L，維生素B121～5mg/L，泛酸鈣15～30mg/L。優(yōu)選地，發(fā)酵培養(yǎng)基的培養(yǎng)條件為溫度28℃，轉(zhuǎn)速300～700rpm，通氣3vvm～7vvm。優(yōu)選地，當葡萄糖消耗至10g/L以下，此時需開始補加葡萄糖，補加葡萄糖以2.8％流速流加，實時測定葡萄糖濃度，調(diào)整流加速率，保證糖不耗盡也不積累，培養(yǎng)時間為96h。優(yōu)選地，步驟(1)中發(fā)酵培養(yǎng)是將種子培養(yǎng)基按照體積百分比為8～10％的接種量接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)。優(yōu)選地，步驟(3)中按照重量份計：裂殖壺藻細胞干粉1份、亞麻籽5-15份。本發(fā)明產(chǎn)生的有益效果為：本發(fā)明在優(yōu)化的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下，獲得了裂殖壺藻粉，經(jīng)檢測，微藻細胞中DHA含量占到總脂比例的30％～40％，該藻油具有較好的工業(yè)化應(yīng)用前景，工藝步驟簡單、耗時短、成本較低。具體實施方式下面將結(jié)合本發(fā)明實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例?；诒景l(fā)明中的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。實施例1：發(fā)酵培養(yǎng)裂殖壺藻分為種子液培養(yǎng)和發(fā)酵罐培養(yǎng)兩個階段，其中種子液培養(yǎng)階段使用的是500mL的三角燒瓶搖床培養(yǎng)的方式。種子培養(yǎng)基為：海鹽40g/L，葡萄糖5g/L，蛋白胨1g/L，酵母粉1g/L；種子液培養(yǎng)的條件為：溫度28℃，搖床轉(zhuǎn)速180rpm/min，培養(yǎng)時間為20～30h。發(fā)酵罐培養(yǎng)階段使用的培養(yǎng)基為：初始葡萄糖60g/L，酵母粉14.2g/L，硫酸銨1g/L，磷酸氫二鉀3g/L，無水硫酸鈉12g/L，無水硫酸鎂5g/L，硫酸鉀7g/L，氯化鉀2g/L，微量元素1ml/L。微量元素配方：氯化鈣50mg/L、氯化亞錳5.2mg/L、硫酸鋅5.2mg/L、硫酸銅0.8mg/L、鉬酸鈉0.016mg/L、硫酸鎳0.8mg/L、硫酸亞鐵0.01mg/L、氯化鈷0.066mg/L、維生素B10.76mg/L、維生素B121.2mg/L、泛酸鈣25.6mg/L。發(fā)酵罐培養(yǎng)的條件為：種子培養(yǎng)基按照體積百分比為8～10％的接種量接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，溫度28℃，轉(zhuǎn)速300～700rpm，通氣3vvm～7vvm。當初始葡萄糖消耗至10g/L以下，此時需開始補加葡萄糖，補加葡萄糖以2.8％流速流加，實時測定葡萄糖濃度，調(diào)整流加速率，保證糖不耗盡也不積累。培養(yǎng)時間為96h。將收集獲得的藻液，冷凍干燥24h，獲得藻細胞干粉。并將裂殖壺藻粉和亞麻籽按照重量份比1:5的比例混合，加入到移動榨油機中壓榨獲得油脂添加劑。其組成如下表：DHA含量(mg/g)ALA含量(mg/g)油脂添加劑16.5±0.11321.86±2.21實施例2：過程同實施例1。最終將凍干的藻細胞干粉和亞麻籽按照1:10的比例混合，加入到移動榨油機中壓榨獲得油脂添加劑。其組成如下表：DHA含量(mg/g)ALA含量(mg/g)油脂添加劑9.70±0.06347.43±1.14實施例3：過程同實施例1。最終將凍干的藻細胞干粉和亞麻籽按照1:15的比例混合，加入到移動榨油機中壓榨獲得油脂添加劑。其組成如下表：DHA含量(mg/g)ALA含量(mg/g)油脂添加劑6.875±0.08362.11±2.31從以上實施例可以看出，各實施例中的ALA含量變化不大，其中實施例1中的DHA含量變化明顯變小，因此實施例1為最優(yōu)實施例。以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。當前第1頁1 2 3